盐生肉苁蓉愈伤组织培养与苯乙醇苷类化合物合成的研究

目的 利用肉苁蓉组织培养技术生产苯乙醇苷类活性成分。方法 研究碳源、生长素和培养条件对细胞中松果菊苷、洋丁香酚苷(类叶升麻苷)和2′—乙酰基洋丁香酚苷3种苯乙醇苷类化合物合成的影响。结果 葡萄糖有利于上述3种成分的合成，6—BA 1mg/L与IAA 1mg/L或6—BA 1mg／L与2，4—D 2mg／L的激素配比有利于松果菊苷和洋丁香酚苷(类叶升麻苷)的积累。15℃黑暗和25℃光照处理可以促进松果菊苷和洋丁香酚苷(类叶升麻苷)的积累。其中IAA 2mg／L与6—BA 1mg／L、25℃黑暗条件下培养时3种苯乙醇苷类的总产量达到1937.7mg／L。盐生肉苁蓉愈伤组织中的主要成分与天然肉苁蓉基本相同，而且愈伤组织中的松果菊苷、洋丁香酚苷(类叶升麻苷)和2′—乙酰基洋丁香酚苷含量高于天然肉苁蓉。结论 盐生肉苁蓉的愈伤组织或细胞可以代替肉苁蓉生产苯乙醇苷类活性成分。     

肉苁蓉愈伤组织培养及所含有效成分量的研究

目的为扩大和提高肉苁蓉Cistanchedeserticola资源的利用效率。方法以肉苁蓉肉质茎的不同组织部位作为外植体,采用正交实验方法,筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养。应用HPLC方法对愈伤组织培养物中松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)的量进行测定。结果肉苁蓉肉质茎的维管组织部分是诱导愈伤组织的最适外植体,鳞片叶次之,髓组织部分诱导效果较差。在暗培养、25~27℃条件下以B5为基本培养基附加6-BA(0.5~2mg/L)与IAA(0.5~1.5mg/L)诱导愈伤组织效果最佳;在半光照(光培养10h/d,暗培养14h/d)条件下,愈伤组织生长正常,最佳继代时间为25~30d。愈伤组织培养物中松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)达4.37%。结论筛选出了适宜的肉苁蓉愈伤组织培养方法,且培养物中主要药用有效成分松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)的量达到并超过了《中国药典》要求(0.3%)的标准。     

管花肉苁蓉不同部位有效成分含量的考察比较

目的 考察新疆和田地区不同产地的管花肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷和苯乙醇总苷的含量.方法 分别采用高效液相色普法(HPLC)和紫外分光光度(UV)法检测管花肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷和苯乙醇总苷的含量.结果同一株管花肉苁蓉中松果菊苷在根部与顶部的含量差异最大达22.4倍,毛蕊花糖苷在根部与顶部的差异最大达到16.7倍,苯乙醇总苷在根部与顶部的差异最大达到8.7倍.结论 管花肉苁蓉各部位有效成分含量的差异悬殊,有效成分主要分布在根部,实验结果将为更加合理科学地使用开发管花肉苁蓉提供依据.     

HPLC法测定不同产地肉苁蓉中松果菊苷的含量

目的建立以高效液相色谱法测定不同产地肉苁蓉中松果菊苷含量的方法。方法色谱柱为Hypersil-ODS柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：A相为1％醋酸溶液,B相为乙腈-甲醇（2：3）;流速1．2mL／min,检测波长334nm,柱温30℃。结果松果菊苷在0．22～2．2μg范围内线性关系良好,r=0．9997,平均加样回收率为96．35％,RSD=2．03％。不同产地肉苁蓉中松果菊苷的含量不同（0．42％～1．52％）。结论此法简便、准确、重现性好,可用于该药材的质量控制。     

肉苁蓉药材与盐生肉苁蓉培养细胞的主要成分对比研究

目的研究肉苁蓉药材与盐生肉苁蓉培养细胞的苯乙醇苷类成分差异。方法利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和HPLC技术进行成分对比分析。结果FTIR的分析结果表明，盐生肉苁蓉培养细胞的红外指纹谱图与肉苁蓉药材具有一定相似性；HPLC的分析结果表明，盐生肉苁蓉细胞中所含的主要成分和肉苁蓉药材相似，只是含量有差异。结论从整体上看，盐生肉苁蓉培养细胞中所含成分种类较多，且大部分含量较高，其中洋丁香酚苷(类叶升麻苷)和松果菊苷的含量大幅度高于肉苁蓉药材。     

