用自制抗HRP－抗HBc双特异性单克隆抗体检测抗HBc的初步应用

用杂交瘤融合法建立了抗ＨＲＰ－抗ＨＢｃ双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）杂交－杂交瘤细胞系，它分泌的腹水抗体经ＦＰＬＣ－离子交换层析梯度盐洗脱呈现三个主峰，抗体活性检测表明依次为抗ＨＲＰ、ＢｓＡｂ及抗ＨＢｃ。试用ＢｓＡｂ－ＨＲＰ复合物检测乙肝病例血样，与市售试剂盒初步比较，效果满意。     

鼠抗人IL－5单克隆抗体研制及初步应用探讨

Ｔ细胞杂交瘤来源的人ＩＬ—５免疫小鼠。用鼠鼠杂交瘤技术获得两株分沁抗人ＩＬ—５特异性单抗（Ｓ１７和Ｓ６６）的杂交瘤，并对Ｓ１７单抗的特性进行了探讨。实验结果表明；两株单抗皆为ＩｇＧ１亚类；Ｓ１７单抗能显著抑制ＭＴＨｈ５Ｒ细胞的增殖，不能竞争性抑制ＮＣ１７单抗与人ＩＬ—５的结合。利用Ｓ１７单抗作为包被抗体建立的检测人ＩＬ—５ＥＬＩＳＡ法具有较高的敏感性，提示其在临床上检测病人血中ＩＬ—５浓度应用的可能性。     

鼠抗人IL－5单克隆抗体研制及初步应用探讨

Ｔ细胞杂交瘤来源的人ＩＬ—５免疫小鼠。用鼠鼠杂交瘤技术获得两株分沁抗人ＩＬ—５特异性单抗（Ｓ１７和Ｓ６６）的杂交瘤，并对Ｓ１７单抗的特性进行了探讨。实验结果表明；两株单抗皆为ＩｇＧ１亚类；Ｓ１７单抗能显著抑制ＭＴＨｈ５Ｒ细胞的增殖，不能竞争性抑制ＮＣ１７单抗与人ＩＬ—５的结合。利用Ｓ１７单抗作为包被抗体建立的检测人ＩＬ—５ＥＬＩＳＡ法具有较高的敏感性，提示其在临床上检测病人血中ＩＬ—５浓度应用的可能性。     

抗人μ链单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

目的:制备高效价的鼠源性抗人μ链单克隆抗体(mAb),并建立可用于感染性疾病早期血清学诊断的ELISA捕捉法。方法:以人IgM全分子免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合,用间接ELISA法筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗μ链mAb的杂交瘤细胞株。mAb的特性(效价、Ig亚类、特异性及相对亲和力)采用ELISA及Westernblot法鉴定。以纯化的mAb包被建立ELISA捕捉法,并用于可疑乙脑患者标本中特异性IgM抗体的检测。结果:筛选到1株可稳定分泌抗人μ链mAb的细胞株2E5。mAb腹水的ELISA效价为1×10-6,Ig亚类(型)为IgG1(κ),相对亲和力为1×10-5。Westernblot结果显示mAb2E5仅与IgM的μ链结合,Mr为75000。以辛酸硫酸铵法纯化的mAb2E5包被,建立了ELISA捕捉法,用于30份乙脑患者血清IgM的检测,敏感性及特异性良好。结论:成功地制备1株抗人μ链mAb2E5,建立了可用于感染性疾病早期血清学诊断的ELISA捕捉法。     

抗人IgG-抗HRP双特异性单克隆抗体细胞株的建立与鉴定

目的 制备人ＩｇＧ检测用双特异性单克隆抗体诊断试制。方法 用人ＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与抗ＨＲＰＭｃＡｂ杂交瘤细胞ＨＡＴ敏感株进行第２次融合。结果 获得５株能稳定分泌抗人Ｉｇ－抗ＨＲＰ的双特异性单克隆抗体的杂交－杂交瘤细胞,分泌的抗体亚类其中１株为ＩｇＧ２ａ／ＩｇＧ１,余为ＩｇＧ１／ＩｇＧ１。培养上清与腹水效价分别为２＾７、１０＾０４以上,经ＨＲＰ亲和层析有２个蛋白吸ＢｓＭｃＡｂ存在于第２     

抗TNF—抗HRP双特异性单克隆抗体的研制

抗ＴＮＦ－抗ＨＲＰ双特异性单克隆抗体的研制陈淑华李向明巫山陈善华（卫生部武汉生物制品研究所，武汉４３００６０）ＴＮＦ－α是一种具有广泛生物学活性的细胞因子，参与机体的免疫反应和炎性反应，因此可用于某些疾病的治疗，但也可引起某些病症的发生、发展。对各种...     

抗重组人肿瘤坏死因子－α单克隆抗体的研制及其初步应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术获得１０株抗重组人肿瘤坏死因子－α（ｒＨｕＴＮＦ－α）ＭｃＡｂ。７株ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，２株为ＩｇＧ２ａ，１株为ＩｇＧ２ａ。１０株ＭｃＡｂ与淋巴毒素（ＬＴ或ｒＨｕＴＮＦ－β）、ｒＨｕＩＬ－６和载体菌菌体蛋白均无交叉反应。其中７株ＭｃＡｂ具有中和活性，７株ＭｃＡｂ能识到天然的ＴＮＦ－α。Ｇ１１和Ｅ６ＭｃＡｂ应用ＡＢＣ法免疫组化染色肝病患者组织细胞片得到明确的阳性结果。用２株识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了一步夹心ＥＬＩＳＡ法，检测ＴＮＦ－α的敏感性可达到１００ｐｇ／ｍｌ左右。     

