艾灸治疗对兔KOA软骨损伤及TNF-α、TGF-β1和IGF-1表达调节作用的实验研究

目的：探讨艾灸对膝关节骨性关节炎（KOA）的治疗机理。方法：通过兔膝关节注射木瓜蛋白酶制造KOA模型,经艾灸和药物治疗6周后,病理组织评分判断软骨损伤情况,并采用定量图像分析技术检测膝关节软骨中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、转化生长因子β1（TGF—β1）和胰岛素样生长因子1（IGF—1）表达的改变。结果：艾灸组软骨病理评分和TNF-α表达黑度均低于模型组,差异有统计学意义,而TGF—β1和IGF-1的表达黑度与模型组比较差异无统计学意义、艾灸组疗效与药物组相似。结论：艾灸能够减轻KOA软骨破坏及关节病损,其对KOA的治疗机制可能主要通过减少炎症细胞因子TNF—α的破坏作用来实现。     

针刺结合雷火灸对膝骨关节炎大鼠MMP-3、TIMP-1及TGF-β1的影响（英文）

目的:观察针刺结合雷火灸对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨针刺结合雷火灸治疗KOA的作用机制。方法:Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,根据随机数字表法随机分成空白组、模型组和针灸组,每组10只大鼠。模型组和针灸组予木瓜蛋白酶右后膝关节注射造模。治疗2星期后,采用酶联免疫吸附法测定各组大鼠滑膜MMP-3、TIMP-1的含量,采用Motic B5显微摄像系统测定TGF-β1的含量。结果:模型组软骨组织中MMP-3和TIMP-1的含量较空白组显著增加(均P0.01);针灸组MMP-3和TIMP-1含量低于模型组,组间差异有统计学意义(均P0.05);针灸组MMP-3和TIMP-1含量高于空白组,组间差异有统计学意义(均P0.05)。模型组软骨组织中TGF-β1的含量较空白组显著降低(P0.01),针灸组TGF-β1含量较模型组升高(P0.05),但低于空白组,组间差异有统计学意义(P0.05)。结论:针刺结合雷火灸能有效平衡KOA模型大鼠中MMP-3和TIMP-1的异常表达,并且对TGF-β1具有一定的上调功能,这可能是针刺结合雷火灸治疗KOA的作用机制之一。     

针刀结合手法对膝关节骨性关节炎患者关节液中MMP-3和TIMP-1的影响

目的:探讨针刀结合手法对膝关节骨性关节炎(KOA)患者的作用机制。方法:将100例膝关节骨性关节炎患者随机分为观察组与对照组,每组50例。观察组采用针刀结合手法治疗。对照组采用口服双氯芬酸片治疗。观察两组治疗前后关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)代谢的变化。结果:治疗后两组关节液中MMP-3、TIMP-1含量均呈下降趋势,与治疗前比较,差异均有统计学意义(P0.01,P0.05)。与对照组比较,观察组下降明显,且接近正常值水平,两组间差异有统计学意义(均P0.05)。结论:针刀结合手法治疗能使膝关节骨性关节炎患者关节液中MMP-3、TIMP-1含量下降,MMPs/TIMPs趋于平衡,从而有可能让软骨退行性变的部分因素得到控制,抑制软骨基质的破坏,从而减轻关节软骨的降解与破坏。这可能是本法治疗KOA的机制之一。     

针刺对膝骨关节炎大鼠MMP-3、TIMP-1及TGF-β1的影响

目的:研究针刺对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨针刺治疗KOA的作用机制。方法:选用SD大鼠30只,随机分成空白组、模型组和治疗组,模型组和治疗组采用木瓜蛋白酶右后膝关节注射的方法制备大鼠KOA模型,针刺治疗2周后测定各组大鼠滑膜MMP-3、TIMP-1及TGF-β1的含量。结果:模型组软骨组织中MMP-3和TIMP-1含量较空白组显著增多(P0.01),治疗组MMP-3和TIMP-1含量较模型组显著降低(P0.05),但仍然略高于空白组;模型组软骨组织中TGF-β1含量较空白组显著降低(P0.01),治疗组TGF-β1含量较模型组增多(P0.05),但仍略低于空白组。结论:针刺能有效平衡KOA模型大鼠中MMP-3和TIMP-1的异常表达,并且对TGF-β1具有一定的上调功能,这可能是针刺治疗KOA有效的机制之一。     

