端粒酶抑制剂联合放疗对小鼠胃癌的作用研究

目的　探讨端粒酶抑制剂对动物在体肿瘤的治疗作用及端粒酶抑制剂对放射治疗的增敏价值。方法　将SGC 790 1胃癌细胞接种BALB/c小鼠 ,采用端粒酶抑制剂AZT联合放射治疗小鼠胃癌 ,观察其对肿瘤体积和肿瘤端粒酶活性的影响。结果　未治疗组小鼠肿瘤体积增加了 3.3倍 ,而AZT、放疗及AZT联合放疗组肿瘤体积分别缩小了 2 3.7%、4 8.8%及 86 .9%。肿瘤端粒酶活性检测 ,未治疗组、AZT、放疗及AZT联合放疗组的相对端粒酶活性分别为 10 0 ,5 2 .6 ,2 3.3及 10 .4。结论　AZT、放疗均能使肿瘤体积缩小并降低端粒酶活性 ,且AZT能增加肿瘤的放射敏感性。     

放疗联合端粒酶抑制剂对小鼠淋巴瘤的作用研究

目的：观察放射治疗联合端粒酶抑制剂（AZT）对小鼠淋巴瘤的治疗效果。方法：采用小鼠为实验动物，复制小鼠淋巴瘤实验模型，随机分为未治疗组单纯放疗组、单纯AZT组和放疗加AZT组，观察各组的治疗效果。结果：动物实验表明，放疗加AZT对小鼠淋巴瘤的治疗作用优于单纯放疗或者单纯AZT治疗。其对端粒酶的作用也最强。结论：放疗和AZT联合应用对肿瘤体积的缩小和端粒酶活性的下降均有相加作用，提示AZT有放射增敏作用。     

端粒酶抑制剂联合放射治疗对小鼠乳腺癌作用的实验研究

目的：探讨端粒酶抑制剂对动物在体肿瘤的治疗价值及端粒酶抑制剂是否增加放射治疗的疗效。方法：采用正交实验设计,应用端粒酶抑制剂 [齐多夫啶 (azidothymidine, AZT)： 300 mg· kg－ 1· d－ 1;拉米夫啶 (lamivudine)： 150 mg· kg－ 1· d－ 1]联合放射 (每周照射 5次,每次 DT 2 Gy,总量 10 Gy/周 )治疗 BALB/c小鼠移植性乳腺癌 (MA782),观察其对肿瘤体积缩小和肿瘤内端粒酶表达的影响。肿瘤体积用游标电子数显卡尺测量计算,并采用 PCR ELISA方法检测端粒酶活性。结果：本研究结果表明,未治疗、单用 lamivudine治疗的小鼠肿瘤体积分别增大 2.7268、 2.5130倍,表明单纯使用 lamivudine作用不明显 (P >0.05);而经 AZT、放疗、 AZT加放疗治疗的小鼠肿瘤体积分别缩小 20.72％、 47.43％、 85.19％,提示 AZT、放疗均能使肿瘤体积缩小 (P< 0.05),并且 AZT与放疗的联合作用明显优于两者的单独作用 (P< 0.05)。而肿瘤端粒酶活性检测表明,未处理,以及经 AZT、 lamivudine、放疗、 AZT加放疗、 AZT加 lamivudine加放疗处理的肿瘤端粒酶 A值分别为 0.817、 0.453、 0.760、 0.480、 0.340、 0.166,显示 AZT、放疗、 lamivudine均有减少肿瘤端粒酶活性的作用 ( P< 0.05),且 AZT与放疗有相加作     

放疗联合端粒酶抑制剂对小鼠淋巴瘤的作用研究

目的　观察放射治疗联合端粒酶抑制剂 (AZT)对小鼠淋巴瘤的治疗效果。方法　采用小鼠为实验动物 ,复制小鼠淋巴瘤实验模型 ,随机分为未治疗组单纯放疗组、单纯AZT组和放疗加AZT组 ,观察各组的治疗效果。结果　动物实验表明 ,放疗加AZT对小鼠淋巴瘤的治疗作用优于单纯放疗或者单纯AZT治疗。其对端粒酶的作用也最强。结论　放疗和AZT联合应用对肿瘤体积的缩小和端粒酶活性的下降均有相加作用 ,提示AZT有放射增敏作用     

