狼疮肾炎患者肾组织白细胞介素-18表达的研究

目的　初步探讨白细胞介素 18(IL 18)在人类狼疮肾炎 (LN)肾组织炎症损伤中的作用。方法　应用免疫组织化学和原位杂交技术观察 6例正常肾组织和 18例LN患者肾组织IL 18的蛋白和基因表达量 ,并用酶联免疫吸附测定 (ELISA)法对该组患者尿IL 18水平进行检测。结果　正常肾组织有弱的IL 18mRNA及蛋白表达 ;LN患者肾组织IL 18mRNA及蛋白表达量均较正常肾组织显著增高 (IL 18mRNA :8 9± 3 4比 2 2± 0 6 ;IL 18蛋白 :8 8± 3 7比 1 4± 0 4 ) ,而且WHOⅣ型LN患者肾组织IL 18表达量显著高于非WHOⅣ型LN患者 (IL 18mRNA :10 8± 3 2比6 6± 1 7;IL 18蛋白 :11 2± 2 7比 5 6± 2 0 ) ;Spearman相关分析提示肾组织IL 18蛋白表达量与狼疮肾炎肾组织活动指数 (AI)、尿IL 18水平及肾组织损伤程度均呈正相关 (P均 <0 0 5 )。结论　肾内IL 18表达上调参与LN肾组织炎症损伤过程 ,尿IL 18水平可能作为衡量LN肾组织炎症活动程度的评估指标。     

凝血酶活性亢进加重狼疮肾炎患者Th1/Th2平衡紊乱

Th1/Th2平衡失调在狼疮肾炎 (lupusnephritis ,LN)的发病上具有重要作用 ,但Th1/Th2平衡的偏离方向尚无定论 ,各家报道不一[1 3 ] 。LN患者存在内皮细胞损伤、凝血活性亢进已众所周知[4] ,但凝血活性与Th1/Th2平衡之间存在何种关系 ?虽然Th1/Th2平衡失调引起的免疫炎症可损伤内皮细胞 ,引起凝血活性增强[4,5] 。但是 ,LN患者增强的凝血活性对Th1/Th2平衡状态又将产生何种影响 ?本文通过观察LN患者凝血状态、Th1/Th2平衡状态以及体外凝血酶刺激后外周血单个核细胞 (PBMC)表达白细胞介素(IL) 10和干扰素 (IFN) γ的变化 ,验证L…     

狼疮肾炎患者外周血白细胞和肾组织白细胞介素-18及其结合蛋白的表达

目的 研究狼疮肾炎(LN)患者外周血白细胞及.肾组织局部白细胞介素-18(IL-18)及其内源性抑制蛋白IL-18结合蛋白(IL-18BP)的表达水平,进一步探讨IL-18及IL-18BP在LN发病中的作用.方法 SYBR green dye Ⅰ实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测外周血白细胞IL-18 mRNA及IL-18BPmRNA的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清IL-18的表达;免疫组织化学方法检测肾组织局部IL-18和IL-18BP的表达.结果 LN组IL-18BP mRNA的2-△△CT值(6±9)显著低于对照组(13±9,P=O.006);IL-18 mRNA的2-△△CT值(1.1±1.0)与对照组(1.1±0.7)之间差异无统计学意义(P=0.929),而血清IL-18的水平(146±101)pg/ml比对照组(48±45)pg/ml明显升高(P=0.000);激素联合应用环磷酰胺(CTX)冲击治疗的患者血清IL-18的水平明显低于单用激素或激素联合应用其他免疫抑制剂的患者(P=0.042);LN患者肾小球内IL-18呈高表达,IL-18BP在肾小管内高表达,而肾小球内表达相对较弱.结论 LN患者外周血白细胞IL-18BP基因的表达降低,而血清IL-18的水平显著升高.作为IL-18的内源性抑制蛋白,较低的IL-18BP的表达可能不能完全中和IL-18的作用而导致TLN疾病的活动与反复发作.LN患者肾小球高表达IL-18,IL-18可能参与了肾组织局部的炎症反应.     