温针灸对兔膝骨关节炎模型基质金属蛋白酶及组织形态学影响的实验研究

目的:观察温针灸对膝骨关节炎模型血清基质金属蛋白酶及软骨组织形态学的影响,探讨温针灸治疗膝骨关节炎在软骨代谢方面的作用机制。方法:将新西兰兔随机均分为空白组、模型组、温针灸组。采用膝关节前交叉韧带切断术制备膝骨关节炎模型,造模1周后温针灸患侧膝关节"犊鼻"、"后三里"穴2个疗程,采用ELISA法测定各组血清中MMP-1、MMP-3、TIMP-1的浓度,股骨内髁行HE染色。结果:模型组MMP-1浓度、MMP-1/TIMP-1比值均高于空白组(P﹤0.05),MMP-3浓度低于空白组(P﹤0.05),TIMP-1变化不明显(P﹥0.05),HE染色示明显的病理损伤;与模型组比较温针灸降低了MMP-1的浓度与MMP-1/TIMP-1之比值,升高MMP-3的浓度,差异有统计学意义(P﹤0.05);且改善了软骨病理损伤。结论:温针灸能够提高膝骨关节炎软骨的自身修复能力,其软骨保护作用可能是通过调节异常的MMP-1、MMP-3与MMP-1/TIMP-1比值而实现的。     

三联疗法对兔膝骨性关节炎软骨MMP-1,MMP-13及TIMP-1 mRNA的影响

目的:观察模型兔膝骨性关节炎软骨中MMP-1、MMP-13及TIMP-1 mRNA表达水平及"三联疗法"对它的影响.方法:将56只大耳白兔随机取8只作正常对照组,48只进行手术方法制作兔膝OA模型.8周后待兔膝骨性关节炎模型建立后,随机将48只追模动物分为模型组、中药薰洗组、功能锻炼组、手法弹拨组、扶他林组、三联疗法组.各治疗组分别进行4周治疗后,取股骨内髁内侧退变软骨用反转录-多聚酶链反应的方法检测各治疗组对软骨中MMP-1、-13及TIMP-1 mRNA表达的影响.结果:正常组软骨中MMP-1、MMP-13及TIMP-1 mRNA表达较低,模型组软骨中MMP-1、MMP-13的mRNA表达明显增高,TIMP-1的mRNA检测为阴性表达.各治疗组软骨中MMP-1、MMP-13的mRNA表达降低,三联疗法组比其它治疗组降低显著(P<0.05),各治疗组软骨中TIMP-1的mRNA表达极低,且各治疗组比较差异无统计学意义.结论:各治疗组均能抑制软骨中MMP-1、-13的mRNA表达,不同程度减轻兔膝骨性关节炎软骨的退变,各治疗组对软骨中TIMP-1的mRNA表达无影响.三联疗法组与其它治疗组在抑制MMP-1、MMP-13在兔膝骨性关节炎软骨中比较差异有统计学意义(P<0.05),说明"三联疗法组"在治疗兔膝骨性关节炎抑制基质胶原溶解破坏减轻软骨退变优于其它治疗组,它对兔膝骨性关节炎的治疗作用机制之一可能与抑制MMP-1、-13表达有关.     

