腹腔内注射腺苷对大鼠中缝背核c-fos表达的影响

目的 研究腹腔内注射腺苷对大鼠中缝背核c-fos蛋白表达的影响.方法 腹腔内注射腺苷和其非特异性受体阻断剂茶碱,采用c-fos免疫组织化学染色(ABC法),观察C-fos蛋白在中缝背核内的分布情况.结果 注入腺苷后大鼠中缝背核的c-fos蛋白表达明显增加,注入茶碱后大鼠中缝背核的c-fos蛋白表达无显著变化.结论 腺苷能促进大鼠中缝背核的c-fos蛋白的表达,说明腺苷对调节睡眠可能有重要作用.     

有氧运动对焦虑大鼠海马环磷酸腺苷的影响

目的探讨有氧运动(游泳运动)对大鼠海马环磷酸腺苷(CAMP)所产生的影响。方法构建大鼠海马有氧运动的不同模式(将其分为持续性与间歇性2组),采用酶联免疫吸附法(ELISA法)对其体内的CAMP浓度所发生的变化进行动态观察。结果有氧游泳运动之后,持续性与间歇性组的CAMP浓度都出现了锯齿形的变化特点,但并不一致。持续性运动组呈现出先降后升的变化趋势,即刻、60、120以及240 min等时间段下降的趋势及其差异都比较凸出(P0.05),且在60 min时刻出现了最低值(P0.01)。间歇性运动组则呈现出先升后降的变化趋势,且改变的幅度也呈现出递增的现象,在240 min时刻其CAMP浓度攀至顶峰,且差异明显(P0.01),在其30、120 min等时刻CAMP则出现了浓度降低的现象,且差异明显(P0.01),在即刻、60 min的不同时刻,CAMP的浓度则偏高,且无明显差异(P0.05)。结论不同的有氧运动类型会给大鼠海马的CAMP产生一定时效性的作用。     

刺激外周神经对幼鼠脊髓、海马c-fos蛋白表达的影响

目的 探讨电刺激坐骨神经后不同时间幼鼠脊髓、海马神经元c-fos蛋白的表达及意义.方法 将30只SD雄性幼鼠随机分成3组:空白对照组,单个电刺激组,强直电刺激组.强直电刺激组包括:强直刺激后1h组、2h组和3h组.首先对单个电刺激组施加单个电刺激,对强直刺激组施加强直电刺激,而后再对强直电刺激组施加同样参数的单个电刺激.实验完毕后取各组动物脊髓和海马神经元做免疫组织化学染色,观察各组动物脊髓和海马神经元内c-fos表达的变化.结果 单个电刺激组、强直电刺激组海马、脊髓神经元内c-fos蛋白强表达,与空白对照组的弱表达比较差异均有统计学意义(P＜0.05);强直刺激后,海马、脊髓不同时间神经元内的c-fos表达不同,以强直刺激后2h为表达量最高.结论 电刺激坐骨神经可使幼鼠海马、脊髓神经元内c-fos蛋白表达增加,推测电刺激后海马、脊髓神经元内c-fos表达量的增加与学习记忆联系密切.     

缺碘子代大鼠海马c-fos表达的研究

目的复制碘缺乏病大鼠模型,研究胚胎期及新生期缺碘、甲状腺激素不足对海马神经细胞原癌基因c鄄fos表达的影响,并探讨其在缺碘性学习记忆低下中可能的机制。方法以碘缺乏病病区粮食加去离子水复制碘缺乏病动物模型,以免疫组化方法研究第一代第二、三胎大鼠海马神经细胞原癌基因c鄄fos表达。结果缺碘组子代大鼠尿碘及血清T3、T4均较同龄正常对照组大鼠明显降低,海马神经细胞原癌基因c鄄fos阳性表达百分率较对照组大鼠海马明显增多(33.74±7.51)/(18.56±4.97),P<0.05。结论胚胎期与新生期缺碘、甲状腺激素不足导致海马神经细胞原癌基因c鄄fos表达明显增加,这种增加的原癌基因c鄄fos表达可能参与了缺碘、甲状腺激素不足,导致海马神经元损伤及其功能、代谢的变化乃至学习记忆低下。     