健脑丸质量控制研究

目的：对健脑丸的质量控制标准进行研究。方法：采用薄层色谱法对健脑丸中丹参、天麻进行定性鉴别。采用高效液相色谱法测定肉苁蓉中的松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量。结果：用薄层色谱法鉴定出天麻素和丹参酮ⅡA的存在。采用HPLC法测定了该丸剂中毛蕊花糖苷的含量,方法精密度、稳定性、重复性良好,平均回收率为：松果菊苷97%,毛蕊花糖苷102%,RSD值为：松果菊苷0.91%,毛蕊花糖苷1.86%。结论：该方法简便、准确、重复性好,能有效控制健脑丸的质量。     

人工栽培与野生肉苁蓉有效成分及种子质量研究

目的:研究人工栽培与野生肉苁蓉有效成分及种子质量,为肉苁蓉资源的合理开发与利用提供理论依据。方法:采用高效液相色谱法测定松果菊苷和毛蕊花糖苷含量,通过筛选法、浸泡法及种子发芽实验分别进行种子分级、种子饱满度测定及种子萌发率测定。结果:人工栽培与野生肉苁蓉有效成分均高于中国药典水平,但人工栽培肉苁蓉松果菊苷含量(2.31%)显著高于野生含量(1.14%),而人工栽培肉苁蓉毛蕊花糖苷含量(0.05%)显著低于野生含量(0.43%);野生肉苁蓉种子质量优于人工栽培肉苁蓉种子质量。结论:人工栽培与野生肉苁蓉有效成分及种子质量存在较大差异,应加强对野生肉苁蓉的引种工作,特别是对优良种质资源的引种、开发和保存,以有效保护肉苁蓉资源及实现资源的可持续利用。     

加味龟鹿二仙膏质量标准研究

目的:建立加味龟鹿二仙膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对加味龟鹿二仙膏中的肉苁蓉、枸杞子、党参进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对松果菊苷进行含量测定。结果:肉苁蓉、枸杞子、党参的薄层鉴别斑点清晰、专属性强;松果菊苷在4.58~91.6μg/mL之间呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5),平均回收率为98.59%,RSD为0.22%(n=9)。结论:该质量标准准确、可靠,能有效控制加味龟鹿二仙膏的质量。     

鲜品肉苁蓉渣和汁有效成分的比较

目的鲜品肉苁蓉渣和汁有效成分量比较及其药用研究初探。方法采用硫酸-苯酚法测定肉苁蓉多糖的量;采用大孔树脂-紫外分光光度法测定了苯乙醇苷的量;采用《中国药典》肉苁蓉项下HPLC方法,测定了松果菊苷和毛蕊花糖苷的量。结果以肉苁蓉多糖、苯乙醇总苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷主要有效成分的量为综合评价指标,鲜品肉苁蓉渣中除多糖的量与汁中相差不明显,其余有效成分的量均明显高于其汁,最大相差依次为8、785、230倍。鲜品肉苁蓉渣部分经冷冻后多糖的量显著升高,苯乙醇总苷的量明显下降。结论鲜品肉苁蓉渣部分与其汁相比药用性更高,为鲜品肉苁蓉科学用药及其保健食品开发提供依据。同时,鲜品肉苁蓉渣部分经冷冻后有效成分的量明显改变,为鲜品肉苁蓉的储存提供了参考。     

松果菊属3种植物的理化分析

对松果菊属紫花松果菊、狭叶松果菊,淡紫松果菊3个种进行了理化分析研究。方法 采用HPLC、TLC法对3种松果菊的松果菊苷进行了定性和定量分析;采用紫外扫描仪,对3种松果菊进行了紫外吸收光谱的测定。结果 3种松果菊根和茎叶中均含松果菊苷成分,但紫花松果菊的含量最低。结论 通过理化分析表明,3种松果菊之间的成分组成存在着差异,特别是紫花松果菊根与另两种根之间存在显著差异。该结果为进一步合理开发利用松果菊资源提供了参考资料。     