温针灸对膝骨关节炎大鼠软骨组织ROCK/LIMK1/Cofilin通路的影响

目的:观察温针灸对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞骨架蛋白Rho相关蛋白激酶(ROCK)/单丝氨酸蛋白激酶1(LIMK1)/丝切蛋白(Cofilin)的影响,探讨针灸防治KOA的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、艾灸组和温针灸组,每组24只。采用右膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶制备KOA大鼠模型。针刺组、艾灸组和温针灸组于造模第1天开始,取右侧"内膝眼""外膝眼"和"足三里"穴,分别采用针刺、艾灸和温针灸治疗,20 min/次,1次/d,共治疗21 d。采用游标卡尺测量右膝关节宽度,排水法检测大鼠右侧足部体积,采用蛋白免疫印迹法检测右侧膝关节软骨组织ROCK、LIMK1和磷酸化LIMK1(p-LIMK1)、Cofilin、磷酸化Cofilin(p-Cofilin)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠右膝关节宽度增加(P0.05),第6天起右侧足部体积增大(P0.01),Markin评分升高(P0.05),右侧膝关节软骨组织ROCK、p-LIMK1和p-Cofilin蛋白表达水平升高(P0.01)。与模型组比较,针刺组、艾灸组和温针灸组大鼠右膝关节宽度降低(P0.05),第12天起右侧足部体积减小(P0.05),Markin评分降低(P0.05),右侧膝关节软骨组织ROCK、p-LIMK1和p-Cofilin蛋白表达水平降低(P0.05)。与针刺组和艾灸组比较,温针灸组大鼠右膝关节宽度降低(P0.05),第15天起右侧足部体积减小(P0.05),Markin评分降低(P0.05),右侧膝关节软骨组织ROCK、p-LIMK1和p-Cofilin蛋白表达水平降低更明显(P0.05)。结论:相对于针刺和艾灸,温针灸更能有效调节KOA大鼠关节炎性损伤状况,其机制可能与降低软骨组织骨架蛋白ROCK、p-LIMK1和p-Cofilin蛋白表达有关。     

丹参注射液对体外培养兔膝关节软骨细胞MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:观察丹参注射液对体外培养兔膝关节软骨细胞MMP-9、TIMP-1表达情况的影响。方法:取12只6月龄新西兰大白兔关节软骨作体外细胞培养,培养后软骨细胞随机分为正常组、模型组、玻璃酸钠组、丹参组4组。采用Western blot法测定软骨细胞内MMP-9、TIMP-1蛋白表达,RT-PCR检测软骨细胞内MMP-9 mRNA、TIMP-1mRNA相对表达量。结果:Western Blot检测结果:相对正常组,OA模型组的软骨细胞组织中MMP-9、TIMP-1蛋白表达明显上调(P0.01);玻璃酸钠组MMP-9、TIMP-1蛋白表达低于空白模型组(P0.05),丹参组MMP-9、TIMP-1蛋白表达低于空白模型组(P0.01);丹参组MMP-9蛋白表达低于玻璃酸钠组,TIMP-1蛋白表达高于玻璃酸钠组。荧光定量PCR检测结果:与空白组相比,OA模型组家兔关节软骨组织MMP-9 mRNA相对表达量显著升高(P0.01),MMP-9/TIMP-1失衡;治疗后,与OA模型组相比,玻璃酸钠组、丹参组MMP-9mRNA相对表达量显著降低(P0.01),TIMP-1mRNA相对表达量显著升高(P0.01);与玻璃酸钠组相比丹参组MMP-9mRNA相对表达量显著降低(P0.01),TIMP-1mRNA相对表达量显著升高(P0.01)。结论:丹参注射液能够有效纠正MMP-9和TIMP-1在骨性关节炎软骨组织中异常表达,减轻软骨损伤,有效治疗骨性关节炎。     

火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎鼠关节形态及软骨LOXL2的影响

目的:探讨火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)大鼠行为学、关节形态及软骨中赖氨酰氧化酶相关蛋白2(LOXL2)影响性。方法:选择30只健康雄性大鼠,10只作为对照不作任何处理。20只大鼠建立KOA模型,成模后随机分成2组,分别予普通针刺和火针膝周密刺,1次/3 d,连续6次。观察各组大鼠Leauesne MG评分、关节软骨细胞情况,外周血及关节软骨转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、LOXL2水平变化。结果:治疗后火针组Leauesne MG评分中的局部疼痛刺激反应、步态、关节活动范围、关节肿胀度较对照组、模型组差异有统计学意义(P<0.05)。血清及关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α含量水平显著低于模型组(P<0.05),LOXL2显著高于模型组(P<0.05)。火针组电镜下软骨细胞形状规则、细胞核完整且饱满,微绒毛少量存在,内质网丰富,有散在的染色质。结论:火针膝周密刺能减轻K0A关节软骨损伤,降低炎性反应,改善软骨LOXL2水平,这可能是火针治疗KOA一个作用机制。     

