miR-103a-3p对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要：目的〓探讨miR-103a-3p在人肺癌组织中的表达及对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 方法：收集南通市肿瘤医院52例肺癌患者手术组织标本,qRT-PCR检测肺癌组织及癌旁组织中miR-103a-3p的表达;采用Lipofecta mineTM 3000 将miR-103a-3p mimic、mimic NC、miR-103a-3p inhibitor及inhibitor NC转染至A549细胞中,qRT-PCR检测miR-103a-3p的转染效率;CCK8实验检测其细胞增殖能力;流式细胞术检测其细胞凋亡能力;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力。 结果：miR-103a-3p在肺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织（p＜0.01）;qRT-PCR结果显示,转染miR-103a-3p mimic组细胞中miR-103a-3p的表达水平明显高于mimic NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力受到抑制;而转染miR-103a-3p inhibitor 组细胞中miR-103a-3p的表达水平低于inhibitor NC组,且细胞增殖、迁移和侵袭能力增强;但细胞凋亡在4组中变化均不明显。 结论：miR-103a-3p在肺癌组织中低表达,miR-103a-3p能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭。     

Extracellular vesicle-mediated delivery of anti-miR-106b inhibits morphine-induced primary ciliogenesis in the brain

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转染miR-544a对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响

摘要：目的：探讨miR-544a对肺癌细胞的侵袭和转移能力的影响及其分子机制。 方法：用miRNA芯片对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D进行miRNA谱系分析,并用荧光定量PCR验证其miR-544a表达水平;用Targetscan软件预测miR-544a的靶基因;Transwell实验观察细胞的侵袭转移能力的变化; western blot验证其表达。 结果：miRNA芯片及荧光定量PCR结果显示,与95C细胞（1.00±0.00）比较,miR-544a在95D细胞中表达上调（2.95±0.26,t=12.94,P<0.05）;Transwell实验结果显示,95C转染miR-544a mimic后增加（32.00±1.00,q=18.67,P<0.01）,95D转染miR-544ainhibitor后,侵袭和转移能力降低（11.00±1.00,q=13.67, P<0.01）;Targetscan软件预测E 钙粘连素（CDH1）可能为miR-544a的靶基因;western blot显示,95C转染miR-544amimic 后,CDH1表达下调,vimentin表达上调（0.202±0.017,0.574±0.009,q分别为63.86, 9.45,P均<0.01）;而 95D转染miR-544a inhibitor后,CDH1表达上调,而vimentin表达下调(0.769±0.014,0.320±0.020,q分别为18.67, 5.99,P均<0.01）。 结论：miR-544a可能通过下调CDH1和上调vimentin的表达来促进肺癌细胞的侵袭和转移。     

miR-200a和YAP1在肺癌的不同表达及病理学意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-200a与Yes相关蛋白1(YAP1)表达量在癌组织和癌旁组织的相关性及其临床病理意义.方法 回顾性选取259例非小细胞肺癌患者术后切除的肿瘤组织及癌旁组织为本次研究对象,采用RT-PCR方法检测并比较患者的miR-200a与YAP1表达量在癌组织和癌旁组织的相关性及其临床...     

Let-7a和miR-96对胰腺癌K-RAS基因的调节作用

  目的  探讨miRNA分子Let-7a和miR-96对胰腺癌系K-RAS基因的抑制作用及其致病机制。  方法  通过检测胰腺癌细胞系miRNA分子(Let-7a和miR-96)水平、K-RAS基因mRNA和蛋白质表达水平, 观察Let-7a和miR-96水平与K-RAS蛋白表达的关系; 并通过升高胰腺癌细胞Let-7a和miR-96水平, 检测其对K-RAS蛋白表达水平的影响。  结果  胰腺癌细胞系K-RAS的mRNA与蛋白质表达均保持在一个较高的水平; 胰腺癌细胞系miRNA分子Let-7a和miR-96水平均较低; 升高胰腺癌细胞Let-7a或miR-96水平会降低K-RAS蛋白表达水平。  结论  正常状态下, Let-7a和miR-96通过调控K-RAS基因发挥对肿瘤的抑制作用, 胰腺癌细胞的Let-7a和miR-96水平呈一定程度的降低, 削弱了对KRAS基因的抑制作用, 进而参与肿瘤的致病过程。     

