血红素加氧酶-1在脑缺血/再灌注损伤中的作用研究

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)表达和活性变化在脑缺血/再灌注(I/R)致脑损伤中的作用。方法♂小鼠随机分为4组,每组30只。以40g.L-1水合氯醛400mg.kg-1ip麻醉,从颈总静脉抽取并回输约40%总血量加双侧颈总动脉夹闭20min,建立脑I/R损伤模型。3组小鼠于建模前16h分别予以脑室内注射150μmol.L-1氯化正铁血红素(Hemin)、150μmol.L-1锌原卟啉Ⅸ(ZnPPIX)或人工脑脊液(ACSF)3μl/只。假手术组仅麻醉并分离暴露双侧颈总动脉和右侧颈总静脉20min。采用Westernblot法检测海马HO-1蛋白表达;分光光度计法检测海马HO活性和脑黄嘌呤氧化酶(XO)活性及丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量;TUNEL法检测海马细胞凋亡。结果Hemin组海马HO-1表达明显增强,HO活性升高,脑XO活性、MDA和ROS含量降低,海马神经元凋亡减少(vsACSF,P<0.05);ZnPPIX组海马HO-1表达无变化(vsACSF,P>0.05),HO活性降低,脑XO活性升高伴脑MDA、ROS含量增加及海马神经元凋亡增多(vsACSF,P<0.05)。结论HO-1表达升高对脑I/R致脑损伤具有保护作用,其作用机制与抗脂质过氧化和清除自由基有关。     

褪黑素对急性肾脏缺血再灌注损伤模型小鼠血红素加氧酶-1表达的影响

目的:研究褪黑素(MT)对急性肾脏缺血再灌注损伤模型小鼠的保护作用及其机制。方法:将昆明种小鼠40只,随机分成MT高、低剂量(10、1 mg.kg~(-1))组,假手术组,缺血再灌注组,造模前30 min各组分别腹腔注射相应药物,后2组注射等容量的3%乙醇生理盐水。造模24 h后测定小鼠血清肌苷(Cr)与尿素氮(Bun)水平,观察肾脏组织的病理学改变,免疫组织化学方法观察小鼠肾脏血红素加氧酶-1(HO-1)的表达。结果:与假手术组相比,缺血再灌注组肾小管上皮细胞呈明显的缺血性改变,血清Cr与Bun水平均显著性升高(P<0.01),肾脏HO-1表达明显增强;与缺血再灌注组相比,MT高、低剂量组肾小管上皮细胞缺血性改变减轻,血清Cr与Bun水平均显著性降低(P<0.01),肾脏HO-1表达明显增强。结论:MT可能通过上调HO- 1的表达而促进其合成从而发挥对急性肾脏缺血再灌注损伤模型小鼠的保护作用。     

远端缺血预处理在小体积肝移植物缺血-再灌注损伤的保护作用

目的研究远端缺血预处理(RIPC)在小体积肝移植物缺血-再灌注(I-R)损伤中的保护作用。方法将10只大鼠随机分成两组,每组5只,原位肝移植组(A组)和RIPC后肝移植组(B组)。建立30%大鼠肝移植模型,检测术后2、6、12、24 h血清中ALT的水平,RT-PCR、Westernblot分别检测肝脏组织中血红素加氧酶1(HO-1)mRNA和蛋白表达。结果与A组相比,术后B组血清ALT水平下调,HO-1 mRNA及蛋白表达均明显增加(P<0.05)。结论 RIPC具有保护小体积移植物I-R损伤作用,这可能与HO-1在术后肝脏组织中的过表达有关。     

姜黄素预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1的影响

目的:探讨姜黄素预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)的影响。方法:建立大鼠肢体缺血2h再灌注3h肺损伤模型。60只大鼠随机等分为5组:假手术组(Sham)、姜黄素组(Cur)、缺血再灌注组(I/R)、姜黄素+缺血再灌注组(Cur-I/R)和锌原卟啉IX(ZnPP)+姜黄素+缺血再灌注组(ZnPP-Cur-I/R)。ZnPP-Cur-I/R组于缺血前24h经腹腔注射ZnPP 20mg/kg,Cur组、Cur-I/R组和ZnPP-Cur-I/R组分别于缺血前2h经腹腔注射姜黄素200mg/kg,其余各组给予等容量生理盐水。除Sham组和Cur组外,其余各组行肢体缺血再灌注。观察肺组织病理学变化,测定肺组织损伤评分、湿/干重比(W/D)、中性粒细胞(PMN)数目和HO-1mRNA及其蛋白表达的情况。结果:与Sham组比较,I/R组肺组织损伤较重,肺损伤评分、W/D及PMN计数升高,HO-1mRNA及其蛋白表达上调(P<0.01);与I/R组比较,Cur-I/R组肺组织损伤减轻,肺损伤评分、W/D及PMN计数降低,HO-1mRNA及其蛋白表达上调(P<0.01);与Cur-I/R组比较,ZnPP-Cur-I/R组肺组织损伤加重,肺损伤评分、W/D及PMN计数升高,HO-1mRNA及其蛋白表达下调(P<0.01)。结论:姜黄素预处理可通过上调肺组织HO-1的表达减轻大鼠肢体缺血再灌注肺损伤。     

