ABO血型系统中Aw基因分子遗传背景的研究与分析

目的：研究一个含有Aw亚型中国汉族家系的ABO基因的遗传机制。方法：对1例血型血清学鉴定为Aw亚型的样本及有关家系，采用PCR-SSP扩增、DNA测序方法，以A101-致序列进行比对，对其ABO等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果：血清学为Aw型样本中ABO基因序列与ABO*A101相比有两个位点发生了突变(467C&;gt;T，543G&;gt;T)，文献中未见报道，为一个新的A等位基因，该样本的家系5人中，2人带有这个新变异的A等位基因。结论：543位突变倒致编码ABO糖基转移酶的156位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸(Leu)，大大降低了酶活性；这个位点对转移酶的活性是至关重要的。     

Am亚型1例

患者，男，28岁，因右肱骨骨折住院，申请输血时发现该患者ABO血型正反定型不一致。抗-A，抗-B标准血清效价均为128(南京军区军事医学研究所)：抗-AB标准血清(本室自制)；ABO试剂红细胞、抗-D、抗-H、抗-A1标准血清(上海血液中心)；微柱凝胶血型定型系统(瑞士达亚美公司)。     

ABO血型系统中Aw基因分子遗传背景的研究与分析

目的:研究一个含有Aw亚型中国汉族家系的ABO基因的遗传机制。方法:对1例血型血清学鉴定为Aw亚型的样本及有关家系,采用PCR-SSP扩增、DNA测序方法,以A101一致序列进行比对,对其ABO等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果:血清学为Aw型样本中ABO基因序列与ABO*A101相比有两个位点发生了突变467C>T,543G>T),文献中未见报道,为一个新的A等(位基因,该样本的家系5人中,2人带有这个新变异的A等位基因。结论:543位突变倒致编码ABO糖基转移酶的156位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸Leu),大大降低了酶活性;这个位点对转移酶的活性(是至关重要的。     

献血者Am亚型1例报告

献血者 ,男 ,2 1岁 ,学生 ,汉族 ,籍贯江苏。初次献血 ,血型初检为Ｏ型 ,复检时发现其血清中含高滴度抗 Ｂ ,但无抗 Ａ ,经进一步检查 ,定为Ａｍ型 ,报告如下。1　材料与方法1 1　试剂来源　抗 Ａ、抗 Ａ1、抗 Ｂ(卫生部长春生物制品研究所 ) ,抗 Ｈ、抗球蛋白试剂 (上海输血研究所国家参比实验室 ) ,抗 ＡＢ和Ｂ细胞、Ｏ细胞 (本室自制 ) ,Ａ1细胞和Ａ2细胞 (达亚美公司 )。1.2　血型血清学1.2 .1　ＡＢＯ正反定型　正定型 :取 4支试管 ,分别加抗 Ａ、抗 Ｂ、抗 Ｈ、抗 ＡＢ各 0 .1ｍｌ,再加入 5 %待检者三洗红细胞 0 .1ｍｌ,混匀 2…     

Am亚型1例

1病例简介献血者,男,18岁,来本站无偿献血300ml,采血后复检正反定型不一致:正定型为O型,反定型为A型。是O型血清中缺乏相应的抗体,还是红细胞含有极弱的抗原?笔者遂对献血者作进一步的血液、唾液检测,发现为弱A抗原中的1种Am亚型。2血型血清学检查2.1试剂抗-A,抗-B标准血清(效价均为128,南京军区军事医学研究所);抗-AB标准血清、ABO试剂红细胞(本室自制);抗-H、抗-A1、IgG抗球蛋白、筛选细胞及聚凝胺(上海市血液中心)2.2ABO正反定型见表1。2.3抗体筛选患者血清与筛选细胞经盐水法、聚凝胺法、抗球蛋白法,结果均为阴性。2.4吸收放散…     

1例Am亚型的鉴定

ABO血型亚型又称为ABO变异型，经血型血清学试验，显示以正反定型不一致及抗原性减弱为主要特征的多种表现型。A型红细胞除A1、A2外，有时可见一些与抗A呈弱反应、甚至不反应的”弱A”变异体，一般也称为A亚型。最近笔者在无偿献血者中发现l例献血者正反血型鉴定不相符，最后确认为Am亚型。现报告如下。     

1例“Am”亚型及其家系调查

"Am"亚型在人群中极少见,如在法国献血者中的频率是1/150 000,在我国台湾省献血者中的频率是1/400 000[1].我们在安顺市的献血者中,首次检出1例"Am"亚型,现报道如下.     

