粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅲ.双抗体夹心ELISA法检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的现场评价

本文报道用槟榔碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果。７３只受试犬中有１６只对槟榔碱无反应。在导泻成功的５７ 只犬中粪抗原阳性者１１只阳性率１９．２％ 。其中驱虫阴性的３８只犬中粪抗原阳性者仅２只（５．３％ ）。在１０只驱出细粒棘球绦虫的家犬中８只粪抗原阳性。５ 只驱出泡状带绦虫的犬中粪抗原阳性者１ 只,但反应强度低。粪抗原的反应强度与细粒棘球绦虫的感染强度呈正相关（ｒ＝ ０．９４）。证明本法可用于家犬细粒棘球绦虫感染的调查。     

现场应用粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的效果评价

目的　评价粪抗原检测法在包虫病流行病学监测中的实际应用价值。　方法　家犬在采集粪便后 ,进行槟榔碱导泻 ,应用粪抗原检测法检测粪样中的细粒棘球绦虫抗原 ,并与槟榔碱导泻法的驱虫结果比较 ,同时分析犬肠道中寄生的其它蠕虫对粪抗原检测结果的影响。　结果　在 2 94只槟榔碱导泻成功的家犬中 ,4 5只检出细粒棘球绦虫 ,粪抗原阳性犬共 4 6只。二者的符合率为 97.8%。在 2 4 9只未检出细粒棘球绦虫的家犬中 ,粪抗原阳性者 1只。　结论　粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染具有较高的敏感性和特异性。可作为包虫病常规监测方法推广应用。     

现场应用粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的效果评价

目的 评价粪抗原检测法在包虫病流行病学监测中的实际应用价值。方法 家犬在采集粪便后，进行槟榔碱导泻，应用粪抗原检测法检测粪样中的细粒棘球绦虫抗原，并与槟榔碱导泻法的驱虫结果比较，同时分析犬肠道中寄生的其它蠕虫对粪抗原检测结果的影响。结果 在294只槟榔碱导泻成功的家犬中，45只检出细粒棘球绦虫，粪抗原阳性犬共46只。二者的符合率为97．8％。在249只未检出细粒棘球绦虫的家犬中，粪抗原阳性者1只。结论 粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染具有较高的敏感性和特异性。可作为包虫病常规监测方法推广应用。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究：Ⅲ.双抗体？…

本文报道用槟碱驱虫法对检测粪抗原诊断家犬细粒棘球绦虫感染的应用价值进行现场比较评价的结果。７３只受试犬中有１６只对槟 无反应。在导泻成功的５７只犬中粪抗原阳性者１１只阳性率１９．２％，其中驱虫阴性的３８只犬只粪抗原阳性者仅２只。     

吡喹酮长效缓释棒控制家犬细粒棘球绦虫感染的现场研究

目的　为确定吡喹酮驱虫棒在包虫病现场控制家犬细粒棘球绦虫感染的效果。方法　以吡喹酮 1 6～ 2 5g/犬剂量 ,给家犬皮下埋植。植前测定犬粪抗原。植后测定实验组和对照组犬粪抗原并同时做槟榔碱导泻的方法进行预防效果评价。结果　Ⅰ号药棒埋植后 8个月 ,粪抗原阳性率从埋药前的 19 5 %下降至 4 6 %。槟榔碱导泻结果 ,实验组的成虫感染率比对照组低 5倍以上 ,差异显著。Ⅱ号药棒埋植前犬群粪抗原阳性率为 4 1 3% ,埋植 1年后实验组粪抗原阳性率为 0 9% ,对照组为 36 4 %。结论　Ⅰ号药棒可以保护未感染犬不发生感染 ,但不能完全驱除已感染并寄生的成虫。Ⅱ号药棒实际上可以完全控制家犬细粒棘球绦虫的感染。这种药棒可以做为包虫病预防措施的主要手段 ,在流行地区推广使用。     

棘球绦虫感染犬粪抗原检测研究新进展

摘要：棘球绦虫（Echinococcus spp）感染的犬目前是人畜棘球蚴病主要传染源,因此对感染犬的动态监测、合理驱虫治疗是预防和彻底消灭包虫病流行的关键性措施之一。近年来,为了克服槟榔碱导泻法鉴定虫种和虫卵以及检测血清特异性循环抗原及抗体等方法的不足,各实验室开始应用ELISA双抗夹心法,试图建立棘球绦虫感染犬粪抗原的快速检测系统。本文对犬感染棘球绦虫的特异性粪抗原检测技术的最新进展作一综述。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究 Ⅰ.用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原—抗体系统检测粪抗原方法的建立