端粒酶抑制剂与丝裂霉素联合应用对膀胱癌的作用研究

 目的 探讨端粒酶抑制剂与化疗药物联合应用对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法 应用端粒酶抑制剂齐夫多啶（AZT）联合化疗药物丝裂霉素（MMC）治疗小鼠移植性膀胱癌（T24），观察其对抑瘤率、肿瘤端粒酶的表达及肿瘤细胞凋亡的影响。结果 AZT、MMC、MMC＋AZT抑瘤率分别为12．1％、29．6％和43．6％，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数分别为（20．23±0．89）％、（8．04±0．12）％和（24．09±1．81）％。肿瘤端粒酶活性检测显示各组端粒酶阳性率分别为36．5％、43．6％和11．8％，与对照组比较，AZT、MMC均有减少肿瘤端粒酶活性的作用（P〈0．05）。AZT与MMC联用明显优于两者单独应用（P〈0．05）。结论 MMC及AZT均能抑制小鼠膀胱癌T24细胞的生长及降低其端粒酶活性、诱导细胞凋亡，二者联用有相加作用。     

顺铂和放疗联合应用在人喉鳞癌细胞中相互作用的研究

 目的 研究CDDP和放疗联合应用于人喉鳞状细胞癌细胞的相互作用，以探讨放、化疗两种处理方式应用的顺序及与端粒酶活性的关系。方法 Hep-2细胞分别经放化疗不同剂量及顺序处理．实验设对照组、CDDP组、放疗组、CDDP+放疗组及放疗+CDDP组，分别用MTT法、端粒酶活性检测PCR-ELISA法及聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法分析各种处理后的细胞存活率及端粒酶活性的变化。结果 CDDP+放疗组比同等处理剂量的放疗+CDDP组的细胞存活率低。且有显著差异。CDDP及放疗均能使端粒酶活性明显增高，并表明为浓度依赖性。但在加入另一种处理后，端粒酶活性降低，其降低的程度与细胞存活率的变化一致(r=0.9445，b=13．61)。结论 对Hep-2细胞先化疗后放疗的治疗效果优于先放疗后化疗，联合治疗后的端粒酶活性可反映治疗效果。     

端粒酶抑制剂叠氮胸苷对HeLa细胞放射性DNA损伤修复的影响

背景与目的:研究端粒酶抑制剂叠氮胸苷(Azidothymidine,AZT)对人宫颈癌HeLa细胞DNA放射性损伤修复的影响,探讨端粒酶在放射诱导的DNA损伤修复中的作用.材料与方法:实验分为空白组,AZT组(400 μmol/L AZT处理HeLa细胞24 h),放射组(2 Gy 60Co γ射线照射),AZT放疗组(400 μmol/L AZT处理HeLa细胞24 h后,用2 Gy 60Co γ射线照射).照射后于0、5、10、30、60、180及360 min分别收集细胞,用端粒重复序列扩增法(PCR-based telomeric repeat amplification protocol,TRAP)-联合酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)即TRAP-ELISA法检测端粒酶的活性.用单细胞凝胶电泳法检测DNA单链断裂损伤,以彗尾DNA百分含量表示DNA单链断损伤量.结果:HeLa细胞受2 Gy 60Co γ射线照射后10 min,端粒酶活性即开始增加,60 min后增加明显,360 min时达到最高.AZT处理HeLa细胞后,能使端粒酶活性下降约50%,而且能抑制HeLa细胞照射后端粒酶活性的增加(P＜0.05).单细胞凝胶电泳实验表明,2 Gy 60Co γ射线照射HeLa细胞后0～10 min,AZT放疗组与放射组的彗尾DNA百分含量无明显差异(P＞0.05),照后30～360 min AZT放疗组彗尾DNA百分含量均高于放射组(P均＜0.05).结论:AZT能阻抑照射后30～360 min DNA单链断裂的修复,说明端粒酶可能在放射性DNA损伤修复中具有重要作用.     

