高胆固醇小鼠脑缺血后脑源性神经营养因子和促调亡因子与神经行为相关性分析

目的 探讨自发性高胆固醇血症小鼠（NJS小鼠）短暂性前脑缺血后脑组织中脑源性神经营养因子和促调之因子的表达与神经元凋亡和神经行为改变的相关性。方法 选择NJS小鼠60只，分为对照组15只，缺血再灌注24h组15只，72h组15只、120h组15只。分别测定神经行为学指标、脑组织中BDNF、BAX的表达和神经元凋亡数。结果 脑缺血再灌注后BDNF表达峰值出现较BAX早，但BAX表达较BDNF表达持续时间长。BDNF／BAX比例与神经元凋亡数呈负相关、与神经功能的恢复呈正相关。结论 短暂性前脑缺血后脑组织BDNF和BAX表达的比值与神经元的损伤相关，提示增加脑缺血后脑组织内BDNF的含量和延长其表达时间将有助于对抗BAX对神经元的损伤作用，从而减少神经元的凋亡和促进神经功能的康复。     

高胆固醇小鼠脑缺血后脑源性神经营养因子和促调亡因子与神经行为相关性分析

目的探讨自发性高胆固醇血症小鼠(NJS小鼠)短暂性前脑缺血后脑组织中脑源性神经营养因子和促调之因子的表达与神经元凋亡和神经行为改变的相关性.方法选择NJS小鼠60只,分为对照组15只,缺血再灌注24h组15只、72h组15只、120h组15只.分别测定神经行为学指标、脑组织中BDNF、BAX的表达和神经元凋亡数.结果脑缺血再灌注后BDNF表达峰值出现较BAX早,但BAX表达较BDNF表达持续时间长.BDNF/ BAX比值与神经元凋亡数呈负相关、与神经功能的恢复呈正相关.结论短暂性前脑缺血后脑组织BDNF和BAX表达的比值与神经元的损伤相关,提示增加脑缺血后脑组织内BDNF的含量和延长其表达时间将有助于对抗BAX对神经元的损伤作用,从而减少神经元的凋亡和促进神经功能的康复.     

NJS小鼠短暂性前脑缺血后海马细胞改变的初步研究

0　引　　言自发性高胆固醇血症小鼠 ( NJS)是经高度近交培育出的品系 ,这种小鼠在正常配方普通食物喂养下血清胆固醇浓度即明显高于正常小鼠[1,2 ] ,具有易发冠状动脉粥样硬化的生化及行为特征[3 ] 。为进一步了解 NJS小鼠对脑缺血的反应 ,我们观察了这种小鼠短暂性前脑缺血后海马神经元的改变。1　材料和方法1 .1　动物选择　选择 8月龄的雄性 NJS小鼠和美国肿瘤研究学会培育的实验小鼠 ( ICR)各 1 8只。其中雄性各 1 0只 ,雌性各 8只 ,实验小鼠由南京军区动物实验中心提供 (苏动质字 970 0 1 )。NJS小鼠的血清胆固醇浓度 ( 5.65± …     

自发性高胆固醇血症小鼠神经行为学评估

目的　观察近交系自发性高胆固醇血症（ＮＪＳ）小鼠的神经行为学特征，探讨高胆固醇血症小鼠的行为学特征。方法　采用探究试验（过障数、爬立数）、斜板试验、雄性小鼠群居喂养等方法来测定ＮＪＳ小鼠的行为特征，并与ＩＣＲ小鼠的测定结果相比较。结果　两品系小鼠行为学特征有统计学差异，ＮＪＳ小鼠的探究活动明显较ＩＣＲ小鼠强（ Ｐ＜ ０．０５），运动平稳能力也较ＩＣＲ小鼠强（ Ｐ＜ ０．００１）。并且ＮＪＳ小鼠的群居优势特征表现得十分明显，行为特征表现为好奇、好动、好斗、攻击性强。结论ＮＪＳ小鼠的特殊的行为特征是与高胆固醇血症相伴而生的，两者可能有共同的生物遗传学基础。     

健脑方促进脑缺血后大鼠海马神经发生的作用研究

目的观察中药健脑方对脑缺血后大鼠海马齿状回神经发生以及空间学习记忆功能的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组。采取永久结扎双侧颈总动脉制作全脑缺血模型。术后治疗组给予健脑方灌胃干预,模型组给予等量生理盐水。使用BrdU标记技术观察缺血后海马齿状回的神经发生,采用Morris水迷宫试验评价大鼠空间学习能力。结果模型组和治疗组海马齿状回BrdU阳性细胞数分别在缺血后第7天达到最高峰。而缺血后7、14、20、28 d治疗组BrdU阳性细胞数明显多于模型组(P<0.05或P<0.01)。水迷宫试验显示术后第14天治疗组大鼠寻台平均时间明显短于模型组(P<0.05)。结论健脑方能持续明显促进脑缺血后大鼠海马齿状回神经发生,并改善大鼠的空间学习能力。     