应用单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫循环抗原的初步研究

检测感染宿主体内的循环抗原和循环免疫复合物可以确诊寄生虫感染和考核疗效。国内已有多篇检测血吸虫循环抗原方法的报道,但应用单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究尚未见诸国内文献。作者应用抗日本血吸虫排泄分泌抗原(S·ESA)单克隆抗体进行斑点酶联免疫吸附试验 (Dot-ELISA)检测感染宿主血清循环抗原,结果表明:本法具有较高的敏感性和特异性。 材 料 和 方 法     

地高辛单克隆抗体的研究 Ⅰ、分泌地高辛特异性单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及抗体特性分析

地高辛(Digoxin)是目前应用最广泛韵强心甙类药物,在心血管疾病临床治疗中占有十分重要的地位。强心甙治疗的安全范围较小,一般治疗量已接近中毒量的60%,并且有较大的个体差异,使得临床应用时中     

鼠抗HCV单克隆抗体研制及初步应用探讨

交联HCV 合成多肽抗原,用鼠一鼠杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗HCV 的特异性单抗,分别命名为YLCV 系1—8。经初步研究结果表示,抗HCV 抗体阳性血清可抑制酶标YLCV-1和YLCY-5单抗与抗原的反应。抗原测定结果6份血清中有一份呈强阳性反应,由此提示单抗在HCV 抗体抗原检测系统中应用的可能性,同时为HCV 抗原成份的分析提供了必要的条件.     

甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲肝病毒抗原检测中的应用

目的 研究甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲肝病毒抗原检测中的应用，以期代替现有试剂中的多克隆抗体，得到灵敏度高、特异性好、重复性和准确性好的甲肝抗原检测试剂。方法 采用双抗体夹心法将甲肝多抗包被96孔酶标板后，加入甲肝抗原，分别用酶标单抗和酶标多抗两种方法进行检测甲肝抗原．对单抗试剂的真实性和可靠性进行评价。结果 单抗试剂的灵敏度为100％、特异度为100％，变异系数均小于15％。结论 单抗试剂可用于甲肝抗原的定性和定量检测，结果准确可靠。     

抗胶质纤维酸性蛋白单克隆抗体（AG1）的研制与初步应用

用尿素抽提及DE_(32)~-纤维素离子交换柱层析,从牛大脑白质中提取GFAP,经鉴定具理化性质符合文献报道。用提取的GFAP免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术,获得稳定分泌抗GFAP单克隆抗体的杂交瘤细胞株AG_1,染色体众数为68,属小鼠IgG_1亚类,免疫印迹试验时仅与GFAP起特异性反应,ABC免疫组化显示AG_1单抗与星形胶质细胞及其肿瘤呈阳性反应,而与非胶质细胞及其肿瘤呈阴性反应。     

Detection of Penicillinase in Milk by Sandwich ELISA Based Polyclonal and Monoclonal Antibody

A sandwich ELISA has been developed using polyclonal and monoclonal antibody for the determination of penicillinase in milk. For this purpose, specific polyclonal and monoclonal antibodies against penicillinase were generated and characterized. Using penicillinase standards prepared from 1–128 ng/mL, the method indicated that the detection limit of the sandwich ELISA, as measured in an ELISA plate reader, was as low as 0.86 ng/mL of penicillinase. For determine the accuracy, raw milk containing 2, 8, 32, and 64 ng/mL of penicillinase were tested by sandwich ELISA. Recoveries were from 93–97.5%, and the coefficient of variation [CV (%)] were from 5.55–8.38%. For interassay reproducibility, recoveries were from 89.5–95.1%, the coefficient of variation [CV (%)] were from 5.26–9.58%. This sandwich ELISA provides a useful screening method for quantitative detection of penicillinase in milk.     

双特异性抗体及其在肿瘤诊治上的研究进展

双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体,能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁,激发具有导向性的免疫反应,现已成为抗体工程领域的热点,在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。双特异性抗体可通过多种途径获得,随着分子生物学技术的迅速发展,出现了基因工程双特异性抗体的多种构建模式,并有多种用于肿瘤的临床诊断和治疗试验。     

FPLC纯化单克隆抗体（Fab＇）_2片段

作者采用ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换色谱柱，在Ｗａｔｅｒｓ６５０Ｅ快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了抗肝癌单克隆抗体（ＨＡｂ１８）Ｆ（ａｂ＇）２片段的快速纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ用胃蛋白酶消化１８ｈ后，上阴离子交换色谱柱纯化，用ｐＨ７．５１０ｍｍｏｌ／ＬＰＢ洗脱，即得到纯化的Ｆ（ａｂ＇）２．一次纯化周期仅需２５ｍｉｎ，一次上样量１２０～１６０ｎｇ蛋白，Ｆ（ａｂ＇）２得率为３４％，回收率为５１％。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定纯度大于９５％，免疫荧光法测定活性为１：４０００．该法操作简单、快速、实用性强，不需要高档次的色谱仪，只要有一台核酸／蛋白检测仪便可进行纯化，是实验室纯化Ｆ（ａｂ＇）２的理想方法．     

Antibody for the development of specific immunoassays to detect nadifloxacin in chicken muscles

A convenient and specific competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for nadifloxacin (NDF) was developed. The modified 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) method was employed to synthesise the artificial antigen of NDF. The indirect competitive ELISA developed to detect NDF has a concentration at 50% inhibition (IC₅₀) of 0.72 ng/mL and a limit of detection of 0.04 ng/mL. This ELISA kit could be used as a screening method to detect and control the illegal content of NDF in food products. In this study, the kit was applied to NDF detection in chicken muscle and produced a satisfactory result with recovery rates from samples spiked with NDF of 92% (10 ng/mL) and 101% (50 ng/mL).