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其免疫家兔血清ＩｇＧ建立了用于检测家犬粪抗原诊断细粒棘球绦虫成虫感染的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法。对用离子交换层析、ＳＰＡ亲和层析、抗兔ＩｇＧ抗体亲和层析和细粒棘球绦虫成虫虫体抗原亲和层析等四种方法纯化的抗体进行了比较，以抗原亲和层析法纯化的抗体免疫活性最高，用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测抗原的终点在标本缓冲液中为２．５ｎｇ／ｍｌ，在健康家犬粪便悬液的上清中为５ｎｇ／ｍｌ。检测１１只人工感染细粒棘球绦虫成虫的家犬粪便标本，粪抗原阳性率达１００％。     

四川省藏族牧区家犬棘球绦虫病流行病学调查研究

目的 对四川省甘孜县达通玛藏族牧区家犬感染细粒棘球棘球绦虫和多房棘球棘球绦虫进行流行病学调查和评价感染风险因素.方法 分别对甘孜县达通玛藏族牧区查龙、卡龙、大德和查扎等4乡的犬主进行问卷调查,了解家犬感染棘球绦虫的相关因素.剖检流浪犬,检测棘球绦虫感染率,并用此结果 评价粪抗原-ELISA方法 .用该方法 检测家犬感染棘球绦虫的阳性率,评价犬驱虫效果.用X2检验和方差分析对结果 进行统计. 结果 2000年流浪犬棘球绦虫感染率为60.9%(14/23),其中细粒棘球绦虫感染率为26.1%(6/23),多房棘球绦虫感染率为34.8%(8/23).粪抗原-EUSA特异性为80.0%,敏感性为9213%.家犬粪抗原-EUSA阳性率平均为50%(290/580).从2003年起,经每半年1次吡喹酮犬驱虫(5 mg/kg),2005年同一犬群粪抗原阳性率降为17.0%(99/580).犬感染风险因素调查发现敞放犬粪抗原阳性率[40.4%(65/161)]明显高于半栓养犬[白天拴养夜晚放养的犬32.3%(109,337);夜晚拴养白天放养的犬29.2%(21/72)]及一直栓养的犬[20%(2/10)1(P＜0.01);主人缺乏防治相关知识的犬[38.1%(121/318)]和不进行驱虫的犬[47.7%(92/193)],阳性率明显高于主人具有相关知识[28.6%(75/262)]和驱虫犬120.4%(79/387)](P＜0.05和P＜0.01).粪抗原-ELISA阳性率与犬的年龄、性别和饲养家畜的种类无关.结论 四川省甘孜县达通玛藏族牧区是家犬两种棘球绦虫病流行区.粪抗原-EUSA法可用于检测犬棘球蚴病.犬敞放和不对犬驱虫,以及牧民缺乏相关知识是造成家犬棘球蚴病传播、流行的重要原因.     

犬细粒棘球绦虫感染LAMP检出日期的确定

目的确定犬细粒棘球绦虫感染环介导等温扩增技术(LAMP)最早检出日期。方法家犬8只,口服喂饲细粒棘球绦虫原头节,建立细粒棘球绦虫感染动物模型。感染后40d收集犬粪,用LAMP检测粪便中细粒棘球绦虫目的基因并与传统的PCR比较。结果 8只犬均获得细粒棘球绦虫感染,感染后第18dLAMP法检查犬粪中细粒棘球绦虫目的基因均阳性,较普通PCR法提早2d。结论 LAMP法简便、快捷、灵敏,有望成为早期诊断犬细粒棘球绦虫感染的重要手段。     

家犬细粒棘球绦虫的人工感染及药物驱虫试验

本试验探讨犬吞食家畜带有棘球蚴的脏器后,细粒棘球绦虫在犬小肠里成熟所需要的时间及氢溴酸槟榔碱和吡喹酮对犬细粒棘球绦虫的驱虫效果。在实验室条件下,给幼犬吞食一定量的原头蚴和含生发层的包囊,经51～109天可在犬粪便中查出孕节或在小肠里检出成虫,感染成功率为77.3％。对犬细粒棘球绦虫的驱虫,以吡喹酮为最好,并明显优于氢溴酸槟榔碱。     

犬用吡喹酮缓释剂控制家犬细粒棘球绦虫自然感染的现场初步观察

用小剂量吡喹酮缓释剂型皮下埋植的方法，给家犬投药后７个月对３５只埋药犬和６５只对照犬用槟榔碱进行驱虫试验的结果，在埋药犬中细粒棘球绦虫感染率（５．７％），低于对照犬（１５．４％），埋药犬中没有发现药物副反应和局部感染，初步证明缓释剂型及皮下埋植方法是安全的并具有控制家犬中细粒棘球绦虫自然感染的作用。     

