甲胎蛋自对H－22腹水肝癌小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

用抗甲胎蛋白（ａｎｔｉ－ＡＦＰ）的单克隆抗体亲和层析柱从脐带血中提纯ＡＦＰ。通过ＭＴＴ法体外观察人ＡＦＰ对Ｈ－２２腹水肝癌小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果表明，Ｈ－２２小鼠脾淋巴细胞经不同浓度ＡＦＰ（１２．５－１００μｇ／ｍｌ）处理后，对刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）诱导的增殖反应明显减弱，抑制率达３９．８％－６６％，并有一定的浓度依赖关系；而用不同浓度的人血清白蛋白（ＨＳＡ，３．１～１００μｇ／ｍｌ）体外处理，则无明显抑制作用。另外，我们用反证法证实，ＡＦＰ抗体（５５、１１０μｇ／ｍｌ）能明显阻断人ＡＦＰ（５０、１００μｇ／ｍｌ）对Ｈ－２２小鼠脾淋巴细胞增殖的抑制作用。     

抗APO—1单抗促进SEB活化的淋巴细胞凋亡及其与胞内游离Ca^ …

为探讨ＡＰＯ－１单抗处理的金黄色葡萄球菌肠毒菌Ｂ活化的淋巴细胞胞浆中游离Ｃａ６２＋浓度的变化，用形态学观察，流式细胞光度术观测了鼠抗人ＡＰＯ－１单克隆抗体对ＳＥＢ活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用，同时采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针检测ＡＰＯ－１单抗处理的淋巴细胞浆内游离Ｃａ＾２＋浓度。     

抗肾综合征出血热病毒人单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以亲和层析技术纯化的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５５０００，６７０００）为特异性抗原，体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），然后将体外免疫的淋巴细胞与人－鼠种间杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，经ＥＬＩＳＡ间接法筛选出２株（２Ｄ５，１Ｂ７）分泌抗－ＨＦＲＳＶ人单克隆抗体（Ｈ－ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株，４次克隆化后，１００％阳性。对２Ｄ５株初步鉴定表明，其抗体类型为ＩｇＧ１；培养上清中抗体浓度为２０～３０μｇ／ｍｌ；特异性免疫荧光反应证明２Ｄ５株Ｈ－ＭｃＡｂ是ＨＦＲＳＶ特异性；中和效价为１∶１６０；体外连续传代６个月仍稳定分泌抗体。     

用肾综合征出血热病毒结构蛋白体外免疫正常人外周血淋巴细胞制备单克隆抗体

用亲和层析提取的肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）结构蛋白（５０ｋＤ和６７ｋＤ）为抗原，在体外免疫正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）。ＰＢＬ经亮氨酸甲基酯处理后，在含有ｓＰＷＭ－Ｔ、ＩＬ－２及不同浓度抗原的培养基中培养６ｄ，计数存活ＰＢＬ数量。结果表明，在上述体外免疫条件下存活ＰＢＬ的数量与抗原剂量呈正相关。将此体外免疫的ＰＢＬ与人－鼠杂交瘤细胞（Ｋ６Ｈ６／Ｂ５）融合，获得了３株分泌抗ＨＦＲＳＶ人单抗的杂交瘤细胞，表明在体外免疫条件下，正常人ＰＢＬ能够对ＨＦＲＳＶ结构蛋白发生特异性免疫应答。     

抗APO-1单抗促进SEB活化的淋巴细胞凋亡及其与胞内游离Ca2+浓度相关性研究

为探讨抗ＡＰＯ－１单抗处理的金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）活化的淋巴细胞胞浆中游离Ｃａ２＋浓度的变化，用形态学观察、流式细胞光度术观测了鼠抗人ＡＰＯ－１单克隆抗体对ＳＥＢ活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用，同时采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针检测了ＡＰＯ－１单抗处理的淋巴细胞胞浆内游离Ｃａ２＋浓度。结果表明，抗ＡＰＯ－１单抗对ＳＥＢ活化１ｄ和对照组淋巴细胞无明显的促凋亡作用，但对ＳＥＢ活化５ｄ的淋巴细胞不仅可明显促进其凋亡，而且可使其胞浆游离Ｃａ２＋浓度升高，而Ｚｎ２＋则抑制了抗ＡＰＯ－１单抗的凋亡诱导作用。由此可见，抗ＡＰＯ－１单抗与其特异性抗体结合后可能是通过使胞浆中游离Ｃａ２＋浓度升高，激活了Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋依赖的内源性核酸内切酶而导致ＳＥＢ活化的淋巴细胞凋亡。     

