Demethylation of the γ-synuclein gene CpG island in colorectal cancer and its clinical significance

Objective To explore the relationship between γ-synuclein gene expression and CpG island demethylation in colorectal cancer (CRC), and the relationship between the demethylation and clinicopathological factors of CRC. Methods The expression of γ-synuclein mRNA was examined in 30 pairs of tumor tissues and tumor-matched non-neoplastic adjacent tissues (NNAT) by RT-PCR.CRC cell lines including COLO205, LoVo, and SW480 were used and treated with a demethylating agent, 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-C). Before and after the treatment, the expression of γ-synuclein mRNA in the cells was determined by RT-PCR, and bisulfite sequencing PCR was also used to analyze methylation status of CpG island. The methylation status of γ-synuclein was then examined in 67 CRC samples and 30 NNAT samples by nested methylation-specific PCR (NMSP) and real time methylationspecific PCR (real-time MSP). The relationship between the demethylation of γ-synuclein in CRC and clinicopathological factors was analyzed. Results The mean γ-synuclein mRNA expression was 0.66±0.34 in CRC samples, which was much higher than 0.45±0.26 in NNAT samples (P=0.011). 5-aza-C could induce expression and demethylation of γ-synuclein in COLO205, LoVo and SW480 cells. Γ-Synuclein gene was demethylated in 80.0%(24/30) of the CRC samples and 50.0%(15/30) of the NNAT samples.The demethylated status of γ-synuclein was much higher in CRC samples than that in NNAT samples (P=0.030), and was significantly correlated with clinical stage, lymph node involvement, and distant metastasis of CRC (P＜0.05). Conclusion The upregulation of γ-synuclein expression in CRC is primarily attributed to the demethylation of CpG island, which may be used as a marker for prognosis.     

Demethylation of the γ-synuclein gene CpG island in colorectal cancer and its clinical significance

Objective To explore the relationship between γ-synuclein gene expression and CpG island demethylation in colorectal cancer (CRC), and the relationship between the demethylation and clinicopathological factors of CRC. Methods The expression of γ-synuclein mRNA was examined in 30 pairs of tumor tissues and tumor-matched non-neoplastic adjacent tissues (NNAT) by RT-PCR.CRC cell lines including COLO205, LoVo, and SW480 were used and treated with a demethylating agent, 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-C). Before and after the treatment, the expression of γ-synuclein mRNA in the cells was determined by RT-PCR, and bisulfite sequencing PCR was also used to analyze methylation status of CpG island. The methylation status of γ-synuclein was then examined in 67 CRC samples and 30 NNAT samples by nested methylation-specific PCR (NMSP) and real time methylationspecific PCR (real-time MSP). The relationship between the demethylation of γ-synuclein in CRC and clinicopathological factors was analyzed. Results The mean γ-synuclein mRNA expression was 0.66±0.34 in CRC samples, which was much higher than 0.45±0.26 in NNAT samples (P=0.011). 5-aza-C could induce expression and demethylation of γ-synuclein in COLO205, LoVo and SW480 cells. Γ-Synuclein gene was demethylated in 80.0%(24/30) of the CRC samples and 50.0%(15/30) of the NNAT samples.The demethylated status of γ-synuclein was much higher in CRC samples than that in NNAT samples (P=0.030), and was significantly correlated with clinical stage, lymph node involvement, and distant metastasis of CRC (P＜0.05). Conclusion The upregulation of γ-synuclein expression in CRC is primarily attributed to the demethylation of CpG island, which may be used as a marker for prognosis.     

抑癌基因CpG岛甲基化与结直肠癌关系的研究进展

CpG岛甲基化可导致抑癌基因的表观遗传学转录失活,在某些情况下可能是抑癌基因失活的惟一机制,直接导致肿瘤的发生.笔者对Syk,p15,hMLH1,APC,DCC,p16等抑癌基因CpG岛甲基化与结直肠癌的关系进行简要综述,并提出存在的问题和展望.     