PCR诊断犬感染细粒棘球绦虫方法检出日期的确定

目的确定犬细粒棘球绦虫感染PCR检测的窗口期。方法家犬8只,口服喂饲细粒棘球绦虫原头节,感染后40 d,收集犬粪,用PCR方法检测粪便中的目的DNA。结果6只犬获得细粒棘球绦虫重度感染,感染后21 dPCR检出目的DNA片段。结论犬重度感染细粒棘球绦虫后粪便PCR检测的窗口期为20 d。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究Ⅱ.粪抗原检测的敏感性、特异性及实验感染犬排出粪抗原的动态观察

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其抗体建立的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ滴定成虫抗原的结果Ａ４５０值与抗原含量呈指数曲线关系,高度相关（ｒ＝０．９８）。实验感染家犬粪抗原含量在２．５－８．０μｇ／ｍｌ之间,因此本法在检测粪抗原中具有足够的敏感性。家犬泡状带绦虫的感染引起的交叉反应是影响本法特异性的主要问题。选择最适的抗体包被浓度可消除交叉反应。用细粒棘球蚴原头节感染家犬后,粪抗原呈低滴度阳性,至２１天后迅速升高。实验感染泡状带绦虫的家犬观察５０天粪抗原均在临界水平之下。作者推荐本法可用于家犬细粒棘球绦虫成虫感染的诊断。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究：Ⅰ.用细粒棘球绦虫成虫 …

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其免疫家兔血清ＩｇＧ建立了用于检测家犬粪抗原诊断细粒棘球绦虫成虫感染的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法。对用离子交换层析，ＳＰＡ亲和层析，抗兔ＩｇＧ抗体亲和层析和细粒棘球线条绦虫成虫虫体抗原亲和层析等四种方法纯化的抗体进行了比较，以抗原亲和层析化纯化的抗体免疫活性最高，用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测抗原的终点在标本缓冲液中为２．５ｎｇ／ｍｌ，在健康家犬粪便悬液的上清中为５ｎｇ／ｍｌ     

澳大利亚犬自然感染或实验感染细粒棘球绦虫的粪抗原检测

细粒棘球绦虫广泛分布于世界各地,是一种重要的人兽共患寄生虫。粪检虫卵等方法用于诊断细粒棘球绦虫不可靠。用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测感染犬的粪抗原,其灵敏度高、特异性强,适用于隐性和显性感染。本文用ELISA检测粪抗原的方法调查了澳大利亚家犬和野犬的自然感染和实验感染情况。     

新疆北部骆驼源细粒棘球绦虫发育和形态特征

目的：研究新疆北部双峰驼细粒棘球绦虫的发育与形态特征。方法：用棘球蚴原头节感染家犬,观察成虫在犬体内的发育。对３５ｄ成虫进行形态学的观察和描述。结果：用原头节感染的６只家犬,在感染后３５ｄ和４５ｄ用槟榔碱驱虫,每只犬驱出成虫１４７８０至１３５９００条。３５ｄ的成虫中有１０％虫体已含有厚壳虫卵,表明有感染性。７７％的成熟体节位于虫体末端,最多体节数为３。虫体总长２．５±０．７ｍｍ,成虫平均顶突钩数３２．７±１．２,外形光滑。平均睾丸数３２．４±３．９,分布于整个成熟体节,在卵黄腺后排成一排。卵巢明显较长,有不明显的分叶,卵黄腺长形并掩盖梅氏腺。结论：新疆北部双峰驼细粒棘球绦虫在形态学上与北非骆驼株细粒棘球绦虫相似,可能是分布在我国的细粒棘球绦虫骆驼株。但与骆驼株亦有不同之处,应进一步鉴定。     

