Fas系统与肿瘤免疫逃逸

肿瘤通过多种机制逃避免疫系统的监视,Fas与FasL也参与了这一过程。本将主要阐述Fas与FasL在肿瘤发生中的可能机制。     

Fas系统与肿瘤免疫逃逸

肿瘤通过多种机制逃避免疫系统的监视,Fas与FasL也参与了这一过程.本文将主要阐述Fas与FasL在肿瘤发生中的可能机制.     

通过FasL通路阻抑肿瘤免疫逃逸的研究

许多白血病和实体瘤细胞通过高表达Fas配体 (FasL)而发生肿瘤的免疫逃逸。为了观察腺病毒载体向肿瘤细胞导入小鼠可溶性Fas(sFas)基因后能否阻抑肿瘤细胞通过FasL发生肿瘤免疫逃逸作用 ,采用AdEasy腺病毒载体系统 ,利用大肠杆菌内质粒间同源重组的方法分别构建携带小鼠sFas基因及增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的重组腺病毒载体 ,扩增纯化后利用空斑试验测定滴度 ,Westernblot检测蛋白的表达。然后 ,分别感染肿瘤细胞 EL4细胞 ,用氚胸腺嘧啶核苷 ( 3 H thymidine,3 H TdR)掺入法检测其诱导靶细胞YAC 1的凋亡率。结果表明 ,获得了重组成功的复制缺陷的腺病毒载体AdsFas和AdEGFP ,密度梯度离心纯化后其滴度达到 10 11pfu/ml,Westernblot分析证实前者能够高效表达出sFas蛋白。转染肿瘤细胞EL4细胞之后与YAC 1细胞混合培养 ,导入sFas组的YAC 1凋亡率在效靶比 (E∶T)为 3∶1,10∶1和 30∶1时分别为 6 %、7%和 9% ,与对照组 (分别为 2 8%、37%和4 5 % )相比明显下降 ,统计学有显著性差异 (P <0 .0 1) ;而导入EGFP组YAC 1凋亡率 (分别为 30 %、36 %和 4 8% )与对照组相似 ,没有统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :腺病毒介导sFas的导入能够明显抑制肿瘤细胞EL4诱导Fas+细胞 YAC 1的凋亡 ,说明通过腺病毒转移sFas基因     

阻抑骨髓移植受者白血病细胞免疫逃逸的实验研究

目的　了解转染小鼠可溶性Fas(sFas)基因后的骨髓移植 (BMT)能否阻抑白血病细胞的免疫逃逸 ,从而消灭残留白血病细胞、减少白血病复发。方法　经尾静脉向雌性C57BL 6小鼠体内植入EL4细胞 1 0 5个 只 ,建立移植性小鼠T细胞白血病 淋巴瘤模型。用转染sFas基因的腺病毒 (Ads Fas)感染 2 4h的雄性C57BL 6小鼠 (H 2 b)骨髓单个核细胞 ,对60 Co致死量照射的雌性同系小鼠进行BMT(D组 ) ,同时设立 :空白对照组 (A组 ,无骨髓细胞植入 )、常规BMT组 (B组 ,骨髓细胞未感染病毒 )、白血病组 (C组 ,仅输入EL4细胞 ,不进行照射和BMT)和绿色荧光蛋白 (EGFP)移植组 (E组 ,骨髓细胞感染AdEGFP)。观察各组造血重建情况、白血病 淋巴瘤的发生及小鼠生存率。结果　BMT后 1 0天脾指数检查 ,B、D、E三组之间差异无显著性 (P >0 .0 5) ,各组与A组间差异有显著性 (P <0 .0 1 )。移植后 30天外周血检查 ,B和D组恢复正常 ,C和E组白细胞和血小板均低下。 2个月后嵌合体检查存在Y染色体 ,骨髓细胞学检查B、D两组基本正常 ,C、E两组存在大量的瘤细胞。C组与E组死亡小鼠组织病理学显示脾脏等部位存在瘤细胞 ,而存活的B和D组小鼠基本正常。生存率 :A组全部死亡 ,B组 (6只 )和D组 (1 6只 )全部存活 ,C组存活 2只 (1 2 .5 % ) ,E组存活     

