骨桥蛋白及其受体异常表达在子宫内膜异位症中的作用

目的探讨骨桥蛋白(OPN)及其受体整合素αvβ3在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法随机选取经手术治疗的89例子宫内膜异位症患者的异位和在位内膜作为实验组,同期非内异症患者子宫内膜作为对照组,SP免疫组化法对上述病例的骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达水平进行检测;并对两者进行相关性分析。结果子宫内膜异位症患者的异位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于其在位内膜的表达,子宫内膜异位症患者的在位内膜中骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3的表达高于对照组子宫内膜中的表达;骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3两者在子宫内膜异位症中的表达呈正相关。结论在子宫内膜异位症中存在着OPN、整合素αvβ3的高表达,两者可能协同在子宫内膜异位症的发生发展中起着重要作用。     

整合素β3在子宫内膜异位症与子宫内膜癌中的表达及生物学行为相关性研究

目的研究整合素β3（beta3 integrin）在子宫内膜异位症、子宫内膜癌中的表达,探讨其表达与子宫内膜异位症发生及子宫内膜异位症和子宫内膜癌生物学行为的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测10例子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜,10例子宫内膜癌,10例对照组正常子宫内膜整合素β3的表达。结果整合素β3在子宫内膜异位症在位内膜组的表达显著低于对照组（P〈0.05）,在异位内膜组中的表达显著高于在位内膜组及对照组（P〈0.05、P〈0.05）;整合素β3在子宫内膜癌组中的表达显著高于对照组（P〈0.05）;整合素β3在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达与子宫内膜癌组中的表达差异无显著性（P〉0.05）。结论整合素β3的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生有关;且可能与子宫内膜异位症具有和子宫内膜癌相似的生物学行为有关。     

子宫内膜异位症患者在位和异位内膜上皮细胞ER-α、ER-β的检测

目的探讨ER-α和ER-β在内异症患者在位及异位内膜上皮细胞中的表达与子宫内膜异位症发生机制的关系。方法通过体外细胞培养,利用流式细胞仪检测ER-α和ER-β在正常子宫内膜上皮细胞及内异症患者在位及异位内膜上皮细胞中表达。结果在正常子宫内膜上皮细胞及内异症患者在位及异位内膜上皮细胞中均检测到ER-α和ER-β的表达。而且在正常对照组和在位内膜组上皮细胞中ER-β明显高于ER-α。结论在子宫内膜异位症患者在位内膜,异位内膜上皮细胞中ER-α和ER-β表达有明显差异,表明除了已知的ER-α对子宫内膜增殖和分化的作用,ER-β可能对子宫内膜的功能也有重要影响,并提出深入研究二者之间的关系对子宫内膜异位症的发生发展,临床生物特性,治疗及预后有重要价值。     

TGFβ1与EGFR在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的检测转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）以及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在子宫内膜异位症中的表达,探讨两者在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测子宫内膜异位症患者在位内膜（10例）、异位内膜（10例）、正常子宫内膜（10例）中TGF-β1和EGFR的表达情况。结果TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达显著高于子宫内膜异位症在位内膜组及对照组（P〈0.05）,TGF-β1在子宫内膜异位症在位内膜组及对照组中的表达无显著性差异（P〉0.05）;EGRF在子宫内膜异位症异位内膜组及在位内膜组中的表达显著低于对照组（P〈0.05）,EGFR在子宫内膜异位症异位内膜组及在位内膜组中的表达无显著性差异（P〉0.05）。结论TGF-β1及EGFR的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关。     

甲氨喋呤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜骨桥蛋白和整合素αVβ3表达的影响

目的 探讨甲氨喋呤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及其受体整合素αvβ3表达的影响及其作用机制.方法 建立CIA大鼠模型,分为模型组和甲氨喋呤(MTX)组,后者用MTX进行干预治疗;采用免疫组织化学染色技术检测滑膜组织OPN和整合素αvβ3的表达,ELISA方法检测血清TNF-α水平.结果 ① CIA模型组和MTX组大鼠的滑膜OPN、整合素αvβ3表达均明显高于正常大鼠对照组(均为P<0.01);与模型组比较,MTX组OPN和整合素αVβ3的表达减少(均为P<0.01). ②正常对照组和MTX组大鼠血清TNF-α水平显著性低于模型组大鼠(均为P<0.01).结论 滑膜OPN和整合素αvβ3异常表达在CIA发病中具有重要意义.MTX通过下调滑膜OPN和整合素αvβ3的表达,降低血清TNF-α水平从而达到治疗CIA的作用.     