血红素加氧酶-1的研究进展

血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)是一种最广泛存在的抗氧化防御酶,是热休克蛋白家族中的一个成员,可代谢血红素生成CO、胆红素和游离铁.在大多数组织内呈低水平表达,可被多种伤害性刺激包括血红素、高氧、缺氧、热休克、内毒素、过氧化氢、细胞因子、紫外线、重金属和NO等诱导产生高水平的表达.HO-1基因表达的调控主要发生在转录水平.HO-1具有抗炎抗氧化、抗凋亡、抗增生效应,但其保护作用的机制仍不是很清楚.HO-1的产生作为一种对伤害性刺激的适应性和保护性反应,与临床上一些相关疾病密切相关.有关此方面的研究现越来越多并且取得了重大的进展.本文就HO-1的产生、基因调控、功能及其与肺部和其他系统疾病的关联方面的研究现状作一综述.     

血红素加氧酶-1在病毒感染过程中的保护作用研究进展

血红素加氧酶-1 (heme oxygenase-1, HO-1)是一种细胞保护酶,可催化血红素转化为一氧化碳、胆绿素和铁,共同保护细胞免受氧化和炎症损伤,在维持细胞稳态中有重要作用。近年来, HO-1被广泛发现具有抑制多种病毒的生物学作用, HO-1诱导表达可抑制丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、A型流感病毒、寨卡病毒、新型冠状病毒、人类呼吸道合胞病毒、甲型肝炎病毒、肠道病毒71等多种病毒的复制。研究显示, HO-1对病毒的抑制和机体的保护作用主要包括3种机制:HO-1及下游产物对病毒复制的直接抑制作用、通过HO-1激活宿主细胞Ⅰ型干扰素相关的先天免疫对抗病毒复制、HO-1及其下游产物抑制病毒感染引起的炎症损伤等。本文主要就HO-1抗病毒作用及其机制的最新进展进行综述,以期为HO-1作为潜在的抗病毒治疗靶点提供研究参考。     

右美托咪定预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1的影响

目的探讨右美托咪定预处理对大鼠肢体缺血再灌注诱发肺损伤时血红素加氧酶-1的影响。方法健康SD大鼠30只,体重300³50 g,随机分为3组,每组10只:假手术组(Sham组);肢体缺血再灌注组(IR组),右美托咪定组(Dex组)。Dex组于缺血前10 min经腹腔注射右美托咪定25μg/kg体重,IR组、Sham组输注等容量的生理盐水。再灌注末,观察肺组织病理变化,测定肺组织湿/干质量比(W/D),行血气分析,测定血红素加氧酶-1(HO-1)的含量。结果与Sham组比较,IR组和Dex组PaO2、PaCO2降低,W/D、HO-1含量升高(P<0.05),且出现病理损伤;与IR组比较,Dex组肺损伤明显减轻,PaO2、PaCO2升高,W/D降低,HO-1含量升高(P<0.05)。结论右美托咪定预处理能增加肢体缺血再灌注诱发肺损伤大鼠肺组织中HO-1的活性,上调HO-1蛋白的表达,减轻肺缺血再灌注损伤。     

血红素加氧酶-1在食管癌放疗前后变化及意义

目的：通过检测食管癌患者放疗前后食管癌组织中血红素加氧酶-1（ HO-1）的变化,确定HO-1是否可能预测食管癌患者对放射治疗存在敏感性。方法选取28例正常食管组织及58例食管癌组织,应用RT-PCR（ real-time PCR）检测HO-1基因的mRNA表达,分析其在正常组织及食管癌放疗前后关系。结果 HO-1在食管癌中表达明显升高与正常食管组织表达差异有统计学意义（ P ＜0 T．01）,并且随着放疗剂量的增加HO-1水平也随之升高,但是在放疗不敏感的患者中HO-1表达与正常相比差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论目前的研究结果表明HO-1的表达可能是食管癌患者对放疗敏感的一个有用的指标。     

