平哮合剂对哮喘豚鼠气道T淋巴细胞凋亡的影响

目的 :通过动物实验观察平哮合剂的疗效并探讨其作用的分子机制。方法 :采用卵蛋白诱导的豚鼠哮喘模型以平哮合剂治疗 ,治疗 1周后 ,观察其对哮喘潜伏期的影响 ,并与氨茶碱治疗组进行比较。采用流式细胞仪分析豚鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中T淋巴细胞的凋亡率。结果 :平哮合剂能显著延长哮喘豚鼠的诱喘潜伏期 ,作用与氨茶碱相当 (P >0 0 5 )。哮喘豚鼠BALF中T淋巴细胞的凋亡率与正常组比较有显著性差异 (P <0 0 1 ) ,平哮合剂可显著提高哮喘豚鼠BALF中T淋巴细胞凋亡率。结论 :平哮合剂有明确的平喘作用 ,其途径之一可能是通过促进气道粘膜中淋巴细胞的凋亡而实现的。     

氨茶碱对哮喘大鼠肺组织TRAIL的表达及支气管肺泡灌洗液中T淋巴细胞凋亡的影响

目的 研究哮喘大鼠肺组织TRAIL的表达及支气管肺泡灌洗液（BALF）中T淋巴细胞凋亡情况．以及氨茶碱对其的影响。方法 将大鼠分为4组：正常对照组、哮喘组、氨茶碱组及地塞米松组。应用免疫组织化学结合图像定量分析方法对TRAIL蛋白表达进行检测。急性分离大鼠BALF中T淋巴细胞．在植物凝聚素-P（PHA-P）的刺激下培养2h，经流式细胞仪检测大鼠BALF中T淋巴细胞凋亡率。结果 大鼠肺组织TRAIL呈组成性表达，哮喘时．其表达明显增加（P〈0．05）．氨茶碱可以减少哮喘大鼠肺组织TRAIL。表达（P〈0．05）。哮喘大鼠BALF中的，T淋巴细胞凋亡率较正常大鼠明显下降（P＜0．05），氨茶碱可以促进哮喘大鼠BALF中的T淋巴细胞凋亡（P＜0．05）。结论 氨茶碱可能通过抑制肺组织TRAIL的表达来抑制TRAIL的促炎作用，同时还可以通过促进哮喘大鼠气道的T淋巴细胞凋亡发挥抗炎作用。     

糖皮质激素对哮喘豚鼠气道T淋巴细胞凋亡的影响

摘要：目的探讨地塞米松减轻哮喘气道炎症的作用及其分子机制。方法采用卵白蛋白致敏法建立豚鼠哮喘模型，以定喘止咳片做药物对照，治疗1周后记录各组的诱喘潜伏期，并进行肺组织病理学检查，同时分离BALF液中T淋巴细胞采用流式细胞仪定量检测方法（FITC—AnnexinV／PI染色法）测定其凋亡率。结果地塞米松能显著延长哮喘豚鼠的诱喘潜伏期、减轻气道炎症、促进BALF中T淋巴细胞的凋亡，作用明显优于定喘止咳片（P〈O．05）。结论地塞米松有明确的抗炎平喘作用，促进气道T淋巴细胞凋亡可能为其主要的作用机制之一。     

加味玄麦甘桔汤对哮喘豚鼠气道T淋巴细胞凋亡的影响

目的从细胞凋亡的角度深入探讨加味玄麦甘桔汤对哮喘豚鼠气道炎性细胞浸润的影响及其作用机制。方法采用卵白蛋白致敏法建立豚鼠哮喘模型,以博利康尼做药物对照,治疗1周后对豚鼠进行支气管肺泡灌洗用于细胞记数及分类,同时分离BALF液中T淋巴细胞,采用流式细胞仪定量检测方法（FITC-Annexin V／PI染色法）测定其凋亡率。结果加味玄麦甘桔汤能显著减轻哮喘豚鼠的气道炎症、促进BALF中T淋巴细胞的凋亡,作用优于博利康尼（P〈0．05）。结论加味玄麦甘桔汤有明确的气道抗炎作用,促进T淋巴细胞凋亡可能为其主要的作用机制之一,      