局灶性脑缺血神经行为及其相关性分析

目的 探讨神经行为学评价在局灶性脑缺血中的作用.方法 采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻断(MCAO)模型;分别采用分级评分和梗死灶体积测定的方法 进行神经行为学评价.结果 分别采用Nagaoka法、Bederson法、zea-Longa法和Zhang法,梗死24小时时分级评分的差别有统计学意义(P＜0.05),而采用Zausinger法,梗死24小时内分级评分差别无统计学意义;分别永久性局灶性脑缺血6小时和24小时,梗死灶体积的差别有统计学意义(P＜0.01),且脑缺血24小时时梗死灶体积与Bederson法分级评分有线性相关关系(r=0.91613,P＜0.05).结论 目前的评价方法 尚不能全面的反映脑缺血时的病理生理状态,一种能较准确地反映脑缺血的神经行为学评价方法 亟待提出.     

脑缺血后海马CA1区细胞凋亡现象的观察

观察大鼠完全性前脑缺血再灌注损伤过程中海马ＣＡ１区神经元死亡的另一种形式－细胞凋亡。采用琼酯糖凝胶电泳及原位缺口翻译法，观察海马ＣＡ１区神经元是否有凋亡特征性改变。结果；脑缺血损伤后５ｄ，从海马ＣＡ１区神经元提取ＤＮＡ，其琼酯糖凝胶电泳呈现典型梯状结构。而采用原位缺口翻译法，发现缺血损伤后３ｄ，海马ＣＡ１区开始出现胞核染色体阳性的凋亡细胞，缺血损伤后５ｄ，凋亡细胞达到高峰。结论：海马ＣＡ１区尽管     

局灶性脑缺血神经行为及其相关性分析

目的 ：探讨神经行为学评价在局灶性脑缺血中的作用。方法：采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻断（MCAO）模型；分别采用分级评分．和梗死灶体积测定的方法进行神经行为学评价。结果：分别采用Nagaoka法、Bederson法、zea-Longa法和Zhang法，梗死24小时分级评分的判别有统计淡意义（P＜0．05），而采用Zausinger法，梗死24小时内分级评分差别无统计学意义；分别永久性局灶性脑缺血6小时和24小时，梗死灶体积的差别有统计学意义（P＜0．01），且脑缺血24小时梗 死灶体积与Bederson法分级评分有线性相关关系（r＝0．91613，P＜0．05）。结论：目前的评价方法尚不能全面的反映脑血时的病理生理状态，一种能较准确地反映脑缺血的神经行为学评价方法亟待提出。     

硫酸镁对兔全脑缺血后海马氨基酸影响的实验研究

目的 :探讨硫酸镁对兔全脑缺血后海马氨基酸含量的影响。方法 :15只兔 ,随机分为 3组 :对照组 (n=5 )、缺血组 (n =5 )和镁处理组 (n =5 )。阻断兔 4血管 6分钟 ,诱导全脑缺血。用高效液相色谱法测定各组缺血再灌注 30分钟兔海马谷氨酸、天冬氨酸、γ -氨基丁酸和甘氨酸含量。结果 :镁处理组海马天冬氨酸和甘氨酸显著低于缺血组 (P <0 .0 1) ,γ -氨基丁酸显著高于缺血组 (P <0 .0 5 )。结论 :硫酸镁处理可使兔全脑缺血再灌注 30分钟海马天冬氨酸和甘氨酸的浓度下降以及γ -氨基丁酸的浓度相应增高 ,故硫酸镁对脑缺血具有神经保护作用     

近交系NJS小鼠有关遗传性状的研究

为了解作者培育的近交系ＮＪＳ小鼠的生化、免疫、形态等遗传学性状，对该小鼠的生化标志基因、免疫标志基因、毛色基因进行测试，并作下颌骨形态分析。结果表明：ＮＪＳ小鼠是一株新培育的近交品系，具有独特的遗传特性。所检的分布在１２条染色体上的２６个生化标志基因未见与其它近交系小鼠完全相同。Ｈ－２位点基因为Ｈ－２Ｋｄ、Ｈ－２Ｄｋ。毛色基因型为ＡＡＢＢｃｃＤＤ。下颌骨形态判别函数ＤＦ１、ＤＦ２、ＤＦ３、ＤＦ４值分别为４．５１、－６．３１、０．１６、－０．８５。与近交系ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６、６１５、ＳＭＭＣ／ｃ的遗传距离分别为８３．１９、６２．８７、４１．３４、２２．４４。     

nNOS在缺血性老年大鼠海马及皮层神经元中的表达及超微结构变化

目的 研究神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS)在血性老年大鼠海马及皮层神经元中的作用并观察其超微结构变化。方法建立老年大鼠脑缺血动物模型,在不同的时间点进行nNOS免疫组化染色和透射电镜观察。检测海马及皮层神经元nNOS的观察其受损情况。结果 缺血30min后再灌注12h组nNOS活性显著升高。而假手术组、缺血30min即刻取材、再灌流1h,96h组nNOS几乎无表达;6h少量表达;24h和48h组中量表达;再灌流超过24h组神经元损伤较重。结论 NO在脑缺血发生中对海马及大脑皮层神经元具有毒性作用。     