SFRP2启动子CpG岛高甲基化与结直肠癌的相关性

目的:研究SFRP2启动子中CpG岛高甲基化与结直肠癌临床特点之间的相关性。方法:通过基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测特定CpG岛甲基化程度,采用Sequenom EpiTYPER技术检测20例结肠癌中正常组织和肿瘤组织中SFRP2启动子甲基化状态。结果:SFRP2_01_CpG_5(P=0.018)、SFRP2_02_CpG_5(P=0.018)与肿瘤位置相关,SFRP2_02_CpG_6、7、8、9(P=0.039)与淋巴结转移个数有关。SFRP2_01_CpG_1.2(P=0.043)、SFRP2_02_CpG_16(P=0.044)与肿瘤直径大小相关。结论:启动子CpG位点甲基化水平与结直肠癌的临床及病理特点有相关性,表明SFRP2启动子可能是结直肠癌的现阶段和未来进展的潜在的表观遗传学的生物学标志物。     

p16基因启动子甲基化与结直肠癌发生发展的关系

目的　探讨p16基因启动子甲基化在结直肠癌发生、发展过程中的作用及其临床意义。方法　采用RT PCR、免疫组化方法检测p16基因表达 ,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测p16基因启动子甲基化。结果　 5 8例结直肠癌中 ,癌旁肠粘膜、原发灶、肝转移灶中p16表达阳性率分别为97% (5 6 /5 8)、31% (18/5 8)、7% (2 /2 8) ,原发灶、肝转移灶中p16表达明显降低 (P <0 0 1)。癌旁肠粘膜组织中未发现p16基因启动子甲基化 ,而癌原发灶、肝转移灶中p16甲基化阳性率分别为 5 0 %(2 9/5 8)、75 % (2 1/2 8) ,3种组织p16基因启动子甲基化率的差别有显著性意义 (P <0 0 1)。在 2 8例出现肝转移者外周静脉血、胆汁中可检测到p16甲基化启动子序列者分别为 2 3例 (82 % )、2 0例 (71% )。结论　p16基因启动子甲基化导致p16抑癌基因失活与结直肠癌的发生、转移有密切关系。     

去甲基化剂5-氮杂-2''''-脱氧胞苷对胃癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨去甲基化剂5氮杂2’脱氧胞苷(5AzaCdR)对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:使用浓度5×106mol/L和105mol/L的5AzaCdR处理胃癌细胞株AGS、SGC7901、MKN28及MKN45。通过MTT、平板克隆实验观察处理前、后细胞的生长活性,RTPCR检测处理前、后抑癌基因RASSF1AmRNA表达的改变,并应用流式细胞仪进行细胞周期和凋亡率的分析。结果:4株胃癌细胞经不同浓度之5AzaCdR处理后,与对照组相比,生长速度出现不同程度减慢;实验组AGS细胞较对照组细胞克隆形成率显著降低(32.4%、28.5%比57.0%,P<0.01);5AzaCdR处理后,3株无RASSF1AmRNA表达的细胞(AGS、MKN28和SGC7901)均检出基因重新表达;处理前后4株胃癌细胞无明显G1期、G2/M期改变,AGS细胞凋亡率由0.6%增至18.6%和20.2%,MKN28细胞亦出现凋亡率由1.85%增至3.85%和6.61%。结论:去甲基化剂5AzaCdR对胃癌细胞生长周期无显著影响,可能系通过诱导抑癌基因再表达或凋亡等途径,间接抑制胃癌细胞的生长。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对MDA-MB-231乳腺癌细胞SLIT2基因去甲基化作用及细胞运动能力的影响

目的 观察5-氮杂-2’-脱氧胞苷( 5-Aza-dc)对恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞Slit2启动子的去甲基化作用及细胞运动能力的影响.方法 用5、10、20 μmol/L 5-Aza-dc分别处理MDA-MB-231乳腺癌细胞;噻唑蓝(MTT)比色法筛选能够恢复MDA-MB-231细胞Slit2表达的5-Azadc最适浓度为10 μmol/L;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测对照组和10μmol/L处理组Slit2mRNA的表达;划痕实验和趋化实验检测5-Aza-dc给药后,乳腺癌细胞的非定向与定向运动能力的变化;聚集实验检测5 -Aza-dc对MDA-MB-231细胞间黏附能力的影响.结果 在RT-PCR结果中,对照组和10 μmol/L 5-Aza-dc处理组Slit2/GAPDH的密度比值分别为0.630±0.042和1.307±0.057,表明5-Aza-dc可有效恢复乳腺癌MDA-MB-231细胞Slit2的表达(P＜0.05).体外趋化实验显示10 μmol/L 5-Aza-dc处理的MDA-MB-231细胞定向运动能力降低(P＜0.01),趋化凶子上皮生长因子(EGF)浓度为10 μg/L时实验组穿过膜的细胞数为49.46±2.92;对照组为99.44±2.54.伤口愈合实验发现10μmol/L 5-Aza-dc处理的MDA-MB-231细胞非定向运动能力降低(P＜0.05),24h时实验组运动的距离为(0.330±0.016) mm;对照组为(0.440±0.045) mm.聚集实验显示10 μmol/L 5-Aza-dc处理的MDA-MB-231细胞间黏附能力增加(P＜0.01),60 min时实验组聚集指数为0.300±0.028,对照组为0.600±0.034.结论 5-Aza-dc可以使MDA-MB-231乳腺癌细胞Slit2启动子区去甲基化,使Slit2基因表达升高,恢复其抑制肿瘤运动的能力.     