介绍一种制备特异性TF和特异性iRNA的方法

以乙肝疫苗、人喉癌细胞膜抗原为抗原，猪脾细胞为效应细胞，经体外免疫后收集应答细胞，制备ＰＳＨＢＶ－ＴＦ ＰＳＡＣ－ｉＲＮＡ。通过抗原特异性细胞免疫功能试验证实，ＰＳＨＢＶ－ＴＦ和ＰＳＡＣ－ｉＲＮＡ都能转移特异性细胞免疫功能。采用体外免疫法制备ＰＳＨＢＶ－ＴＦ和ＰＳＡＣ－ｉＲＮＡ是可行的，并且具有诸多优点。     

人胎胸腺素对T细胞增殖及IL—2分泌的影响

胸腺素具有广泛的免疫调节作用。本文观察了人胎胸腺素（ＨＦＴ）在体外对人周围血Ｔ细胞的增殖及对周围血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－２的影响，实验结果表明：ＨＦＴ能刺激Ｔ细胞增殖，１％ＨＦＴ的作用最强，但未见ＨＦＴ与ＰＨＡ对Ｔ细胞增殖的协同促进作用；而ＨＦＴ对ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的影响不明显，ＨＦＴ与ＰＨＡ共同作用的效应约有提高，亦仅相当于ＩＬ－２在１．９￣７．９ｕ／ｍｌ时的效应。     

表达人HGF／MBP融合蛋白的pMAL—MBP／HGF重组质粒的构建及鉴定

将人ＨＧＦ完整编码区ｃＤＮＡ片段插入ＭＢＰ表达型ｐＭＡＬ－Ｃ２载体质粒中，构建了表达人ＨＧＦ／ＭＢＰ融合蛋白的ｐＭＡＬ－ＭＢＰ／ＨＧＦ重质粒。表达的ＨＧＦ／ＭＢＰＧＥ分析分子量约为１１０ｋＤ，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ表明能被兔抗ＭＢＰ抗体和抗人ＨＧＦＭｃＡｂ所识别。     

IL—10对外周血单个核细胞体外产生IL—2及IFN—γ的调节作用

为探讨Ｔｈ１与Ｔｈ２两类细胞因子间相互调节，研究了ｒｈＩＬ－１０对ＰＨＡ体外诱导人ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ的影响。结果表明，１０ｎｇ／ｍｌＩＬ－１０明显抑制ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ（Ｐ＜０．０２及Ｐ＜０．０１）。在加入兔抗人ＩＬ－１０抗体的ＰＢＭＣ体外培养体系中，在５μｇ／ｍｌ浓度时，ＩＬ－２产生可明显增加（Ｐ＜０．０５），随着抗体浓度增加，ＩＬ－２呈剂量依赖性增加（ｒ＝０．９６２，Ｐ＜０．０１），ＩＦＮ－γ产生亦增加，但差异不明显。本研究表明ＩＬ－１０抑制活化人ＰＢＭＣ体外产生ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ，而抗人ＩＬ－１０抗体则表现出增强作用。ＩＬ－１０介导Ｔｈ１与Ｔｈ２两类辅助性Ｔ细胞间的相互调节，选择机体对抗原的免疫应答类型，从而对临床疾患的防治有一定指导意义。     

牛膝多糖对小鼠体液免疫反应的增强作用

牛膝多糖（ＡＢＰ）是从传统中药牛膝根中分离得到的一有效成分。ＡＢＰｉｐ５０ｍｇ·ｋｇ－１×５ｄ能明显提高血清总ＩｇＧ及特异性抗体溶血素的含量，并增加脾脏ＰＦＣ数；还能对抗环孢霉素Ａ引起的ＰＦＣ及ＩｇＧ的下降。ＡＢＰ０．２～０．８ｇ·Ｌ－１体外能刺激小鼠脾细胞增殖，也能增强ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖。上述结果表明，ＡＢＰ能增强小鼠的体液免疫功能。     

