γ射线照射致小鼠胸腺组织信号转导差异基因的变化及意义

目的探讨6Gyγ射线照射后不同时间小鼠胸腺组织信号转导差异基因表达谱的动态变化。方法雄性C57BL/6小鼠48只,5～6周龄,经6Gyγ射线照射后,分别于照射后1、6、14、28d分批活杀取胸腺。提取胸腺组织总RNA,应用快速高通量cD-NA基因芯片技术检测γ射线照射后的差异表达基因,特别是与信号转导相关的差异基因的表达。结果小鼠经6Gyγ射线照射后,随时间推移,胸腺组织信号转导相关差异表达基因数目逐渐减少,照射后1、6、14、28d差异基因数量分别为126、43、27和0个。辐射所诱导的胸腺组织信号转导差异表达基因在照射后不同病理阶段,涉及不同的信号通路,主要包括Wnt受体信号通路、MAPK信号通路、G蛋白偶联受体信号PI-3K/AKT通路、NIK-I-κB/NF-κB级联信号通路等。结论 6Gyγ射线照射小鼠胸腺组织信号转导基因涉及多个信号通路,并且显示出时间上的明显差异。     

MicroRNA及其靶基因在预测直肠癌放化疗疗效中的作用

目的 MicroRNA及其靶基因参与直肠癌放化疗疗效应答,本研究旨在筛选直肠癌放化疗疗效相关的microRNA及其靶基因,推动直肠癌放化疗疗效的基础研究。方法 基于PubMed数据库挖掘与直肠癌放化疗疗效相关的microRNA,结合microRNA-mRNA调控关系以及基因芯片表达谱数据,寻找与直肠癌放化疗疗效相关的靶基因。通过DAVID、IPA等工具对靶基因进行基因本体论和信号转导通路富集分析。结果 通过文本挖掘,共搜集到38个与直肠癌放化疗相关的microRNA,结合实验验证和计算机预测的microRNA-mRNA调控关系,共得到潜在的靶基因3 545个。其中,131个在基因芯片表达谱（GSE35452）中具有显著的差异表达现象（P<0.05）。基因本体论以及信号转导通路富集结果表明,这些基因与直肠放化疗疗效密切相关。结论 上述microRNA及其调控的差异表达基因参与了直肠癌放化疗疗效相关的多条信号通路,在一定程度上从生物机制的角度解释了直肠癌放化疗疗效的差异。同时,筛选出的microRNA及其靶基因也为预测直肠癌放化疗疗效的研究提供了理论依据。     

IL—6相关基因的克隆与鉴定

目的：克隆和鉴定IL－6作用相关基因将有助于揭示IL－6信号转导机制和发现新的信号分子,方法：以来源于IL－6处理和未处理的U937细胞mRNA的双链cDNA作为检测子和驱动子,进行cDNA代表性异分析,结果：分离了14个差异表达基因序列（EST）,反向RNA Nortghern杂交筛选到9个差异表达序列,经测序及序列分析,其中7个差异表达的EST代表在细胞生命活动或信号转导中有重要的作用的已知基因,2个EST代表与IL－6作用相关的新基因,Northern印迹和时间表达普进一步证明了P52和P31代表的新基因与IL－6作用的相关性,结论：上述结果提示这些差异cDNA序列可能与IL－6信号转号作用密切相关。     

氧化还原内稳态与节律基因相互调控的研究进展及在航天医学应用展望

氧化还原信号是细胞内稳态的重要调节因素,许多生物过程响应来自细胞内氧化还原状态的信号.研究发现细胞氧化还原状态在体内发生节律性振荡,周期与节律基因振荡周期一致.大量证据表明昼夜节律的转录/翻译反馈回路机制与氧化还原的非转录振荡机制间存在相互调控关系,二者耦合产生一个具有高度灵活性的计时系统.空间飞行期间,航天员长期暴露...     