艾灸对膝骨关节炎兔软骨Wnt信号通路及血清炎性因子的影响

目的：基于Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路探讨艾灸干预膝骨关节炎（KOA）模型兔的可能作用机制。方法：将24只新西兰兔随机分为正常组、模型组及艾灸组，每组8只。除正常组外，其余2组兔采用右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶水溶液的方法制作KOA模型。造模成功后，艾灸组兔每日予艾条悬灸右膝犊鼻穴20 min，连续治疗21 d ；正常组和模型组正常饲养，不给予任何干预措施。干预结束后次日，各组兔麻醉后心脏采血，采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；取各组兔右膝关节股骨端软骨，采用苏木精-伊红（HE）染色法观察各组兔膝关节软骨的组织形态，采用蛋白免疫印迹（Western blot）法和实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）法分别测定各组兔膝关节软骨组织中Wnt信号蛋白-3α（Wnt3α）、β-连环蛋白（β-catenin）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）蛋白及mRNA的表达水平，采用免疫组化法检测各组兔膝关节软骨组织中IL-1β、TNF-α的表达，并分析其积分光密度（IOD）。结果：模型组兔血清IL-1β、TNF-α明显高于正常组（P＜0.05），艾灸组上述指标明显低于模型组（P＜0.05）。与正常组比较，模型组兔膝关节软骨细胞明显变性，软骨组织损伤严重；艾灸组兔膝关节软骨结构较为完整，软骨细胞数目较多且分布较均匀，细胞形态较为正常。模型组兔膝关节软骨组织中Wnt3α、β-catenin、MMP-13蛋白和mRNA相对表达量均明显高于正常组（P＜0.05），艾灸组兔膝关节软骨组织中上述指标蛋白和mRNA相对表达量均明显低于模型组（P＜0.05）。模型组兔膝关节软骨组织IL-1β、TNF-α蛋白表达显著高于正常组（P＜0.05），艾灸组兔膝关节软骨组织上述蛋白表达明显低于模型组（P＜0.05）。结论：艾灸犊鼻穴可下调KOA模型兔血清及软骨组织中炎性因子的表达，有效缓解膝关节软骨组织损伤，其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。     

舒筋活血止痛水外擦拍打对兔膝骨性关节炎软骨组织MMP-1表达的影响

目的:观察舒筋活血止痛水外擦拍打治疗对兔膝骨性关节炎(KOA)软骨组织MMP-1表达的影响。方法:随机将15只新西兰大白兔分为正常组、模型组、拍药组,采用前交叉韧带切断术(ACLT),制作KOA模型。术后6周拍药组进行舒筋活血止痛水外擦拍打干预。干预2周后处死动物,采用HE染色观察软骨形态学改变,并进行改良Mankin评分,免疫组化检测MMP-1的表达情况。结果:模型组改良Mankin评分明显增高,拍药组改良Mankin评分低于模型组,差异有统计学意义(P0.01);模型组MMP-1阳性表达显著增强,拍药组MMP-1阳性表达较模型组降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论:舒筋活血止痛水外擦拍打治疗可明显降低兔KOA软骨组织MMP-1的表达,延缓兔KOA的进展。     

补肾壮筋汤对肝肾亏虚型膝骨关节炎患者MMP-1及TIMP-1的干预作用

目的:观察补肾壮筋汤对肝肾亏虚型膝骨关节炎(KOA)患者血清及关节液中金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的干预作用。方法:将60例肝肾亏虚型KOA患者分为2组,对照组30例采用口服硫酸氨基葡萄糖胶囊治疗,治疗组30例在对照组治疗的基础上加用补肾壮筋汤治疗,疗程均为30d。采用Elisa法检测,2组患者治疗前后血清及关节液中MMP-1、TMP-1含量;采用Lequesne指数对临床症状进行评分,并评定综合疗效。结果:总有效率治疗组为93.3%,高于对照组的86.7%,差异有统计学意义(P0.05);2组血清、关节液中MMP-1含量治疗后均低于治疗前(P0.05),而治疗组减少更明显(P0.05);治疗组血清、关节液TIMP-1含量治疗后高于治疗前(P0.05),且高于对照组治疗后(P0.05)。结论:补肾壮筋汤可降低KOA患者血清、关节液MMP-1的活性,并提高TIMP-1的活性,缓解关节软骨退变,从而保护关节软骨。     