放疗联合周剂量重组人血管内皮抑素对A549肺腺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用的研究

目的:研究放疗联合周剂量重组人血管内皮抑素(recombinant human endostatin, rh-Endostatin)对肺腺癌A549裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法: 40 只裸鼠A549细胞移植瘤模型随机分成4组:空白对照组、rh-Endostatin治疗组、放射治疗组和放疗联合rh-Endostatin治疗组,观察并绘制肿瘤生长曲线图,计算肿瘤体积抑制率;肿瘤组织行常规HE病理学检查,免疫组织化学法检测肿瘤组织中微血管内皮CD31的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)的变化;采用免疫组织化学及Western印迹法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的表达;TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡. 结果:治疗第8天起,放疗联合rh-Endostatin治疗组的肿瘤体积与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).15 d后,rh-Endostatin治疗组、放射治疗组和放疗联合rh-Endostatin治疗组小鼠的肿瘤体积的抑制率依次为68.35%、90.78%和106.56%; rh-Endostatin治疗组小鼠的MVD较放射治疗组下降明显(P＜0.05);但rh-Endostatin治疗组与对照组、放疗联合rh-Endostati治疗组及放射治疗组相比,VEGF的改变差异均无统计学意义;放疗联合rh-Endostatin治疗组细胞凋亡明显.结论:放疗联合周剂量rh-Endostatin能抑制肿瘤的生长,较早诱导肿瘤退缩,可能与减少放射治疗后肿瘤血管再生及增加肿瘤细胞和内皮细胞的凋亡相关;各治疗组小鼠均未出现急性不良反应,因此该方法具有短疗程的优势,可用于临床推广.     

hTR反义PS-ODN联合顺铂对人胃癌裸鼠皮下移植瘤作用的体内研究

目的 探讨hTR反义寡脱氧核苷酸（ASODN）联合顺铂对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法 30只裸鼠建立胃癌皮下移植瘤模型后，随机分成5组，予以不同条件处理，对照组（瘤周注射RPMI1640培养液）、ASODN组（瘤周注射反义寡脱氧核苷酸）、RODN组（瘤周注射随机寡脱氧核苷酸）、DDP组（瘤周注射化疗药物顺铂）、ASODN＋DDP组（瘤周注射反义寡脱氧核苷酸和顺铂）。治疗后定期观察肿瘤体积，计算肿瘤抑制率。采用TRAPPCR—ELISA法检测移植瘤的端粒酶活性。结果 ASODN＋DDP组、ASODN组、DDP组和RODN组的最高肿瘤抑制率分别为94.2％、84．3％，92．8％和26．9％。在端粒酶活性检测中，4个治疗组间均有统计学意义。结论 hTR反义PSODN对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长及端粒酶活性有一定抑制作用，且可增强DDP的上述作用。     

Simultaneous targeting of telomeres and telomerase as a cancer therapeutic approach

Telomeres, which are important for maintaining chromosome integrity and functions, shorten with each cell division. Telomerase, responsible for telomere synthesis, is expressed in approximately 90% of human tumor cells but seldom in normal somatic cells. This study evaluated the hypothesis that simultaneous shortening of telomeres and inhibition of telomerase results in synergistic and tumor-selective cytotoxicity. In telomerase-positive human pharynx FaDu tumor cells, paclitaxel caused telomere erosion (first detected at 1 h) and apoptosis. Expression of antisense to the RNA component of human telomerase (hTR) inhibited telomerase activity, shortened telomere length, reduced cell growth rate, and resulted in a significant higher sensitivity to paclitaxel. Another telomerase inhibitor, 3'-azido-3'-deoxythymidine (AZT), at a concentration that produced little or no cell detachment or apoptosis, inhibited the telomerase activity and enhanced the paclitaxel-induced cell detachment and apoptosis. AZT also enhanced the activity of paclitaxel in mice bearing well-established s.c. FaDu xenograft tumors (i.e., reduced residual tumor size, enhanced apoptotic cell fraction, and prolonged survival time), without enhancing host toxicity. In contrast, AZT did not enhance the paclitaxel activity in the telomerase-negative osteosarcoma Saos-2 cells nor in FaDu cells where telomerase was already suppressed by antisense hTR, confirming that the AZT effect in parent FaDu cells is mediated through telomerase inhibition. These results demonstrate that combined use of agents targeting both telomere and telomerase yielded synergistic activity selective for tumors that depend on telomerase for telomere maintenance.     