肺癌与癌旁组织中miR-20a的定量检测及其意义

目的：探讨人肺癌与癌旁组织miR-20a定量检测的临床意义。 方法：real-time PCR检测31例肺癌及其对应癌旁组织中miR-20a的表达量, 分析其与肺癌组织学类型、临床分期、分化程度等临床病理特征的关系。 结果：肺癌组织miR-20a表达量(2^{-△△Ct)为3.630（1.042～7.727）,与对应癌旁组织相比,有显著性差异(P<0.05)。miR-20a与肺癌临床分期、分化程度、病理类型、肿块大小和淋巴结转移均无相关性(P>0.05) 。 结论:miR-20a在肺癌组织高表达,可能与肺癌的发生有关。}     

miR-34a调控下游基因FUT8表达介导乳腺癌多药耐药的实验验证

目的探究miR-34a及FUT8的异常表达对乳腺癌多药耐药性的调控机制,明确乳腺癌耐药的诊疗靶点。方法采用Real-time PCR及western blot技术检测MCF-7和MCF-7/ADR中miR-34a和FUT8的表达水平; Real-time PCR技术检测乳腺癌细胞系中miR-34a的转染效率;通过生物信息学方法预测并采用双荧光素酶报告实验验证FUT8与miR-34a之间的靶向关系;特异性调控miR-34a的表达后,分别通过Real-time PCR、western blot以及免疫荧光染色检测转染细胞系中FUT8基因及蛋白质水平变化;采用CCK8实验、免疫荧光实验检测其对MCF-7和MCF-7/ADR细胞增殖、耐药性的调控作用。结果 miR-34a在MCF-7中的表达水平明显高于MCF-7/ADR(P=0.002 6);FUT8基因在MCF-7/ADR中的表达水平明显高于MCF-7(P=0.001 6);FUT8是miR-34a调控乳腺癌耐药性的靶点(P=0.001 9);特异性上调MCF-7/ADR细胞中miR-34a的水平可明显抑制FUT8的表达,并抑制该细胞的多药耐药性及增殖性;而下调MCF-7细胞中miR-34a表达后,FUT8的表达水平明显升高,同时增强了细胞多药耐药及增殖能力。结论 miR-34a通过调控下游基因FUT8的表达介导乳腺癌多药耐药。     

腹腔镜结直肠癌手术治疗对结直肠癌患者血清中miR-17、miR-21、miR-20a和miR-92水平的影响

目的探究腹腔镜结直肠癌手术对结直肠癌(CRC)患者血清miR-17、miR-21、miR-20a和miR-92水平的影响。方法选取2015年6月-2018年6月该院收治的CRC患者120例作为研究对象,采用实时荧光定量PCR反应(RT-qPCR)检测血清中miR-17、miR-21、miR-20a和miR-92水平;使用生活质量核心调查问卷第3版(QLQ-C30)评估腹腔镜结直肠癌手术治疗前后患者的状况。结果经腹腔镜结直肠癌手术治疗后,CRC患者的躯体、认知、情绪、角色和社会功能评分均得到明显提高;患者血清中miR-17、miR-21、miR-20a和miR-92的相对水平均明显下降;通过相关性分析发现,miR-17、miR-20a和miR-92的相对量变化与QLQ-C30评分变化有相关性(P<0.05),而miR-21则无相关性(P>0.05)。结论腹腔镜结直肠癌手术治疗后,CRC患者血清中miR-17、miR-20a和miR-92的水平可以作为评估治疗效果的潜在标志物。     