STAT3与肿瘤免疫逃逸的研究进展

信号转导子与转录激活子3（STAT3）是一种存在于细胞质内的双功能蛋白,可以被多种酪氨酸激酶激活,激活后发生磷酸化,形成二聚体转入细胞核内,调节细胞生长、分化、凋亡相关基因的表达,是多条致癌通路的汇集点,在大多数肿瘤细胞内呈持续性激活,在肿瘤的发生、发展、转移中起了重要作用。近几年的研究表明,STAT3能在很多环节参与调节肿瘤的免疫逃逸,可能是肿瘤免疫治疗的一个重要靶点。     

慢性乙型肝炎患者体内病毒免疫逃逸机制的研究进展

慢性乙型肝炎患肯体内免疫功能的紊乱与病毒长期携带状态密切相关，但到目前为止，对于HBV感染的慢性无症状携带者和慢性乙型肝炎患者的免疫治疗并不尽人意。现对近年来慢性乙型肝炎患者体内病毒免疫逃逸机制的研究新进展作一介绍。     

慢性乙型肝炎患者体内病毒免疫逃逸机制的研究进展

慢性乙型肝炎患者体内免疫功能的紊乱与病毒长期携带状态密切相关 ,但到目前为止 ,对于HBV感染的慢性无症状携带者和慢性乙型肝炎患者的免疫治疗并不尽人意。现对近年来慢性乙型肝炎患者体内病毒免疫逃逸机制的研究新进展作一介绍     

TGF-β2/Smad2在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的 研究转化生长因子β(TGF-β)信号传导通路中TGF-β2/Smad2在人脑胶质瘤组织中的表达和意义.方法 收集人脑胶质瘤组织样本59例,免疫组织化学法检测TGF-β2、Smad2、磷酸化Smad2(P-Smad2)及Ki-67蛋白在其中表达情况,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其中Smad2 mRNA的表达.结果 TGF-β2、Smad2、P-Smad2及Ki67蛋白与人脑胶质瘤病理级别呈正相关(P<0.01),各级别均数比较差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β2、Smad2、P-Smad2蛋白表达之间亦呈正相关(P<0.01);TGF-β2、Smad2及P-Smad2蛋白表达均与增殖指标Ki-67蛋白表达呈正相关(P<0.01).Smad2 mRNA表达与Smad2和P-Smad2蛋白表达呈正相关(P<0.05).结论 TGF-β2/Smad2蛋白表达随肿瘤病理级别增高表达增强,与胶质瘤的恶性进展有关.     

细胞红蛋白在脑胶质瘤的表达和临床意义

目的：探讨细胞红蛋白（Cygb）在不同级别脑胶质瘤的表达及其在预后判断等方面的意义。方法采用免疫组织化学方法检测88例脑胶质瘤组织标本（WHOⅠ级10例,Ⅱ级37例,Ⅲ级26例,Ⅳ级15例）Cygb的表达情况,并分析其与临床病理、肿瘤复发和预后的关系。结果在低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）中Cygb呈高表达,在高级别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）中Cygb呈低表达。Kruskal-Wallis test分析Cygb的表达程度与胶质瘤的病理级别呈高度负相关（P＜0.01）;Mann-Whitney U test分析Cygb与胶质瘤术后是否复发也呈高度负相关（P＜0.01）。Cygb低表达组患者的生存率低于Cygb高表达组。Cox回归分析Cygb低表达为脑胶质瘤高风险因素之一。结论 Cygb的表达水平能作为判断脑胶质瘤恶性程度的另一个指标, Cygb的表达水平还可以作为判断脑胶质瘤患者的预后和是否复发指标之一。     

脑神经胶质瘤的研究进展

脑神经胶质瘤是由大脑胶质细胞癌变所产生的、最常见的原发性颅内肿瘤。年发病率约为3～8人／10万人口。目前脑神经胶质瘤的治疗主要是手术疗法配合放射治疗、化学治疗,但生存率极低,在传统的治疗方法外,还有免疫学疗法和疫苗等诸多新兴治疗方法,所以脑神经胶质瘤已经成为神经科学与肿瘤学的研究交叉热点,本文就脑神经胶质瘤的分类学,分子发病机制,多种治疗方法及效果进行综述。     

神经干细胞在基因治疗胶质瘤中的研究进展

神经干细胞是近几年的研究热点之一,其作为基因治疗的载体更是引起了广泛的关注和深刻研究。本文就神经干细胞在基因治疗胶质瘤方面的优点、缺点,研究现状和发展方向做一综述。     