平哮合剂治疗寒性哮喘34例

目的：观察中药组（平哮合剂）、氨茶碱组治疗前后患肺通气功能,临床症状改善及可溶性白细胞介素2受体（SIL－2R）的变化,方法：运用酶联免疫吸附双抗体夹心法测定各组患的血清SIL－2R水平。结果：平哮合剂在改善肺功能,临床症状方面疗效比氨茶碱明显（P＜0．05,或P＜0．01）,中药组血清SIL－2R水平比氨茶碱组明显降低（P＜0．05）。     

壁虎粉对哮喘豚鼠模型干预作用的实验研究

目的探讨壁虎粉平喘的部分作用机理。方法采用卵蛋白致敏激发豚鼠哮喘为模型,观察壁虎粉干预组、氨茶碱对照组和哮喘模型组动物哮喘发病情况,肺泡灌洗液（BALF）中EOS含量及豚鼠肺组织病理学的改变。结果壁虎粉和氨茶碱组BALF中EOS含量明显低于哮喘模型组,病理学提示壁虎粉能抑制局部炎症细胞浸润、保护气管粘膜的完整性。结论壁虎粉可通过抑制气道炎症,促进EOS凋亡等途径发挥平喘作用。     

孟鲁司特对哮喘大鼠淋巴细胞凋亡的作用及其机制

目的：观察孟鲁司特（MK）对哮喘大鼠淋巴细胞凋亡的影响并探讨其分子机制。方法：40只大鼠随机分为正常组、哮喘组、MK和地塞米松（DXM）组。采用卵蛋白（OVA）腹腔注射致敏并反复雾化吸入刺激建立大鼠哮喘模型，药物干预组管喂MK或腹腔注射DXM。采用双标记双染色的方法先标记CD4^ /CD8^ T淋巴细胞，然后用原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，采用免疫组化的方法检测淋巴细胞Fas的表达。结果：哮喘大鼠外周血及肺组织中T淋巴细胞的凋亡率低于正常组大鼠，MK、DXM处理后，CD4^ /CD8^ T淋巴细胞凋亡率均明显升高，与哮喘组及正常组比较差异均具显著性（P＜0．01）。体外培养时MK呈剂量和时间依赖性促进OVA抗原刺激的外周血淋巴细胞Fas表达水平及凋亡，其中以CD4^ T淋巴细胞凋亡率和Fas表达的增加更为明显，与CD8^ T淋巴细胞比较差异具显著性（P＜0．05）。10^-6mol/L的MK可明显促进10^-4mol/L DXM对淋巴细胞凋亡的诱导作用。结论：MK可促进哮喘大鼠外周血及肺组织中CD4^ T淋巴细胞凋亡，该作用可能通过Fas途径介导。MK对DXM促淋巴细胞凋亡具有协同作用。     

氨茶碱雾化吸入对正常及哮喘豚鼠气道粘膜的影响

目的 观察吸入氨茶碱对正常豚鼠气道粘膜的影响及对豚鼠哮喘的预防作用。方法 ３４只豚鼠随机分为６组：对照组、正常动物氨茶碱吸入组、哮喘组、哮喘豚鼠０．５％氨茶碱吸入组、哮喘豚鼠地塞米松吸入组、哮豚鼠０．５％氨茶碱＋地塞米松吸入组,分别行肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）、血清茶碱浓度及病理学检验。结果 正常动物吸入氨茶碱后气道粘膜上皮纤毛不完整,上皮细胞脱落,表面有炎性渗出,粘膜及粘膜下层炎性细胞浸润明显,肺泡     

平哮合剂对哮喘豚鼠模型影响的实验研究

目的研究平哮合剂对哮喘豚鼠引喘潜伏期及气道炎性细胞浸润的影响.方法采用卵白蛋白致敏法制造动物模型.末次给药后24 h记录诱喘潜伏时间,并行支气管肺泡灌洗用于细胞记数及分类.结果平哮合剂能显著延长哮喘豚鼠的诱喘潜伏期,与模型组相比P＜0.05,并能明显减轻哮喘豚鼠气道内(EOS)的浸润,与模型组相比P＜0 05.结论平哮合剂具有明确的平喘、抗炎作川.     