骨桥蛋白血清白细胞介素-8与狼疮肾炎的病理临床关系

骨桥蛋白（osteopotin，OPN）与系统性红斑狼疮（SEE）的临床活动有关，白细胞介素8（interleukin-8，IL-8）与狼疮肾炎（Lupus Nephritis，LN）的肾损害关系密切。为了探讨狼疮肾炎（LN）患者肾小管OPN表达和血浆IL-8的浓度及其意义，本研究检测了LN患者的OPN，并分析其表达与病理分型、临床表现和血清IL-8的关系。     

白细胞介素-17的表达与狼疮肾炎关系初探

目的　了解狼疮肾炎 (LN)病人白细胞介素 17(IL 17)在血浆、尿液及肾组织中表达水平与LN发病相关性。方法　建立正常对照、活动期和非活动期LN组 ,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血浆和尿液IL 17水平 ;制备正常对照、WHOⅣ型和非Ⅳ型肾组织标本 ,采用微波免疫组织化学染色法 ,光镜观察IL 17在肾组织中的表达。结果　血浆IL 17均测不出 (<5 pg/ml) ;尿液IL 17水平 ,活动期LN病人 (2 9± 5 ) pg/ml较正常对照 (3 3± 0 8)pg/ml和非活动期LN病人(9 6± 0 9) pg/ml明显升高 (P <0 0 0 1) ,且非活动期LN病人较正常对照亦明显升高 (P <0 0 0 1) ;免疫组织化学显示 ,WHOⅣ型LN较非Ⅳ型和正常对照组 ,单位肾小球细胞数 [(117± 31) / gcs(肾小球横向联合切面 )较 (4 3± 8) /gcs和 (34± 7) / gcs]明显升高 (P <0 0 1) ,单位肾小球IL 17+ 细胞数(Ng) [(33± 8) /gcs较 (8 2± 1 6 ) / gcs和 0 ]明显增多 (P <0 0 1) ,每平方毫米肾小管、间质IL 17+ 细胞数 (Nt) [(2 9± 9) /mm2 较 (8 8± 1 5 ) /mm2 和 0 ]亦明显增多 (P <0 0 1)。相关分析显示Ng与肾小球细胞增多、肾组织活动指数、尿蛋白、尿N 乙酰 β 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)、血肌酐及尿IL 17亦呈正相关 ;Nt与肾组织活动指数、肾小管间质损害程度、尿     

Th1/Th2失衡在初发系统性红斑狼疮患者中的研究

目的：利用三荧光标记法流式细胞术检测细胞内细胞因子，从单细胞水平研究初发系统性红斑狼疮（SLE）患者Th1/Th2平衡。方法：全血培养后使用荧光标记的抗细胞表面抗原单抗标记表面抗原，抗细胞因子单抗进行细胞内染色，检测出CD4^ 干扰素（IFN）-γ^4白细胞介素（IL）-4^-及CD4^ IFN-γ^-IL-4^ 细胞作为Th1及Th2细胞，从单细胞水平研究初发SLE患者Th1/Th2平衡。结果：未用药治疗的SLE病人其Th1细胞明显低于正常对照组（P=0.02）。35例SLE患者按Th1/Th2可分成两组，Th1/Th2降低组与Th1/Th2升高组。Th1/Th2降低组其Th1细胞的降低十分明显。Th1/Th2升高组中Th1细胞仅轻度下降。Th1/Th2降低组体现了更高的颊部红斑发生率（P=0.036）。结论：Th1型反应与Th2型反应均参与了SLE的发病。不同患者可能免疫系统的异常并不同。Th1细胞的降低可能与颊部红斑发生有关。     

白细胞介素—1受体拮抗剂对NZB／WF1小鼠狼疮肾炎治疗作用的 …

探讨白细胞介素受体拮抗剂ＩＬ－１ｒａ对ＮＺＢ／ＷＦ１小鼠狼疮肾炎的治疗作用。方法：同批１３周龄，体重３０ｇ－３５ｇ ＮＺＢ／ＷＦ１雌鼠１２只，随机分为二组，治疗组每只小鼠每次腹腔内注射ＩＬ－１ｒａ １００μｇ，每２周１次，共３次，对照组每只每次腹腔内注射生理盐水０．１ｍｌ，９月龄时活杀，取肾脏，石蜡包埋制片，作ＨＥ，ＰＡＳ，ＰＡＳＭ及Ｍａｓｓｏｎ三色染色，光镜观察其病理形态学变化。     

重型肝炎患者血清内毒素、白细胞介素(IL)-4、IL-18水平的研究

重型肝炎(重肝)病死率可高达60％～80％，它仍为现今研究的热点。已知内毒素(LPS)血症是重肝发生发展的重要因素。炎症因子白细胞介素(IL)-18被认为是诱导LPS致肝损害的重要介质，IL4为抗炎因子，它们在重肝中的作用知之甚少。本研究旨在通过对重型乙型肝炎患者病程中这三种介质的变化、相互作用、调节的研究，探讨它们在重肝发病中的作用。     