骨肉瘤靶向治疗的研究进展

骨肉瘤是一种多因素和多基因协同作用、经过多个阶段最终形成的极其复杂的多基因遗传性疾病.随着细胞生物学及分子生物学的发展,现代医学对骨肉瘤的认识逐渐上升到分子水平.从分子水平探讨骨肉瘤的发生和发展已成为现代生物医学研究的热点问题.目前,国外已有大量的相关文献提出了骨肉瘤多个可能的信号通路,靶向受体,信号传导抑制剂等.本文主要从骨肉瘤的分子机制,免疫系统分子靶向治疗,骨代谢涉及的细胞外及细胞间的信号通路,以及新的治疗靶点和药物运输系统等方面进行综述研究.     

亚细胞定位及信号转导检测技术在hrnt_1基因功能研究中的应用

目的 :hrnt_1是本实验室克隆的全长基因 ,GenBankNr库中编号为AF2 2 3393。实验证实该基因与支气管上皮细胞恶性转化相关 ,但具体的生物学功能尚不清楚。本研究旨在建立一种功能研究的方法 ,为探索hrnt_1在细胞恶性转化过程中的生物学功能提供线索。方法 :构建hrnt_1与pEGFP荧光素表达载体 ,通过融合蛋白的表达 ,观察hrnt_1基因产物在细胞中的位置分布 ;利用信号通路检测技术 ,观测hrnt_1对细胞内信号转导通路的影响。结果 :hrnt_1产物主要分布在细胞核中 ,对Myc Max,GR ,NFκB ,EIK_1 STAT等核转录因子活性有上调作用。结论 :细胞定位与信号通路检测技术相结合的方法简便、快速 ,适用于新的疾病基因功能研究。     

肺纤维化发生的分子机制和早期防治研究进展

肺纤维化是以肺成纤维细胞增殖及细胞外基质聚集为特征的病变，对人的健康和生命危害极大。因其确切发病机制仍不十分清楚，而给防治带来极大困难。目前已知肺纤维化发生与肺成纤维细胞的间隙连接通讯功能下调、纤维化相关基因及群体基因、多种细胞生物因子的异常表达和纤维化相关信号转导途径的激活等有一定关系。因此阐明其发病机制对肺纤维化的有效防治具有指导意义。本文就近年关于肺纤维化的发生机制和早期防治研究进展进行综述。     

细胞凋亡的研究进展:回顾1998

细胞凋亡是当前生物医学热门话题之一，近年有诸多相当令人兴奋的发现。现已明确，细胞凋亡的发生主要是胞内一系列凋亡蛋白酶激活的级联反应和细胞表面的死亡受体接受相应外部信号生物调节的结果。本文介绍１９９８年国外有关细胞凋亡研究的主要进展，包括凋亡蛋白酶的作用及其激活、Ｂｃｌ－２家族的作用、死亡受体及其信号转导和与细胞凋亡有关的放射分子生物学研究概况。     

抑郁症与脑内CERB的调节

当前抑郁研究的重点已经从单胺递质调节机制转向到抗抑郁药的长期作用机制和抑郁的根本病理生理学研究。研究内容主要有信号通路及转录因子的调节、神经分化、神经营养、可塑性等。CREB（cAMP反应元件结合蛋白）是胞内与抑郁相关的几个信号转导通路中的一个交汇点,它能对相关基因的转录进行调节进而影响许多细胞因子的表达,并通过这些细胞因子启动细胞、内分泌、行为反应。因此,明确脑内CERB的调节与抑郁的关系对我们进一步深入理解抗抑郁药的作用机制和抑郁症的根本病理生理学有重要的意义。就此,本文对近年来CREB和抑郁关系的相关研究进行综述,主要涉及上游信号通路对CREB的影响、CREB对下游基因的调节以及CREB的活性和水平在不同脑区的变化与抗抑郁作用的关系。     

HDAC抑制剂MS-275诱导人肺腺癌细胞系A549基因表达谱分析

目的 研究HDAC抑制剂MS-275对人肺腺癌A549细胞基因表达谱的影响,探讨MS-275抗肿瘤的分子机制.方法 运用制备的包含8 064个人类基因的cDNA芯片检测MS-275诱导人肺腺癌A549细胞基因表达谱的变化.结果 MS-275(2μmol · L-1)处理A549细胞16h后,cDNA芯片分析筛选出MS-275对A549细胞的影响基因803个,其中上调基因440个,下调基因363个,其中包括许多与细胞凋亡、细胞分化、DNA修复等相关基因如p21、DR6.结论 MS-275通过外源性凋亡信号、内源性凋亡信号和细胞周期阻滞等多种分子机制诱导A549细胞凋亡.     

