体外牙髓-牙本质复合体观察模型的初步构建

目的 体外构建牙髓-牙本质复合体模型,通过对生长于其内的牙髓细胞生长情况的观测评价该模型的构建效果。方法 构建可动态观察细胞形态的牙髓-牙本质复合体模型。将增殖稳定的人牙髓细胞接种于模型内培养,检测细胞在髓腔环内与牙本质髓腔内壁的关系和形态学表现,以及结构内细胞的增值活性等。结果 人牙髓细胞可以在本研究构建的模型内稳定增殖生长。 结论 本研究成功构建了体外牙髓-牙本质复合体动态观察模型,人牙髓细胞可在其内稳定增殖生长。     

牙髓-牙本质复合体中第三期牙本质的生物学研究

牙本质是构成牙齿主体的硬组织，而牙髓是组成牙齿的唯一的软组织，但是由于其胚胎发生和功能上的关系密切，因此将他们合称为牙髓一牙本质复合体。牙髓可以终生不断地形成牙本质，此活动受到牙髓一牙本质复合体中一些生长因子的调节。牙本质可分为三期：第一期牙本质(原发性牙本质)，是牙齿发育过程中所形成的牙本质，     

人根尖乳头干细胞生成牙髓牙本质复合体的实验研究

目的应用组织工程方法,探讨人根尖乳头干细胞（SCAP）进行牙髓牙本质复合体再生的可能性。方法从牙根未发育完
全的健康阻生智齿中分离牙乳头,用组织贴块法培养SCAP。细胞分别在成骨诱导液中培养3周及普通培养基中培养60 d后,
用茜素红检测钙结节形成情况,免疫荧光法和RT-PCR检测成骨细胞标志物碱性磷酸酶（ALP）、骨涎蛋白（BSP）、骨钙素（OC）和
牙本质涎蛋白（DSP）的表达情况。选取5~6周雌性裸鼠6只,将SCAP与羟磷灰石/磷酸三钙（HA/TCP）复合培养作为实验组,仅
有HA/TCP作为对照组,分别植入同一只裸鼠背部皮下,左右侧各1个。8周后移植物行HE染色和免疫组化染色观察新生组织
情况。结果SCAP在体外经成骨诱导3周及普通培养基培养60 d后,茜素红染色阳性,且表达成骨细胞标志物ALP、BSP、OC
和DSP。实验组移植物8周后可见牙髓牙本质样结构形成,且紧靠牙本质样结构内侧的细胞DSP阳性表达,而对照组未见任何
硬组织形成。结论SCAP可应用于组织工程,进行牙髓牙本质复合体再生。
     

牙髓牙本质复合体的nNOS阳性神经纤维

目的:研究神经型一氧化氮合酶（nNOS）在牙髓牙本质复合体中的表达,探讨其分布与功能的关系。方法:收集新鲜健康人前磨牙60颗,经固定、脱钙、石蜡包埋、切片,nNOS免疫组织化学染色。结果:在根髓nNOS阳性神经纤维呈粗大束状,向颈部逐渐变细,分支少;在颈部,束状纤维呈放射状至冠髓;在冠髓束状纤维大量分支呈网状,部分围绕于血管,部分止于牙髓基质,部分经成牙本质细胞层进入前期牙本质和成熟牙本质近髓1/3牙本质小管。结论:nNOS阳性神经纤维存在于人牙髓牙本质复合体中,部分围绕于血管周围,可能与血管功能调节有关,部分止于牙髓基质、前期本质和牙本质小管内,可能与牙内因素和牙外因素引起的感觉有关。     

牙髓牙本质复合体体外培养模型的建立

目的 建立牙髓牙本质复合体体外培养模型.方法 取20～30岁成人新鲜、健康、完整的第三磨牙,纵向将牙齿切成厚约2 mm的片状结构,每片牙片均包含牙釉质、牙本质和牙髓,运用DMEM培养液进行体外培养,隔天换液,连续培养21 d.分别在培养的第7、14、21天,通过光镜和电镜观察,并行免疫组化检测,对模型进行鉴定.结果 光镜和电镜观察显示,成牙本质细胞和牙髓细胞在培养的第7天和第14天时,均保持良好的细胞形态;培养第21天时,部分细胞开始发生变性.免疫组化检测表明,成牙本质细胞牙本质涎磷蛋白表达阳性.结论 该模型能够在体外进行较长时间的培养,为人类牙髓牙本质复合体的体外研究提供了一种新的方法.     