腺苷对大鼠视交叉上核c-fos蛋白表达的影响

目的观察腺苷对大鼠视交叉上核（SCN）内c-fos蛋白表达的影响,探讨腺苷对睡眠—觉醒活动的影响。方法将大鼠随机分成四组,分别向腹腔内注射腺苷3.0 g/L（腺苷组）、生理盐水3.0 g/L（对照1组）、腺苷3.0 g/L＋茶碱6.0 g/L（腺苷加茶碱组）、生理盐水6.0 g/L（对组2组）。采用常规石蜡切片技术和Fos免疫组织化学染色ABC法检测各组视交叉上核c-fos蛋白的表达。结果腺苷组视交叉上核内c-fos蛋白表达较对照1组明显升高（P〈0.01）;腺苷＋茶碱组较对照2组亦明显升高（P〈0.01）。结论腺苷可通过刺激视交叉上核内c-fos蛋白表达促进睡眠。     

咪唑安定对氯胺酮诱导的大鼠脑扣带回内c-fos表达的影响

目的观察咪唑安定对氯胺酮诱导大鼠扣带回c-fos基因表达的影响。方法SD大鼠20只,随机分为对照组、咪唑安定组、氯胺酮组和咪唑安定＋氯胺酮Ⅰ、Ⅱ组（MKI、Ⅱ组）,每组4只。MKⅠ组、Ⅱ组分别腹腔注射眯唑安定2．5、5mg／kg,5min后,腹腔注射100mg／kg氯胺酮。对照组、氯胺酮组、眯唑安定组分别腹腔注射生理盐水、100mg／kg氯胺酮、咪唑安定5mg／kg。2h后,取脑,冰冻切片,进行Fos蛋白免疫组织化学染色。结果氯胺酮组Fos蛋白免疫组织化学阳性神经元（FLIN）明显多于对照组、咪唑安定组（P〈0．01）;MKⅠ组、Ⅱ组FLIN均少于氯胺酮组（P〈0．01）,而且MKII组明显少于MKI组（P〈0．01）。结论咪唑安定可能通过剂量依赖的抑制氯胺酮诱导的c-fos在扣带回的表达,减轻或消除氯胺酮的精神副作用。     

甲状腺素对甲状腺功能减退症大鼠海马syntaxin-1蛋白表达的影响

目的 研究成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马突触前膜蛋白syntaxin-1的表达及不同剂量甲状腺素替代治疗的作用,探讨甲减脑损伤可能的分子机制.方法 健康3月龄成年SD雄性大鼠44只,体质量250 ～ 300 g,按体质量随机分为4组:甲减组、常规治疗组、大剂量治疗组和对照组,每组11只.甲减组、常规治疗组和大剂量治疗组每日腹腔注射丙基硫氧嘧啶(PTU) 10 mg/kg;4周后,甲减组继续给予PTU腹腔注射2周,常规治疗组和大剂量治疗组每日分别给予50、200μg/kg左旋甲状腺素腹腔注射2周;对照组每日腹腔注射等量生理盐水.造模结束后,采用放射免疫法检测4组大鼠血清T3、T4水平;采用免疫组化法检测4组大鼠海马syntaxin-1蛋白的表达.结果 与对照组[(0.65±0.05)、(55.20±3.56)nmol/L]比较,甲减组血清T3、T4[(0.34±0.04)、(43.01±2.95)nmol/L]明显降低(P均＜0.05),大剂量治疗组血清T3、T4[(1.11±0.10)、(96.68±6.42)nmol/L]显著升高(P均＜0.05);常规治疗组血清T3、T4[(0.63±0.05)、(55.04±3.77)nmol/L]与对照组比较,差异无统计学意义(P均＞0.05).甲减组大鼠海马CA1、CA3区起始层、放射层、腔隙层和齿状回(DG)分子层、多形层syntaxin-1蛋白表达水平(0.059±0.016、0.064±0.014、0.068±0.016,0.069±0.017、0.072±0.016、0.070±0.011,0.051±0.012、0.072±0.017)显著高于对照组(0.037±0.008、0.045±0.010、0.042±0.009,0.040±0.010、0.053±0.009、0.042±0.009,0.032±0.007、0.047±0.010,P均＜0.05);常规治疗组和大剂量治疗组各层syntaxin-1蛋白表达水平(0.041±0.011、0.046±0.017、0.044±0.014,0.037±0.008、0.051±0.010、0.043±0.010,0.033±0.011、0.045±0.014和0.040±0.010、0.045±0.011、0.043±0.010,0.033±0.009、0.050±0.010、0.041±0.009,0.032±0.009、0.046±0.009)较甲减组降低(P均＜ 0.05),与对照组比较,差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 成年期甲减大鼠海马内syntaxin-1蛋白表达增加,常规剂量甲状腺素替代治疗能使其恢复至正常水平.     

