细胞骨架系统对TNF－α产生的影响

本文证实细胞微管聚会抑制剂秋水仙碱、长春花碱、长春新碱等均可明显抑制脂多糖刺激的大鼠腹腔巨噬细胞合成肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）。微管解聚抑制剂重水与Ｔａｘｏｌ亦可使ＴＮＦ－α产生轻度减少，提示微管的聚合与解聚对ＴＮＦ－α的正常产生都非常重要，其中聚合功能对ＴＮＦ－α合成的调节尤其重要。此外，微丝聚合抑制剂细胞松弛素Ｂ亦可轻度抑制ＴＮＦ－α的产生，说明微丝亦参与对ＴＮＦ－α合成的调节。     

秋水仙碱对巨噬细胞分泌TNF－α的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．）能剂量依赖性地抑制ＬＰＳ刺激的大鼠巨噬细胞（Ｍψ）分泌ＴＮＦ－α。Ｃｏ１的衍生物β－ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无影响，对ＴＮＦ－α的分泌亦无影响；其他微管抑制剂如长春新碱等亦能抑制Ｍψ分泌ＴＮＦ－α。间接免疫荧光染色和原位杂交法显示，ＬＰＳ能促进微管聚合，并使ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及蛋白质表达明显增加；当ＬＰＳ与Ｃｏｌ．联用时，微管解聚，ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达及其蛋白质合成减少，ＴＮＦ－α失去原有的胞浆定位，弥散分布于胞浆。说明ＴＮＦ－α的合成需要完好的微管结构与功能，并提示在生理或病理条件下微管功能的变化可能直接或间接参与对ＴＮＦ－α生物合成的调节。     

秋水仙碱对肿瘤坏死因子—α基因表达的影响

微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌ，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ刺激ＰＵ５－１．８细胞的ＴＮＦ－ａ基因表达，以前工作曾证实Ｃｏｌ主要抑制ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的转录。本研究进一步证实这种抑制作用呈延迟性，即Ｃｏｌ需作用３小时才能充分表现其负性影响。而且这种抑制作用可被蛋白合成抑制剂放线菌酮（ＣＨＸ）完全阻断。单用Ｃｏｌ对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ稳定性无明显影响，而与ＣＨＸ联用时则可明显延长ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－αｍＲＮＡ半衰期。以上资料堤示，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α基因表达的影响可能是对其在转录及转录后水平综合影响的结果。     

秋水仙碱抑制巨噬细胞合成肿瘤坏死因子—α机制的初步探讨

我们以前证实微管聚合抑制剂Ｃｏｌ（秋水仙碱）可抑制分泌ＴＮＦ—α。本文进一步证实Ｃｏｌ并非干扰将ＴＮＦ—α胞外的分泌过程，因Ｃｏｌ不引起ＴＮＦ—α在细胞内的潴留，而是抑制ＴＮＦ—α的产生。因为：（１）阻断新合成蛋白分泌过程的试剂Ｍｏｎ（莫能菌素），能完全抑制ＴＮＦ—α的释放，将大量ＴＮＦ—α阻留在细胞内。如加用Ｃｏｌ．则Ｍｏｎ阻留于胞内的ＴＮＦ—α明显减少；（２）Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示Ｃｏｌ可抑制ＴＮＦ—α前体一２６ＫＤ蛋白的产生。如在ＬＰｓ刺激的不同时间加Ｃｏｌ，其抑制效应在２～８ｈ内逐渐消失，若同时给予ＬＰＳ与Ｃｏｌ．则Ｃｏｌ的抑制效果最好，说明Ｃｏｌ作用于ＴＮＦ—α生物合成早期。在分子水平上，Ｃｏｌ明显减低ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ—αｍＲＮＡ水平。以上资料提示Ｃｏｌ主要通过抑制ＴＮＦ—αｍＲＮＡ转录而减少ＴＮＦ—α的合成。     

TNF—α结构与功能的关系

肿瘤坏死因子（TNF-α）是一种具有广泛生物学活性的细胞因子，其功能发挥与结构密切相关。TNF-α的活性形式为三聚体结构，其单体结构类似三明治，不同氨基酸残基的作用各异，内部残基参与三聚体形成，外部残基参与受体结合。有4个重要的结构域。TNF-α包括跨膜型和分泌型，二者的结构和功能均有差异。     