MicroRNA-15a抑制骨髓瘤细胞生长及其机制研究

目的:研究microRNA-15a(miR-15a)在多发性骨髓瘤(MM)细胞生长中的作用及可能机制。方法:慢病毒颗粒感染MM细胞株U266和RPMI8226,流式细胞术(FCM)分选获得稳定转染MM细胞株。CCK-8法检测miR-15a高表达前后MM细胞的增殖情况;AO/EB染色、Hoechst 33258荧光染色法及FCM检测miR-15a高表达前后MM细胞凋亡的情况;FCM检测miR-15a高表达前后MM细胞周期的情况;real-time PCR方法检测miR-15a高表达前后MM细胞miR-15a、BMI-1及BCL-2 mRNA的表达;Western blot方法检测miR-15a高表达前后MM细胞BMI-1蛋白表达。结果:获得高表达miR-15a的MM稳定转染细胞株。CCK-8结果显示miR-15a高表达可抑制M M细胞(U266和RPM I8226)的增殖;AO/EB、Hoechst 33258染色和FCM结果显示,miR-15a高表达可显著诱导MM细胞(U266和RPM I8226)的凋亡,U266和RPM I8226细胞高表达组与对照组细胞凋亡率分别为:90.52%vs37.08%,59.40%vs 44.17%;同时,miR-15a高表达可诱导MM细胞(U266和RPM I8226)G1期阻滞,G1期细胞分别为(41.50±0.64)%、(45.31±0.77)%。real-time PCR结果显示,在高表达miR-15a抑制骨髓瘤细胞生长的过程中BCL-2 mRNA表达显著降低,BMI-1 mRNA表达则没有改变,但是Western blot结果却显示BMI-1蛋白表达出现显著降低。结论:miR-15a高表达通过诱导骨髓瘤细胞周期阻滞和凋亡抑制骨髓瘤细胞生长,其机制涉及miR-15a在转录后水平对BMI-1、BCL-2基因的负调控。     

miR-20a对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及与血清肿瘤标志物联合检测的诊断效能

目的 探讨miR-20a对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及血清肿瘤标志物联合miR-20a检测在NSCLC诊断中的价值.方法 选取该院2013年1月至2015年1月收治的NSCLC患者112例,肺部良性疾病患者94例,采用电化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)...     

肺癌组织中调控PUMA基因 的miRNA筛查和MiR-221表达差异研究

目的 肺癌组织中调控PUMA基因的miRNA筛查并比较MiR-221的表达差异。方法 收集肺癌组织和肺良性病变组织作为研究对象,利用生物学信息分析查询可能调控PUMA的miRNA,应用定制的试剂盒进行初步筛查,并检测miRNA-221在两种组织中的表达情况。结果 根据生物学数据库的分析共筛查出可能调节PUMA的miRNAs有96个; 初步筛查结果显示有10种miRNAs在肺癌组织中表达上调。miR-221进一步验证显示,在肺癌组织中和肺良性病变组织中表达差异有统计学意义(P<0.05),转移与非转移之间表达差异有统计学意义,但与病理组织类型无关。结论 肺癌组织中与PUMA基因相关的10种miRNAs表达上调,提示这些miRNA可能参与PUMA基因的表达调控及肺癌的发生发展有关。miRNA-221在肺癌组织中表达与是否转移有关。     

miR-29a在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

摘要：目的：检测miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平并探讨其对人乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。 方法：用荧光定量RT-PCR检测乳腺癌组织及癌旁组织中miR-29a的表达水平;用脂质体法将miR-29a mimic及miR-29a inhibitor分别转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,通过MTT实验和 Transwell实验观察miR-29a对MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的影响;miRanda软件预测miR-29a的靶基因,western blot验证其表达结果。 结果：荧光定量RT-PCR检测结果表明,与癌旁组织（2.17±0.89）比较,miR-29a在乳腺癌组织（5.65±1.45）中的表达水平上调（t=3.94,P＜0.01）;MTT实验和Transwell实验结果显示,与mimics阴性对照组［（106.36±5.15)%,(216.70±7.20）个］相比,miR-29a mimics组［（133.32±6.31）%,(294.30±8.60)个］乳腺癌细胞的增殖和迁移能力增加（t分别为3.36和6.85,P均＜0.01）;与inhibitor阴性对照组［（105.35±3.42）%,(240.30±9.50）个］相比,miR-29a inhibitor组［（66.63±3.82）%,(156.30±7.80）个］乳腺癌细胞的增殖和迁移能力降低（t分别为8.18和6.81,P均＜0.01）。miRanda软件预测人第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）可能为miR-29a的靶基因。western blot结果显示,与mimics阴性对照组（0.55±0.01）相比,乳腺癌细胞转染miR-29a mimic后,其PTEN蛋白质的表达水平（0.22±0.01）下调（t=14.29,P＜0.01）;与inhibitor阴性对照组（0.49±0.02）相比,转染miR-29a inhibitor后,PTEN蛋白质的表达水平（1.25±0.02）上调（t=19.39,P＜0.01）。 结论：miR-29a在乳腺癌组织中的表达水平增高,并可能通过下调PTEN蛋白的表达促进乳腺癌细胞的增殖和转移。     