松果菊苷药理学作用的新进展

松果菊苷又名紫锥花苷、海胆苷英,是一种从管花肉苁蓉茎中分离出来的天然化合物。现代医学研究表明松果菊是由亲水性多糖苷组成的苯丙素和苯乙醇糖苷连接到一个三糖的部分所组成,其主要的化学成分是苯乙醇苷。松果菊苷具有许多的生物学效应,如神经保护作用、肝脏的保护作用、抗肿瘤、抗凋亡、抗衰老、免疫调节和促进生殖的作用,同时还有降糖、降脂、促进骨形成以及抗肺动脉高压以及预防动脉粥样硬化的作用,本文就最近几年松果菊苷的药理学作用及其吸收代谢方面的研究进展加以阐述。     

苁黄补肾胶囊质量标准的研究

目的 建立苁黄补肾胶囊的质量标准。方法 采用TLC法鉴别处方中的肉苁蓉、熟地黄、菟丝子、五味子;用HPLC法测定肉苁蓉中的松果菊苷。其中HPLC法采用Kromasil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱温：30 ℃;流动相为甲醇-乙腈-1％醋酸溶液(13∶10∶77);体积流量：1 mL/min;检测波长为334 nm。结果 TLC鉴别色谱特征斑点明显;松果菊苷在0.48～1.92 μg存在良好的线性关系,平均回收率为99.1%,RSD为1.52%。结论 所建立的TLC和HPLC法专属性强,重复性好,可用于苁黄补肾胶囊的质量控制。     

不同产地管花肉苁蓉中有效成分的定量分析

目的建立管花肉苁蓉药材中松果菊苷、毛蕊花糖苷和半乳糖醇的HPLC测定方法。方法采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱,甲醇-0.1%甲酸梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,在检测波长330nm、柱温为35℃的条件下对松果菊苷和毛蕊花糖苷的量进行测定;采用Prevail Carbohydrate ES聚合凝胶柱色谱柱,以乙腈-水(77∶23)为流动相,体积流量为0.7mL/min,以ELSD为检测器,在柱温为25℃的条件下对半乳糖醇进行测定。结果松果菊苷的平均回收率为100.29%,RSD为1.32%;毛蕊花糖苷的平均回收率为102.10%,RSD为1.14%;半乳糖醇的平均回收率为99.42%,RSD为2.83%。结论本方法对管花肉苁蓉质量标准的制定和栽培基地的选择具有很好的参考价值。     

两种金属离子对黄芩愈伤组织培养及其次生代谢物积累的影响

目的研究Fe%^2＋、Mn^2＋离子对黄芩组织培养过程中组织生长量和次生代谢物积累的影响。方法进行黄芩愈伤组织的诱导、分化，然后改变MS培养基中Fe^2＋、Mn^2＋的含量进行继代培养；提取所得黄芩愈伤组织中的黄酮类化合物，分别用紫外可见分光光度法和高效液相色谱法测定了总黄酮和黄芩苷的含量。结果有利于黄芩愈伤组织生长的金属离子浓度为：Fe^2＋0.15mmol/L、Mn^2＋0.2mmol/L；增大Mn^2＋浓度到1.5mmol/L有利于黄酮类次生代谢物生物合成；而高浓度的Fe^2＋有利于黄芩苷的生物合成。结论通过调节金属离子含量可以有效的提高黄芩愈伤组织生长率并显著提高其有效成分的含量。     

狭叶松果菊 3-脱氢奎尼酸合成酶基因 cDNA 的克隆及其组织表达特征

目的 克隆狭叶松果菊 〖WTBX〗Echinacea angustifolia 3-脱氢奎尼酸合成酶基因并考察其在各个组织中的表达情况。方法 采用快速扩增 cDNA 末端技术,以狭叶松果菊组培苗 cDNA 为模板,克隆出狭叶松果菊 3-脱氢奎尼酸合成酶基因全长序列并通过半定量 RT-PCR 分析其在不同器官中的表达模式。结果 克隆到的基因 (命名为EanaroB) 全长为 1 424 bp,编码一个 442 个氨基酸残基组成的多肽。其氨基酸序列与植物来源的 3-脱氢奎尼酸合成酶同源性都在 80% 左右。将得到的序列提交 Genbank,序列号为EU293857。半定量 RT-PCR 结果表明,狭叶松果菊EanaroB 基因在狭叶松果菊的根、茎、叶、花中均有表达,但花和叶中的表达量较高,在根和茎中较少。结论 采用 RACE 和 PCR 的方法从狭叶松果菊中克隆出了咖啡酸类化合物生物合成途径上的一个基因 EanaroB,为进一步研究咖啡酸类衍生物生物合成代谢途径提供一定依据,为今后利用基因工程技术提高咖啡酸类衍生物,包括苯乙醇苷类物质松果菊苷的代谢工程打下一定基础。     

