地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血浆HPA轴及脑组织HSP70表达的干预效应研究

目的探讨地黄饮子加减方对大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠血浆下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA轴)含量及其脑组织热休克蛋白70(heatshock protein 70,HSP70)表达的干预效应。方法 MCAO法制作SD大鼠脑缺血模型,造模成功后第二天开始给予地黄饮子加减方浓缩煎剂灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,连续7天,于最后一次灌胃后1小时取材,放射免疫法检测血浆HPA轴含量,免疫组化法检测脑组织HSP70表达。结果经地黄饮子治疗后:MCAO模型大鼠血浆皮质醇(COR)含量明显低于正常组、模型组,差异有统计学意义(P0.01),促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量均明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);地黄饮子组较模型组脑组织的HSP70表达更为明显,差异有统计学意义(P0.01);模型组COR含量与脑组织HSP70表达存在显著的正相关关系,CRH、ACTH含量则与HSP70表达无明显相关性,地黄饮子组HPA轴各指标与脑组织HSP70表达无明显相关性。结论地黄饮子加减方可能通过纠正HPA轴的紊乱状态、提高大鼠脑组织HSP70表达等途径在脑缺血急性期发挥神经保护作用。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠HPA轴影响的实验研究

目的:通过对MCAO模型大鼠缺血不同时点及地黄饮子灌胃后HPA轴水平的检测,观察其变化特点及地黄饮子的干预效应。方法:采用放射免疫分析法测定MCAO模型大鼠缺血后6h、48h和灌胃地黄饮子7d后的血浆HPA轴水平。结果:①脑缺血6h时模型组HPA轴水平低于正常组,其功能呈抑制状态;②脑缺血48h时,模型组ACTH、COR的含量较正常组明显升高,CRH含量进一步降低;③地黄饮子能够提高MCAO模型大鼠CRH、ACTH的血浆含量并降低COR的含量。结论:地黄饮子加减方能够提高MCAO模型大鼠CRH、ACTH的血浆含量并降低COR的含量,通过改善HPA轴功能的紊乱在脑缺血急性期发挥保护作用。     

加减地黄饮子对痴呆大鼠行为学及脑内细胞凋亡影响的研究

采用D－半乳糖似衰老和在大鼠脑内海马区注射喹啉酸造成海马损伤两者相结合的办法，较好的模拟了AD（阿尔茨海默氏病）的病理过程，并采用古方地黄饮子，结合老年性痴呆的病机进行加减变化，用于造模痴呆大鼠灌胃治疗，结果表明：模型组行为学改变较其它各组有明显差异，有成簇凋亡细胞出现，为模型成功提供了佐证，细胞凋亡参与了AD的病理过程，加减地黄饮子可能会影响到细胞凋亡的发生。     

加减地黄饮子对痴呆大鼠行为学及脑内细胞凋亡影响的研究

采用D -半乳糖拟衰老和在大鼠脑内海马区注射喹啉酸造成海马损伤两者相结合的办法 ,较好的模拟了AD(阿尔茨海默氏病 )的病理过程 ,并采用古方地黄饮子 ,结合老年性痴呆的病机进行加减变化 ,用于造模痴呆大鼠灌胃治疗。结果表明 :模型组行为学改变较其它各组有明显差异 ,有成簇凋亡细胞出现 ,为模型成功提供了佐证 ,细胞凋亡参与了AD的病理过程 ,加减地黄饮子可能会影响到细胞凋亡的发生。     

加减地黄饮子对痴呆大鼠脑组织AchE水平及SOD活力的影响

1　材料与方法1 1　实验动物及分组　健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠 72只 ,体重 30 0± 10ｇ,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。将大鼠随机分成 6组 :中药保护组、中药治疗组、西药对照组、模型组、假损伤组、空白组 ,每组 12只。1 2　药物　Ｄ -半乳糖 15ｇ溶于 5 0 0ｍｌ生理盐水中 ,0 5ｍｌ合 15ｍｇ。脑复康 75片溶于 30 0ｍｌ纯净水中 ,2ｍｌ含生药 2 0 0ｍｇ ;喹啉酸 (ＱＡ)2 5 0 5ｇ溶于 2 0 0 μｌ0 0 1ＭＰＢＳ中 ,2 μｌ含 15 0ｎｍｏｌＱＡ。加减地黄饮子由地黄饮子减去肉桂、附子等温燥之药 ,并加黄芪、血竭、桃仁、红花等益气活…     