miR-27a通过调控Sprouty2促进胰腺癌细胞PANC-1的生长

目的探讨miR-27a在胰腺癌细胞生长过程中的作用及相关机制。方法应用RT-PCR检测胰腺癌组织中miR-27a的表达水平;应用CCK-8生长曲线和软琼脂克隆形成实验检测miR-27a对胰腺癌细胞PANC-1生长能力的影响;应用双荧光素酶报告基因实验和Westernblot筛选miR-27a的靶基因。结果 (1)相比较于癌旁正常胰腺组织,胰腺癌组织中miR-27a表达显著上调;(2)抑制胰腺癌细胞PANC-1内源性miR-27a能够显著下调癌细胞的生长活性;(3)miR-27a能够直接调控Sprouty2基因3'UTR中的MRE序列;(4)抑制PANC-1细胞内源性miR-27a能够显著上调Sprouty2蛋白35%。结论 miR-27通过调控胰腺癌细胞PANC-1中Sprouty2蛋白表达发挥癌基因功能。     

miR-451a suppresses the development of breast cancer via targeted inhibition of CCND2

Extensive research has indicated that miRNAs are crucial for the occurrence and progression of cancers. miR-451a, involved in breast cancer (BC), is one of the miRNAs. This study focused on the mechanism by which miR-451a regulates BC. The levels of miR-451a in BC tissues and cell lines were examined using quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Kaplan‒Meier analysis showed that this was intimately related to the patient's overall survival rate. Functional experiments revealed the negative effects of miR-451a on the abilities of BC cells to multiply (tested by Cell Counting Kit-8), migrate (tested by wound healing assay), and invade (tested by Transwell assay) and its positive effects on apoptosis (tested by flow cytometry). Western blotting indicated that the expression of tumor-related proteins was affected by miR-451a. Moreover, in vivo experiments suggested that tumor growth was clearly restrained by an miR-451a agonist in a xenograft tumor model. Bioinformatic analysis indicated that miR-451a directly targeted Cyclin D2 (CCND2), as demonstrated by the luciferase reporter assay. An opposite change in the level of CCND2 and miR-451a in BC was indicated by qRT-PCR, western blotting, and immunohistochemistry. Subsequently, functional experiments and western blotting analysis confirmed that CCND2 accelerated BC progression, which was regulated by miR-451a. Cumulatively, research on miR-451a may be valuable for BC treatment.     

心肌肌钙蛋白测定结果的影响因素

心肌肌钙蛋白(cTn)是心肌损伤最特异、最敏感的血清标志物之一,可作为急性心肌梗死(AMI)的首选标志物。目前,检测血清cTn水平的各种技术已趋向成熟,但是cTn测定结果的影响因素有很多种。既往文献大多分析某一种影响因素,该文尝试综合分析多种影响因素。在应用这一指标时应充分考虑到cTn的多种影响因素,动态检测cTn并与临床症状以及其他检查结果进行综合分析。     

实施病区护士长一日五查房的效果评价

目的 探讨病区护士长一日五查房的实施效果.方法 护士长于晨会交班前、晨间护理后、上午下班前、下午上班后和下午下班前分别进行护理质量查房.结果 病区护理质量、患者满意度均提高,护理不良事件发生率下降(P＜ 0.01或P＜0.05).结论 护士长一日五查房对护理质量的提高有着重要的促进作用,有助于加强病房管理、融洽护患关系.