针刀松解法对膝骨性关节炎兔软骨基质金属蛋白酶-3和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响

目的观察针刀松解法对膝骨关节炎(KOA)兔软骨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)的影响,探讨针刀治疗KOA的机制。方法将40只清洁级6月龄健康新西兰兔随机取10只为空白组,剩余30只统一造模,关节制动方法制造KOA模型,造模成功后将30只兔随机分为模型组、针刀组和电针组,每组10只。针刀组以膝关节内外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏、横剥法进行针刀松解,每星期1次,共治疗3次;电针组取阴陵泉、阳陵泉、内膝眼、犊鼻穴,电针频率2~100 Hz,强度为3 m A,每次电针20 min,每星期治疗3次,共治疗3星期。光镜观察软骨形态改变,Western blot法检测膝关节软骨Col-Ⅱ、MMP-3蛋白表达水平。结果 HE染色模型组家兔膝关节滑膜存在不同程度增生、水肿,光镜下见模型组关节软骨呈明显退行性变。电针组和针刀组软骨组织损伤减轻,且有修复趋势。针刀组兔膝关节软骨破坏程度明显减轻。针刀组Col-Ⅱ蛋白表达较模型组明显升高(P0.01);针刀组Col-Ⅱ蛋白表达与电针组比较,差异具有统计学意义(P0.05);模型组Col-Ⅱ蛋白表达水平降低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P0.05)。模型组MMP-3蛋白表达较空白组明显升高(P0.01);针刀组MMP-3蛋白表达较空白组降低,但无统计学意义(P0.05);针刀组MMP-3蛋白表达与模型组和电针组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论针刀松解治疗KOA兔,能够使软骨MMP-3水平下降,Col-Ⅱ表达水平升高,从而阻抑软骨退变,起到治疗作用。     

补肾活血方对膝骨关节炎大鼠MMP-3、MMP-13及OPG/RANKL轴的影响

目的:检测不同质量分数的补肾活血方对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠模型膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化受体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)轴相关因子mRNA表达的影响,探讨补肾活血方对KOA大鼠模型骨重建及治疗作用的机制。方法:采用随机数字表法将48只Wistar大鼠分为正常对照组,模型对照组,依托考昔片组,补肾活血方中药小、中、大剂量组6组,每组8只。采用木瓜蛋白酶膝关节腔内注射法制备KOA大鼠模型。确认造模成功后,依托考昔片组给予依托考昔3.125μg/g混悬液灌胃,补肾活血方小、中、大剂量组分别给予补肾活血方0.52,1.04,2.08 g/kg混悬液灌胃,正常对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水灌胃,1d1次,连续4周。给药结束后,对KOA模型鼠进行关节软骨退行性改变组织学分级评分(Mankin′s评分),采用实时荧光定量核酸扩增检测系统检测关节软骨内MMP-3、MMP-13、OPG、RANKL的mRNA表达水平。结果:KOA造模后大鼠膝关节软骨Mankin′s评分较正常对照组升高,差异有统计学意义(P0.05);经各治疗组药物治疗后,评分有所下降(P0.05)。模型对照组大鼠MMP-3、MMP-13及RANKL的mRNA表达较正常对照组显著上调,而OPG mRNA有所下降(P0.05);经依托考昔及中药治疗后,MMP-3、MMP-13及RANKL的mRNA表达有不同程度下降,其中大剂量组与依托考昔片组相近;经依托考昔及中、大剂量补肾活血方治疗后,OPG mRNA表达有所上升(P0.05)。结论:补肾活血方能提高模型鼠膝关节软骨内OPG的mRNA表达,降低MMP-3、MMP-13和RANKL的mRNA表达水平,可能是通过调节关节腔内的骨代谢平衡来改善关节软骨损伤、延缓骨关节炎病情进展的。     