脑胶质瘤患者血清中肝细胞生长因子定量测定的临床意义

目的检测脑胶质瘤患者血清肝细胞生长因子（HGF）水平,分析血清HGF水平与胶质瘤恶性程度、手术、放射治疗及化学治疗的关系。方法32例脑胶质瘤患者按病理分级标准分为高级别组和低级别组。以20例健康人作为对照组,采用ELISA法检测患者外周血中的HGF水平,比较正常人及胶质瘤患者手术前后、放射治疗和化学治疗前后血清HGF水平。结果高级别组脑胶质瘤患者血清中HGF水平显著高于低级别组HGF水平（P〈0．01）,且高级别组和低级别组均显著高于正常人（P〈0．01、P=0．000446）;脑胶质瘤患者手术、放射治疗及化学治疗后血清HGF水平显著下降。结论脑胶质瘤患者血清HGF浓度水平可以反映肿瘤恶性程度及治疗预后。     

肿瘤免疫逃逸与肿瘤免疫治疗的思考

机体抗肿瘤的免疫效应与肿瘤逃避免疫系统的攻击之间形成一对此消彼长的矛盾关系。近年来,人们针对肿瘤免疫逃逸的机制,致力于研究多种免疫治疗方案,以提高肿瘤的免疫原性,激发机体的特异性和非特异性免疫应答,促进肿瘤的消亡。癌基因的不断发现和深入研究、各种细胞因子和免疫刺激分子功能的不断拓展和深化,都为肿瘤的免疫治疗提供了强有力的理论基础。     

人脑胶质瘤相关基因的研究进展

胶质瘤的发生与发展是一个多因素多步骤的复杂过程,包括癌基因的启动,扩增或过度表达以及抑癌基因的突变和缺失。近几年来研究发现了一些对胶质瘤发生发展较为重要的相关基因,包括IMP3、ATX、EMP1、IDH1、Micro-RNA7、PTEN、TIP30、p53等。对这些基因的研究和深入探讨在胶质瘤的防治方面具有重要意义。     

明胶酶在脑胶质瘤大鼠中的活性

目的：通过观察脑胶质瘤大鼠动物模型中明胶酶的活性变化，为以明胶酶为靶点的脑胶质瘤治疗奠定实验基础。方法：实验于2004-10／2005-12在解放军军事医学科学院野战输血研究所干细胞生物学研究室完成。9L大鼠胶质瘤细胞购自广州南方医科大学。①选取清洁级健康成年雄性Fisher344大鼠27只，24只建立大鼠脑胶质瘤模型，造模后随机数字表法分为建模后7，14，21，28d组，6只／组，每组3只用于灌注固定做免疫组化分析，另3只用于反转录多聚酶链反应和明胶酶谱分析。剩余3只大鼠作为正常对照。②采用反转录多聚酶链反应技术、免疫组织化学和明胶酶谱等方法检测胶质瘤中明胶酶2（matrix metalloproteinase 2，MMP-2）和明胶酶9（matrix metalloproteinase 2，MMP-9）的活性变化。结果：实验选取清洁级健康成年雄性Fisher344大鼠27只，全部进入结果分析。①MMP-2和MMP-9mRNA的表达：9L胶质瘤细胞中均可见MMP-2和MMP-9mRNA的表达，MMP-2的表达量高于MMP-9；大鼠脑胶质瘤组织中可见两者mRNA的表达，而正常脑组织MMP-2mRNA低表达，检测不到MMP-9mRNA的表达；随着肿瘤的生长，MMP-9mRNA的表达量增高。②MMP-2和MMP-9免疫组织化学观察结果：9L胶质瘤细胞的免疫组化显示，MMP-2和MMP-9均呈现阳性染色，主要为胞浆和胞膜染色；肿瘤组织MMP-2和MMP-9染色阳性，为胞浆染色，在血管内皮和肿瘤侵袭边缘细胞胞阳性染色明显。随脑胶质瘤的生长，MMP-2和MMP-9染色程度加深。③MMP-2和MMP-9酶活性检测结果：9L细胞无血清培养上清中可见Pro—MMP2（Mr72000）与Pro—MMP9（Mr92000）及其活化形式activeMMP-2（Mr 66000）与activeMMP-9（Mr83000）的表达，MMP-2的表达量较高；MMP-2酶原与活化的MMP-2在脑胶质瘤组织中明显表达，而在正常脑组织低表达。MMP-9酶原与活化的MMP-9在脑肿瘤组织中表达，正常脑组织中未检测到其表达。④MMP-2和MMP-9在肿瘤组织中的定位情况：脑胶质瘤组织冰冻切片原位明胶酶谱结果显示，肿瘤组织因表达活性的明胶酶降解载片上的明胶，致使不被染色，肿瘤部位很透亮。对侧脑组织因不表达明胶酶，不能降解明胶，被染黑。结论：脑胶质瘤模型中表达高活性的MMP-2和MMP-9，且与胶质瘤生长速度密切相关。     

