双抗体夹心ELISA法检测人血清弓形虫抗体

本文报告了双抗体夹心竞争ＥＬＩＳＡ法检测人血清弓形虫抗体，并与间接ＥＬＩＳＡ法进行了比较。结果二法阳性符合率为９１．７％。夹心ＥＬＩＳＡ法特异性、稳定性优于间接ＥＬＩＳＡ法，间接ＥＬＩＳＡ法阳性检出率略高于夹心法，但无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。     

抗Ro／SSA抗体的检测及其方法学比较研究

取人脾脏制成匀浆，经超速离心和ＤＥＡＥ纤维素层析提取Ｒｏ／ＳＳＡ抗原，建立ＥＬＩＳＡ检测抗Ｒｏ／ＳＳＡ抗体的方法。各类风湿性疾病患者的检测阳性率依次为ＳＳ７２．７％、ＳＬＥ４７．４％、ＲＡ２３．０％、ＤＬＥ１４．２％、ＭＣＴＤ１４．２％。此外，ＥＬＩＳＡ与ＣＩＥ的符合率为８５．９％，与免疫印迹法的符合率为８５％     

PCR与单克隆抗体ELESA夹心法快速诊断结核病的研究

应用聚合酶性反应（ＰＣＲ）技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列ＩＳ９８６基因的方法和用单克隆抗体ＴＢ１５－Ｃ３经ＥＬＩＳＡ夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇，对１０种抗酸杆菌，２种普通菌进行了检测．ＰＣＲ仅对结核杆菌复合体扩增出２４５ｈｐ特异性条带，ＥＬＩＳＡ检测除人型结核杆菌、ＢＣＧ阳性外，还与鸟型及瘰疬分枝杆菌反应阳性．ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性为１ｐｇ，相当于１３个左右细菌，ＥＬＩＳＡ检测的被感性为１５ｎｇ／ｍｌ．应用ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ检测了９６份结核临床标本．ＰＣＲ的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率（Ｐ＜０．０５），ＰＣＲ的检出率虽高于细菌培养的阳性率，但相差不显著（Ｐ＞０．０５）．ＥＬＩＳＡ检测阳性率明显高于抗酸染色涂片、细菌培养和ＰＣＲ的阳性率（Ｐ＜０．００１）．ＥＬＩＳＡ的假阳性率高于ＰＣＲ的假阳性率，但相差不显著（Ｐ＞０．０５）．研究表明，ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ均是特异、敏感、快速的诊断结核病的方法．但在使用中又各自有其特点．     

乌鲁木齐地区孕妇TORCH感染的检测分析

应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法及聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法。对孕妇４１０８人次及５８８人次，进行了弓形体（ＴＯ）风疹病毒（ＲＵＶ），巨细胞病毒（ＣＭＶ）血清ＩｇＭ及血清ＤＮＡ的检测。结果：ＥＬＩＳＡ法（ＴＯ、ＲＵＶ、ＣＭＶ）阳性检出率分别为２．２１％、２．４４％、２．５４％。ＰＣＲ法（ＴＯ、ＲＵＶ、ＣＭＶ）阳性检出率分别为２．１９％、５％、５．５％。两种方法的阳性检出率Ｐ值＜０．０１有非常显著性差异。并对检测结果进行初步分析。     

用Dot－ELISA检测孕妇巨细胞病毒感染

建立了快速检测孕妇血清内的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＩｇＭ、ＩｇＡ的ＤＯｔ－ＥＬＩＳＡ技术，用该法检测１２０例孕妇血清，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＡ的阳性率分别为１２．５０％和１４．１７％；总检出率为２１．６７％，显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。与ＥＬＩＳＡ相比，灵敏性为９６．３０％，特异性１００％。两者对ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＡ的检出率无显著性差别（Ｐ＞０．０５），但较ＥＬＩＳＡ更为快速，简便，经济，适于推广普及。     

McAb检测囊虫病人循环抗原的研究

应用ＭｃＡｂ双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测脑囊虫病人血清和脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡＧ）。血清经ＰＥＧ沉淀浓缩沸浴和ＣＳＦ经沸浴处理后，ＣＡｇ的阳性率分别为９２．７３％和９０．７４％，总阳性率为９２．０７％，灵敏度６８．７ｎｇ／ｍｌ。对照组中除２例包虫病人血清有交叉反应外，其余均为阴性。平行检测病人ＣＳＦ的ＣＡｇ和ＣＡｂ，以及同步检测血清和ＣＳＦ中的ＣＡｇ，表明它们之间有互补和相互验证的作用，可提高阳性率。对囊虫病人治疗前后血清ＣＡｇ的动态检测，表明血清ＣＡｇ的阴转率随疗程的增加而提高。这些结果说明ＣＡｇ检测不仅可用于囊虫病的诊断，而且可作为疗效考核的重要手段。也说明ＭｃＡｂ双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测ＣＡｇ具有敏感性高、特异性强、重复性好等优点。     