子宫内膜异位症TGF-β_1及其基因的表达及意义

目的研究子宫内膜异位症中转化生长因子β1（TGF-β1）及其基因表达,探讨TGF-β1在子宫内膜异位症中的作用机制。方法 54例子宫内膜异位症异位内膜、在位内膜,50例对照组正常子宫内膜中,采用免疫组化方法检测TGF-β1的表达,SYBR Green实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）检测TGF-β1 mRNA的表达量。结果 TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的蛋白表达显著高于在位内膜组及对照组（P〈0.05、P〈0.05）;TGF-β1在子宫内膜异位症在位内膜组中的表达与对照组中的表达无显著性差异（P〉0.05）;TGF-β1mRNA在子宫内膜异位症异位内膜中的表达量显著高于在位内膜组和对照组（P〈0.05、P〈0.05）,TGF-β1mRNA在位内膜组的表达量与对照组中的表达量无显著性差异（P〉0.05）。结论 TGF-β1可能参与子宫内膜异位症的发病机制,影响其发生发展。     

生长激素对SD大鼠子宫内膜容受性的影响

目的 观察生长激素对着床期SD大鼠子宫内膜整合素αvβ3(Itgαvβ3)及骨桥蛋白(OPN)表达的影响,以探讨改善子宫内膜容受性的方法.方法 随机将50只雌性SD大鼠平均分成两组,对照组为生理盐水(NS)组,实验组为生长激素(GH)组.取发现阴栓后第4天子宫内膜,用免疫组织化学技术检测子宫内膜Itgαvβ3及OPN的表达,同时首次通过SYBR Green嵌合荧光实时定量PCR技术检测子宫内膜上述两种因子mRNA的表达.结果 GH组子宫内膜Itgαvβ3及OPN的表达呈强阳性,对照组表达弱于GH组,两组差异有统计学意义(Itgαvβ3:77.33±4.23比92.56±16.80,0PN:71.75±8.77比80.73± 13.00,均P＜0.05).实时荧光定量PCR结果与免疫组织化学结果相符.结论 生长激素可以增强着床期子宫内膜Itgαvβ3及OPN的表达,可能可改善子宫内膜容受性,提高临床妊娠率.     

雌激素受体不同亚型在卵巢子宫内膜异位症在位内膜与异位内膜中的表达及其意义

目的 研究雌激素受体(ER)不同亚型在子宫内膜异位症的在位和异位内膜中的表达,以寻找其在不同病灶中的分布规律,探讨子宫内膜异位症的发病机制.方法 收集解放军总医院2004年1月-2006年12月行手术治疗的卵巢子宫内膜异位症石蜡标本,包括卵巢子宫内膜异位囊肿60例及其在位内膜60例(增生期各30例、分泌期各30例)以及正常子宫内膜30例(增生期和分泌期各15例).采用免疫组织化学(EnVision)方法检测上述组织中ERα和ERβ的表达.染色结果半定量化,并分析比较各种组织间的表达差异.结果 各组中,ERα和ERβ在腺上皮的表达与它们在间质细胞中的表达呈正相关.ERα蛋白在不同部位的表达:在位内膜ERα的表达(腺上皮和间质细胞阳性率分别为73.3%和76.7%)高于卵巢子宫内膜异位囊肿(腺上皮和问质细胞阳性率分别为43.4%和46.7%)和正常内膜的表达(腺上皮和间质细胞阳性率分别为56.7%和50.0%),均P<0.05.ERβ蛋白在不同部位的表达:卵巢子宫内膜异位囊肿(腺上皮和间质细胞阳性率分别为90.0%和76.7%)高于在位子宫内膜的表达(腺上皮和间质细胞阳性率分别为68.0%和63.3%),后者又高于正常子宫内膜(腺上皮和间质细胞阳性率分别为36.7%和26.7%),P均<0.05.在位内膜的ERα和ERβ蛋白表达在增殖期均高于分泌期,P均<0.05;异位内膜增殖期和分泌期的表达差异无统计学意义.ERα和ERβ蛋白在不同部位表达的比较:在正常内膜中ERα的表达略高于ERβ,但差异无统计学意义,P>0.05;卵巢子宫内膜异位囊肿中ERβ的表达高于ERα,P<0.05;而在位内膜中两种亚型表达差异无统计学意义.结论 子宫内膜异位症患者在位子宫内膜及异位内膜均有ERα和ERβ的表达,但与正常子宫内膜相比,在卵巢子宫内膜异位囊肿中ERβ表达占优势,而ERα表达受限.ERα和ERβ在不同组织中的分布及表达水平与子宫内膜异位症的发生和发展有着密切关系.     