人铜锌超氧化物歧化酶基因启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体的构建及表达

目的 构建人铜锌超氧化物歧化酶基因(Cu/Zn SOD,SOD1)启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,并对其功能进行鉴定,为研究细胞内SOD1基因表达调控和相关的信号转导机制提供重要工具.方法 提取人基因组DNA,FCR扩增SOD1 5'非编码区启动子序列(-1 499- +17);采用基因重组技术构建由SOD1启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,将该载体瞬时转染Hella细胞,观察静息或佛波酯(PMA)刺激下红色荧光蛋白表达,以检测SOD1启动子的转录活性及其基凶表达.结果 酶切和DNA测序证明所构建红色荧光蛋白报告基因载体正确;该表达载体静息状态下在Hella细胞表达少量红色荧光蛋白,经PMA刺激后,能够表达较多高亮度的红色荧光蛋白.结论 成功构建了SOD1启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,其对相关刺激有很好的反应,可用于SOD1基因表达信号调控机制的研究.     

相分离影响癌症发生发展的研究进展

相分离是细胞内无膜区室形成的主要机制,参与调控细胞代谢、信号转导、基因表达和蛋白质稳态等多种生理过程.近年来,研究人员发现相分离和癌症密切相关,通过影响DNA修复过程,转录调控,致癌基因和抑癌基因的表达,以及癌症中重要的无膜区室的组装等影响癌症的发生发展.本文回顾了相分离的概念、研究历史、生理功能及其与癌症的关系,重点...     

三氧化二砷诱导NB4细胞凋亡相关基因表达改变的基因芯片研究

目的 利用基因芯片技术研究NB4细胞经三氧化二砷(As2O3)诱导凋亡后的凋亡相关基因表达变化.方法 检索NCBI的Entrez以及Human IPI数据库,通过染色体定位来排除冗余基因,共获得1 384个凋亡相关基因.探针使用软件OligoArray 2.0设计,并作Blast比对.设计基因特异寡核苷酸探针,合成后点样,制备寡核苷酸芯片.用2μmol/L的As2O3处理NB4细胞48h后,提取细胞总RNA,分别以Cy3,Cy5标记对照组及实验组,随后与含1 384个凋亡相关基因的寡核苷酸芯片杂交,使用基因芯片扫描仪对杂交信号扫描,软件分析Cy3和Cy5两种荧光信号的强度和比值,找出经As2O3处理后出现差异表达的基因,并挑选其中差异表达最明显的4条基因,设计引物后与CNDA产物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳进行验证.结果 NB4细胞经2μmol/L As2O3作用48h后共有4个基因表达上调,12个基因表达下调,且RT-PCR验证结果与基因芯片结果完全相符.结论 As2O3可以诱导NB4细胞一系列基因表达的改变,这些涉及信号转导、转录调节、细胞周期、氧化应激、蛋白质的翻译合成及细胞分化等方面基因的差异表达,可能在NB4细胞凋亡中起着重要作用.     

基于通路和网络方法对重度抑郁症和阿尔茨海默症易感基因的分析

目的运用通路富集和网络分析的方法揭示重度抑郁症(major depressive disorder,MDD)和阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)的共病生物过程和异常通路,预测潜在风险基因。方法对MDD或AD易感基因进行通路和网络分析,构建主要重叠通路的串话网络,通过提取MDD和AD特异性蛋白质相互作用子网络,确定与这两种疾病相关的潜在风险基因。结果研究得到255个MDD易感基因和587个AD易感基因以及46个共享基因。通过分析确定了48条与免疫系统、信号转导系统、内分泌系统等显著性共病通路。最后分析特异性子网络,预测出5个潜在风险基因:HSP90AA1、ELAVL1、CEBPB、HSP90AB1和YBX1。结论 MDD与AD共病可能是多种分子和通路的功能异常引起的,且MDD易感基因可能在共病中发挥主要作用。     