加减地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)大鼠海马双侧注射后大脑组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的变化及加减地黄饮子的干预作用。方法采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组Bax2-ΔΔCt显著升高,而Bcl-22-ΔΔCt显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、加减地黄饮子组Bax2-ΔΔCt显著降低(P<0.05),而加减地黄饮子组Bcl-22-ΔΔCt显著升高(P<0.05)。结论海马注射Aβ1-40可诱导大鼠脑组织BaxmRNA表达上调和Bcl-2表达下调,而加减地黄饮子可通过抑制海马组织BaxmRNA的表达和促进Bcl-2mRNA表达,进而起到减少神经细胞凋亡的作用。     

加减地黄饮子对阿尔茨海默病大鼠模型的实验研究

目的:探讨大鼠海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)后血清TNF-α和IL-1β含量的变化及加减地黄饮子对其影响。方法:100只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐对照组、加减地黄饮子组共5组,采用海马立体定向注射Aβ1-40诱导Alzheimer's病动物模型后,药物干预4周,第5周应用双抗夹心酶联免疫吸附测定法检测TNF-α和IL-1β含量。结果:模型组TNF-α和IL-1β含量显著高于假手术组(p<0.05)。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和加减地黄饮子组TNF-α和IL-1β含量显著降低(p<0.05)。结论:大鼠海马注射Aβ1-40后大鼠血清TNF-α和IL-1β含量明显增高,加减地黄饮子通过降低血清TNF-α和IL-1β的含量,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。     

地黄饮子对海马神经元AD模型细胞凋亡的调控作用

目的 :探讨古方地黄饮子含药脑脊液对 β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5～ 35)所致海马神经细胞AD(Alzheimer’sDisease)模型凋亡基因bcl 2、bax和caspase 3表达的影响。方法 :运用中药脑脊液药理学的方法把体外培养成熟的大鼠海马神经细胞分为空白组、模型组、VitE对照组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组。 6组分别加入正常培养液、正常脑脊液、VitE脑脊液、中药脑脊液低、中、高剂量 ,继续孵育 2h。然后除空白组加入等量培养液外 ,其它各组加入经老化处理的Aβ2 5～ 35(终浓度为 1 0 μmol/L)共同孵育 2 4h ,胰蛋白酶消化 ,离心收集细胞 ,提取总RNA。应用RT PCR和琼脂糖凝胶电泳方法测定bcl 2、bax和caspase 3基因的表达。结果 :地黄饮子脑脊液能剂量依赖性地增强受损海马神经元bcl 2基因的表达 ,降低bax和caspase 3基因的表达。说明对Aβ2 5～ 35所致离体海马神经细胞凋亡有抑制作用 ,其作用机理可能与地黄饮子升高bcl 2 /bax的比值 ,抑制线粒体释放细胞色素C ,控制caspase 3的激活有关     

加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经生长因子表达的影响

目的观察加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响及其可能的神经元保护机制。方法采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型(MCAO)。将120只Wistar大鼠随机分成6组:空白组、假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、西药对照组,每组20只。连续灌胃7 d后,进行手术操作。HE染色法观察大鼠脑组织病理学改变;免疫组织化学法观察大鼠脑组织NGF的表达。结果低剂量、高剂量加减地黄饮子均能保护梗死区神经细胞,细胞结构较完整;增强梗死区脑组织NGF的表达。结论加减地黄饮子预处理可对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元起保护作用,其脑保护作用机制可能与调节大鼠脑组织NGF表达及保护梗死区神经细胞结构有关。     

不同补肾法对哮喘模型大鼠HPA轴的影响

为探讨哮喘大鼠HPA（下丘脑-腺垂体-肾上腺）轴变化及不同补肾法（阴阳双补、补肾阴、补肾阳）对该轴的影响。SD大鼠腹腔注射卵蛋白制成哮喘模型，分别予相应方法治疗，并与必可酮气雾剂比较。采用逆转录聚合酶链反应和图象分析法、放射免疫法，分别观察各组大鼠下丘脑CRHmRNA，血浆ACTH、CORT水平的变化。结果：模型大鼠下丘脑CRHmRNA，血浆ACTH、CORT水平均明显低于对照组，补肾三方均能不同程度提高哮喘大鼠下丘脑CRHmRNA表达，升高血浆ACTH、CORT水平，阴阳双补法作用最为显著，补肾阳法作用其次，补肾阴法作用不甚明显。结论：哮喘模型大鼠存在着下丘脑水平的HPA轴的抑制，阴阳双补法及补肾阳法能有效地改善哮喘大鼠HPA轴的抑制状态。     