散发性结直肠癌患者血RASSF2和sFRP1启动子区甲基化检测

目的检测散发性结直肠癌患者血清RASSF2和sFRP1启动子区甲基化情况．从而为散发性结直肠癌的早期筛查提供参考。方法使用甲基化特异性PCR检测59例散发性直结肠癌患者和59例健康对照血清sFRP1和RASSF2基因启动子区甲基化的情况,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果59例结直肠癌患者中RASSF2和sFRP1甲基化者分别为16例（27．1％）和18例（30．5％）;而59例健康对照无一例发现RASSF2或sFRP1基因甲基化,差异有统计学意义（均P〈0．01）。29例（49．2％）结直肠癌患者有至少1个基因甲基化,其甲基化率明显高于RASSF2和sFRP1单-基因甲基化率（均P〈0．05）。结直肠癌患者血清RASSF2和sFRP1基因甲基化率与结直肠癌临床病理特征均无明显关系（均P〉0．05）。结论血清RASSF2和sFRP1基因启动子区甲基化水平在结直肠癌组织异常升高,联合两基因的血清甲基化检测可为散发性结直肠癌的早期筛查提供参考。     

5-Aza-dC和TSA对胰腺癌Panc-1细胞TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dC)及组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)对胰腺癌Panc-1细胞系中TFPI-2基因甲基化水平及基因表达的影响。方法 Panc-1细胞经5-Aza-dC和TSA单独或联合处理后,应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白印迹法(Western Blot)检测细胞TFPI-2基因启动子区甲基化状态和mRNA及蛋白表达情况。结果 Panc-1细胞经5-Aza-dC单独处理或与TSA联合处理后,TFPI-2基因启动子区高甲基化状态产生逆转,表现为非甲基化,原本不表达TFPI-2 mRNA及蛋白的Panc-1细胞重新表达,TFPI-2mRNA相对表达量为0.821±0.050和0.887±0.042,蛋白表达量为0.613±0.092和0.712±0.059,两者作用效果相似。经TSA单独处理的Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区仍为异常高甲基化状态,原本不表达的TFPI-2基因未见重新表达。结论 Panc-1细胞中TFPI-2基因启动子区高甲基化可能是导致该基因失活的主要原因;5-Aza-dC单独作用或与...     

外周血Septin9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用

目的:评价外周血Septin9基因甲基化状态在中国结直肠癌筛查中的作用。方法:选取2014年9月—2015年3月于北京大学肿瘤医院内镜中心接受结肠镜检查的170例患者,分析其外周血Septin9基因甲基化状态与临床病理资料的关系。结果:外周血Septin9基因甲基化检测结直肠癌的灵敏度及特异度分别为72.5%(95%CI:62.2%~81.4%)及91.1%(95%CI:82.6%~96.4%)。其阳性率与患者年龄、性别及病变部位无关(P0.05)。低分化癌患者Septin9基因甲基化阳性率高于高分化者(P=0.028),进展期患者的Septin9基因甲基化阳性率高于早期患者(P=0.002)。无论早期或进展期结直肠癌,外周血Septin9基因甲基化检测的灵敏度均高于癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)及糖链抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)(P0.05)。Septin9基因甲基化在结肠腺瘤中的阳性率较低(4.3%)。结论:外周血Septin9基因甲基化检测CRC具有较高的灵敏度及特异度,患者依从性好,有可能提高CRC的早期诊断率。     