牙髓牙本质复合体体外培养模型的建立

目的建立牙髓牙本质复合体体外培养模型。方法取20~30岁成人新鲜、健康、完整的第三磨牙,纵向将牙齿切成厚约2 mm的片状结构,每片牙片均包含牙釉质、牙本质和牙髓,运用DMEM培养液进行体外培养,隔天换液,连续培养21 d。分别在培养的第7、14、21天,通过光镜和电镜观察,并行免疫组化检测,对模型进行鉴定。结果光镜和电镜观察显示,成牙本质细胞和牙髓细胞在培养的第7天和第14天时,均保持良好的细胞形态;培养第21天时,部分细胞开始发生变性。免疫组化检测表明,成牙本质细胞牙本质涎磷蛋白表达阳性。结论该模型能够在体外进行较长时间的培养,为人类牙髓牙本质复合体的体外研究提供了一种新的方法。     

全冠牙体预备后影响牙髓-牙本质复合体反应因素的研究

目的:观察全冠牙体预备后牙髓牙本质复合体的反应及剩余牙本质厚度和修复时间对牙髓的影响。方法:选择因正畸需要拔除的健康第一前磨牙38颗,根据牙体制备的深度不同分为3组,暂时冠修复后分别于术后1,3,6周后拔除观察牙髓的炎症反应及剩余牙本质厚度。结果:全冠牙体预备后,牙髓组织主要表现为轻、中度的炎症反应。6周左右可见修复性牙本质形成。剩余牙本质厚度影响牙髓的反应,牙本质越厚,牙髓重度炎症的发生率越低(P<0.05)。结论:术后观察时间对牙髓预后的影响是以剩余牙本质的厚度为前提,剩余牙本质小于2mm时,时间与牙髓反应关系密切(P<0.01)。剩余牙本质为2～2.5mm时,时间与牙髓的反应相关(P<0.05)。但剩余牙本质厚度大于2.5mm时,时间与牙髓反应无关。     

组织工程技术应用于牙髓—牙本质再生的研究进展

众所周知,牙髓-牙本质复合体关系密切,牙髓为牙本质提供营养,并能不断形成牙本质,牙本质则将牙髓与外界有害刺激隔离,一旦牙本质的完整性受到破坏,牙髓暴露,常需将牙髓去除,最终可能导致牙丧失.     

大鼠第一腮弓细胞构建组织工程牙本质-牙髓复合体样结构

目的 观察胚胎12.5 d(E12.5 d)大鼠第一腮弓上皮及外胚间充质细胞离散后肾被膜下移植的成牙能力.方法 切取E12.5 d大鼠第一腮弓(下颌突),酶消化离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,4周后收获移植物,对移植物进行组织学观察和免疫组化抗牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)检测.结果 种植4周,植入细胞在肾被膜下形成牙本质-牙髓复合体样结构.DSP在新生的牙本质组织中呈阳性表达.Masson三色法显示绿色矿化基质形成.结论 E12.5 d大鼠第一腮弓细胞部分保留了牙齿自然发育的遗传信号,在肾被膜下可以构建形成牙本质-牙髓复合体样结构.     

人牙髓细胞向成牙本质细胞诱导分化中细胞周期变化

目的 建立成牙本质细胞样细胞体外培养体系,观察体外培养的牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中细胞周期的变化.方法 利用组织块酶解法培养人牙髓细胞并进行鉴定,使用矿化诱导液诱导其向成牙本质细胞样细胞分化.对细胞增殖情况使用流式细胞仪进行细胞周期测定.结果 ①获得的牙髓细胞均为波形丝蛋白阳性,角蛋白阴性,证明为中胚层来源的细胞.②诱导分化的牙髓细胞在2周左右进入复层生长期;3周左右开始有细胞结节形成,周围细胞呈放射状排列,部分细胞出现细长突起并呈极性排列;4周左右细胞团中央Von Kossa染色为阳性.③在诱导开始后1周,细胞处于活跃的增殖期,以后细胞增殖变慢,3周后多数细胞处于G0G1期.结论 实验成功建立了成牙本质细胞样细胞体外培养体系,所获得的成牙本质细胞样细胞具有成牙本质细胞的部分形态和生物学功能,诱导分化后细胞增殖变慢,是研究成牙本质细胞的较好模型.     