肉苁蓉枸杞咀嚼片质量标准研究

目的研究肉苁蓉枸杞咀嚼片的质量控制方法。方法采用薄层色谱(TLC)法对肉苁蓉枸杞咀嚼片中的肉苁蓉、枸杞子进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对肉苁蓉主要成分松果菊苷、毛蕊花糖苷进行定量分析,色谱柱为Hypersil BDS C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液,流速1 mL/min,检测波长330 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果肉苁蓉和枸杞子的TLC特征斑点清晰、专属性强;松果菊苷和毛蕊花糖苷分别在41.8~418.0μg/mL(r=0.999 9)和40~400μg/mL(r=0.999 9)范围内线性关系良好,回收率分别为99.58%(RSD=0.85%)、99.31%(RSD=1.13%)。结论所建立的定性和定量分析方法能有效控制该咀嚼片的质量。     

肉苁蓉苯乙醇苷类成分抗骨质疏松作用机制研究进展

肉苁蓉是一种珍贵的滋补类药材,素有"沙漠人参"的美誉,具有极高的药用价值和食用价值.药理学研究已确认肉苁蓉具有抗氧化、抗炎、抗疲劳、抗衰老、抗骨质疏松、润肠通便、保肝、免疫调节等药理作用,其中苯乙醇苷类是其主要活性成分之一.近年来,肉苁蓉苯乙醇苷类成分抗骨质疏松的作用得到广泛关注,松果菊苷和毛蕊花糖苷是其代表性成分,笔...     

松果菊苷通过IL-33/STAT轴对脓毒症大鼠急性肾损伤的保护作用及机制研究

目的 探究松果菊苷对脓毒症大鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用,并探讨可能机制。方法 55只SPF级SD大鼠中随机选择10只设为对照组;剩余45只大鼠建立脓毒症模型,成功40只,并将其随机分为模型组、松果菊苷低剂量组、松果菊苷中剂量组、松果菊苷高剂量组,每组各10只。松果菊苷低、中、高剂量组尾静脉注射松果菊苷(分别为25、50、100 mg/kg),对照组、模型组注射等量DMSO,术后6、12、18 h分别给药一次。流式细胞术检测外周血Th1、Th2构成比;检测血清炎症因子;检测血清肾功能指标;HE染色观察肾组织病理学变化;免疫印迹法检测肾组织白介素-13(IL-13)、Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导及转录激活子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示,对照组肾组织结构完整,形态正常;模型组肾组织结构严重破坏,肾小球基质增多、系膜区增厚,可见大量炎性细胞浸润;松果菊苷低、中、高剂量组系膜区增厚减轻,炎性细胞浸润减少,中、高剂量组改善更加明显。与模型组比较,松果菊苷低、中、高剂量组外周血Th2构成比、血清IL-6、IL-8、尿素氮...     

松果菊苷对阿尔茨海默病转基因小鼠脑内氧化应激及β-淀粉样蛋白含量的影响

目的 研究松果菊苷抑制阿尔茨海默病转基因小鼠脑内氧化应激并减少β-淀粉样蛋白含量的作用.方法 实验小鼠分为APP/PS1转基因小鼠(AD模型鼠)和松果菊苷治疗组.对照组给予生理盐水,治疗组小鼠给予松果菊苷(20 mg/kg/天)2个月.应用水迷宫实验方法检测两组小鼠的学习记忆能力;利用免疫荧光技术检测Aβ在AD模型鼠及...     

紫外分光光度法测定松果菊提取物中多酚

松果菊Echinacea purpurea(L.)Moench为菊科松果菊属药用植物,原产北美,是印第安人的传统药材。由于其具有显著的抗感染与免疫促进作用,近年来在西方应用广泛,成为闻名世界的“免疫”草药。国内外有关松果菊的化学成分的研究报道较多,证实其含有多糖、多酚、咖啡酸衍生物、挥发油、烷基酰胺、类黄酮等成分[1~3]。目前我国学者对松果菊的药用研究和质量控制越来越重视,已有报道对松果菊中的菊苣酸、松果菊苷和挥发油进行测定[4~7]。本实验采用紫外分光光度法测定了松果菊提取物中的多酚,进一步完善了松果菊的质量标准研究。1材料与仪器松果…