PGE2与LTB4在微管对TNF—α合成调节中的作用

本研究证实完善的微管功能对下ＴＮＦ－α的合成是必要的。如用秋水仙碱抑制微管聚合，则可减少ＭΦ产生ＴＮＦ－α，Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α的抑制作用部分是由于该药引起前列腺素Ｅ２升高所致，因为用环加氧酶抑制剂消炎痛阻断ＰＧＥ２合成，可部分拮抗Ｃｏｌ的这一抑制作用。此外，Ｃｏｌ可抑制花生四烯酸的另一产物白三烯的产生，然而补充外源性ＬＴＢ４并不影响Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α的抑制作用。     

GM—CSF与IFN—r联合刺激人PBMC产生TNF—α

ＧＭ－ＣＳＦ本身并不能诱导人外周血单核细胞产生ＴＮＦ－α，对ＬＰＳ的刺激作用也不具有协同性，但与ＩＦＮ－ｒ联合刺激ＰＢＭＣ可以产生ＴＮＦ－α，最大效应出现于刺激后１８－２４ｈ，且呈明显的时间和剂量依赖关系，消炎痛和多粘菌素Ｂ对此效应无影响，排除了ＰＧＥ２和ＬＰＳ存在影响的可能性。     

TNF—α与肝细胞损伤

在内毒素、脂多糖、半乳糖胺、氯仿等引起的肝细胞损伤中，由巨噬细胞分泌的α肿瘤坏死因子起着重要的介导作用。通过抑制巨噬细胞的功能，或使用抗肿瘤坏死因子抗体或肿瘤坏死因子受体来中和肿瘤坏死因子，可以减轻肝损伤     

人TNFα—EGF重组质粒的构建

本实验将编码人ＴＮＦα分子上与其受体相关的部分核苷酸序列缺失，代之以人ＥＧＦ基因ｃＤＮＡ，实现基因重组，转化子经快速细胞破碎法切初筛，经Ｄｏｔ ｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定，从中挑选出２０个人ＴＮＦα－ＥＧＦ阳性重组质粒。为进一步获得重组嵌合人ＴＮＦα－ＥＧＦ分子和ＴＮＦα分子和ＴＮＦα作用机制的深入探讨奠定了初步基础。     

类风湿关节炎患者血清sTNF—R、TNF—α的变化

目的为探讨类风湿关节炎 (RA)与可溶性肿瘤坏死因子受体 (s TNF- R)、TNF- α、TNF- α/ s TNF- R比值的关系。方法应用双抗体夹心 EL ISA法检测了活动期 RA(2 8例 ) ,稳定期 RA (12例 )及健康人 (30例 )血清中 s TNF- R 、s TNF- R 、TNF-α的水平。结果活动期 RA患者血清 s TNF- R 、s TNF- R 、TNF-α水平明显高于健康人及稳定期 RA组 ,P均 <0 .0 1。稳定期 RA患者血清 s TNF- R 、s TNF- R 、TNF-α水平亦明显高于健康人 ,P<0 .0 1。在 RA患者中 ,血清 s TNF- R 、s TNF- R 水平与 ESR、CRP、Ritchie index呈显著正相关 ,与类风湿因子 (RF)水平无相关性。RA患者治疗 3个月后 s TNF- R 、s TNF- R 及 TNF- α/ s TNF R比值显著下降。结论 RA患者血清 s TNF- R 、s TNFR- 水平显著增高 ,且与疾病活动度呈正相关。测定血清 s TNF- R 、s TNF- R 、TNF- α/ s TNF- R水平可作为 RA诊断 ,监测疾病活动、治疗及判断预后的一项有意义的实验室指标     

PGE_2与LTB_4在微管对TNF－α合成调节中的作用

本研究证实完善的微管功能对ＴＮＦ－α的合成是必要的。如用秋水仙碱（Ｃｏｌ）抑制微管聚合，则可减少ＭΦ产生ＴＮＦ－αＣｏｌ对ＴＮＦ－α的抑制作用部分是由于该药引起前列腺素Ｅ＿２（ＰＧＥ＿２）升高所致，因为用环加氧酶抑制剂消炎痛（Ｉｎｄｏｍ，）阻断ＰＧＥ＿２合成，可部分拮抗Ｃｏｌ的这一抑制作用。此外，Ｃｏｌ可抑制花生四烯酸的另一产物白三烯（ＬＴＢ＿４）的产生，然而补充外源性ＬＴＢ＿４并不影响Ｃｏｌ对ＴＮＦ－α的抑制作用。     