人体皮肤微血管年龄变化的图象分析

本文以32例正常人体颈部皮肤的活检标本,通过计算机图象分析的方法及统计学处理,证明皮肤微血管随年龄增长而明显减少。比较明显的减少发生于20岁以后。并且观察到这种变化与皮肤的衰老有密切的联系。     

Evaluation on Changes of Testicular Histology in Aging Men

Objective To evaluate the changes of testicular histology in aging men. Methods Testicular tissues were obtained by orchiectomy from 40 aging men （75.9±3.8 years） with advanced prostate cancers （aging group）. Control group comprised 20 testicular tissue samples obtained by biopsy from young men with obstructive azoospermia （33.7 ± 4.9 years） who underwent assisted reproductive treatment. Hematoxylin and eosin were used to stain the sections for observation of histology. Changes of seminiferous tubules and interstitial compartment were observed. Results In aging group, vacuolation of seminiferous epithelium was a common phenomenon and the incidence was 85%. Ten samples had moderate spermatogenesis. Thirty cases showed hypospermatogenesis or germ cell arrest, even absence of spermatogenesis. In samples with germ cell arrest, seminiferous epithelia had only the layer of spermatogonia. Twenty-three cases had the heterogeneity of spermatogenesis. In interstitial compartment, pathological changes included loose connection and Leydig cells aggregations and reduce. In the control, most samples demonstrated a normal spermatogenesis. Conclusion Pathological changes occurred in aging testis were associated with degenerative alterations on both the seminiferous epithelium and the interstitial compartment, which contribute to lowering testis functions.     

乙肝病毒表面蛋白及其抗体复合物对人精子功能的影响

目的：研究乙肝表面蛋白（HBs）与其单克隆抗体（MAb）复合物对人精子功能的影响,探讨乙肝病毒（HBV）损害人精子的可能机制。方法：对HBs-HBsMAb孵育后的精子活力进行分析,采用JC-1染料结合流式细胞术监测人精子线粒体膜电位（MMP）。结果：人精子在体外与25μg/mL的HBs和不同浓度（20、40、80μg/mL）HBsMAb共孵育后,活力好的精子百分比例显著下降（P〈0.01）,MMP也下降。结论：HBV可能通过HBs-HBsMAb对人精子功能产生负面影响。     

慢性鼻窦炎CT扫描下鼻道窦口复合体的结构分析及临床意义

目的 探讨对慢性鼻窦炎在CT影像中表现出的鼻道窦口复合体解剖结构变异情况,分析慢性鼻窦炎发病的解剖基础及给临床医师在手术中提供必要的解剖依据.方法 选择近期162例慢性鼻窦炎患者的CT冠状位扫描,观察中鼻道及窦口复合体解剖变异的CT表现.结果 162例（324侧）副鼻窦CT影像中,出现鼻道窦口复合体的变异共有219侧.其中主要包括中鼻甲气化,眶下气房（Haller＇s气房）,筛大泡,鼻丘过度气化,钩突肥大和偏移（内移、外移）.各种解剖变异类型在总变异中出现的几率分别为：中鼻甲气化32％,Haller气房6％,筛泡气化变异28％,钩突变异48％,鼻丘过度气化1％.鼻道窦口复合体的解剖变异总出现率为67.59％.结论 在鼻窦炎的CT扫描中中鼻道和鼻道窦口复合体区域解剖变异较常见,CT可以给鼻窦炎患者提供部分解剖学基础,并对鼻窦内窥镜手术有肯定的指导价值,并可预防手术并发症,给鼻内镜手术提供有效的帮助.     

