常用纯合子转基因动物的筛选方法

纯合子转基因动物的筛选在转基因动物的培育和疾病模型的建立中具有重要意义。近年来,为了缓解转基因动物近交衰退的发生,研究人员采用分子生物学技术在常规育种的基础上提出多种新的方法来缩短纯合子转基因动物的筛选过程,本文对该方面的进展情况进行了综述。     

xylE转基因小鼠的繁育及其纯合子的筛选

目的 进行转基因小鼠的繁育与纯合子转基因小鼠的筛选。方法 选用致突变xylE转基因原代小鼠31号和9号进行传代，自F2起采用全同胞交配繁育至F3。结果 转基因能遗传且各世代转基因小鼠表型无异常，亦未见近交衰退现象。经不同世代载体回收和转化检验表明，靶基因功能未因世代传递而改变，并从3l号系的F3中筛选出一只纯合雄鼠，经与非转基因雌鼠交配所产4窝28只小鼠，PCR—southern检测均呈阳性，证实为～纯合子。结论 xylE转基因能遗传，4个世代内便筛选出纯合子小鼠，极大地缩短了育种周期。     

转基因动物研究进展

转基因动物就是指通过人工的方法将外源基因导入动物染色体基因组，使之稳定表达并能遗传给后代的一类动物。目前制备转基因动物的方法主要有显微注射法、反转录病毒感染法、胚胎干细胞法等。转基因动物的迅速发展使医药、农业、环保、生物材料等领域发生了巨大变革。本文主要对转基因动物的研究进展及其常用的各种转基因方法、转基因动物的应用和研究前景进行概述。     

转基因动物研究进展

转基因动物就是指通过人工的方法将外源基因导入动物染色体基因组,使之稳定表达并能遗传给后代的一类动物。目前制备转基因动物的方法主要有显微注射法,反转录病毒感染法,胚胎干细胞法等。转基因动物技术已广泛渗透于分子生物学、免疫学、生物制药、畜牧育种以及器官移植等研究领域中。本文通过对当前转基因动物的研究进展做出分析,以探讨当前转基因动物的发展方向和展望未来转基因动物的前景。     

乙型肝炎病毒纯合子转基因小鼠(adr 1.2)的培育

目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的HBV转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生founder小鼠以后,将正常小鼠与转基因小鼠交配,通过PCR,Dot-blotting,Southern-blotting等方法检测 HBV DNA在转基因小鼠体内的整合状况,阳性率达50％左右后,进行近亲交配。结果：共得到了7代HBV转基因小鼠,其中包含有整合HBV基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,并得到了整合有HBV基因的纯合子转基因小鼠。 目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的HBV转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生founder小鼠以后,将正常小鼠与转基因小鼠交配,通过PCR,Dot-blotting,Southern-blotting等方法检测 HBV DNA在转基因小鼠体内的整合状况,阳性率达50％左右后,进行近亲交配。结果：共得到了7代HBV转基因小鼠,其中包含有整合HBV基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,并得到了整合有HBV基因的纯合子转基因小鼠。 目的：通过遗传学育种使外源基因整合位点随机的HBV转基因小鼠成为单一整合位点的纯合子转基因小鼠。方法：产生founder小鼠以后,将正常小鼠与转基因小鼠交配,通过PCR,Dot-blotting,Southern-blotting等方法检测 HBV DNA在转基因小鼠体内的整合状况,阳性率达50％左右后,进行近亲交配。结果：共得到了7代HBV转基因小鼠,其中包含有整合HBV基因纯合子的转基因小鼠。结论：外源基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,并得到了整合有HBV基因的纯合子转基因小鼠。     

hApoE7转基因小鼠纯合子的培育和鉴定

目的：载脂蛋白E(apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质，并且与迟发型早老性痴呆(AD)相关。为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系，我们拟培育C57BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠。方法：将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配，仔代经PCR初筛，再行Southern杂交鉴定，杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数，纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍。经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57 BL/6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定。结果：Southern杂交鉴定出F1代转基因小鼠6只，F2代转基因小鼠7只，其中纯合子3只。将所得到的纯合子小鼠与正常的C57 BL/6小鼠交配，仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性。结论：通过培育C57 BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠，发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合。     

中药利尿药理实验动物筛选方法探讨

为保证利尿药理实验结果的科学性，在进行利尿药理实验时，要对实验动物进行筛选以确保其在排尿方面具有均一性。国内主要采用Aston筛选动物的方法，国外则普遍应用Kau的方法。鉴于Kau的方法具有样本小、易重复、实验周期长的优点，更适合中药利尿药理学的研究，建议国内采用该方法进行中药利尿药理实验的动物筛选。     

建立转基因动物的方法及其进展

本文从显微注射法、逆转录病毒感染法、胚胎干细胞法、精子载体法和体细胞核移植法等5个方面回顾了建立转基因动物的方法,同时综述了其研究进展,并对其前景进行了展望。     

转基因动物制备方法及其研究进展

转基因动物制备方法及其研究进展李华，王太一（实验动物部）关键词基因工程，动物，方法转基因动物指以人工的方法在动物的基因组内稳定地整合进外源基因的一类动物。它已成为考察发育基因的调节机理、致癌基因的作用和免疫系统内部错综复杂的细胞反应的有效工具，并为精...     