血红素加氧酶-1抑制剂在光动力治疗胰腺癌敏感性中的作用

目的 研究血红素加氧酶-1(HO-1)及其抑制剂锌原卟啉Ⅸ在光动力治疗（PDT）胰腺癌中的作用,从而为光动力治疗胰腺癌的敏感性提供依据。方法 CCK-8法检测PDT及锌原卟啉Ⅸ（ZnPPⅨ）对胰腺癌细胞株PANC-1增殖能力的影响;利用Western blot和Real-time PCR技术分别检测胰腺癌细胞中HO-1蛋白及其mRNA的表达情况;构建胰腺癌裸鼠皮下种植瘤模型,进一步观察PDT及ZnPPⅨ对胰腺癌成瘤能力的影响。结果 PDT联合ZnPPⅨ干预胰腺癌细胞能明显抑制胰腺癌细胞的增殖率（P <0.05）;PDT胰腺癌细胞中HO-1 mRNA水平和蛋白表达水平均增加,而PDT联合ZnPPⅨ干预后的胰腺癌细胞HO-1表达明显降低（P <0.05）;动物实验结果显示,PDT联合ZnPPⅨ干预可抑制胰腺癌皮下种植瘤的生长,肿瘤体积和质量明显降低。结论 血红素加氧酶-1抑制剂ZnPPⅨ可增强胰腺癌光动力治疗的敏感性,可能成为胰腺癌光动力治疗的潜在增敏剂。     

血红素加氧酶-1在5/6肾切除大鼠肾脏中的表达及活性

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在慢性肾衰竭大鼠肾脏中的表达、活性及其诱导剂对肾脏病变的保护作用。方法:将大鼠随机分为三组:A组假手术组,B组慢性肾衰竭组,C组给予氯化高铁血红素(Hemin)灌饲慢性肾衰竭组,8周后检测大鼠血压,肾功能,血、尿蛋白,观察肾组织病理改变,免疫组织化学观察HO-1的表达。结果:C组较B组蛋白尿水平明显降低(P<0.05),肾功能明显降低(P<0.05),但较A组明显升高(P<0.05),肾小球硬化及肾小球基底膜增生程度以及肾间质纤维化程度虽较B组减轻,但差异无显著性意义。免疫组织化学显示,B组HO-1的表达较A组、C组均明显降低(平均光度、面密度)(P<0.05),但肾组织中B组、C组之间HO的活性无统计学意义,B、C组较A组均明显降低(P<0.05),血清中HO的活性B组较C组明显降低(P<0.05)。结论:HO-1在慢性肾衰竭大鼠肾脏中的表达及活性是降低的,但其诱导剂对慢性肾衰竭大鼠肾脏病变具有部分保护作用。其机制尚可待进一步研究。     

辛伐他汀对急性心肌梗死大鼠血红素加氧酶-1的影响

目的探讨大鼠急性心肌梗死后心肌内血红素加氧酶-1(HO-1)水平变化及辛伐他汀对HO-1表达的影响。方法结扎♂SD大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分为心肌梗死组(MI组)、辛伐他汀(Sim组)和假手术组(Sham组,只穿线不结扎)。Sim组以辛伐他汀40 mg.kg-1.d-1灌胃,MI组和Sham组以等体积生理盐水灌胃。术后24 h、7 d、28 d处死动物,RT-PCR及Western bolt测定心肌非梗死区HO-1 mRNA和蛋白表达水平,并测非梗死区心肌超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果HO-1 mRNA和蛋白表达水平均在心梗后24 h开始升高,7 d达峰,28 d恢复至基线水平。3个时间点MI组上述指标均高于Sham组;术后7 d和28 d Sim组上述指标均高于MI组(P<0.05)。随HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD活性升高,MDA含量降低。结论心肌内HO-1水平在急性心肌梗死后28 d内呈现动态变化。辛伐他汀可诱导HO-1表达,发挥抗氧化损伤的心脏保护作用。     