何首乌对D-gal致衰大鼠学习记忆能力及海马内突触素含量的影响

目的　探讨何首乌对致衰大鼠学习记忆能力及海马内突触素含量的影响。方法　选用Wistar大鼠 ,用D 半乳糖 (D gal)制成亚急性衰老模型 ,并观察药物对学习记忆能力的影响 ;通过免疫组化和计算机图象分析研究药物对致衰大鼠海马内突触素含量的影响。结果　何首乌可使致衰大鼠Y 迷宫分辨学习的正确次数明显增加 ,明暗箱被动回避反应的步入潜伏期也显著延长。何首乌可使致衰大鼠海马内突触素免疫反应产物的校正光密度值 (COD)显著高于D gal模型组。结论　何首乌能改善D gal致衰大鼠学习记忆能力及提高海马内突触素的含量。     

海马CA1区注射吗啡对大鼠睡眠的影响

目的观察吗啡在海马CA1区对大鼠睡眠的影响。方法选择雄性成年SD大鼠39只,分为对照组(8只)、吗啡组(8只)和纳洛酮组(8只),15只不符合要求已剔除。运用脑立体定位、核团插管、药物微量注射和多导睡眠描记技术,观察海马CA1区注射药物后大鼠睡眠-觉醒指标变化情况。结果与对照组比较,吗啡组大鼠海马CA1区双侧微量注射吗啡后觉醒时间增加32.0%(P<0.05),总睡眠时间减少23.7%(P<0.05),其中深慢波睡眠减少76.1%(P<0.05)。纳洛酮组大鼠海马CA1区双侧微量注射纳洛酮后觉醒时间减少34.1%(P<0.01),总睡眠时间增加25.3%(P<0.01),其中深慢波睡眠增加247.8%(P<0.01)。结论吗啡在海马参与对睡眠-觉醒周期的调节,且吗啡对睡眠的影响主要是通过改变深慢波睡眠成分实现的。     

慢性间歇性缺氧对海马区相关学习记忆能力的影响

目的研究慢性间歇性缺氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)对大鼠海马区相关学习记忆能力的影响,并探求其可能的机制。方法 24只SD大鼠随机分为CIH组12只,空白对照组(CON组)12只,CIH组缺氧8周后,2组行Morris水迷宫及穿梭箱实验测试,比较2组大鼠的空间记忆及条件性学习记忆能力;行为检测实验结束后,立刻处死2组大鼠,取脑组织,免疫组织化学方法检测海马区乙酰胆碱M1受体表达水平。结果与CON组比较,CIH组穿越平台次数有所增加,跨越目标象限时间虽升高,但无明显差异(P>0.05)。CIH组第8天回避潜伏期较第2天明显缩短[(362.6±252.4)s vs(546.6±124.7)s,P<0.05]。与CON组比较,CIH组大鼠海马齿状回乙酰胆碱M1受体灰度值显著增高(0.147±0.009 vs 0.072±0.018,P<0.05)。结论 CIH可能通过提高海马区的乙酰胆碱M1受体水平,保持大鼠空间记忆能力。     

大鼠脑缺血-再灌注后海马区IL-1β、c-fos、CRF表达的时间关系

目的　探讨中动脉梗塞大鼠脑缺血 再灌注后IL 1 β、c fos、促肾上腺皮质激素释放因子CRF在脑内海马区表达的时间规律及其时序关系。方法　采用大脑中动脉插入丝线结扎 (MCAO)方法制造大鼠脑缺血 再灌注缺血模型。分别按照 30min至 7d的不同灌注时间取材 ,假手术组大鼠作为对照组。应用免疫组化方法标记实验各组大鼠脑组织中海马区IL 1 β、c fos、CRF阳性神经元数量。 结果　免疫组化结果表明 ,IL 1 β免疫活性细胞在缺血再灌注后从 1h(97 4± 39 3)后开始表达 ,2h(61 0 67± 1 88 4)后达高峰 ,至 7d(6 6± 5 9)时IL 1 β免疫活性细胞表达基本消失 ;c fos免疫活性细胞从 2h(1 62 4± 2 4 75)开始表达 ,4h(52 1 7± 1 0 3 5)达高峰 ,4d(1 0 4± 9 7)时表达基本消失 ;CRF免疫活性细胞从 2h时 (97 2± 1 8 4)开始表达 ,1 2h(374 4± 56 95)和 7d(396 3± 50 98)时表达分别达到 2次高峰。脑缺血 再灌注后IL 1 β、c fos、CRF在海马区表达高峰时间具有一定的前后时序 ,即IL 1 β表达早于c fos,而CRF表达随c fos之后。 结论　大鼠脑缺血 再灌注后可诱发IL 1 β、c fos、CRF表达增加 ,具有一定时间规律性和时序关系。     