组蛋白去乙酰化酶1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 研究组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜中的表达,探讨其在子宫内膜异位症发生、发展中的作用. 方法 应用免疫组织化学和免疫印迹法检测20例子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜组织(研究组)中及20例子宫肌瘤患者的子宫内膜组织(对照组)HDAC1的表达情况. 结果 HDAC1阳性着色主要分布于子宫内膜上皮细胞和间质细胞的细胞核,在位内膜中HDAC1的表达强度明显高于对照组子宫内膜(P<0.01).免疫印迹检测提示,子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜组织中HDAC1蛋白的相对表达量分别为2.67±0.69和2.55±1.36,显著高于对照组子宫内膜1.63±0.93(P<0.01,P<0.05);而在位内膜组与异位内膜组之间无统计学差异(P＞0.05). 结论 HDAC1在子宫内膜异位症在位和异位内膜组织中的高表达,可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起重要作用.     

TGF-β1在子宫内膜异位症与子宫内膜癌中的表达及生物学行为相关性研究

目的研究转化生长因子β-（TGF-β1在子宫内膜异位症、子宫内膜癌中的表达，探讨其表达与子宫内膜异位症发生及子宫内膜异位症和子宫内膜癌生物学行为的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测10例子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜，10例子宫内膜癌，10例对照组正常子宫内膜TGF-β1表达。结果TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达显著高于子宫内膜异位症在位内膜组及对照组（P〈0．05、P〈0．05）；TGF—β1在子宫内膜癌组中的表达显著高于对照组（P〈0．05）；TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达与子宫内膜癌组中的表达差异无显著性（P〉0．05）。结论TGF-β1的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生有关；且可能与子宫内膜异位症具有和子宫内膜癌相似的生物学行为有关。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的:研究血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(Vascular endothelial growth factor receptor1,VEGFR1)在子宫内膜异位症(内异症)患者子宫在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症中的作用机制.方法:采用免疫组织化学及Western blot方法检测34例异位症患者在位内膜、异位内膜(内异症组)及34例正常内膜(对照组)组织中VEGF及其受体VEGFR1蛋白的定位及表达.结果:异症组在位及异位子宫内膜组织腺上皮细胞及间质细胞中均有VEGF及VEGFR1蛋白表达,且均高于同期对照组内膜,差异有统计学意义;对照组分泌期内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达高于增生期,呈现周期性变化,而内异症组在位及异位内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达失去周期性变化,分泌期与增生期均高表达,差异无统计学意义.Western blot检测结果与免疫组化结果一致.结论:内异症患者在位及异位内膜组织中VEGF、VEGFR1蛋白高表达可能与内异症的发生发展有关.     