针砂马准灸对兔膝骨性关节炎软骨uPA、uPAR、PAI-1的影响

目的观察针砂马准灸对兔KOA模型软骨细胞中uPA、uPAR、PAI-1表达水平的影响,探究回医针砂马准灸治疗KOA的作用机理。方法 6月龄新西兰大耳兔40只,随机分为针砂马准灸组、艾灸组、模型组、空白组,每组10只。采取右后肢伸直位石膏管型固定法制备兔KOA模型,针砂马准灸组给予针砂马准灸治疗,艾灸组给予膝关节局部艾灸治疗,模型组每日在兔固定器上固定15分钟,空白组不予任何处理,6天为1疗程,共治疗2个疗程。治疗结束后采用HE染色法观察各组软骨的病理改变,并进行C.Colombo评分;RT-PCR及Western blot法检测各组关节软骨中uPA、uPAR、PAI-1 mRNA及蛋白的表达。结果 HE染色显示模型组兔KOA软骨表面大量细胞崩解、潮线不完整缺损、软骨下血管增生明显;与空白组比较,模型组C.Colombo评分升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,针砂马准灸组及艾灸组C.Colombo评分降低,差异有统计学意义(P0.05)。与空白组比较,模型组KOA软骨细胞中uPA、uPAR蛋白及mRNA的表达升高,PAI-1蛋白及mRNA的表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,针砂马准灸组及艾灸组兔KOA软骨细胞中uPA、uPAR蛋白及mRNA的表达降低,PAI-1蛋白及mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论针砂马准灸治疗膝骨性关节炎的机制可能为通过激活uPA系统,提高PAI-1的表达,进一步抑制uPA、uPAR的表达,达到治疗作用。     

不同针灸方法对KOA模型大鼠软骨损伤生物标志物MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响

摘要：目的：观察比较不同针灸方法对KOA模型大鼠MMP-1、MMP-3、TIMP-1的影响。方法：将体重180-200g的SPF级雄性SD大鼠50只,适应性饲养7天后随机分为正常组（N）、模型组（M）、温针组（W）、电针组（D）、手针组（S）五组,每组10只。N组不作任何处理,其余四组腹腔注射戊巴比妥钠（1%,0.04ml/g）麻醉后,1mg单碘乙酸盐（MIA）溶于50μL 9%的无菌生理盐水,右膝关节注射造模,周期14天,造模前后进行行为学Lequesne MG评分检测。N、M组不作任何干预,其余三组对鹤顶、阳陵泉穴分别进行针刺、电针、温针干预,手针组0.25*25mm针灸针,刺入约5mm平补平泻手法,200 r/min,1min,留针20 min,10 min行针1次;电针组平补平泻后接电针,疏波,1mA,2Hz,20min/次;温针组平补平泻后,将直径5mm艾柱置于针柄,20min/次;三组均隔天干预,共28天。干预前后进行行为学机械刺激回缩阈值检测,28天后戊巴比妥钠麻醉,生理盐水心脏灌注取关节软骨和关节进行Western blot、免疫组化检测。结果：行为学Lequesne MG评分检测显示,造模前各组大鼠膝关节评分差异无统计学意义（P>0.05）,造模后除N组外,其余四组评分显著高于造模前,差异有统计学意义（P<0.05）。机械刺激回缩阈值检测显示,干预前M、W、D、S组与N组相比回缩阈值均降低,其结果有统计学意义（P<0.05）。干预后D组较M组升高,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测关节软骨显示,MMP-1阳性表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）;D组较W组降低（P<0.05）,MMP-3阳性表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）,D组较S、W组降低（P<0.05）;T1MP-1阳性表达N、M、W、S组较D组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,S组较M组升高（P<0.05）。Western blot检测软骨显示,MMP-1蛋白表达M组较N组升高（P<0.05）,D、W、S组较M组降低（P<0.05）,W组较D组升高（P<0.05）;MMP-3蛋白表达M组较N组升高（P<0.05）,D、S组较M组降低（P<0.05）;T1MP-1蛋白表达D、S、W组较M组升高（P<0.05）。其余结果无统计学意义（P>0.05）。结论：电针、温针、手针三种方法可有效改善KOA模型大鼠关节软骨损伤,可能通过升高TIMP-1的表达从而降低MMP-1、MMP-3的表达,相比之下电针更有利于调节上升TIMP-1且抑制MMP-1、MMP-3的表达,手针方法次之,温针效果则略逊于前两者。     