慢性间歇性缺氧对大鼠认知功能及海马CA1区超微结构的影响

我们于2005年4月至2006年1月通过建立慢性间歇性缺氧大鼠动物模型,观察慢性间歇性缺氧对大鼠认知功能及海马内神经元超微结构的影响,为进一步探讨慢性间歇性缺氧导致认知功能障碍发病机制提供形态学依据。     

NMDA受体激动剂对大鼠海马CA1区神经元膜电位影响的研究

缺血缺氧可引起神经元细胞膜电位发生改变，表现为缺血缺氧早期细胞膜超极化，随后细胞膜发生缓慢去极化及快速去极化，最终导致神经元细胞的膜电位维持或接近零水平，即持续去极化。1997年Tanaka等研究发现，大鼠离体海马脑片CAl区神经元一旦发生快速去极化，即使及时给予氧及葡萄糖，其膜电位也不能恢复至正常水平，     

钙结合蛋白在老年人海马CA1和CA3区的分布

目的　探讨老年人海马中钙结合蛋白 (CalbindinD 2 8K ,CaBP)的分布及表达 ,并分析其在人衰老过程中对神经元的生理、病理变化的影响。方法　收集 12例 6 0岁以上老年人非脑部疾病尸检左侧大脑半球的海马组织 ,经病理常规处理后 ,切片 ,用免疫组织化学ABC染色法检测海马CA1与CA3区CaBP的分布。结果　CaBP阳性产物出现在神经元的细胞质中 ,CA1区的CaBP免疫阳性细胞数多于CA3区。结论　CaBP在老年人海马CA1、CA3中均有表达 ,但有差别。提示CaBP在老年人海马的功能活动中可能起重要作用。     

冠状动脉内注射腺苷对血压、心律的影响

目的 评估冠状动脉（冠脉）血流储备测定时冠脉内注射腺苷对血压、心率和心律的影响。方法 60例胸痛、冠脉造影正常及18例单支冠脉病变行冠脉内支架术患者测定冠脉血流储备,比较各例注射腺苷（左冠脉18μg,右冠脉12μg）后血压、心电的变化。结果 冠状造影正常者注射腺苷后收缩压、舒张压及平均动脉压和心率显著降低;5例（8．3％）于注射腺苷后出现Ⅲ度房室传导阻滞（右冠脉3例、左前降支2例,P＝0．005）;单支冠脉病变患者于支架术前注射腺苷后血压、心率无显著变化,术后注射腺苷其血压、心率显著减低。结论 冠脉内注射腺苷测定冠脉血流储备是一种安全和可靠的方法。     

葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙通道的影响

目的观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙离子通道的作用。方法采用酶加机械分离法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单通道技术记录同一钳制电压下离子通道活动情况。结果低浓度葛根素(1.2mmol/L、2.4mmol/L)对L-型钙离子通道的活动无明显影响;浓度达到4.8mmol/L、9.6mmol/L时,L-型钙离子通道平均开放时间对照组由(11.77±4.84)ms缩短到(7.95±2.51)ms和(4.53±0.83)ms(P<0.05),浓度进一步增加到19.2mmol/L时,通道开放时间降至(3.042±0.792)ms。当葛根素达到一定浓度(4.8mmol/L,9.6mmol/L)时,通道开放概率对照组由(1.1×10-3±1.0×10-4)%降低到(5.3×10-4±1.8×10-4)%和(3.2×10-4±1.3×10-4)%,随着浓度的进一步增加(19.2mmol/L),开放概率降至(2.1×10-3±9.0×10-5)%。结论葛根素可以抑制单个大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙离子通道活动,减少通道开放时间,降低通道开放概率。     