HSV－I感染人单核细胞诱生肿瘤坏死因子α

以纯化ＨＳＶ－Ｉ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ｉ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活的ＨＳＶ－Ｉ不能诱导单核细胞分泌细胞毒因子。用重组人ＴＮＦａ中和抗体能完全中和ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞培养上清中的细胞毒活性，表明其中含有的细胞毒因子为ＴＮＦａ。而重组人ＴＮＦａ中和抗体对ＨＳＶ－Ｉ感染的ＰＨＡ活化淋巴细胞上清中的细胞毒活性无明显影响，其细胞毒因子可能大多为淋巴毒素（ＴＮＦβ）。     

IFN—γ抑制血管成形术后兔血管平滑肌细胞增殖和PDGF—A的表达

目的和方法：采用体外细胞培养，进行氚标胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入和原位杂交。结果：发现γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）能抑制体外培养新西兰兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的ＤＮＡ合成和血小板衍化生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）的基因表达；整体实验中，用４ＦＦｏｇａｒｔｙ导管气囊拉伤新西兰兔的腹主动脉内皮后，随即连续肌注ＩＦＮ－γ（１６５万Ｕ·ｋｇ１·ｄ１）３天，结果发现肌注ＩＦＮ－γ能明显抑制受损部位ＶＳＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ的标记率及ＰＤＧＦ－Ａ的表达。结论：ＩＦＮ－γ对血管成形术引起的血管挛缩有一定的舒张作用。     

FK506对淋巴细胞趋化反应的影响

通过研究ＦＫ５０６在体外对人淋巴细胞趋化反应的影响。发现在ＦＫ５０６的浓度为０．５ｎｇ／ｍｌ时，对蛋－亮－脯氨酸甲酯多肽（ＦＭＬｐ－ＭＥ）、酵母多糖激活血清（ＺＡＳ）和趋化性胆汁（ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃｂｉｌｅ，ＣＢ）引起的淋巴细胞趋化反应的抑制率分别为４７．３％、３２．２％和４８．９％；对经ＰｈｏｒｂｏｌＭｙｒｉｓｔａｔｅＡｃｅｔａｔｅ（ＴＰＡ）激活的淋巴细胞，ＦＫ５０６的抑制作用更强，抑制率分别达７１．２％、５５．４％和６９．６％。ＦＫ５０６也抑制ＴＰＡ激活的淋巴细胞产生趋化因子。比较经不同处理的淋巴细胞培养上清液引起的白细胞趋化反应，发现ＴＰＡ组与ＴＰＡ＋ＦＫ５０６组间存在显著性差异（淋巴细胞趋化反应Ｐ＜０．００１、单核吞噬细胞Ｐ＜０．０００５、中性粒细胞Ｐ＜０．０００５），而对未激活的淋巴细胞产生趋化因子无影响。可见对淋巴细胞趋化反应的抑制可能是ＦＫ５０６作用的一种方式。     

抗肾综合征出血热病毒人单克隆抗体杂交瘤细胞株的建…

以亲和层析技术和纯化的肾综合征出血热病毒结构蛋白为特异性抗原，体外免疫正常人外周血淋巴细胞，然后将体外免疫的淋巴细胞与人－鼠种间杂交瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ间接法选出２株分泌抗－ＨＦＲＳＶ人单克隆抗体杂交瘤细胞株，４次克隆化后，１００％阳性。     

抗t—PA单克隆抗体的制备及初步应用

应用锗心ｔ－ＰＡ和人黑色素瘤细胞分泌的ｔ－ＰＡ抗原，经腹腔及脾内免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠。用细胞融合技术制务杂瘤细胞，细胞融合率达８５％获得四株抗ｔ－ＰＡ杂交瘤细胞株，鼠腹水抗体效价达１：１０＾５；Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ结果表明该单抗所结合的抗原分子量与ｔ－ＰＡ相符。     