蛋白激酶C在人子宫平滑肌正常细胞与肌瘤细胞中活性变化的研究

目的：通过比较人子宫平滑肌细胞（human myometrium cell,HMC)及其肌瘤细胞（human myometrium myona cell,HMMC)的细胞浆和细胞膜中蛋白激酶C（protein kinaseC,PKC)活性的异同,探讨PKC在肿瘤发生中的作用。方法：同位素放射结合实验TAKAI法。结果：基础状态下,HMC胞膜PKC比活性高于胞浆PKC比活性;HMMC胞膜PKC比活性高于胞浆PKC比活性;且HMMC的PKC总活性高HMC,乙酰胆碱（acetylcholine,Ach)可使HMC及HMMC的胞膜PKC比活性升高、胞浆PKC比活性轻度下降、总活必增加;佛波酯（TPA）则可使二者的胞膜PKC比活性升高、胞浆PKC比活性升胞浆PKC比活性下降、总活性基本不变;阿托品（atropin,Atr)使Ach升高的PKC总活性降低;1-（5-异喹啉磺酰基）-2-甲基哌嗪（H7）抑制TPA对PKC活性的诱导,结论：HMMC胞浆、胞膜和总的PKC活性均高于HMC,提示PKC在肿瘤发生中起作用;PKC对激动剂反应性不同,提示对PKC活化机制不同。     

羊房室结覆盖层的组织学观察和定量分析

目的　了解羊房室结覆盖层的形态学特点及细胞成分 ,为探讨房室传导机理和心血管实验提供形态学参考。方法　石蜡切片 ,HE染色 ,光镜观察 2 3只正常杂种山羊房室结的覆盖层 ,并用HPIAS -10 0 0高清晰度彩色图文分析系统定量分析。结果　羊房室结有典型的覆盖层 ,青年羊组覆盖层平均厚度为 0 .2 8± 0 .13mm ;老年羊组平均厚度为 0 .5 1± 0 .2 3mm ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。图象分析结果显示覆盖层细胞与一般心肌细胞的多项参数有显著差异。结论　羊房室结有典型的覆盖层 ,其厚度随年龄增长而增加 ,其细胞属移行细胞。     

急性心肌梗死患者血浆TAT变化的价值

目的观察急性心肌梗死(AMI)患者溶栓治疗前后血浆凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)的变化。方法AMI患者34例,对照33例,采用双抗体夹心法检测血浆TAT;对其中6例患者溶栓前、溶栓后6 h及对12 h的血浆TAT进行动态观察,与对照组进行比较。结果AMI组TAT[(13.10±6.70)μg/l]较对照组[(6.96±3.60)μg/l]显著升高(P<0.01);6例溶栓治疗的患者;溶栓6 h后,TAT[(15.10±7.60)μg/l]较治疗前显著升高(P<0.05)。结论TAT是AMI早期诊断、治疗及预后判断的良好指标之一。     

兔心脏胶原纤维的组织学构筑及定量分析

目的　探讨兔心脏各个部位胶原纤维的分布规律及其含量。方法　用石蜡切片 ,VanGieson和Masson染色 ,光镜观察 5例成年杂种兔左右心房、左右心室、室间隔及左乳头肌的胶原纤维网络构筑 ,并用计算机图像处理系统定量分析。结果　胶原纤维广泛分布于心脏各个部位 ,形态构筑大体相似。在纵切面上 ,呈粗细不等的胶原纤维束 ,与肌细胞走向平行 ;横切面上 ,心肌细胞周围有较细的胶原纤维膜 ,彼此连接成蜂窝状。各个部位之间胶原纤维面积的含量无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　在心肌细胞之间胶原纤维互相编织 ,构成一个多层次、多方位复杂的三维空间网络 ,心肌细胞被固定并活动在这个网络中。胶原纤维的改变 ,可能会影响心肌的功能     

人胎十二指肠EC细胞的体视学研究

用免疫组化法显示人胎十二指肠 EC 细胞,用单网格测试系统进行体视学测量,分别测算出以上皮组织为包容空间的体积密度(Vv C,E)和以肠组织为包容空间的体积密度(Vv C,T)并与以往的计数方法进行比较分析。结果表明,Vv C,E 值随胎龄而增加,而 Vv C,T 值呈峰形变化。结果还显示,计算单位长度上皮内的阳性细胞数的普通计数法可以反映肠内分泌细胞与上皮组织的对应关系,Vv C,T 值能够综合而准确地反映 EC 细胞与肠组织的对应关系。