APP17肽对糖尿病小鼠海马神经元凋亡相关蛋白的影响

本研究的目的在于观察糖尿病小鼠海马内神经元的凋亡情况，探讨糖尿病神经退变发生的可能机理及APP17肽的作用。     

逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区及前额叶超微结构的影响

目的观察逍遥散对阿尔茨海默病(AD)大鼠模型大脑海马CA1区及前额叶超微结构的影响。方法将大鼠随机分为四组,其中模型组、西药组、中药组三组采用D-半乳糖(D-gal)腹腔注射和A-β双侧海马注射联合造模,生理组仅用等体积生理盐水做相同的造模处理。造模完成后,西药、中药组每日分别用奥拉西坦溶液和逍遥散煎剂灌胃干预1次,连续28 d,用药体积均为0.5 ml/100 g(浓度分别为150 mg/ml、2 g/ml);生理组采用等体积的生理盐水灌胃。灌胃结束,四组大鼠分别以0.4 ml/100 g 10%水合氯醛麻醉液腹腔注射麻醉后,断头剥离海马CA1区及前额叶,并迅速切成1 mm×1 mm×1 mm的小块,分组标记,放入装有4℃4%戊二醛固定液的小玻璃容器中,4℃保存、待检。结果模型组大鼠前额叶皮质(PFC)神经元可见大量线粒体肿胀、其嵴消失,粗面内质网扩张,核膜皱褶,微管、微丝排列紊乱、缠结;突触间隙明显变宽、突触后膜致密物(PSD)厚度明显变薄。中药组大鼠PFC神经元微量线粒体肿胀,少量粗面内质网扩张,微管、微丝排列较有序。与模型组大鼠比较,中药组大鼠PFC神经元突触间隙明显变窄,PSD厚度明显变厚。结论逍遥散能使AD模型大鼠突触间隙变窄,PSD厚度增加,增强突触传递效能,改善AD模型大鼠受损的学习记忆能力。     

甲状腺激素对成年大鼠海马内突触结合蛋白Ⅰ表达的影响

目的 观察不同甲状腺激素水平对大鼠海马突触结合蛋白Ⅰ(syt Ⅰ)蛋白表达水平的影响.方法 复制雄性SD大鼠成年期甲状腺功能减退症(甲减)、甲状腺功能亢进症(甲亢)模型,用放射免疫法测定血清甲状腺激素T3、T4水平,用免疫组织化学超敏链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(S-P)法分析海马CA1区、CA3区和齿状回(DG)Syt Ⅰ蛋白的表达.结果 甲减组大鼠血清T3、T4水平[(0.34±0.12)、(41.03±11.37)nmol/L]明显低于对照组[(0.65±0.15)、(55.20±10.68)nmol/L,P<0.01或<0.05];甲减组Syt Ⅰ免疫反应产物阳性颗粒较对照组也明显减少,尤以海马CA1、CA3区锥体细胞层、放射层及DG区颗粒细胞层减少明显,Syt Ⅰ免疫反应产物,甲减组海马CA1区多形层(0.048±0.007)、细胞层(0.299±0.035)、放射层(0.042±0.007)、腔隙分子层(0.038±0.006)和CA3区的细胞层(0.085±0.019)、放射层(0.040±0.011)、腔隙分子层(0.038±0.006)及DG区颗粒细胞层(0.076±0.019)均较对照组(0.068±0.014、0.376±0.053、0.053±0.008、0.056±0.009,0.118±0.026、0.052±0.010、0.053±0.009、0.099±0.015)明显减少(P<0.01或<0.05).甲亢组大鼠血清T3、T4水平[(1.43±0.30)、(157.18±19.95)nmol/L]明显高于对照组(P<0.01).CA1区细胞层(0.322±0.050)、放射层(0.039±0.006)、腔隙分子层(0.042±0.006)和CA3区细胞层(0.098±0.034)、放射层(0.046±0.013)、腔隙分子层(0.046±0.010)及DG区颗粒层(0.085±0.024)、分子层(0.042±0.009)Syt Ⅰ免疫反应产物也较对照组减少(P<0.05或<0.01).结论 甲状腺激素水平增高或降低均可导致成年大鼠海马内SytⅠ蛋白表达减少.     

通络救脑口服液对AD大鼠海马CA3区超微结构及C-反应蛋白表达的影响

目的 观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白_(1～40)(Aβ_(1～40))诱导的老年性痴呆(AD)模型大鼠海马CA3区超微结构及C反应蛋白(CRP)表达的影响.方法 140只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、阴性对照组、阳性对照组及3个实验组(12、24、48 mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量组),共7组.采用大脑海马立体定向注射凝聚态Aβ_(1～40)诱导AD动物模型,药物干预4 w后,透射电镜观海马组织超微结构的变化,免疫组织化学染色和计算机图像分析技术测定海马区CRP阳性目标积分光密度.结果 电镜观察结果 显示:模型组大鼠海马变性,通络救脑口服液能改善大鼠海马神经元病理改变.与假手术组比较,模型组大鼠海马区CRP蛋白表达增高(P＜0.05);与模型组比较,通络救脑口服液低、中、高各剂量组CRP蛋白表达均显著降低(P＜0.05).结论 通络救脑口服液对AD模型大鼠脑内海马组织超微病理改变具有改善作用,并且能明显降低大脑海马组织CRP蛋白的表达,具有抗炎作用.