子宫内膜及异位灶趋化因子受体转录在子宫内膜异位症发病中的作用

目的：探讨子宫内膜异位症患者在位内膜及异位灶18种趋化因子受体的转录特征，以揭示趋化因子受体及其配体在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法：以正常子宫内膜为对照，半定量RT-PCR检测子宫内膜异位症患者在位内膜及异位灶18种趋化因子受体mRNA的表达水平，并比较其差异。结果：与正常子宫内膜相比，子宫内膜异位症患者在位子宫内膜CCR6、CCR8、CCR9、CX3CR1表达明显升高（P＜0．05）。与在位内膜相比，异位灶CCR4、CCR8、CCR9、CXCR1表达显著升高（P＜0．05）。结论：在位子宫内膜CCR6、CCR8、CCR9、CX3CR1高表达，可能参与子宫内膜异位症的发生；异位灶CCR4、CCR8、CCR9、CXCR1高表达，可能参与子宫内膜异位症的进一步发展。     

IDO通过整合素αvβ3调控子宫内膜间质细胞黏附能力

探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)通过细胞外黏附分子整合素对子宫内膜间质细胞(ESC)与细胞外基质黏附能力的调控。收集非内异症患者健康内膜、内异症患者在位内膜及异位内膜样组织,体外分离、培养获得子宫内膜间质细胞,并鉴定细胞纯度;In-cell Western比较分析健康、在位和异位ESC中IDO的表达水平,以及脂多糖(LPS)和1-甲基色氨酸(1-MT)单独或联合作用对IDO表达的影响;黏附试验分析LPS和(或)1-MT对ESC与细胞外基质laminin、collagen、fibrino-gen、fibronectin等黏附能力的影响;进一步应用流式细胞术分析LPS或/和1-MT对相应细胞外基质配体-整合素表达的调节。结果显示,IDO在子宫内膜异位症患者来源在位及异位ESC中高表达。炎症因子LPS可以促进ESC中IDO的表达,并通过上调整合素αvβ3增强ESC对细胞外基质collagen I、collagen IV、fibrinogen、fibronectin的黏附。IDO特异性抑制剂1-MT可以抑制ESC表达IDO,并且可以逆转LPS诱导的整合素αvβ3表达及ESC黏附能力。     

子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中骨桥蛋白的表达及意义

目的探讨骨桥蛋白(OPN)在子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中的表达及意义。方法用酶联免疫吸附方法检测40例子宫内膜异位症患者术前血清与腹腔液中骨桥蛋白的表达情况。结果 (1)子宫内膜异位症患者术前血清OPN平均水平为(46.68±16.38)ng/ml(16.69~101.85ng/ml),明显高于对照组患者水平(P<0.05);内异症组患者的腹腔液OPN平均水平为(47.47±15.90)ng/ml(20.35~97.56ng/ml),也高于对照组患者的表达水平(P<0.05)。(2)Ⅲ~Ⅳ期内异症患者的血清与腹腔液中OPN的表达水平均高于I~Ⅱ期患者,差异具有显著性(P<0.05)。(3)内异症患者的血清与腹腔液的OPN表达呈正相关关系(r=0.669,P<0.05);对照组血清与腹腔液的0PN表达亦呈正相关关系(r=0.538,P<0.05)。结论 OPN在子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中高表达,可能促进异位内膜黏附和侵袭,促进血管生成,在子宫内膜异位症发生发展中起重要作用,OPN在内异症的早期诊断方面有一定应用价值。     

胎盘生长因子(PLGF)及其受体血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)及其受体血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)与子宫内膜异位症(endom etriosis,EMS)发病的相关性。方法用免疫组织化学染色法检测28例子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜和异位子宫内膜(增生期、分泌期各14例),以及28例正常子宫内膜(增生期15例,分泌期13例)中PLGF及其受体VEGFR-1的表达。结果PLGF、VEGFR-1在各组内膜中均有表达,分泌期表达高于增生期,有显著差异。EMS的异位子宫内膜中的表达显著高于其在位子宫内膜和正常子宫内膜;EMS的在位子宫内膜和正常子宫内膜之间比较无明显差异。结论PLGF、VEGFR-1可能参与子宫内膜异位症的发病过程。     