补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠模型IL-5信号通路的调控机制

目的：观察中药补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素-5（IL-5）水平以及嗜酸粒细胞（ EOS）上白介素-5受体α（ IL-5 R α）mRNA表达的影响,探讨中药补肺益肾方通过IL-5信号通路促进哮喘EOS凋亡的机制。方法24只健康幼龄豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组。以卵蛋白致敏激发制备豚鼠哮喘模型,分离豚鼠BALF中的EOS,酶联免疫吸附法（ ELISA）检测BALF中IL-5的含量,TdT介导的dUTP缺口末端标记法（ TUNEL）检测EOS凋亡,原位杂交检测IL-5 RαmRNA表达。结果模型组IL-5水平高于正常组（ P﹤0.01）,中药组IL-5水平低于模型组（ P﹤0.05）。模型组豚鼠EOS凋亡明显减少,中药组EOS凋亡明显高于模型组（ P﹤0.01）。模型组豚鼠EOS表达IL-5 Rα mRNA明显低于正常组（ P﹤0.01）,中药组EOS表达 IL-5 RαmRNA明显增加（ P﹤0.05）。结论中药补肺益肾方可通过降低气道IL-5水平,促进IL-5 RαmRNA表达,来促进EOS凋亡,减轻气道炎症,从而达到防治哮喘的目的。     

止嗽立效颗粒对哮喘豚鼠气道变应性炎症的影响

目的：制备豚鼠哮喘模型,观察止嗽立效颗粒抗气道变应性炎症作用。方法：以卵蛋白致敏豚鼠为哮喘模型动物,灌胃给予不同剂量的止嗽立效颗粒,观察治疗后各组豚鼠外周血和肺胞灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞（EOS）计数和白细胞介素-5（IL-5）含量。结果：外周血中,空白对照组和止嗽立效颗粒组的EOS计数和IL-5含量均比模型组显著降低（P〈0.01）;BALF中,空白对照组和止嗽立效颗粒组的EOS计数和IL-5含量也均比模型组显著降低（P〈0.01）。结论：止嗽立效颗粒具有抗哮喘豚鼠气道变应性炎症作用,其机制可能是降低机体IL-5的表达,并减少血液中EOS的数量。     

布地奈德对哮喘小鼠淋巴细胞凋亡和stat5b/Bcl-xL信号通路的影响

[摘要] 目的 观察布地奈德（BUD）吸入治疗对哮喘小鼠淋巴细胞凋亡的作用,及其对stat5b/Bcl-xL信号通路的影响,探讨BUD的作用靶点。方法 SPF级的Balb/c雌性小鼠30只随机分为正常组、哮喘组、BUD组,每组10只。用卵清蛋白（OVA）腹腔注射和雾化吸入制备哮喘小鼠模型。所有小鼠于末次激发后24 h处死,取右肺作病理切片,行左肺支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞总数计数。用流式细胞仪检测各组小鼠脾脏淋巴细胞的细胞凋亡率;用半定量RT－PCR检测各组小鼠脾脏淋巴细胞stat5b基因和Bcl-xL基因的mRNA表达。结果 哮喘组与正常组比较,BALF白细胞总数增多,淋巴细胞凋亡率降低,stat5b基因和Bcl-xL基因的mRNA表达增高;BUD组与哮喘组比较,BALF白细胞总数减少,淋巴细胞凋亡率增加,stat5b基因和Bcl-xL基因的mRNA表达降低。 结论 BUD能促进哮喘淋巴细胞凋亡,减轻气道炎症,并且下调stat5b/Bcl-xL信号通路,提示stat5b/Bcl-xL信号通路可能是BUD治疗哮喘的一个重要作用靶点。     