地黄饮子加减方与化痰通络汤对MCAO大鼠神经功能的影响

目的观察地黄饮子加减方与化痰通络汤对大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠神经功能的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组[灌胃尼莫地平药液12 mg/(kg·d)]、地黄饮子加减方组[灌胃地黄饮子加减方药液7.9 g/(kg·d)]与化痰通络汤组[灌胃化痰通络汤药液6.5 g/(kg·d)],每组8只,假手术组和模型组灌胃等量蒸馏水,连续干预7天。建立MCAO大鼠模型,分别在术后3 h、6 h、1 d、6 d、7 d进行神经功能评分,采用放射免疫法检测干预后大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和血清皮质酮(cortisone,CORT)的水平,免疫组织化学染色法检测大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分升高,CRH、ACTH降低(P0.05,P0.01),CORT及脑组织MMP-9表达升高(P0.01)。与模型组比较,地黄饮子加减方组和化痰通络汤组大鼠神经功能评分明显降低,CRH、ACTH升高,CORT及脑组织MMP-9表达降低(P0.05,P0.01)。与尼莫地平组比较,地黄饮子加减方组血清CORT降低(P0.05),化痰通络汤组MMP-9表达降低(P0.01)。结论地黄饮子加减方与化痰通络汤均能明显改善MCAO模型大鼠的神经功能。其机制可能与地黄饮子加减方调节紊乱的HPA轴功能、化痰通络汤抑制大鼠MMP-9表达有关。     

地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠认知功能的影响

目的:观察地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠认知功能的影响及作用机制。方法:采用大鼠双侧颈总动脉结扎制作慢性脑低灌注模型,通过Morris水迷宫测定其学习记忆功能,测定海马组织中总抗氧化能力(T-AOC)活性,流式细胞仪检测海马组织凋亡细胞率。结果:地黄饮子20g/kg、10g/kg使大鼠逃避潜伏期缩短,跨越平台次数增加,海马T-AOC升高,海马中细胞凋亡率降低。结论:地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠认知功能损害有改善作用,可能与抗氧化、保护海马神经元、抑制脑细胞凋亡有关。     

地黄饮子对快速老化小鼠 SAMP8线粒体通路细胞凋亡的影响

目的：研究地黄饮子对快速老化小鼠P8线粒体通路细胞凋亡的影响,探讨其治疗AD的药效及作用机制。方法：运用RT-PCR检测地黄饮子对SAMP8小鼠Caspase -3、Caspase -9、Apaf -1基因mRNA表达的影响,观察小鼠细胞凋亡情况。结果：地黄饮子能下调海马Caspase-3 mRNA、Caspase -9mRNA、Apaf-1mRNA的表达,且均有统计学意义。结论：地黄饮子可通过对细胞凋亡的线粒体途径的影响,抑制促凋亡基因,减少神经元的丢失,从而改善学习记忆能力。     

地黄饮子脑脊液对M146L细胞活力及细胞凋亡的影响

目的:构建APP/PS1双基因转染细胞(M146L细胞)作为AD细胞模型,观察地黄饮子含药脑脊液对M146 L细胞的细胞活力及细胞凋亡的影响,探讨其防治AD的作用机制.方法:将M146 L细胞分为模型组、中低组、中中组和中高组,另设未经转染的CHO细胞为空白组,除空白组外,脑脊液处理细胞,LDH、MTT法检测各组细胞的...     

加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织NGF表达的影响

[目的]观察加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响及其可能的神经元保护机制.[方法]采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型(MCAO).120只Wistar大鼠随机分成6组,每组20只.连续灌胃7 d后进行手术操作.苏木一伊红(HE)染色法观察大鼠脑组织病理学改变;免疫组织化学法观察大鼠脑组织NGF的表达.[结果]加减地黄饮子低剂量、高剂量组均能保护梗死区神经细胞,细胞结构较完整;增强梗死区脑组织NGF的表达.[结论]加减地黄饮子预处理可对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元起保护作用,其脑保护作用机制可能与调节大鼠脑组织NGF表达及保护梗死区神经细胞结构有关.     