白细胞介素-18在类风湿关节炎外周血单个核细胞中的表达

目的　探讨类风湿关节炎 (RA)外周血白细胞介素 18(IL 18)的表达及其与Th1/Th2平衡和疾病活动的关系。方法　以 β actin为内参照 ,用半定量反转录多聚酶链反应 (RT PCR)法测定 16例RA患者及 15名正常对照外周血单个核细胞 (PBMC)中IL 18、IL 4、IFN γmRNA水平 ,观察IL 18与IL 4、IFN γ及疾病活动指标红细胞沉降率 (ESR)、C反应蛋白 (CRP)的相关性。结果　①RA患者PBMC中IL 18mRNA表达与正常组相比增高非常显著 (1 82± 0 39比 0 45± 0 30 ,P <0 0 0 1)。②RA组IFN γ、IL 4均显著高于对照组 ,但IL 4/IFN γ显著低于对照组。③相关分析显示 :RA组IL 18mRNA与IFN γ、ESR显著正相关 (16例 ,r分别为 0 836 ,0 75 3,P均 <0 0 5 )。结论　RA患者外周血IL 18mRNA表达水平显著高于正常对照组 ,且与RA患者外周血IFN γ的产生及疾病活动性相关。     

流式微珠阵列法检测结脑患者Th1/Th2细胞因子表达

目的:运用流式微珠阵列法评价IFN-γ、IL-4在结核性脑膜炎(结脑)中的表达情况,以探讨Th1/Th2平衡状态与其疾病发生发展的关系。方法:采集结脑患者治疗前后的外周血和脑脊液以及健康人的外周血,流式微珠阵列法检测其中IL-4和IFN-γ的浓度,比较各检测指标在各组中差异,并分析差异的意义。结果:结脑患者外周血的IFN-γ浓度较正常对照组低,IL-4浓度无差异;治疗前后外周血中的IFN-γ、IL-4和脑脊液中的IL-4水平均差异无统计学意义,但治疗前后脑脊液中IFN-γ表达差异有统计学意义。结论:与正常对照组及治疗前后相比较,Th1细胞因子IFN-γ在结脑患者的体液中有显著性变化,提示其参与结脑的病理生理过程;流式微珠阵列法能准确检测Th1/Th2细胞因子表达的动态变化。     

狼疮肾炎患者Th1/Th2细胞因子失平衡状况的研究

目的探讨不同病理类型、不同病程狼疮肾炎(LN)患者的Th1和Th2失衡情况。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定16名正常人及18例LN患者外周血浆白细胞介素(IL)-18及IL-13水平,同时应用免疫组织化学检测6名正常人肾组织和18例LN患者肾组织IL-18及IL-13的表达量。结果无论在肾组织或外周血,LN患者IL-18水平及IL-13水平均较正常对照组显著上升(P均<0.001),Ⅳ型LN患者血浆IL-18/IL-13较正常对照组显著增高(P<0.05),V型LN患者较正常对照组有降低趋势,但未达统计学意义(P>0.05),而Ⅱ型LN患者其比率数值与正常对照组极其接近;在肾组织局部,不同病理类型LN患者之间IL-18/IL-13比率差异无显著性(P>0.05);血浆IL-18/IL-13比率与肾组织狼疮活动指数(AI)呈正相关(P<0.05),肾组织IL-18/IL-13比率与AI无相关关系(P>0.05)。结论LN患者免疫紊乱状态似乎不能简单的按Th1优势/Th2优势进行二分法分类,其免疫紊乱状态远较此复杂,不同活动状态,不同部位及不同病理类型的狼疮的免疫紊乱状态是不同的。     

Th1/Th2细胞平衡偏移与自身免疫性甲状腺疾病的相关性研究

目的 明确白细胞介素-2(IL-2)、IL-5与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发生的相关性,探讨Th1/Th2细胞平衡在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用.方法 选取2007年8月至2008年5月南昌大学第三附属医院内分泌科45例Graves病(GD)、30例桥本甲状腺炎(HT)患者,同时选取20名健康体检者作为对照组.采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测患者和对照组血清中Th1型细胞因子IL-2扣Th2型细胞因子IL-5并进行统计学分析.结果 (1)GD患者血清中IL-5明显高于HT组和对照组(P<0.05),而IL-2与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).(2)HT患者血清IL-2明显高于GD组和对照组(P<0.05),而IL-5与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).(3)HT患者Th1型细胞因子IL-2与甲状腺球蛋白抗体(TCAb)和甲状腺微粒体抗体(TMAb)呈显著正相关(r=0.517,P<0.05;r=0.475,P<0.01).结论 Th1/Th2细胞免疫平衡在HT患者中以Th1细胞免疫占优势为主,在GD患者中以Th2细胞免疫占优势为主.     