沙鼠脑缺血再灌注后海马CA1区细胞存活数量的实验观察

①目的 利用沙鼠脑缺血模型,从分子生物学角度探讨脑缺血再灌注不同时期对海马CA1区的影响.②方法 采用双侧颈总动脉夹闭法制作沙鼠脑缺血再灌注损伤模型.HE染色观察沙鼠脑缺血后海马CA1区的组织病理改变.③结果 单次5分钟缺血的沙鼠HE染色海马CA1区存活细胞数与假手术组及正常对照组相比减少,差异具有极显著性(P<0.01);反复5分钟缺血,中间间隔时间为10分钟的缺血组,与持续性10分钟缺血组、假手术组及正常对照组相比,差异具有极显著性(P<0.01);反复5分钟缺血,中间间隔时间为1小时的缺血组,在各个时间段呈现出最为严重的缺血性变化;与其它组相比,差异具有极显著性(P<0.01);反复5分钟缺血,中间间隔时间为24小时的缺血组,却呈现出较轻的病理变化;与持续性5分钟缺血组相比差异无显著性(P=0.0501).④结论 重复性脑缺血损伤的严重程度可能与缺血持续时间、间隔时间的长短等有关.重复5分钟缺血,中间间隔时间为1小时的缺血组,缺血损伤程度最重.提示对于脑梗死的患者,应该不间断的施行综合治疗,防止重复性脑梗塞的发生.     

全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回核酸的影响

目的：观察全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回核酸的影响。方法：采用4－血管阻断（4－VO）方法建立大鼠急性全脑缺血模型,用吖啶橙染色法进行全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回的核酸保护作用的研究。结果：与正常对照组比较,全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回核酸吖啶橙染色后的荧光强度明显减弱。结论：缺血再灌注可导致大鼠海马及齿状回核酸损伤。     

姜黄素对全脑缺血再灌注大鼠海马高迁移率族蛋白1表达及凋亡的影响

目的 观察姜黄素对全脑缺血再灌注后大鼠海马高迁移率族蛋白1(HMGBl)表达及神经元凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠192只,随机分成假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)、姜黄素组(Cur组,200 mg/kg缺血前1 h腹腔注射)及溶剂对照组(SC组).建立四动脉阻塞全脑缺血冉灌注模型,在再灌注后1、3、5、7 d处死大鼠;HE染色观察海马神经细胞形态,TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡,免疫蛋白印迹法对海马HMGBI表达行半定量分析.结果 IR组及SC组海马CA1区各点凋亡细胞数明显多于sH组,Cur组再灌注1、3、5、7 d凋亡细胞数分别为IR组的41%、57%、65%、70%(P＜0.05).IR组(0.685±0.050)及Sc组(0.695±0.053)再灌注1 d HMGB1表达水平明显低于SH组(0.977±0.063,P＜0.05),再灌注3 d(1.360±0.045,1.353±0.045)、5 d(1.342±0.046,1.338±0.047)、7 d(1.319±0.052,1.322±0.035)表达水平明显高于SH组(0.992±0.031,0.978±0.090,0.992±0.075,P＜0.05).Cur组再灌注1 d HMGB1表达水平(0.842±0.063)明显高于IR组、SC组但低于SH组(P＜0.05),再灌注3 d(1.125±0.023)、5 d(1.098±0.073)、7 d(1.087±0.089)表达水平明显低于IR组及sC组(P＜0.05).SC组与IR组相比差异无统计学意义.结论 SD大鼠全脑IR后1 d海马HMGB1表达明显减少,后升高并持续高表达至再灌注7 d.姜黄素减轻海马神经元凋亡及损伤的机制可能与抑制HMGB1的合成与释放有关.