粪便基因甲基化检测在结直肠癌及其癌前病变筛查中的作用

目的 探讨粪便中T淋巴细胞成熟相关蛋白（MAL）、细胞周期依赖性激酶抑制因子2A（CDKN2A）和6-氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）基因甲基化状态及其在结直肠癌和癌前病变筛查中的价值.方法 收集69例结直肠癌、24例腺瘤、19例增生性息肉患者及26名健康人群的清晨粪便标本,提取其DNA并进行亚硫酸氢盐修饰处理,采用甲基化特异性PCR技术分析MAL、CDKN2A及MGMT甲基化状态,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系,并比较3个基因甲基化联合检测与粪隐血试验（FOBT）的诊断敏感性.结果 结直肠癌患者粪便DNA中MAL、CDKN2A、MGMT基因启动子甲基化率分别为78.3%、52.5%、55.1%,腺瘤患者分别为58.3%、41.7%、37.5%,增生性息肉患者分别为26.3%、15.8%、10.5%,正常对照人群分别为3.8%、0、3.8% 结直肠癌和腺瘤患者3个基因甲基化水平均显著高于增生性息肉患者和正常对照人群（均P＜0.05）.3个基因甲基化联合检测诊断结直肠癌和腺瘤敏感度分别为92.8%和70.8%,明显高于FOBT的29.0%和25.0%（均P＜0.05）.3个基因甲基化状态与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移、远处转移及TNM分期均无关（均P＞0.05）.结论 粪便中MAL、CDKN2A、MGMT基因启动子甲基化水平在结直肠癌和腺瘤患者中明显升高,其联合检测可望成为结直肠癌及其癌前病变筛查的非侵入性检测方法.     

ER基因CpG岛甲基化的表达及其临床意义

目的:研究ER基因表达及CpG岛甲基化状况与胃癌生物学行为和预后的关系.方法:分别应用免疫组化SP法和限制性内切酶PCR法分析91例胃癌ER的表达和30例胃癌ER墓因CpG岛甲基化的状况.结果:胃癌ER阳性率为38%(35/91),其中高分化腺癌10%(3/30),分别与低分化腺癌43%(13/30)、未分化腺癌53%(8/15)、粘液癌63%(5/8)及印戒细胞癌75%(6/8)比较皆具有显著性差异(P＜0.05);伴淋巴结转移组为55%(11/20),未转移组22.5%(9/40),差异有显著性(P＜0.05).正常胃粘膜ER基因CpG岛未甲基化,而胃癌呈高度甲基化40%(12/30)(P＜0.05).结论:ER在胃癌中的表达与浸润、转移有关,ER阳性胃癌生物学行为差,ER基因CpG岛甲基化可能是胃癌中ER失表达的分子机制.     

结直肠癌患者血清Syk基因甲基化与术后复发转移和预后的关系

目的 探讨血清Syk基因甲基化与结直肠癌术后复发转移和预后之间的关系. 方法 收集120例结直肠癌患者的组织和血清标本,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测Syk基因的甲基化状态.结果 120例结直肠癌患者中37例肿瘤组织发生Syk基因甲基化,其相应血清中32例可检测到同样的甲基化模式;而肿瘤组织未发生甲基化的83例患者的血清中均未检测到甲基化的Syk基因.血清Syk基因甲基化组的淋巴结转移率明显高于无甲基化组(68.8%比38.6%,χ2=8.55,P=0.003);前者的术后转移复发率也明显高于后者(34.4%比9.1%,χ2=10.46,P=0.001);血清Syk基因甲基化组的3年生存率明显低于无甲基化组(65.1%比90.6%,χ2=7.818,P=0.006). 结论 血清Syk基因甲基化状态与肿瘤组织的甲基化状态密切相关,可以作为结直肠癌患者淋巴结转移、预测复发和判断预后的一个指标.     

BNIP3基因甲基化与早期结直肠癌患者临床病理特征的关系

目的分析早期结直肠癌组织中BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化与患者临床病理特征的关系,评价其在结直肠癌发生发展中的作用。方法用甲基化特异性PCR技术分析107例早期结直肠癌患者肿瘤组织中BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果本组结直肠癌组织标本中BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化阳性率为58.9%(63/107)。右半结肠组肿瘤组织中BNIP3基因甲基化明显高于左半结肠组(P<0.001);低分化组明显高于高中分化组(P=0.002)。BNIP3基因甲基化在患者性别、年龄、肿瘤大小和分期等分组间无明显差异。结论早期结直肠癌组织中存在BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化。BNIP3基因高甲基化与早期结直肠癌部位和分化程度密切相关。     