模拟失重对流体剪切应力诱导MG-63细胞ERK2激活的影响

目的 研究成骨细胞力学信号转导功能中酪氨酸磷酸结合结构域适应蛋白(Shc)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK2)的关系,并观察模拟失重条件下流体剪切应力(FSS)诱导ERK2活性的变化,以期从信号转导水平探讨模拟失重对成骨细胞力学信号转导功能的影响.方法 将负性缺失突变体质粒Shc-SH2和活性ERK质粒Myc-ERK2共同转染入MG-63细胞中,同时将真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2也共同转染入MG-63细胞中作为转染平行对照组,对转染细胞进行1.5 Pa流体剪切应力处理15 min.利用回转器模拟失重60 h,对转染细胞进行1.5 Pa FSS处理15 min.结果 在转染平行对照组中,FSS组中的Myc-ERK2的活性显著升高;在Shc-SH2转染组中,Myc-ERK2的活性与转染平行对照组相比显著降低(P＜0.05),在FSS组中未见Myc-ERK2活性的变化.转染了真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2的细胞在模拟失重条件培养及FSS作用15 min后,Myc-ERK2的活性升高,但与未进行模拟失重的对照组相比,Myc-ERK2的活性显著降低(P＜0.05).结论 在力学信号转导通路中,Shc可以介导力学信号以激活ERK2.模拟失重对细胞的力学信号转导功能具有不良影响.     

微小RNA在甲状腺癌发生、 发展中的研究进展

微小RNA（miRNA）是一类内源性的、在进化上高度保守的非编码单链小RNA,其在多种生物和代谢过程中发挥着重要作用,包括信号转导及细胞增殖、分化和凋亡。miRNA可以担任抑癌基因或者癌基因,与肿瘤的形成有着密切的联系。近年来的研究结果显示,miRNA与甲状腺癌关系密切,参与了甲状腺癌的发生、发展过程,这与其具有的高侵袭性特征也存在相关性。笔者主要综述miRNA在不同类型甲状腺癌中的最新研究进展。     

G蛋白亚单位基因家族等信号转导分子研究进展

本主要针对以G蛋白亚单位基因家族等信号转导分子研究进展为基础的创新药物分子设计新策略进行概述。就G蛋白的分子结构及其亚单位基因分类;G蛋白亚单位的基因结构特点;G蛋白活性的调节包括G蛋白激活剂、G蛋白拮抗剂和G蛋白信号转导调节因子;基于信号转导分子的药物设计策略,包括G蛋白分子与药物作用靶点、Ras和其他小分子量G蛋白、细胞周期分子、核受体与转录因子、信号转导的抑制剂等进行讨论,并对其前景进行了展望。     

鼻咽癌放射抗拒相关的信号通路

目的 研究具有不同放射抗拒性的人鼻咽癌细胞株CNE-2R与CNE-2的基因表达谱差异,筛选与鼻咽癌放射抗拒相关的基因信号通路.方法 验证已构建的鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R的放射抗拒性,选用Human-6v3.0全基因组表达谱微珠芯片,筛选这2种细胞的差异表达基因.对差异基因进行生物信息学分析,寻找与鼻咽癌放射抗拒...     

功能性消化不良胃动力信息检测与评价

目的 研究功能性消化不良患者胃动力系统的电过程和机械过程.方法 根据临床标准筛选15例功能性消化不良患者,从体表提取生物阻抗胃动力信号和胃电信号,并利用小波变换将阻抗胃动力信号从呼吸和血流等生物阻抗信号中分离出来.通过能谱和频谱分析方法,以及主能量和支配频率等将信号进行分类.结果 接受药物治疗1周后,15例FD患者主述其症状还没有明显缓解或者消除,但此时提取的胃电参数与治疗前相比大都有显著性改变,而来源于阻抗信号的胃动力参数没有显著性变化.结论 阻抗胃动力参数反映胃的运动过程和效果,与同步胃电的结合将为FD和胃动力功能研究提供一种新的无创检测和评价方法.