哮喘豚鼠MMP-9、TIMP-1的表达及与气道炎症、重塑的关系

目的：观察实验性哮喘豚鼠BALF中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其抑制剂（TIMP-1）的表达；观察哮喘豚鼠气道平滑肌MMP-9、TIMP-1的表达及气道平滑肌面积的变化。方法：用免疫组化方法结合显微图像分析测定气道平滑肌MMP-9、TIMP-1免疫反应的变化及气道平滑肌厚度；BALF中细胞总数；MMP-9、TIMP-1阳性细胞百分比。结果：MMP-9、TIMP-1广泛分布于气道平滑肌；哮喘组MMP-9平均灰度值明显低于对照组（P〈0．01）；哮喘组TIMP-1平均灰度值明显低于对照组（P〈0．01）；哮喘组气道平滑肌厚度明显高于对照组（P〈0．05）；BALF中哮喘组嗜酸粒细胞明显高于对照组（P〈0．05）；巨噬细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞MMP-9、，TIMP-1均呈阳性；且哮喘组MMP-9及TIMP-1阳性细胞百分比比对照组MMP-9及TIMP-1明显增高（P〈0．01）。结论：MMP-9、TIMP-1可能与哮喘气道炎症及气道重塑有关。     

平哮定喘膏治疗哮喘缓解期60例临床观察

目的探讨中药平哮定喘膏对缓解哮喘患者抗变态、抗感染、提高机体免疫力的作用机制。方法应用平哮定喘膏治疗哮喘缓解期患者60例，并与西药对照组30例进行随机对照，观察两组治疗前后临床症状、体征及血中白介素-2（IL-2）、白介素-8（IL-8）、内皮素（ET）、特异性免疫球蛋白E（IgE）的变化。结果治疗组治疗后临床症状、体征有显著改善（P〈0．01），IL-2含量明显升高（P〈0．01），IgE、ET、IL-8含量明显降低（P〈0．01），优于对照组（P〈0．05）。临床观察未发现平哮定喘膏有明显毒副作用。结论平哮定喘膏可能通过升高IL-2，降低IgE、ET、IL-8的含量对哮喘缓解期具有较好的治疗作用，且使用安全。     

补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞凋亡和IL-5受体表达的影响

目的观察中药补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveo larlavage fluid,BALF）中嗜酸粒细胞（eosinophils,EOS）白介素-5受体α（interleukin-5Rα,IL-5Rα）mRNA表达的影响,探讨中药补肺益肾方促进哮喘EOS凋亡的机制。方法 24只健康幼龄豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组。以卵蛋白致敏激发制备豚鼠哮喘模型,分离豚鼠BALF中的EOS,TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TdT-mediated dUTP nick end labeling ,TUNEL）检测细胞凋亡,原位杂交检测IL-5RαmRNA表达。结果模型组豚鼠EOS凋亡明显减少,中药组EOS凋亡明显高于模型组（P〈0.01）。模型组豚鼠EOS表达IL-5RαmRNA明显低于正常组（P〈0.01）,中药组EOSIL-5RαmRNA表达明显增加（P〈0.05）。结论中药补肺益肾方可通过促进IL-5RαmRNA表达,降低IL-5生物学功能,促进EOS凋亡,减轻气道炎症,从而达到防治哮喘的目的 。     

支气管哮喘大鼠心肌细胞凋亡研究

目的探讨支气管哮喘心肌细胞损害的机制，为法医学实践中哮喘猝死案例的死因鉴别诊断提供形态学依据。方法建立支气管哮喘模型，实验组分别予以肾上腺素、氨茶碱治疗，应用HE、TUNEL及流式细胞术，对各组大鼠心肌细胞凋亡的规律进行研究。结果实验组心肌细胞的凋亡指数（PI）和凋亡率明显高于对照组（P〈0．05），随哮喘时间延续，PI和凋亡率均明显增加，至第8周最高。实验各组心肌细胞的凋亡依次为：肾上腺素组〉肾上腺素加氨茶碱组〉哮喘模型组〉氨茶碱组。结论哮喘促进心肌细胞凋亡机制的激活引起心肌细胞凋亡是哮喘心肌损害的分子病理机制中一个重要因素，哮喘心肌细胞凋亡与哮喘发作时间及某些哮喘治疗药物如β2受体激动剂——肾上腺素的使用有一定关系。     