自噬基因LC3在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的探讨细胞自噬状态与子宫内膜异位症之间的关系及其意义。方法对子宫内膜异位症患者在位及异位内膜基质细胞(n=31)及正常子宫内膜基质细胞(n=31)行原代培养,进行免疫细胞化学鉴定;应用透射电镜观察组织中细胞自噬泡超微结构变化;采用RT-PCR、Western blot法检测LC3 mRNA和蛋白的表达。结果透射电镜结果显示:子宫内膜在位及异位内膜细胞的自噬泡数目较少。RT-PCR及Western blot法结果显示:子宫内膜异位症患者在位及异位内膜的LC3 mRNA及蛋白的表达水平明显低于正常子宫内膜(P0.05)。子宫内膜异位症患者在位与异位内膜的LC3 mRNA表达差异无统计学意义(P0.05),而异位内膜的LC3蛋白表达水平高于在位内膜(P0.05)。结论子宫内膜异位症患者的在位及异位内膜基质细胞的自噬活性降低,自噬可能参与子宫内膜异位症的发生。     

血管生成素-2和内皮抑素在子宫内膜异位症中的高表达

目的 探讨血管生成素-2（ANG-2）和内皮抑素（ENS）在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法 卵巢子宫内膜异位症病人25例，24例无内膜病变者为对照组。留取子宫内膜，用免疫组化染色法检测ANG -2和ENS在子宫内膜中的表达，用酶联免疫吸附测定法检测腹腔液中ANG -2和ENS的蛋白含量。结果ANG -2在位子宫内膜组织中的阳性表达率显著高于异位内膜和对照组，异位内膜中阳性表达率显著高于对照组；ENS在异位内膜组织中的表达明显高于在位内膜和对照组，在位内膜明显高于对照组；ANG-2及ENS表达强度在子宫内膜异位症Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ比较无显著差异。异位组腹腔液的ANG-2、ENS含量和ANG-2/ENS 比值均显著高于对照组。结论ANG-2和ENS在子宫内膜异位症血管生成中起到重要的作用，参与调节异位病灶的发生和进展。     

Survivin和CD44v6在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的研究Survivin、CD44v6在卵巢子宫内膜异位症中的表达，以探讨二者与卵巢子宫内膜异位症发病的关系。方法用免疫组化S-P方法检测卵巢子宫内膜异位症31例异位内膜、5例在位内膜、15例正常内膜中Survivin和CD44v6的表达。结果Survivin蛋白在异位内膜中表达明显高于在位内膜、正常内膜（P〈0．05）；CD44v6蛋白在异位内膜组与增生期内膜比较有统计学意义（P〈0．05），与其他两组比较无统计学意义（P〉0．05）；二者的表达不随AFS分期的变化而变化；并且二者在卵巢子宫内膜异位症中的表达呈相关性（r=0．24），但无统计学意义（P〉0．05）。结论Survivin和CD44v6在卵巢子宫内膜异位症中的异常表达对卵巢子宫内膜异位症的发生及发展起着重要的作用.     

相对定量的2-△△CT法分析HLA-G基因在子宫内膜异位症中的表达

目的检测人类白细胞抗原-G(HLA-G)在子宫内膜异位症(EM)在位与异位内膜组织中的表达。方法选取卵巢子宫内膜异位囊肿患者30例(实验组),非子宫内膜异位症患者30例(对照组),应用实时荧光定量RT-PCR技术检测实验组在位与异位内膜组织,及对照组在位子宫内膜组织中HLA-G mRNA的表达,2-△△CT法分析结果。结果HLA-G mRNA在实验组在位与异位内膜组织中的表达均明显高于对照组(P<0.05),两者比值约为3.5/1。实验组在位与异位内膜组织中的表达无明显差异(P>0.05)。结论HLA-G mRNA的表达异常可能与EM发病有关。     

白介素-17和血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的作用

目的:探讨白介素-17(IL-17)和血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学及免疫印迹方法检测50例异位症患者在位内膜、异位内膜及47例正常子宫内膜组织中IL-17及VEGF蛋白表达。结果:各组内膜组织腺上皮细胞及基质细胞中均有IL-17和VEGF蛋白表达,内膜异位症在位内膜及异位内膜均高于同期对照组内膜,差异均有统计学意义;对照组分泌期内膜IL-17和VEGF蛋白表达均高于增生期,呈周期性变化,而内膜异位症组分泌期与增生期IL-17和VEGF蛋白均呈高表达,失去周期性变化。结论:内膜异位症患者在位及异位内膜组织中IL-17及VEGF蛋白高表达可能与内膜异位症的发生发展有关。