Abstract：

Objective To explore the effects of curcumin on the expression of high mobility group box 1(HMGB1)and apoptotic neurons in hippocampus after global cerebral ischemia/reperfu8ion in SD rats.Methods A total of 192 male SD rats were randomly divided into 4 groups:sham group(SH),ischemia-reperfusion group(IR),cureumin group(Cur)and solvent control group(SC).Bilateral vertebrate arteries were electroeauterized and bilateral comlnon carotid arteries libemted in 3 ischemic groups.Isasteric curcumin solutions(200 mg=/kg)or menstruum were injected intraperitoneally at 1 hour preischemia in Cur and SC groups.The rats in each group were ligated for 15 minutes and then decapitated at slides.Apoptotic neurons were detected in CA1 region by TUNEL(terminal deoxynueleotidyl transferasemediated dUTP-biotin nick end labeling).Western blot was used to make a semi-deternination of HMGB1 expression.Results At each time point,tlle number of apoptotic neurons was much more in IR and SC groups than that in SH group(P＜0.05).And the number of apoptotie neurons at 1,3,5,7 d postreperfusion was only 41%,57%,65%and 70%in Cur group respectively(P＜0.05).The exPressional level of HMGB1 in IR and SC groups was significantly lower at 1d post-reperfusion(0.685±0.050:0.695±0.053 vs 0.977±0.063,P＜0.05).And it was significantly higher at 3,5,7 d post-reperfusion in IR and SC groups than that in SH groups(1.360±0.045/1.353±0.045;1.342±0.046/1.338±0.047;1.319±0.052/1.322 ±0.035 vs 0.992±0.031;0.978±0.090;0.992±0.075,P<0.05).The level at 1 d post-reperfusion(0. 842±0. 063)in Cur group was significantly higher than that in IR and SC groups but lower than that in SH group. And it was lower at 3, 5, 7 d post-reperfusion (1. 125 ± 0. 023, 1. 098 ±0. 073, 1. 087 ± 0. 089) than those in IR and SC groups (P＜0. 05). There was no significant difference of HMGB1 expression level between IR and SC groups. Conclusion The expression level of HMGB1 in hippocampus is significantly reduced at 1 d post-reperfusion. Then it significantly increases and a high level is maintained until 7 d after global cerebral ischemia/reperfusion. Cureumin can reduce hippocampal neuronal apoptosis and injury. Such an effect may be due to an inhibition of the synthesis and release of HMGB1.     

全脑缺血再灌注血管性痴呆大鼠海马和丘脑NT-3及FGF的动态变化

目的：探讨血管性痴呆与神经营养因子-3(NT-3)、成纤维细胞因子（FGF）之间的关系。方法：Wistar老龄大鼠雌雄随机分为假手术组和实验组,实验组包括全脑缺血15 min组及缺血15 min再灌注1 h、6 h、2 d、4 d、9 d组,每组5只。用免疫组化ABC法检测缺血再灌注不同时相海马和丘脑NT-3及FGF表达。结果：正常老龄大鼠海马和丘脑均含有少量NT-3及FGF;缺血再灌注1 h～4 d,海马 NT-3表达迅速而持续增强,与对照组比较差异有显著性（P<0.05）,缺血再灌注9 d时减弱至对照组水平（P>0.05）;缺血再灌注6 h～2 d,海马FGF表达增强,与对照组比较差异有显著性(P<0.05）;缺血再灌注4 d时其表达进一步增强（P<0.01）,随后其表达锐减,与对照组比较差异无显著性（P>0.05）;缺血再灌注2 d,丘脑NT-3和FGF 表达开始增强,与对照组比较差异有显著性（P<0.05）,随后二者表达均减弱,与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：海马对缺血损伤具有反应快、作用持久的NT-3和FGF保护机制,丘脑缺乏良好的NT-3和FGF保护机制。     

地黄饮子对脑缺血再灌注大鼠海马脑源性神经营养因子和基质细胞衍生因子表达的影响

目的 探讨地黄饮子对脑缺血冉灌注大鼠海马脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和基质细胞衍生因子(stromal cell derived factor 1,SDF1)的表达及修复神经元的作用机制.方法 选取清洁级SD大鼠75只,按数字表法随机分为正常组、治疗组和缺血组,每组25只.10％水合氯醛麻醉,暴露并钳夹双侧颈总动脉40 min,造模使大鼠急性脑缺血.治疗组:造模后灌服地黄饮子汤36 g/kg;缺血组:造模后每日胃灌盐水1次;正常组:正常饮食.3周后,测量大鼠脑梗死面积,分别测定3组大鼠脑海马CA1区BDNF和SDF1蛋白表达情况.结果 正常组海马CA1区BDNF(99.25±9.48)和SDF1蛋白含量[(2.59±0.76) mg/L]均明显高于地黄饮子治疗组[BDNF:(79.98±10.68),SDF1蛋白含量:(3.68±0.96) mg/L]]和缺血组[BDNF:(59.59±13.73),SDFl蛋白含量:(0.93±1.24)mg/L],差异有统计学意义(P＜0.05).地黄饮子治疗组BDNF和SDF1蛋白含量明显高于缺血组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组的脑梗死面积明显低于缺血组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 地黄饮子治疗可以提高BDNF和SDF1蛋白水平,增加内源性保护机制和神经干细胞增殖、迁移,保护神经元的功能.