狼疮性肾炎患者外周血Th1／Th2淋巴细胞平衡的研究

目的：通过检测狼疮性肾炎患者外周血中CD4^ 淋巴细胞分泌细胞子的情况,探讨了Th1/Th2细胞类型与狼疮性肾炎的发病关系。方法：采用流式细胞分析法对29例狼疮性肾炎患者和15名健康志愿者外周血中淋巴细胞的胞内细胞因子（INF－γ、IL-4）和表面抗原（CD4）进行分析。结果：狼疮性肾炎患者Th1细胞数和Th1/Th2比值与正常对照组比较,差异有非常显著性（P＜0．01）。活动期与缓解期Th1数和Th1/Th2比值比较,增加趋势,但差异无显著性（P＞0．05）。患者Th1和Th2细胞数与Th1/Th2比值与疾病活动指数SIEDAI、ANA和C3补体之间没有相关性（P＞0．05）。结论“狼疮性肾炎有强的Th1优势。     

影响支气管哮喘Th1/Th2失衡的因素及治疗的新视点

支气管哮喘(简称哮喘)是由嗜酸粒细胞、肥大细胞和T细胞等多种炎性细胞参与的气道慢性炎症性疾病,其发病机制极为复杂,近来研究发现Th1/Th2失衡是哮喘免疫学发病机制中的一个重要环节,本文就Th1/Th2失衡与哮喘的关系,Th1/Th2平衡的调节及其在哮喘治疗中的价值作一综述.     

钥孔戚血蓝蛋白诱导Balb/c小鼠脾细胞Th1/Th2失衡的研究

目的 探讨钥孔戚血蓝蛋白(KLH)诱导Balb/c小鼠脾细胞Th1/Th2失衡的特点,为药物干预Th1/Th2失衡奠定基础.方法 以KLM 完全弗氏佐剂(CFA)免疫Balb/C小鼠并分离其脾细胞,ELISA法检测脾细胞上清中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12p40和Th2型细胞因子IL-4、IL-5,以及血清Thl型抗体IgG2a和Th2型抗体IgG1水平.结果 ①免疫小鼠出现脾肿大、脾细胞计数升高.②免疫小鼠脾细胞IL-2于24h明显升高,48h达高峰;IL-4、IFN-γ和IL-5于24h轻度升高,96h达高峰;各时间点IL-12p40均较低.③不同剂量基础或强化免疫均可致细胞因子升高,IL4/IFN-γ升高.④免疫小鼠血清IgG1、IgG2a升高,以IgG1明显.结论 KLH CFA可诱导Balb/c小鼠脾细胞发生Th2型优势反应.     

Th1/Th2及Tc1/Tc2在胃癌患者外周血中的漂移及意义

目的: 研究胃癌患者外周血Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移状况,并分析其免疫预存状态.方法: 2008-10-21/2008-12-05中国人民解放军总医院普通外科新入院的术前胃癌患者外周血样本25例,同期健康献血员正常对照组外周血样本25例.四色流式细胞仪检测胃癌患者及正常对照人群外周血激活的淋巴细胞内细胞因子(IFN-γ、IL-4),并分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移状态.结果: 胃癌患者外周血Th1/PBL、Tc1/PBL、Th1/Th2、Tc1/Tc2比值均较正常对照组明显减少(6.242%±4.078% vs 3.047%±1.710%,14.171%±8.984% vs 6.393%±5.235%,3.127%±3.633% vs 1.172%±0.300%,17.200%±25.930% vs 3.252%±8.732%,均P＜0.01).结论: 胃癌患者Th1及Tc1细胞比例减少,并出现Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移现象,提示胃癌患者预存免疫状态低下,机体抗肿瘤免疫功能抑制.     

慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠模型肾组织细胞凋亡及Th1/Th2细胞因子的研究

目的研究慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠模型。肾组织细胞凋亡及Th1／Th2细胞因子的改变方法20只B6D2F1代杂交鼠，随机分为模型组(10只)及对照组(10只)，12周后处死采用原位末端标记法(TUNEL)染包观察肾组织细胞凋亡；免疫组织化学、Western blot和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Fas、FasL基因转录及蛋白表达情况。结果TUNEL法结果显示模型组肾组织细胞凋亡较对照组增多。免疫组织化学提示：各组均有Fas、FasL表达，正常对照组有极少量Fas表达．表达部位在肾小球系膜细胞；FasL表达部位在近端肾小管上皮细胞。聚合酶链反应(PCR)结果：模型组较正常对照组Fas mRNA表达增高。模型组较正常对照组FasL mRNA表达差异无显著性。正常对照组干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4阳性细胞极少；模型组肾组织血管周围浸润的炎性细胞中可见IFN-γ和IL-4阳性细胞，且IL-4阳性细胞明显高于IFN-γ，提示Th2细胞表达占优势。模型组比正常对照绀INFγ／和IL-4阳性细胞明显升高，RT-PCR结果显示：模型组IFN-γ与正常对照组比较差异无显著性：模型组IL-γ较正常对照组显著升高。结论cGVHD狼疮样小鼠模样小鼠模织细胞凋亡异常及Th1/Th2细胞因子失衡，在狼疮肾炎(LN)的发病中起重要作用。     

双歧杆菌对食物过敏小鼠肠道屏障功能及Th1/Th2细胞因子的影响

目的:探讨双歧杆菌在改善食物过敏动物肠道屏障功能、调整肠道菌群结构以及对免疫功能调节方面的作用及其机制.方法:无受试蛋白喂养BALB/c小鼠40只,随机分为4组: 分别于0、3、9 d腹腔注射生理盐水,金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB),卵清蛋白(OVA),SEB+OVA; 并于第7、14天给予OVA灌胃.在SEB+OVA致敏组的基础上设立自然恢复组、双歧杆菌作用组、思密达作用组、双歧杆菌+思密达共同作用组,第15天开始分别经灌胃给予不同的药物,连续7 d,每日1次.培养法分析粪便菌群,检测血清二胺氧化酶(DAO)含量,ELISA法测定血清IgE、IL-4、INF-γ含量.对肠系膜淋巴结(MLN)及肝、肾、肺组织进行培养以探讨有无细菌移位(BT)发生.同时,采用流式细胞术分析其脾细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞的数量变化.结果:与SEB+OVA实验组相比,双歧杆菌作用组小鼠血清IgE、DAO含量(A 值)、血清IL-4(51.314±3.785 ng/L vs 69.980±9.103ng/L,P<0.05)含量显著降低; 血清INF-γ水平显著升高(194.281±12.144 ng/L vs 133.875±33.822 n g/L,P<0.05); 脾细胞悬液中CD4+CD25+T细胞数量显著升高(5.778%±0.773% vs 4.216%±0.439%,P<0.05); 肠道固有菌群中益生菌乳酸杆菌的含量(6.670±0.443 vs 5.654±0.289,P<0.05)、双歧杆菌的含量(8.611±0.295 vs 7.491±0.339,P<0.05)显著升高,条件致病菌大肠杆菌的含量(5.364±0.537 vs 6.718±0.267,P<0.05)、类杆菌的含量(7.427±0.544 vs 8.606±0.317,P<0.05)显著降低; MLN及外周器官细菌移位率显著降低(12.5% vs 37.5%,P<0.05).结论:双歧杆菌可以有效调节机体免疫功能、调整肠道菌群失调及保护肠道黏膜屏障功能.     

Th1/Th2炎症极化与肺气肿和肺纤维化

肺气肿具有Ⅰ型T辅助细胞（Th1）炎症极化的特征，表现为损伤过度和修复不足，肺实质的破坏增加，肺间质变薄。与之相反，肺纤维则具有Ⅱ型T辅助细胞（Th2）炎症极化，表现为损伤后修复过度，肺间质增厚，胶原沉积。通过调控Th1和Th2的炎症趋势来控制肺组织的损伤和修复的结局可能会为肺气肿和肺纤维化的防治提供新思路。     

Th1/Th2及CD4+CD25+调节性T细胞与非酒精性脂肪性肝炎

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是与代谢性疾病相关的一类疾病,目前其发病机制仍未完全清楚.CD4 T辅助细胞具有重要的免疫功能,优先向Th1亚群分化参与NASH的发病,Th1/Th2比值下降,促炎症细胞因子IFN-γ、TNF-α分泌增多,机制可能与胰岛素抵抗或者肝内免疫功能异常有关.CD4 CD25 调节性T细胞分泌TGF-β、IL-10抑制性细胞因子,通过抑制Th1和Th2的增殖和分化,控制疾病的进程.此文主要就Th1/Th2及CD4 CD25 调节性T细胞在非酒精性脂肪性肝炎中的研究进展作一综述.