PPARγ配体吡格列酮联合放射治疗对小鼠结肠癌的实验研究

 目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ配体吡格列酮联合放射治疗对小鼠结肠癌的抑制作用。 方法：小鼠结肠癌细胞CT26接种于BALB/c小鼠右侧肋腰部,将小鼠随机分为空白对照组、肿瘤对照组、溶剂（DMSO）对照组、单纯给吡格列酮组、单纯放疗组和放疗+给吡格列酮组,分别观察各组肿瘤生长情况,计算并比较抑瘤率,病理观察肿瘤在光镜下的变化。 结果：放疗后两周小鼠的肿瘤体积比较,吡格列酮组、放疗组、放疗+吡格列酮组与肿瘤对照组比较,对小鼠结肠癌的生长均有抑制作用（p<0.05）,放疗组或放疗+吡格列酮组与吡格列酮组比较,结果均有统计学意义（p<0.05）,放疗组与放疗+吡格列酮组比较,结果无统计学意义（p>0.05）;吡格列酮组、放疗组、放疗+吡格列酮组的抑瘤率分别为46.30%、68.60%和70.01%;肿瘤病理学变化明显。 结论：吡格列酮、放疗以及两者联合使用均能够抑制小鼠结肠癌的生长,PPARγ是肿瘤治疗较好的新靶点。 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ;吡格列酮;放射治疗;小 鼠;结肠癌     

Experimental study of the effect of angiogenesis inhibitor TNP-470 on the growth and metastasis of gastric cancer in vivo

Objective: To study the effect of angiogenesis inhibitor TNP-470 on the growth and metastasis of gastric cancer in vivo. Methods: Metastatic model simulating human gastric cancer was established by orthotopic implantation of histologically intact tumor tissue into gastric wall of nude mice. TNP-470 was administrated S.C. at doses of 0 mg/kg, 15 mg/kg, 30 mg/kg, 60 mg/kg every other day for eight weeks. Ten weeks after implantation, the mice were sacrificed and the tumor size measured and the presence of metastasis recorded. The microvascular density was examined by immunohistochemical staining with anti-human factor VIII antibody. Results: Compared to the untreated controls, growth of the orthotopically implanted tumor was significantly reduced in size in the mice treated with TNP-470 with an inhibition rate of 59.9%, 77.0% and 84.9% at the dosage of 15 mg/kg, 30 mg/kg and 60 mg/kg, respectively. Tumor metastasis to the liver and peritoneum was also significantly inhibited in a dose-dependent manner. The microvascular density was also decreased significantly in the treated mice. Conclusion: Angiogenesis inhibitor TNP-470 has strong inhibitory effect both on tumor growth and metastasis of human gastric cancer in nude mice.     

血管生成抑制剂TNP-470对胃癌生长及转移抑制作用的实验研究

目的研究血管生成抑制剂ＴＮＰ－４７０对胃癌生长及转移的抑制作用。方法完整组织块裸鼠胃壁原位种植,建立类似于临床的胃癌转移模型。移植后第１周开始皮下注射ＴＮＰ－４７０,隔天１次,剂量为０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ,共用８周。移植后第１０周处死动物,测量肿瘤大小,观察转移情况,以兔抗人Ⅷ因子抗体免疫组化染色检测肿瘤微血管密度。结果ＴＮＰ－４７０对体内胃癌的生长及转移均有抑制作用,ＴＮＰ－４７０剂量为１５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ的抑瘤率分别为５９．９％、７７．０％和８４．９％,肝转移抑制率分别为５１．３％、８７．８％和８７．８％,腹膜转移抑制率分别为３２．８％、６６．４％和７７．６％。用ＴＮＰ－４７０治疗后,肿瘤的微血管密度明显减少。结论ＴＮＰ－４７０对体内胃癌的生长及转移均有抑制作用。     

消化道肿瘤组织中端粒酶活性的表达及其意义

目的 :研究端粒酶活性在消化道肿瘤组织及其癌旁组织中的表达及其意义 ,并评价TRAP ELISA检测法的应用价值。方法 :用TRAP ELISA方法检测了 112例肿瘤组织 (其中食管癌 12例、胃癌 36例、肝癌 15例、胰腺癌 11例、大肠癌 38例 )及 94例相应癌旁组织的端粒酶活性。结果 :食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌肿瘤组织端粒酶活性阳性率分别为 83.33%、86 .11%、86 .6 7%、90 .90 %和 84 .2 1%。肿瘤组织端粒酶活性明显高于癌旁组织和正常组织 (P <0 .0 0 1) ,端粒酶的活性与肿瘤大小、转移、分化程度、分期均不相关。结论 :端粒酶活性是消化道肿瘤诊断的一个很好的指标 ,而且TRAP ELISA检测法是一种非放射性同位素方法 ,可以快速并半定量地检测端粒酶活性