青海省玛沁县家犬棘球绦虫感染现状及影响因素调查

目的了解青海省部分棘球蚴病流行区家犬棘球绦虫感染现状及其影响因素,为加速该类地区棘球蚴病防治进程提供参考。方法在青海省牧区选取棘球蚴病重度流行县玛沁县,采用整群随机抽样的方法抽取两个乡镇为调查点,于2018年11月-2019年9月,沿着两乡镇通往各牧委会及部分远牧点的主要交通路线,对所有养犬的户主进行问卷调查,收集家犬相关信息,同时每只家犬采集一份粪便。以PCR方法检测犬粪中棘球绦虫DNA并鉴别虫种,DNA检测阳性者判为棘球绦虫感染,计算棘球绦虫感染率,卡方检验分析与家犬感染有关的影响因素。结果共调查86家养犬户,"犬犬投药,月月驱虫"落实率为39.53%(34/86)。家畜私人屠宰户占90.70%(78/86),其中53.85%(42/78)将未煮熟的家畜内脏直接喂犬。86家养犬户共饲养160只家犬,家犬拴养率为80.00%(128/160)。犬"月月驱虫"落实率为47.50%(76/160)。共采集144只家犬的144份粪便,家犬受检率为90.00%(144/160)。棘球绦虫感染率为25.00%(36/144)。感染犬中兼有细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫感染占2.78%(1/36),细粒棘球绦虫感染为97.22%(35/36),未发现家犬单独感染多房棘球绦虫。近半年内规范和未规范驱虫家犬的感染率分别为21.67%(13/60)和27.38%(23/84),组间差异无统计学意义(P0.05)。采样前一个月内驱虫家犬和未驱虫家犬的感染率分别为18.67%(14/75)和31.88%(22/69),组间差异无统计学意义(P0.05)。拴养家犬的感染率为22.66%(29/128),与散养和半拴养家犬的感染率43.75%(7/16)之间的差异无统计学意义(P0.05)。0～1岁、1～5岁和5岁家犬感染率依次为39.29%(11/28)、 21.82%(12/55)和21.31%(13/61),三组间差异无统计学意义(P0.05)。不同性别、不同季节和不同牧场类型中家犬的感染率之间,亦均无统计学差异(P0.05)。结论玛沁县家犬细粒棘球绦虫感染情况仍较为严重。为了落实家犬"月月驱虫"以及家畜内脏规范处理等传染源控制工作,应以牧民为重点对象,进一步加强棘球蚴病防治的健康教育与技术指导。     

粪抗原检测法诊断犬细粒棘球绦虫感染的研究：Ⅱ.粪抗原检测 …

用细粒棘球绦虫成虫虫体抗原及其抗体建立的双抗体夹心ＥＬＳＩＡ滴定成虫抗原的结果Ａ４５０值与抗原含量呈指数曲线关系,高度相关。实验感染家犬抗原含量在２．５－８．０μｇ／ｍｌ之间,因此本法在检测粪抗原中具有足够的敏感性。家犬泡状带绦虫的感染引起的交叉反应是影响本法特异笥的主要问题。     

家犬粪便中的细粒棘球绦虫DNA PCR检测方法的建立

目的 建立检测家犬粪便中细粒棘球绦虫DNA的PCR方法，为开展流行病学监测提供检测手段。方法 犬粪经液氮反复冻溶后提取DNA，PCR扩增编码细粒棘球绦虫12srDNA检测该靶DNA片段（255bp）。结果 10只细粒棘球绦虫感染犬，8只（体内成虫数〉80条）阳性，2只（体内成虫数分别为4条和5条）阴性。4只未感染家犬粪样及其他3种绦虫DNA样本均为阴性。结论 初步建立了灵敏、特异的检测家犬粪便中细粒棘球绦虫的PCR方法。     

四川省藏族牧区家犬棘球绦虫病流行病学调查研究(英文）

目的 对四川省甘孜县达通玛藏族牧区家犬感染细粒棘球棘球绦虫和多房棘球棘球绦虫进行流行病学调查和评价感染风险因素。 方法 分别对甘孜县达通玛藏族牧区查龙、卡龙、大德和查扎等4乡的犬主进行问卷调查,了解家犬感染棘球绦虫的相关因素。剖检流浪犬,检测棘球绦虫感染率,并用此结果评价粪抗原?鄄ELISA方法。用该方法检测家犬感染棘球绦虫的阳性率,评价犬驱虫效果。用χ2 检验和方差分析对结果进行统计。 结果 2000年流浪犬棘球绦虫感染率为60.9%（14/23）,其中细粒棘球绦虫感染率为26.1%（6/23）,多房棘球绦虫感染率为34.8%（8/23）。粪抗原?鄄ELISA特异性为80.0%,敏感性为92.3%。家犬粪抗原?鄄ELISA阳性率平均为50%（290/580）。从2003年起,经每半年1次吡喹酮犬驱虫（5 mg/kg）,2005年同一犬群粪抗原阳性率降为17.0%（99/580）。犬感染风险因素调查发现敞放犬粪抗原阳性率[40.4%（65/161）]明显高于半栓养犬[白天拴养夜晚放养的犬32.3%（109/337）;夜晚拴养白天放养的犬29.2%（21/72)]及一直栓养的犬[20%（2/10）] （P＜0.01）;主人缺乏防治相关知识的犬[38.1%（121/318）]和不进行驱虫的犬[47.7%（92/193）],阳性率明显高于主人具有相关知识[28.6%（75/262）]和驱虫犬[20.4%（79/387）] （P＜0.05 和P＜0.01）。粪抗原?鄄ELISA阳性率与犬的年龄、性别和饲养家畜的种类无关。 结论 四川省甘孜县达通玛藏族牧区是家犬两种棘球绦虫病流行区。粪抗原?鄄ELISA法可用于检测犬棘球蚴病。犬敞放和不对犬驱虫,以及牧民缺乏相关知识是造成家犬棘球蚴病传播、流行的重要原因。