建立转基因动物的方法及其进展

本文从显微注射法，逆转录病毒感染法，胚胎干细胞法，精子载体法和体细胞核移植法等5个方面回顾了建立转基因动物的方法，同时综述了其研究进展，并对其前景进行了展望。     

转基因动物技术研究进展

转基因动物技术起始于上个世纪七十年代末,随着生物科学的飞速发展,此技术也得到很大的进步。转基因动物技术在生物医药、农业等领域具有重要的作用。本文就转基因动物技术的发展、方法、应用及面临的问题做一综述。     

转基因动物技术与转基因动物制药

转基因动物技术始于上个世纪 80年代 ,2 0多年来 ,转基因动物在制作方法上由最初的显微注射法、逆转录病毒法和胚胎干细胞法 ,发展到体细胞核移植技术、腺病毒载体法、精子头与转移基因共注射法等。随着转基因技术的不断发展 ,利用转基因动物生产药用蛋白质即转基因动物制药的研究也取得了突破性进展 ,目前 ,转基因动物制药正走向产业化的道路 ,具有十分广阔的前景     

慢病毒载体法制备转基因动物研究进展

慢病毒为逆转录病毒的一种,除了具有逆转录病毒的基本特性外,还具有感染静止细胞的特性。最近研究发现,应用慢病毒载体进行转基因动物制备,转基因的效率得到显著提高,使转基因动物研究领域产生突破性进展。本文介绍了慢病毒载体构建的基本原理、慢病毒载体制备转基因动物的常见方法及国内外研究的最新进展。     

转基因动物技术的基本方法和应用

简要介绍了转基因动物技术的基本方法，总结了转基因动物在生物医学研究中的应用，例如基因表达和调控、建立人类疾病模型、基因治疗、用作生物反应器、异种器官移植、动物品种改良等。     

转基因动物技术与转基因约

转基因动物技术始于上个世纪80代,20多年来,转基因动物在制作方法上由最初的显同注射法,逆转录病毒法和胚胎干细胞法,发展到体细胞核移植技术,腺病毒载体法,精子头与转移基因共注射法等。随着转基因技术的不断发展,利用转基因动物生产药用蛋白质即转基因动物制药的研究也取得了突破性进展,目前,转基因动物制药正走向产业化的道路,具有十分广阔的前景。     

转基因动物在皮肤病学研究中的应用

转基因动物在皮肤病学研究中的应用徐宏彬刘维达（中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所，南京２１００４２）转基因动物是指用实验方法导入的外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。随着基因转移技术的发展，应用转基因动物的研究日益增...     

转基因动物在毒理学中的应用

转基因动物作为研究代谢调节、分化、发育中有关基因功能的工具已在各领域发挥了巨大的作用.在新药开发和研究中,因转基因动物的准确、经济、实验次数少和显著缩短实验时间等优点,现已成为一种进行“快速筛选”和药物非临床前安全评价的的手段.本文将对毒理学研究方面常用的转基因小鼠和大鼠进行阐述,旨在更全面的了解其在毒理学研究中的重要作用,为利用转基因技术技术培育应用于毒理学研究方面的转基因小鼠和大鼠的制备提供参考性的依据.     

转基因动物与生殖内分泌学研究

转基因动物与生殖内分泌学研究成国祥（扬州大学农学院）１９８０年前，有关生殖内分泌的研究都需切除部分组织或细胞，以便在体外对切除的组织或细胞进行细胞学或分子生物学分析，以及对切除后机体体内的生理后果进行分析。而通过特殊的操作系统，可在体内复杂环境下分析...     

转基因技术在实验动物科学中的应用

转基因技术在实验动物科学中的应用至今主要用于基础研究的转基因技术，目前所涉及的物种已呈每年翻番的增长趋势，不仅已遍及绝大部分家畜，还包括多种实验动物。研究中使用最多的动物则仍然是小鼠，在基础研究方面几乎已根本改变了对哺乳动物发育遗传学的观念。如今，这...     

HPV转基因动物研究进展

人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)可以引起人宫颈癌、肛门生殖器癌、尖锐湿疣等多种良、恶性肿瘤,严重威胁人类健康。然而,由于HPV严格的嗜人类上皮组织的特性,自然状态下不感染任何实验动物,给研究HPV的感染过程、致病机理,以及开发治疗HPV感染的药物等带来了困难,因此,研究HPV的动物模型显得尤为重要。