远端缺血预适应的心肌梗死大鼠心肌中血红素加氧酶-1的研究

目的探讨血红素加氧酶-1（HO-1）及其催化产物在远端缺血预适应（RPC）后的心肌梗死大鼠心肌中的作用。方法实验分为心肌梗死组（AMI组）及其假手术组（As组）和下肢缺血预适应组（LIP组）及其假手术组（Ls组）。AMI组和LIP组又分2、4、6、12h组;Ls组实验结束即刻处死;取12h组用伊文思兰和氯化三苯四氮唑（TTC）染色检测心肌梗死面积。用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测心肌组织中HO-1 mRNA基因的表达,用全自动生化仪检测血清中的肌酸激酶同工酶（CK-MB）和胆红素。结果LIP组心肌梗死面积比AMI组明显降低（P〈0.05）;血清中各时间点心肌组织中HO-1的表达、胆红素和铁蛋白均比AMI组明显升高（P〈0.05或〈0.01）。结论下肢缺血预适应能够减小心肌梗死面积,HO-1对心肌有保护作用。     

诱导血红素加氧酶-1对肝硬化大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对肝硬化大鼠肠黏膜屏障的保护作用.方法 建立四氯化碳(CCl4)致大鼠肝硬化动物模型,钴原卟啉诱导HO-1表达.FITC-荧光标记法检测大鼠肠黏膜通透性.ELISA法检测血浆TNF-α及IL-6含量.分光光度法检测肠组织HO活性及MDA含量.TUNEL染色法检测肠黏膜细胞凋亡.Western blot检测肠组织Bcl-2蛋白表达.结果 与control组比较,肝硬化(HC)组大鼠肠道通透性显著增高(P＜0.01);HC+HO组大鼠肠道通透性比HC组显著降低(P＜0.05).血浆TNF-α水平在HC组显著高于control组(P＜0.01),而在HC+HO组显著低于HC组(P＜0.05);IL-6水平在HC组显著高于control组(P＜0.01).肠组织匀浆MDA含量在HC组显著高于control组(P＜0.01),而在HC+HO组显著低于HC组(P＜0.01).诱导HO-1可有效抑制肝硬化大鼠肠黏膜细胞凋亡.HC组大鼠Bcl-2蛋白表达量显著低于control组(P＜0.01),诱导HO-1可使Bcl-2蛋白表达量显著高于control组(P＜0.01).结论 诱导HO-1可能通过抑制炎症与细胞凋亡保护肝硬化大鼠肠黏膜屏障.     

血红素加氧酶-1在硫化氢对抗顺铂诱导的听细胞毒性损伤中的作用

目的探讨血红素加氧酶-1（HO-1）在硫化氢（H2S）对抗顺铂（Cisplatin）诱导的听细胞损伤中的作用。方法应用顺铂处理听细胞,建立化疗药物耳毒性的体外模型。硫化氢的供体硫氢化钠（NaHS）及HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ（ZnPPIX）先于顺铂加入培养基中,作为预处理。检测细胞存活率、胞内丙二醛（MDA）的含量、HO-1的表达。结果顺铂在10～80gmol／L浓度范围内处理听细胞24h可浓度依赖性地降低细胞存活率。40μmol／L顺铂处理24h可增加听细胞内MDA的含量。NaHS处理可上调HO-1的表达,抑制顺铂引起的胞内MDA含量增加及细胞存活率降低。HO-1的抑制剂秦ZnPPIX可明显减弱H2S对顺铂诱导的胞内MDA含量的增加及细胞存活率降低的抑制作用。结论HO-1可通过抗氧化的机制介导H2S对顺铂诱导的听细胞毒性的改善作用。     

血红素加氧酶-1的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响。方法:32只健康雄性wistar大鼠,随机分为4组,正常+脂多糖(LPS)(对照组)、肝硬化+生理盐水对照组(TAA组)、肝硬化+LPS组(TAA+LPS组)、肝硬化+LPS+hemin(氯化高铁血红素)(HM组)。用硫代乙酰胺(TAA)诱导肝硬化模型时间共计10周,对照组自由饮清水。于模型造成后,向对照组、TAA+LPS组、HM组大鼠腹腔内注入LPS3 mg/kg;TAA组大鼠腹腔内注入等量的生理盐水;HM组于注射LPS 12 h前,腹腔注射HM(40 mg/kg),并在注入LPS 6 h后,各组动物经腹主动脉穿刺采全血观察血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的表达。留肝组织用免疫组织化学法观察HO-1的表达。结果:对照组、TAA组、TAA+LPS组、HM组血浆中的ALT/AST、MDA、NO依次升高差异有显著性(P<0.05),对照组、TAA、TAA+LPS、HM组各组大鼠的灰阶值显著依次降低,且有明显差别(P<0.05)。结论:在实验性的肝硬化内毒素中尽管HO-1的表达增加,但它未起到保护作用,它与内毒素对机体的损伤有关。     