太子健Ⅱ煎剂对哮喘模型豚鼠IL-8及TNF—α的影响

目的观察太子健Ⅱ煎剂对哮喘模型豚鼠哮喘发作情况及支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,探讨其抗小儿哮喘复发的作用机制。方法将50只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、高、低剂量太子健II煎剂组,各10只。卵白蛋白致敏并成功诱发哮喘,分别灌服O．9％氯化钠注射液、地塞米松（DxM）、高、低剂量太子健Ⅱ煎剂,连续15d。观察其体质量的变化：测定其末次诱喘引喘潜伏期：检测BALF中IL-8及TNF-α含量。结果模型组豚鼠出现典型的哮喘发作症状,体质量增长缓慢,BALF中IL-8及TNF-α含量明显升高（P〈O．01）。与模型组比较,太子健Ⅱ高剂量组能减轻哮喘症状,体质量增长显著,延长引喘潜伏期（P〈0．05）;能降低BALF中IL-8及TNF-α的水平（均P〈0．05）。结论太子健Ⅱ煎剂可能通过对哮喘豚鼠整体免疫功能调整,降低气道炎性细胞囚子,从而一定程度上减轻气道的慢性变应性炎症。     

滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响

目的：研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2（IL-2）含量的变化及滨蒿内酯（Sco）对其的影响。方法：建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值，比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素（PHA）诱导的T淋巴细胞转化以及脾细胞分泌IL-2活性的影响。结果：Seo剂量依赖地对哮喘豚鼠淋巴细胞增殖有抑制作用；Seo能够抑制PHA诱导的哮喘朦鼠T淋巴细胞转化；哮喘豚鼠IL-2生成水平高于正常对照组。Seo也可抑制哮喘豚鼠IL-2的活性。结论：Seo在体外抑制哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和脾淋巴细胞产生IL-2的水平，可能是其治疗哮喘的免疫学机制之一。     

滨蒿内酯对豚鼠哮喘模型的炎性介质抑制作用

目的：研究滨蒿内酯（Seo）对豚鼠哮喘的抗炎作用及机制。方法：制备迟发性哮喘豚鼠模型，免疫组化法检测豚鼠血浆和支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素5（IL-5）含量；电镜法对豚鼠肺组织细胞溶酶体磷脂酶A：（PLA2）进行染色，井通过图像分析定量检测其含量。结果：哮喘组IL-5及PLA2的含量与正常对照组比较明显增高（P〈0．05）；提前雾化给予42mg／L，340mg／L的Seo组与哮喘模型组比较明显降低IL-5及PLA2含量（P〈0．05）。结论：Seo可能通过抑制IL-5及PLA2发挥其对支气管哮喘的作用。     

支气管哮喘大鼠淋巴液中淋巴细胞线粒体跨膜电位变化及地塞米松对其干预的影响

目的 探讨哮喘大鼠淋巴液中淋巴细胞线粒体跨膜电位、Fas/FasL变化以及地塞米松干预的影响.方法 建立哮喘模型,收集激发后2、6、12、24、48 h淋巴液、血液、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中淋巴细胞,流式细胞仪(FCM)检测淋巴细胞线粒体的跨膜电位(△·ψm),细胞免疫组化(SABC法)检测淋巴细胞表面Fas/FasL蛋白的表达.结果哮喘组淋巴液、血液、BALF淋巴细胞线粒体跨膜电位均较对照组和治疗组峰值升高(P＜0.05),而对照组和治疗组之间则无显著性差异(P＞0.05);与对照组、治疗组相比较,哮喘组淋巴液和BALF中淋巴细胞表面Fas、FasL蛋白光密度明显降低(P＜0.001),而治疗组和对照组比较无显著性差异(P＞0.05).结论 哮喘大鼠淋巴液、血液、BALF中均存在明显的淋巴细胞早期凋亡障碍和Fas/FasL表达降低,尤其是哮喘淋巴液中淋巴细胞凋亡障碍和Fas/FasL降低程度较其血液、BALF更为明显;地塞米松可能是通过提高哮喘Fas/FasL蛋白的表达来加速淋巴细胞凋亡而发挥治疗作用.