健脑安对MCAO模型大鼠HPA轴影响的实验研究

脑缺血再灌注的病理改变可引发神经内分泌功能的紊乱,使促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、糖皮质激素(glucocorticoid,GCs)中的皮质醇(cotisiol,COR)等在再灌注后迅速升高.神经-内分泌-免疫网络的功能失调将进一步加重脑缺血再灌注后的神经元损伤.临床急性脑血管患者ACTH,COR升高水平,是衡量急性期患者病情轻重、预后、疗效判定的指标,其值的高低表明下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能紊乱的程度[1～4].     

地黄饮子对AD细胞模型抗氧能力影响的实验研究

目的：观察地黄饮子对AD细胞模型抗氧能力影响。方法：通过建立β淀粉样蛋白诱导PC12细胞损伤的AD细胞模型,采用脑脊液药理学方法,观察地黄饮子对PC12细胞培养液中CAT、GSH-Px、SOD、MDA含量的影响,探讨地黄饮子对AD细胞模型抗氧能力的作用。结果：地黄饮子能提高PC12细胞培养液中SOD、CAT、GSH-Px的活性,降低培养液中MDA的含量。结论：地黄饮子通过提高AD细胞模型的抗氧化能力,对Aβ所致PC12细胞损伤起到较好的保护作用。     

加减地黄饮子对AD大鼠海马NF-κB和CRP表达的干预作用

目的:观察加减地黄饮子对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD模型大鼠大脑海马组织NF-κB和CRP表达的影响。方法:采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆动物模型,分组并经加减地黄饮子和盐酸多奈哌齐治疗后,采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定各组海马区NF-κB和CRP表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马区NF-κB和CRP蛋白表达显著升高;与模型组比较,加减地黄饮子组NF-κB和CRP蛋白表达明显下降。结论:加减地黄饮子可下调AD模型大鼠海马组织NF-κB和CRP表达,这可能是其抗AD的机制之一。     

地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠脑组织NO、NOS含量及行为学的影响

目的:探讨地黄饮子对老年性痴呆(AD)模型大鼠脑组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及行为学的改善作用.方法:用D-半乳糖(D-Gal)腹腔注射和鹅膏蕈氨酸(iboteni cacid,IBO)脑内Meynert基底核(nbM)注射相结合诱导大鼠模型.分别用程控穿梭箱、酶法检测各组实验大鼠学习记忆、脑组织NO、NOS的变化.结果:AD模型组大鼠学习记忆能力降低,脑组织NO、NOS含量显著升高;地黄饮子与西药对照组较AD模型组学习记忆能力显著提高,脑组织NO、NOS含量显著降低.结论:用D-Cal合IB0结合诱导可建立AD动物模型,地黄饮子可提高AD大鼠学习记忆能力、降低脑组织NO、NOS含量.     

地黄饮子减少老龄大鼠脑组织缺血再灌注损伤的机制研究

目的：探讨地黄饮子（Dihuang Yinzi,DY）对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法：构建大脑中动脉栓塞大鼠模型诱导脑缺血再灌注损伤（Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI）。HE染色观察脑缺血再灌注大鼠大脑皮层组织病理学改变,TTC染色观察大鼠脑梗死面积,Western blot检测脑组织中与自噬相关的Beclin-1、Atg5、LC3蛋白表达的情况,免疫组化检测脑组织中CD62P的表达量,ELISA法测定大鼠血清中β血小板球蛋白/β血栓环蛋白（β-TG）和血小板因子4(PF4)的含量,并检测各组大鼠的脑水肿情况。结果：HE染色结果显示地黄饮子可明显改善缺血再灌注对脑组织的病理学损伤,TTC染色和脑水肿检测结果显示地黄饮子可有效减轻CIRI造成的脑梗死和脑水肿。与CIRI组比较,CIRI+DY12g/kg组脑组织中Beclin-1、LC3 II/LC3 I和Atg5蛋白的表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）。脑组织中CD62P的蛋白表达量显著降低（P<0.05或P<0.01）,血清中β-TG和P...