血红素加氧酶-1重组乳酸乳球菌灌胃对内毒素血症大鼠肠道的保护作用

目的利用基因工程原理合成携带血红素加氧酶-1(HO-1)基因的乳酸乳球菌,通过对正常大鼠灌胃后,观察其是否有对内毒素血症大鼠肠道肠粘膜保护效应,及减轻肠道炎症反应。方法将24只健康清洁级♂SD大鼠随机分为携带HO-1基因的乳酸乳球菌灌胃组(HO-1组,n=8)、乳酸乳球菌灌胃组(LL组,n=8)、谷氨酰胺灌胃组(Glu组,n=8)。分别给予携带HO-1基因的乳酸乳球菌、乳酸乳球菌或谷氨酰胺,每日1次,共4次。d4腹腔内注射内毒素,12h后取末端回肠。比较各组动物的死亡率,检查肠组织病理学变化,并检测肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)含量和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达量。结果与LL组比较,HO-1组的生存率均明显升高(P<0.05);HO-1组和Glu组chiu′s评分和肠组织MPO活性明显降低(均P<0.01);肠组织TNF-α的含量明显减低(P<0.01),IL-10的含量却明显升高(P<0.01);HO-1的含量明显增加(P<0.01);与Glu组比较,HO-1组的IL-10的含量和HO-1的含量明显增加(P<0.01,P<0.05)。结论携带HO-1基因的乳酸乳球菌对内毒素血症大鼠肠粘膜有较好的保护作用,且能明显减轻肠道炎症反应。     

血红素加氧酶-1对慢性粒细胞白血病细胞凋亡效应的研究

目的探讨HO-1在慢性粒细胞白血病（以下简称慢粒）中的表达,研究其对抗细胞凋亡的效应,并研究抑制HO-1的表达对细胞凋亡的影响。方法探讨HO-1在慢性粒细胞白血病中的表达,研究其对抗细胞凋亡的效应,并研究抑制HO-1的表达对细胞凋亡的影响。结果RT-PCR结果显示骨髓血中HO-1的表达呈组成性,与对照组相比,诱导K562细胞HO-1的表达促进了细胞的生长（P＆lt;0.05）,并且这种表达成剂量依赖性,而抑制HO-1的表达促进了细胞的凋亡（P＆lt;0.05）,细胞的存活率只有对照组的30%。结论慢粒标本中HO-1的表达呈组成性,HO-1是一种可诱导型分子,并发挥抗凋亡效应,抑制HO-1的表达可能成为治疗慢粒的新方法。     

丹参在肝移植缺血-再灌注损伤中的保护作用

20世纪以来肝移植已成为临床治疗肝功能衰竭有效的治疗阶段,但是目前肝移植作为一种治疗手段远没达到人们期望的理想效果.     

血红素加氧酶-1对糖尿病大鼠神经病理性疼痛的影响及可能的机制

目的探讨血红素加氧酶-1对糖尿病大鼠神经病理性疼痛的影响及可能的机制。方法将造模成功的30只糖尿病大鼠随机分为3组,每组10只。甲组糖尿病鼠10只,乙组糖尿病鼠10只并采用锌原卟啉干预,丙组糖尿病鼠10只并采用钴原卟啉干预,另选取10只正常大鼠作为对照组。对所有大鼠在造模前和造模后进行测试大鼠的机械性缩足反应阈值(PWMT)。造模后43d,麻醉大鼠,取坐骨神经电镜标本;取L4~L6段脊髓,行HE染色,免疫组化染色及原位末端标记检测。结果在造模后7~42d内,甲乙丙3组的PWMT显著降低;与甲组相比,乙组的PWMT显著降低,丙组的PWMT显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血红素加氧酶-1对糖尿病大鼠神经病理性疼痛具有治疗作用,其可能的原因为血红素加氧酶-1能够减轻糖尿病外周神经病变及抑制脊髓背角神经元凋亡有关。     

血清血红素加氧酶-1水平与矽肺患者纤维化发生发展的相关性

目的探讨HO-1在矽肺患者肺纤维化发生发展中的作用。方法采用双抗体一步夹心Elisa实验法统一检测60例不同期别矽肺患者及60例健康对照者血清中HO-1的水平。结果 HO-1在矽肺Ⅰ期患者血清中的表达水平显著高于正常对照组,而随着矽肺期别增加,其表达水平下降,但仍显著高于正常对照组(P<0.05)。结论 HO-1在矽肺患者肺纤维化发生、发展过程中起重要作用。