Am亚型1例

亚型是导致正反定型不一致的重要原因之一。近期我科检出Am亚型1例,报告如下。1病历资料患者,女,44岁,因腰椎间盘突出行手术入院。有妊娠史(G2P1),无输血史。术前备血正定型为O型,反定型为A型,抗体筛选阴性。为明确其血型,进一步做血型血清学检查。     

ABO血型变异与B糖基转移酶关系研究

目的研究ABO血型B亚型系统Bw亚型与B糖基转移酶的关系。方法运用血型血清学鉴定方法鉴定1个家庭2例ABO血型的Bw亚型,运用聚合酶链式反应的方法扩增糖基转移酶1~7号外显子,送到试剂公司测序。结果直接测序发现2例ABO血型的Bw亚型,其中B糖基转移酶基因第721位C〉T的转变,导致糖基转移酶多肽链Arg241Trp的转变。结论糖基转移酶基因第721位的C〉T的突变引起糖基转移酶活性的消失或者减弱,导致Bw亚型。     

昆明地区无偿献血者ABO亚型的分子遗传学分析

目的研究无偿献血者中昆明地区ABO亚型的分子机制。方法对26名无偿献血者正反定型不符的标本ABO基因第6、7外显子及侧翼内含子进行测序分析。结果 26例标本中共检测到2个O等位基因(O01、O02)、4个A等位基因(A101、A102、A105、A201)、9个B等位基因(B101、B(A)02、B305、Bel03、Bx02、Bw03、Bw11、Bw17、Bw19)以及1个新的B等位基因。该新等位基因基因第6外显子上检测到255CT,为同义突变。结论本研究揭示了昆明地区献血者ABO血型亚型的分子遗传学背景。ABO基因第6外显子255CT突变未见报道。     

福建省汉族人群Ax亚型分子遗传学分析——附1例新的α1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶等位基因

目的了解福建省汉族人群中Ax亚型的表型频率,探讨其遗传学特征。方法用微板法对本中心2003~2009年的福建汉族献血者共424 792人(份)作血液标本筛查,对血清学表现为Ax亚型的献血者标本和50例(包括30人(份)血清学鉴定为正常A型及20人(份)B型抗-A减弱)对照标本,采用PCR扩增ABO基因第6、7外显子及第6内含子,并对扩增产物测序。结果从424 792份献血者血样中共检出9例Ax亚型,从这些个体的A等位基因中,新发现1例存在467C>T、721C>T突变的Axnew等位基因,3例为已报道的Ax09、2例为A307、2例为A102以及1例A205等位基因。结论福建省人群中Ax的表型频率估计约为0.002 1%,Ax表现型在福建省汉族人群中存在遗传异质性;发现1个新的引起Ax亚型的A等位基因。     

4例Ax亚型血清学及分子遗传分析——发现一个新的Ax等位基因

目的 对4例正反定型不符的献血者标本进行分子遗传分析,分析其分子生物特征.方法 采用吸收放散进行红细胞弱抗原检测,SSP-PCR方法进行基因分型,采用PCR产物直接测序分析其序列.结果 该4例标本均为Ax或AxB亚型,测序结果表明,第六、七外显子含有4个碱基错义突变,分别为nt467T＞C,nt526G＞C,nt539G＞A,nt646T＞A.一个碱基无义突变nt537G＞A.其中nt526G＞C,nt539G＞A两个错义突变和nt537 G＞A无义突变是在Ax亚型个体中首次发现.结论 Ax亚型可能是多个碱基突变,引起氨基酸的改变,导致糖基转移酶活性的降低,从而使红细胞上表达的A抗原大大减少.     

异常ABO表型遗传的分子背景研究

ABO系统是人类最早发现的血型系统,其血清学分型简便、稳定.1925年Bernstein确定ABO血型遗传学说之后,开始被应用于法医学上真正科学意义的亲权关系鉴定. ABO血型的遗传符合经典的遗传规律,直到1964年cis-AB血型的发现,人们才开始进一步研究血型的遗传规律.到目前为止,国内外陆续报道了数个罕见家系,在DNA多态性分析结果显示不能排除或肯定其亲权关系的家族成员中,ABO血型表型遗传不符合孟德尔遗传规律,这引起了研究者对经典遗传规律的质疑.经过血型工作者对ABO血型的分子遗传背景深入研究,已能从ABO基因水平解释此异常现象.     