新生儿心肌炎柯萨奇B病毒感染的研究

用间接ＥＬＩＳＡ、ＭａｃＥＬＩＳＡ检测２６例新生儿心肌炎血清ＣｏｘＢ病毒特异性ＩｇＧ和ＩｇＭ，其中１４例用聚合酶链反应检测血清肠道病毒（ＥＶ）－ＲＮＡ。结果ＣｏｘＢ病毒ＩｇＧ的阳性检出率为３８％，ＩｇＭ的阳性检出率为５４％，ＥＶ－ＲＮＡ的阳性率为５０％，三者阳性率均明显高于对照组。检测了１０例母婴血清的ＣｏｘＢ病毒的ＩｇＭ，提示ＣｏｘＢ病毒可能通过胎盘传播，１４例做了急性期和恢复期双份血清检测，ＩｇＧ有４倍滴度改变者６例。     

分泌抗登革病毒单抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

将纯化的登革３型病毒（ＤＥＮ－３）单克隆抗体３Ｄ３（ＡｂＩ）连结到载体分子ＫＬＨ上，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合。用ＥＬＩＳＡ夹心法检测阳性克隆，融合率达１００％，阳性率为５％，经２－３次克隆化，获得了６株分泌抗登革病毒单抗的独特型抗体（ＭｃＡｂ２）的杂交瘤细胞系。在进行阳性筛选及特异鉴定时，选择了以３－５μｇ／ｍｌ的最适Ａｂ１包被浓度，并用正常小鼠Ｉｇ及ＫＬＨ分     

聚合酶链反应鉴定丙型肝炎病毒母婴传播的状态及其意义

采用多种方法，动态检测了１１例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的孕妇所生的婴儿血抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ。发现用合成肽酶联免疫吸附试验（ｓｐＥＬＩＳＡ）检测婴儿抗－ＨＣＶ阳性率（２３．５２％）显著低于第二代重组抗原ＥＬＩＳＡ（２ｎｄＥＬＩＳＡ）（４１．１８％）（Ｐ＜０．０５）；用２ｎｄＥＬＩＳＡ检测，６例婴儿脐血和静脉血抗－ＨＣＶ阳性，５例持续１～５月阴转，１例阳性持续１３个月。经重组免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）鉴定，４例阳性，２例可疑阳性。用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ，５例阳性，３例于生后１～６个月自然阴转，２例持续阳性分别达９个月和１３个月。提示检测抗－ＨＣＶ判断ＨＣＶ母婴传播的状态受到婴儿抗－ＨＣＶ产生水平低下、母体抗－ＨＣＶ的被动输入和不同检测方法的影响，用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ是判断母婴传播更可靠的指标。     

抗心磷脂抗体的检测

本文介绍一种检测ＡＣＡ的ＥＬＩＳＡ方法，该法重复性好、特异性强、敏感性高，方法简便。１４４份正常人血清ＢＩ的Ｘ＋２ＳＤ作为正常值上限，其中ＩｇＧ－ＡＣＡＢＩ为２．３５，ＩｇＡ－ＡＣＡ为２．０６，ＩｇＭ－ＡＣＡ为２．５，ＳＬＥ和ＲＡ患者ＡＣＡ阳性率（４６％和３５％）明显高于正常人群（３．５％，Ｐ＜０．０５）。ＳＬＥ患者中各类ＡＣＡ检出阳性率为ＩｇＧ４４％，ＩｇＭ３０％，ＩｇＡ２２％，因此，ＡＣＡ值可     

单克隆抗体竞争性ELISA在日本血吸虫病诊断中的应用

本文应用单克隆抗体ⅢD10竞争性ELISA,对369例粪检阳性日本血吸虫病患者(慢性316例,急性54例),检测血清内抗CCA 抗体水平,并与环卵沉淀试验和间接血凝试验对比。结果表明,C-ELISA 的敏感性为 97.75～100％,高于 CCPT(90.27％,p<0.05)。而正常人无假阳性,与肝吸虫、肺吸虫和包虫感染的突叉反应依次为1.39％、1/18和0。特异性明显高于COPT和IHA。本试验快速、简便、重复性好。     