TNFα对IFNr诱导肿瘤细胞HLA—Ⅱ抗原表达的影响

本文用ＩＦＮｒ诱导人肿瘤细胞株表达ＨＬＡ－Ⅱ类抗，并观察ＴＮＦα，ＢＣＧ－ＰＳＮ对ＩＦＮｒ诱导ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达的影响。发现两株肿瘤细胞当ＩＦＮｒ为５００ｕ／ｍｌ时，诱导第４天ＨＬＡ－Ⅱ抗原表达；当ＴＮＦα，ＢＣＧ－ＰＳＮ分别与ＩＦＮｒ合用时，能诱导肿瘤细胞ＨＬＡ－Ⅱ类抗原的高表达率。有助于增加肿瘤细胞的免疫原性，提高宿主免疫应答能力。     

秋水仙碱对LPS诱导巨噬细胞TNF—α基因表达的抑制作用

细胞微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ激活的小鼠巨噬细胞株ＰＵ５－１．８产生ＴＮＦ－α及减少其基因表达，而Ｃｏｌ．衍生物β－Ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无作用，对ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累亦无影响，其它微管聚合抑制剂长春新碱、长春花碱等则有类似Ｃｏｌ．的抑制作用。用ｒｕｎ ｏｎ核转录试验和ｍＲＮＡ半寿期检测证实Ｃｏｌ．ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累     

微管微丝交联因子1与细胞骨架

微管微丝交联因子1(MACF1)是一种在哺乳细胞中普遍表达的细胞骨架蛋白,既能与微管交联,又能与微丝交联。MACF1在细胞极化、细胞迁移、信号转导以及维持组织的完整性中发挥着重要作用。本文基于MACF1能够与微丝微管交联的特点,就其通过细胞骨架间的相互作用对细胞生理功能的调节做一综述。     

促肝细胞生长素对肝坏死大鼠TNF产生的影响

国内外学者认为TNF与病毒性肝炎关系密切。Aderka认为TNF在重症肝炎的发病中起重要作用,是引发急性肝坏死的重要介质。本研究用D-GL诱发实验性大鼠急性肝坏死模型,观察促肝细胞生长素(HGF)对肝坏死大鼠TNF、转氨酶(ALT)和肝组织脂质过氧化物(LPO)的影响。 材料与方法 1.实验动物:健康大鼠系本校实验动物中心供给。体重180～210g,雌雄各半,在常温下饲养,实验前12h禁食,注射D氨基半乳糖(D-GL)后4h自由饮水进食。 2.D-GL:重庆医科大学化学教研室提供。临用前溶于灭菌生理盐水并调pH至6.8～7.0,终浓度为100g/L。     

白藜芦醇甙对内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生TNFα和NAG的影响

收集小鼠腹腔巨噬细胞，调整细胞浓度为５×１０￣５／ｍｌ，加入２４孔培养板每孔１ｍｌ，内毒素刺激前后不同时间加入白藜芦醇甙培养，检测上清中肿瘤坏死因子，溶酶体酶（Ｎ－乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶ＮＡＧ）的变化，结果说明：白藜芦醇甙可减少上清中ＴＮＦ＿α和ＮＡＧ的量，通过此可减少内毒素刺激产生的由ＴＮＦ＿α和ＮＡＧ介导的组织损伤。     

过敏性紫癜TNFα变化及意义

利用ＥＬＩＳＡ法检测３５例急性期和２５例恢复期ＨＳＰ患儿血清ＴＮＦα浓度，结果显示，急性期ＨＳＰ病人血清ＴＮＦα浓度明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），恢复期接近正常（Ｐ〉０．０５）。急性期与恢复期之间也有显著差异（Ｐ〈０．０１），ＣＩＣ阳性与否与ＴＮＦα浓度无相关性，提示ＴＮＦα在ＨＳＰ的发病中可能具有重要意义。     

不同年龄段人血清肿瘤坏死因子—α（TNF—α）值的变化

我们用放免分析测定了不同年龄人血清ＴＮＦ－α值。结果显示，正常新生儿脐血、新生儿、幼儿及成人之间血清ＴＮＦ－α值有显著性差异（Ｐ〈０．０１），共值分别为８．０９±３．３９、１７．０９±３．２９、２４．５３±２．７９、１０．０１±４．１ｐｍｏｌ／Ｌ；新生儿败血症患者血清ＴＮＦ－α值显著高于成人肺炎患者（Ｐ〈０．０１）。结果提示同年龄人血清ＴＮＦ－α值的差异，可能反映了机体免疫状态的差异，从而引起不同