复合型ABO糖基转移酶的分子生物学与酶动力学的研究

在输血医学最基本的AB0血型系统中，存在着为数不少的ABO抗原性减弱的表型。现在已对这些ABO血型弱表达现象的分子基础进行了广泛的研究，从基因和糖基转移酶水平阐明了部分亚型的调控机理。ABO血型中最为特殊是Cis—AB和B（A）。现已知道2者在基因上可以用相同的理论来解释，随着当前临床使用的商品化血型单克隆抗血清的普及，回顾以前的血清学案例，我们可以把这2个血型放在一起研究。Cis-AB和B（A）血型均具有双重复合糖基转移的功能。     

“Am”亚型引起的正反定型不符1例

李××，男，２７岁，无偿献血者，系本市人。２００１年８月１３日来我站献血，经体检正定血型为“O”型，反定血型为“A”型。后经血型血清学试验和唾液血型物质的测定鉴定为“Am”亚型。现报告如下：１材料与方法１．１标本来源：无偿献血者李××抗凝血３ml，收集唾液２ml。１．２试剂：抗A，抗B上海科华（批号２０００１２２０）及上海生物制品研究所（批号２００１０１０１）。抗A＋B，抗A１，抗H，上海市血液中心（批号分别是２００００５２３，２００１０２１３，２００１０５０８）。Ac、Bc、Oc系本站制备。１．３方法：ABO…     

ABO~* B新等位基因的鉴定1例

目的鉴定1名B抗原弱阳性献血者的血型血清学特点及基因特征。方法采用正反定型及吸收放散试验鉴定其ABO血型,并用PCR技术对ABO基因的7个外显子和启动子分别扩增后测序。结果血型血清学鉴定该个体表达弱B抗原,ABO合子型为B/O,经比对,该标本ABO*B基因存在第6外显子的272T>C的突变。结论发现1例新的ABO*B等位基因。     

罕见B放散型分子遗传背景的分析

目的分析一例罕见B放散型的ABO基因分子遗传背景。方法对一例血型血清学正反定型不符的无偿捐血者样本进行了包括吸收放散、血型物质检测等系列血清学实验后,采用PCR-SSP方法、第6、7外显子PCR产物直接测序,进行ABO基因定型;并对第6、7外显子及第6内含子进行基因克隆序列分析,以及采用PCR扩增样本的ABO基因5端调控(CBF/NF-Y增强子)区域,扩增产物经胶回收后进行直接序列测定。结果经过吸收放散等血型血清学实验鉴定为Bel表现型,在此样本中发现了一个ABO*B变异等位基因,它是在ABO基因的第7外显子695核苷酸位出现T>C突变,导致232位氨基酸由Leu转变为Pro。ABO基因微卫星增强区域序列测定为4个43个碱基长度的重复,第1个重复中nt41为C/G杂合,其余3个重复序列中nt41均为G,定为G/C型(B101/O01等位基因型)。结论在中国人群中再次报道nt695位突变的ABO新等位基因,表明ABO基因的第232位氨基酸对决定ABH糖基转移酶活性是至关重要的。     

ABO血型系统中1种新A2等位基因的发现及在中国福建地区汉族人群中A2亚型调查

本研究探讨ABO血型系统中A2亚型在中国福建地区汉族人群中的分布频率及其分子机制。采用血清学方法鉴定1例A2亚型标本,PCR扩增ABO基因第6、7外显子及第6内含子,PCR产物经割胶纯化后直接测序,并对含有突变位点的扩增片段进行单倍体序列分析;用抗-A1单克隆血清筛查福建地区3 176例A或AB型汉族无偿献血者。结果表明,该例A2亚型的基因型鉴定为A/Olv,与A101相比,其第7外显子存在467C>T和607G>A突变,分别导致多肽链P156L和E203K替换;经标准血清学方法检测,3 176例随机A或AB型献血者(同时期健康献血者约16 527人)未检出A2亚型。结论:首次发现467C>T和607G>A组合的A2等位基因,A2亚型在福建地区汉族人群中罕见。     

Ax新基因的序列分析及其家系的研究

目的探讨Ax亚型中国汉族家系的ABO基因的分子生物学特点。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应扩增法对血清学定为Ax血型的家系总共5份样本做基因分型，对其中4份样本进行直接测序，发现2份有异常杂合序列，进一步采用单倍体特异性引物进行序列测定。结果这个家系中2份ABO基因序列与ABO＊A101相比有3个位点发生了突变（467C〉T、829G〉A，1009A〉G），定为舭新基因，Genbank注册号为DQ092380。结论829位突变导致编码ABO糖基转移酶的277位氨基酸由缬氨酸（Val）转变为甲硫氨酸（Met），很大程度上降低了A2糖基转移酶的活性。推测277位氨基酸处于ABO血型基因编码的转移酶的活性区域。