RUNX3基因甲基化在结直肠癌发生中的作用及与预后的关系

目的 探讨RUNX3基因甲基化在结直肠癌发生中作用及与预后的关系.方法 分别用免疫组化和甲基化特异性PCR(MSP)技术检测结直肠正常黏膜、腺瘤和癌组织中RUNX3蛋白表达和甲基化状态,分析甲基化状态与5年生存率的关系.统计分析采用秩和检验Kruskal-Wallis法、x2或Fisher's确切概率法检验、Log-rank检验及多因素COX回归分析.结果 28例腺瘤和65例癌组织中RUNX3蛋白表达率分别为86％( 24/28)、52％( 34/65),明显低于正常组织94％(61/65)(x2=4.328,P=0.037;x2=16.675,P=0.000),腺瘤与癌组织间差异无统计学意义(x2=3.266,P=0.071).正常组织RUNX3基因无甲基化,腺瘤和癌组织中RUNX3甲基化率分别为21％(6/28)、35％ (23/65),明显高于正常组织(P=0.000),腺瘤与癌组织间差异无统计学意义(x2=1.766,P=0.183);腺瘤组织RUNX3基因甲基化者蛋白表达率为67％ (4/6),非甲基化者为91％( 20/22),差异无统计学意义(P=0.191);癌组织RUNX3基因甲基化者蛋白表达率为26％ (6/23),非甲基化者为88％ (28/32),RUNX3基因甲基化与蛋白失表达有关(x2=9.810,P=0.002).甲基化者5年生存率明显低于未甲基化者(x2 =5.87,P=0.016).多因素分析显示,RUNX3基因甲基化是影响结直肠癌患者预后的独立因素(P=0.033).结论 RUNX3基因甲基化是结直肠癌发生中的重要基因事件和影响结直肠癌患者预后的独立因素,可能与蛋白失表达有关.     

结直肠癌中DNA甲基化的研究进展

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,是我国近年来发病率增长最快的肿瘤,其发生率增长了100%,现为第5位恶性肿瘤。过去认为结直肠癌发生是APC、k-ras、p53等基因突变累积使得正常结直肠上皮通过腺瘤演变为腺癌的结果。近来研究表明DNA的甲基化,不同于经典的基因突变,也是肿瘤发生的一种机制[1]。大多数结直肠癌中DNA的甲基化和一些经典的p53、k-ras等基因突变同时存在,而且许多基因如p14、p16、hMLH1等的启动子在结直肠癌中处于甲基化状态。本文将讨论近年来结直肠癌中DNA甲基化的一些研究进展。1DNA甲基化和CpG岛在人的基因组中,有70%…     

结直肠癌患者分泌型卷曲相关蛋白2基因超甲基化研究

目的 分析结直肠癌患者粪便和外周血中分泌型卷曲相关蛋白2(SFRF2)基因甲基化与结直肠癌Dukes分期及组织学分型的关系,评价用SFRP2基因筛查结直肠癌和判断病情的价值.方法 用甲基化特异性PCR技术分析169例结直肠癌,63例结肠腺瘤和46例非腺瘤性息肉患者的瘤组织、粪便和外周血中SFRY2基因甲基化状态,以30例健康志愿者肠镜下肠黏膜活性组织作为对照. 结果本组SFRP2基因在88.2%的结直肠癌组织,65.1%的腺瘤组织和45.7%的非腺瘤性息肉组织中发生超甲基化;在相应的粪便中分别有84.0%、46.0%和32.6%发生超甲基化;在相应的外周血中分别有66.9%、6.4%和2.2%发生超甲基化.在正常对照的结肠黏膜组织和外周血中未检测到SFRP2基因超甲基化,但在粪便中有2例SFRIY2基因甲基化.此外,肿瘤组织和粪便中SFRP2与肿瘤的临床特征包括性别、年龄、位置、大小、Dukes分期等无显著相关性,与分化和浸润程度呈正相关,而外周血中SFRP2基因超甲基化与Dukes分期呈正相关.结论 粪便中SFRF2基因超甲基化可以作为结直肠癌筛查的一种新型分子标记物;外周血中SFBP2基因超甲基化与肿瘤分期呈正相关,可能对判定结直肠癌恶性程度和预后有一定的意义.     