人胎胸腺素对T细胞增殖及IL－2分泌的影响

胸腺素具有广泛的免疫调节作用。本文观察了人胎胸腺素（ＨＦＴ）在体外对人周围血Ｔ细胞的增殖及对周围血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－２的影响，实验结果表明：ＨＦＴ能刺激Ｔ细胞增殖，１％ＨＦＴ的作用最强，但未见ＨＦＴ与ＰＨＡ对Ｔ细胞增殖的协同促进作用；而ＨＦＴ对ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的影响不明显，ＨＦＴ与ＰＨＡ共同作用的效应约有提高，亦仅相当于ＩＬ－２在１．９～７．８ｕ／ｍｌ时的效应。     

抗原表位定向选择的人源抗TNF-αFab的鉴定

目的对通过抗原表位定向选择技术（ＥＧＳ）所筛选到的２株人源化ＴＮＦ－α抗体Ｆａｂ段进行分析鉴定。方法测定可变区基因的序列,用亲本鼠单抗Ｚ８进行竞争ＥＬＩＳＡ,用Ｌ９２９细胞检测其体外中和ＴＮＦ－α的活性,并用硫氰酸铵洗脱法比较与亲本鼠单抗的亲和力。结果基因测序表明２株抗体ＶＨ相同,属人ＶＨⅠ亚群;Ｖκ分别属人ＶκⅠ、ＶκⅢ亚群;竞争抑制实验表明所获人源抗体片段与亲本鼠源抗体是针对ＴＮＦ－α的同一抗原表位;体外中和实验证明此抗体片段能中和ＴＮＦ－α对Ｌ９２９细胞的毒性;该抗体片段的亲和力略低于原鼠单抗Ｚ８。结论用ＥＧＳ方法获得的人源抗体片段基本保持了原鼠单克隆抗体Ｚ８的特性     

结核杆菌主要蛋白抗原59对T细胞的增殖反应

用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，观察了经抗γδ＋Ｔ细胞的单抗处理和Ｈ３７Ｒｖ免疫的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠淋巴细胞体外对ＭＰＴ５９刺激的增殖反应。结果显示，去除γδ＋Ｔ细胞不能阻止该淋巴细胞的增殖。ＦＡＣＳｃａｎ分析表明，被ＭＰＴ５９刺激增殖的Ｔ细胞３１％为Ｖβ１１＋Ｔ细胞，其明显高于非刺激组和ＤＮＰ－ＫＬＨ刺激组。ＭＰＴ５９以Ｖβ１１为主要方式刺激Ｔ细胞增殖，提示它可能是结核杆菌分泌的一种超抗原。     

体外免疫建立分泌卵巢癌反应性单克隆IgG人—鼠杂交瘤

用正丁醇提取的人卵巢癌细胞ａｏ１０／１７抗原，置于含免疫反应剂的无血清培基中免疫人脾细胞。经融合、筛选和克隆化，建立了９株分泌人源性单克隆ＩｇＧ抗体（ＨｍＡｂ）的人－鼠杂交瘤细胞系ＡＦ１～ＡＦ９。酶标抗体竞争抑制试验表明，其中ＨｍＡｂＡＦ５和ＡＦ８能识别卵巢癌抗原分子上的不同表位；杂交瘤细胞系所分泌的ＨｍＡｂ的效价高，所识别的抗原表达于卵巢癌细胞的表面     

重组人G—CSF免疫小鼠全套单链抗体噬菌体表面展示文库？…

利用全套噬菌体抗体表面展示技术，绕过杂交瘤技术，从重组人Ｇ－ＣＳＦ免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总ＲＮＡ，反转录成ｃＤＮＡ后，用抗体中变区ＰＣＲ混合引物进行全套抗体重，轻链可变区（ＶＨ和ＶＬ）基因的扩增，经重叠延伸反应，在体外随机装配成单链抗体（ＳｅＦｖ）将其克隆至噬菌粒载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ中，电转化含ＳｕｐＥ的Ｅ．ｃｏｌｉ菌株，以辅助噬菌体Ｍ１３Ｋ０７超感染噬菌粒文库，构建成全套ＳｃＦｖ表面展示文