单克隆抗体MG7在胃癌癌前病变组织中的免疫组织化学研究

作者应用胃癌单克隆抗体MG7对289例胃粘膜活检标本进行PAP免疫组织化学观察,发现伴有肠化生的萎缩性胃炎组(20.0％)与伴有肠化生的癌旁粘膜组(62.1％)间、弥漫型胃癌癌旁粘膜肠化生组(41.7％)与肠型胃癌癌旁粘膜肠化生组(76.5％)间、轻型不典型增生组(23.9％)与中重度不典型增生组(54.0％)间,MG7-Ag表达阳性率均有显著性差异(均为P<0.01)。在胃癌组织中MG7-Ag表达阳性率为87.8％,而8例正常胃粘膜均阴性。结果表明,胃癌单克隆抗体MG7对胃癌的诊断具有较高的特异性;肠化生与胃癌(尤其是肠型胃癌)的发生有密切关系;对MG7-Ag表达阳性的肠化生和异型增生患者加强随访,将有利于胃癌的早期发现。     

PCT和CRP联合检测对儿童呼吸道感染的临床意义

目的 分析PCT和CRP联合检测对儿童呼吸道感染的临床意义。方法 回顾性分析2016年6月~2017年3月我院呼吸科300例呼吸道感染疾病患儿,根据临床诊断分为病毒感染组（126例）和细菌感染组（174例）,分析两组检测的PCT和CRP结果并计算其阳性率。结果 细菌感染组PCT阳性率为85.63%,CRP阳性率为67.82%;病毒感染组PCT的阳性率为29.37%,CRP阳性率为63.49%。细菌感染组PCT阳性率明显高于病毒感染组;细菌感染组CRP阳性率与病毒感染组无明显差异。结论 PCT在细菌感染阳性率优于CRP,二者联合检测鉴别诊断儿童细菌、病毒感染性疾病具有更高临床价值。     

Development of a rapid,sensitive, dye immunoassay for schistosomiasis diagnosis: a colloidal dye immunofiltration assay

The colloidal dye immunofiltration assay (CDIFA) combines the concepts of the double-antigen sandwich assay, the Dot immunofiltration assay, and colloidal dye-linked antigen technique to produce a new dye immunoassay for antibody detection in schistosomiasis. The CDIFA consisted of soluble egg antigen (SEA) of Schistosoma japonicum coated onto nitrocellulose membrane, mounted on a flow-through test device to provide the assay capture matrix. SEA absorbed to a red colloidal dye, R-3, produced in China, served as the antigen–antibody complex detecting reagents. The results showed that the sensitivity of the CDIFA was 100% in 35 cases of acute schistosomiasis (35/35), 98% in 50 cases of chronic schistosomiasis (49/50). The specificity of the assay was 99.4% in 180 healthy individuals (179/180). The cross-reaction was 13.3% in 30 cases of paragonimiasis, 2.6% in 38 cases of clonorchiasis sinensis and 0% in 20 cases of hookworm infection, 20 cases of fasciolopsiasis and 16 cases of ascariasis. The results were similar to those detected by routine enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In a field evaluation of the CDIFA kit, the positivity rate of the CDIFA was 97.5% in 157 cases of schistosomiasis, compared with 91.1% with the circumoval precipitin test (COPT). The dye-labeled SEA conjugate was stable at room temperature for at least 6 months. The results indicated that the CDIFA provided an economic, simple, rapid, robust test for the detection of schistosome infection, suitable for a wide variety of field applications without any instrumentation.     

Influenza A viral nucleoprotein detection in isolates from human and various animal species

Summary A double antibody sandwich, enzyme-linked immunosorbent assay (DAS-ELISA) was developed to detect influenza A viral antigen, employing a monoclonal antibody directed against type-specific influenza A nucleoprotein (McAb anti-NP). McAb anti-NP was used to coat ELISA plates as well as to prepare the peroxidase conjugate. Influenza A viruses of avian, equine, swine, and human origin were detected in allantoic fluids of inoculated eggs with higher sensitivity by the DAS-ELISA than by hemagglutination (HA) assays. Minimal concentrations of 8 ng/ml influenza virus protein were detected in Nonidet P40-treated virus preparations. Viral antigen detection in tissues of experimentally infected chickens and pigs was successful, but in pigs yielded a lower positive score than the conventional method of virus isolation in eggs. The test is sensitive, rapid, and easy to perform, but does not permit influenza A subtyping. In avian species, the McAb anti-NP DAS-ELISA differentiates between influenza and Newcastle disease viruses. In pigs, the test distinguishes between influenza and Aujeszky's disease.     