5-氮-2'-脱氧胞苷和曲古抑菌素诱导脾酪氨酸激酶基因去甲基化及转录和表达

目的 观察去甲基化药物(5-氮-2-脱氧胞苷)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂(曲古抑菌素)对结直肠癌细胞HCT-15中脾酪氨酸激酶基因表达、细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 应用2.5 μmol/L的5-氮-2-脱氧胞苷和1 μmol/L的曲古抑菌素分别或联合处理HCT-15细胞,通过甲基化特异性聚合酶联反应、逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹检测处理前后脾酪氨酸激酶的甲基化状态和表达;氚胸腺嘧啶掺入法和体外细胞侵袭试验研究去甲基化前后细胞增殖力和侵袭力的变化.结果 (1)5-氮-2-脱氧胞苷和曲古抑菌素可使脾酪氨酸激酶基因去甲基化而恢复表达,曲古抑菌素增强5-氮-2-脱氧胞苷的去甲基化作用;(2)与脾酪氨酸激酶失表达阴性对照组比较,5-氮-2-脱氧胞苷、曲古抑菌素和联合用药组及脾酪氨酸激酶稳定表达阳性对照组中细胞增殖力分别下降30%、25%、45%和54%;细胞侵袭力分别下降22%、27%、43%和64%.结论 5-氮-2-脱氧胞苷和曲古抑菌素可恢复甲基化脾酪氨酸激酶基因的重新表达,抑制细胞增殖,降低细胞侵袭和转移力.     

结直肠癌患者分泌型卷曲相关蛋白2基因超甲基化研究

目的 分析结直肠癌患者粪便和外周血中分泌型卷曲相关蛋白2(SFRF2)基因甲基化与结直肠癌Dukes分期及组织学分型的关系,评价用SFRP2基因筛查结直肠癌和判断病情的价值.方法 用甲基化特异性PCR技术分析169例结直肠癌,63例结肠腺瘤和46例非腺瘤性息肉患者的瘤组织、粪便和外周血中SFRY2基因甲基化状态,以30例健康志愿者肠镜下肠黏膜活性组织作为对照. 结果本组SFRP2基因在88.2%的结直肠癌组织,65.1%的腺瘤组织和45.7%的非腺瘤性息肉组织中发生超甲基化;在相应的粪便中分别有84.0%、46.0%和32.6%发生超甲基化;在相应的外周血中分别有66.9%、6.4%和2.2%发生超甲基化.在正常对照的结肠黏膜组织和外周血中未检测到SFRP2基因超甲基化,但在粪便中有2例SFRIY2基因甲基化.此外,肿瘤组织和粪便中SFRP2与肿瘤的临床特征包括性别、年龄、位置、大小、Dukes分期等无显著相关性,与分化和浸润程度呈正相关,而外周血中SFRP2基因超甲基化与Dukes分期呈正相关.结论 粪便中SFRF2基因超甲基化可以作为结直肠癌筛查的一种新型分子标记物;外周血中SFBP2基因超甲基化与肿瘤分期呈正相关,可能对判定结直肠癌恶性程度和预后有一定的意义.     

结直肠癌患者分泌型卷曲相关蛋白2基因超甲基化研究

目的 分析结直肠癌患者粪便和外周血中分泌型卷曲相关蛋白2(SFRF2)基因甲基化与结直肠癌Dukes分期及组织学分型的关系,评价用SFRP2基因筛查结直肠癌和判断病情的价值.方法 用甲基化特异性PCR技术分析169例结直肠癌,63例结肠腺瘤和46例非腺瘤性息肉患者的瘤组织、粪便和外周血中SFRY2基因甲基化状态,以30例健康志愿者肠镜下肠黏膜活性组织作为对照. 结果本组SFRP2基因在88.2%的结直肠癌组织,65.1%的腺瘤组织和45.7%的非腺瘤性息肉组织中发生超甲基化;在相应的粪便中分别有84.0%、46.0%和32.6%发生超甲基化;在相应的外周血中分别有66.9%、6.4%和2.2%发生超甲基化.在正常对照的结肠黏膜组织和外周血中未检测到SFRP2基因超甲基化,但在粪便中有2例SFRIY2基因甲基化.此外,肿瘤组织和粪便中SFRP2与肿瘤的临床特征包括性别、年龄、位置、大小、Dukes分期等无显著相关性,与分化和浸润程度呈正相关,而外周血中SFRP2基因超甲基化与Dukes分期呈正相关.结论 粪便中SFRF2基因超甲基化可以作为结直肠癌筛查的一种新型分子标记物;外周血中SFBP2基因超甲基化与肿瘤分期呈正相关,可能对判定结直肠癌恶性程度和预后有一定的意义.