麝香乌龙丸联合双醋瑞因胶囊治疗风寒湿痹型膝骨关节炎疗效及对患者血清白细胞介素6、基质金属蛋白酶1、 基质金属蛋白酶3及金属蛋白酶组织抑制剂1水平的影响

目的观察麝香乌龙丸联合双醋瑞因胶囊治疗风寒湿痹型膝骨关节炎(KOA)临床疗效及对患者血清白细胞介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)水平的影响。方法将80例风寒湿痹型KOA患者按照随机数字表法分为2组。对照组40例予双醋瑞因胶囊治疗;治疗组40例在对照组治疗基础上加用麝香乌龙丸治疗。2组均治疗12周。观察2组治疗前后症状量化评分、膝关节压痛视觉模拟评分(VAS)、20 m步行痛VAS变化,以及治疗前后血清IL-6、MMP-1、MMP-3、TIMP-1水平变化。结果治疗后2组症状量化评分、膝关节压痛VAS、20 m步行痛VAS均降低(P 0.05),且治疗组均低于对照组(P 0.05)。治疗后2组血清IL-6、MMP-1、MMP-3水平均下降(P 0.05),且治疗组均低于对照组(P 0.05)。治疗后2组血清TIMP-1水平均升高(P 0.05),且治疗组高于对照组(P 0.05)。结论麝香乌龙丸联合双醋瑞因胶囊能减轻风寒湿痹型KOA患者关节症状,改善关节功能,可能与降低IL-6、MMP-1、MMP-3水平及提高TIMP-1水平相关。     

温针灸对不同时间点KOA模型兔关节软骨中MMP-1、MMP-13表达的影响

目的:观察温针灸(warming moxibustion)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨细胞中基质金属蛋白-1、13(matrix metalloproteinase-1、13,MMP-1、MMP-13)表达的影响,明确温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取70只新西兰大耳兔,其中10只作为空白对照组,剩余随机分为模型2周组、模型4周组、模型6周组、温针灸2周组、温针灸4周组、温针灸6周组。采用右后肢伸直位石膏固定制备KOA兔模型,模型2、4、6周组不予处理,温针灸2、4、6周组分别给予温针灸治疗2周,治疗结束后取材。采用免疫组化及RT-PCR检测各组治疗前后关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型2周组、模型4周组、模型6周组软骨中MMP-1、MMP-13表达明显升高(P0.05),且各组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。与相应模型组比较,温针灸治疗后,MMP-1、MMP-13的表达降低(P0.05),且各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:温针灸可降低KOA兔软骨中MMP-1、MMP-13的表达,说明温针灸治疗KOA可能与其抑制MMP-1、MMP-13的表达有关。     

艾灸不同腧穴对KOA大鼠不同组织TNF-α、MMP-13表达的影响

目的 观察艾灸不同腧穴对膝骨性关节炎（KOA）大鼠血清及关节软骨与滑膜TNF-α、MMP-13表达的影响,探讨艾灸不同腧穴对KOA大鼠的特异性调节作用。方法 将大鼠随机分为空白组（Con）、模型组（KOA）、模型+足三里艾灸组（ST36）、模型+阳陵泉艾灸组（GB34）、模型+犊鼻艾灸组（ST35）,每组8只。选择关节腔注射MIA溶液的方法制备KOA模型。ST36、GB34、ST35组每日艾灸30 min,7天为1个疗程,共3个疗程。分析各组大鼠的机械刺激痛阈值（MWT）,番红固绿染色及OARSI评分,血清、关节软骨与滑膜的TNF-α、MMP-13的表达情况。结果 与Con组比,KOA组足底机械痛阈值下降,OARSI评分、血清与关节软骨和滑膜TNF-α以及血清、关节滑膜MMP-13的表达均明显升高（P<0.001,P<0.05）。与KOA组比,3个治疗组足底机械痛阈值上升,OARSI评分、血清TNF-α和MMP-13、软骨TNF-α均降低（P<0.001,P<0.05）,软骨MMP-13无明显变化（P>0.05）;ST36组滑膜TNF-α和MMP-13低表...