HLA—G与肿瘤免疫逃逸

HLA—G分子是一种非经典HLA—Ⅰ类抗原．相对于经典的Ⅰ类抗原．它的组织分布非常局限，多态性有限。生理情况下HLA—G主要表达于绒毛膜外层细胞（滋养层细胞），在胎儿逃避母体免疫攻击的机制中发挥着至关重要的作用。研究表明，一些肿瘤可表达HLA—G，可能通过抑制NK细胞、T细胞的功能等机制。在肿瘤免疫逃逸中占有重要的地位。HLA—G在肿瘤免疫中所扮演的角色及其与T细胞、Th1/Th2漂移、细胞因子等之间的相关性已成为肿瘤免疫研究的热点。     

抗Fas锤头状核酶阻抑小鼠急性粒-单核白血病细胞免疫逃逸的研究

为了研究抗Fas锤头状核酶对T细胞Fas表达及其凋亡的影响和探讨增强供者淋巴细胞输注时移植物抗白血病（GVL）效应的新策略，构建可有效切割Fas mRNA的锤头状核酶真核质粒，用电穿孔法将其导入小鼠CTL细胞株CTLL-2之后，借助RT—PCR和Western blot检测其Fas的表达，同时检测转染前后其胱冬酶-3（Caspase-3）活性和凋亡（Annexin V—FITC法）的改变，并用MTT法检测空白对照组、空载体转染组及pU6-RZ596转染组CTLL-2细胞的增殖情况和体外杀伤小鼠急性粒-单核白血病细胞（WEHI-3）的活性。结果表明：构建的U6嵌合型锤头状核酶RZ596在细胞内能有效切割Fas，明显降低小鼠活化CTLL-2的Fas水平，与高表达Fas配体的WEHI-3孵育后，其存活率和体外杀伤WEHI-3活性明显高于对照组。结论：抗Fas核酶能显著降低小鼠活化CTLL-2的Fas表达，使其免于WEHI-3的膜Fas配体经Fas途径所致的凋亡，并提高CTL对小鼠急性粒-单核白血病细胞的杀伤力，从而阻抑小鼠急性粒-单核白血病细胞的免疫逃逸。     

胰岛素样生长因子Ⅰ和胸苷激酶1与脑胶质瘤的相关性分析

目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）和胸苷激酶1(TK-1)与脑胶质瘤的相关性。方法 选取2012年8月-2020年8月于都江堰市人民医院行手术治疗的脑胶质瘤患者120例作为研究对象,根据胶质瘤级别分为低级组（n=53）、高级组（n=67）,另选取行颅脑手术的良性脑膜瘤患者39例作为对照组,比较各组手术前后血清IGF-Ⅰ、TK-1水平变化情况。计算血清IGF-Ⅰ、TK-1诊断脑胶质瘤的敏感度和特异度,Pearson法分析血清IGF-Ⅰ、TK-1水平与脑胶质瘤等级的相关性。结果 手术前,胶质瘤组血清IGF-Ⅰ、TK-1水平均显著高于对照组（P<0.05）。且术前高级组脑胶质瘤患者血清IGF-Ⅰ、TK-1均显著高于低级组。IGF-Ⅰ、TK-1联合检测时灵敏度最高、约登指数最大。血清IGF-Ⅰ及TK-1表达水平与脑胶质瘤级别呈正相关（r=0.725,0.663,P<0.05）。结论 脑胶质瘤患者血清IGF-Ⅰ、TK-1均显著高于脑膜瘤患者,二者与胶质瘤分级具有较好相关性,行颅脑手术后二者水平均出现降低,术前血清IGF-Ⅰ、TK-1两者联合可以准确预测脑胶质瘤分级。