前列腺特异抗原化学发光免疫分析方法的建立及初步应用

建立的前列腺特异抗原(PSA)化学发光免疫分析(CLIA)使用2株抗PSAMcAb,一株McAb包被微孔板,另一株McAb与HRP连接。底物是鲁米诺/H2O2/对碘苯酚系统的双抗体夹心一步法,测定范围0.5～64ng/mL,最低检出值为0.13ng/mL,平均回收率为100.6%,批内和批间CV分别小于8.3%和11.5%,正常参考值小于3.5ng/mL。1000份血清临床考核,与参比试剂盒临床符合率一致,具有同等的临床诊断价值。     

A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定

目的:对A族链球菌Fba蛋白McAb2所对应的表位进行定位.方法:以初步定位的表位区段为线索合成三段重叠多肽,dot-ELISA检测McAb2与合成肽的亲合力,并以McAb2为靶分子,利用噬菌体随机七肽库进行亲和筛选,用竞争ELISA鉴定阳性克隆.结果:dot-ELISA检测结果表明Fba_(100-112)肽段与McAb2的结合能力最强.经过3轮亲和筛选后,随机挑选20个噬菌体克隆,竞争ELISA对其与McAb2的亲和力做检测,其中12个克隆显示较强的阳性结果.阳性克隆DNA测序,与Fba基因第100位氨基酸至110位氨基酸中ITPDL同源性较高.结论:通过dot-ELISA将A族链球菌Fba蛋白McAb2对应的表位定位于100～112位氨基酸,结果同噬菌体随机肽库筛选的核心氨基酸位置吻合.为进一步研制表位肽疫苗、研究Fba蛋白及其单克隆抗体的生物学功能奠定了基础.     

治疗和未治疗小鼠日本血吸虫病免疫应答的动态观察

本文报道定期检测治疗和未治疗日本血吸虫病小鼠循环抗原(CSA)、特异性抗体、循环免疫复合物(CIC)以及嗜酸性粒细胞(EOS)的结果。实验表明 CSA 于感染后2周的阳性检出率(ELISA 双抗体法)为40%,4周时全部呈现阳性反应。抗虫卵抗体在感染后3周阳性率为10%,6周时全部检出。结果表明检测 CSA 有早期诊断之价值。CIC 峰见于感染后7～10周,此时 EOS绝对计数亦最高。上述指标在感染后13周明显下降,但在未治疗鼠直至感染后12～30天 CSA逐渐转阴,而特异性抗体仍持续呈现阳性反应,用 ELISA 检测 CSA 在疗效考核上较用 IHA 检测抗虫卵抗体的方法为优。     

ELISA法检测江门地区性病门诊患者生殖支原体抗原

目的应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测性病门诊患者泌尿生殖道生殖支原体（Mg）抗原，探讨江门地区性传播疾病（STD）门诊患者Mg感染状况。方法采用Mg多克隆抗体，标记酶结合物，建立检测Mg抗原的双抗体夹心ELISA法，对性病门诊患者泌尿生殖道分泌物进行MIg抗原检测。结果双抗体夹心ELISA法可检测到5μg／ml蛋白浓度，除肺炎支原体外与其他泌尿生殖道常见支原体和细菌无交叉反应；共检测了174例标本，Mg抗原阳性33例，阳性率为18．97％，其中男性和女性阳性率分别为19．88％和7．69％；男性患者中，非淋菌性尿道炎（NGU）、淋病、前列腺炎患者的Mg抗原阳性率分别为13．43％、62．5％和4．84％。结论STD门诊患者存在Mg感染，应用双抗体夹心ELISA法检测Mg抗原具有一定的灵敏度，且具有快速、简便的特点，适合临床筛查Mg抗原。     

肝细胞肝癌和肝硬化组织中丙型肝炎病毒各区段抗 …

目的 研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在肝细胞肝癌（ＨＣＣ）和肝硬化（ＬＣ）中所起的作用。结合乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）进行分析，并初步探讨了ＨＣＶ与ＨＢＶ感染是否有相互促进作用。方法 采用ＨＣＶ－Ｃ，Ｅ，ＮＳ３，ＮＳ４区单克隆抗体，ＨＢｓＡｇ多克隆抗体用免疫组化方法检测了５９例ＨＣＣ及３５例ＬＣ组织标本。结果 ＨＣＶ阳性反应主要分布在肝细胞及癌细胞的胞浆内，呈细颗粒状。ＨＣＣ中，ＨＣＶ感染率；北京（２９例