As2O3诱导K562细胞凋亡过程中酪氨酸蛋白激酶活性的变化

目的：阐明Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡的可能机制，为Ａｓ２Ｏ３治疗白血病的推广应用提供一定的理论基础。方法：采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及生物化学等方法，观察在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶（ＰＴＫ）活性及某些内源性蛋白酪氨酸磷酸化的变化。结果：在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白ＰＴＫ活性降低，分子量为１８万和１２．５万的蛋白酪氨酸磷酸化减少。结论：Ａｓ２Ｏ３可能通过降低细胞内某些蛋白，尤其ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白的ＰＴＫ活性，减少蛋白酪氨酸磷酸化，从而阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ抗凋亡信号的传导，诱导Ｋ５６２细胞凋亡     

慢性粒细胞白血病发病机理研究的进展

慢粒白血病（ＣＭＬ）最大的特点是存在特异性的Ｐｈ染色体即ｔ（９；２２）。该易位产生ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因，其表达为一个具有高酪氨酸激酶活性的ＢＣＲ／ＡＢＬ融合蛋白，后者被认为是ＣＭＬ发病的分子基础。本文就ＡＢＬ及ＢＣＲ蛋白的正常结构和生物学活性以及ＣＭＬ细胞中ＡＢＬ蛋白ＰＴＫ的激活及其所介导的致癌信号的传导进行综述，以助进一步了解ＣＭＬ的发病机理。     

酪氨酸激酶抑制剂抗白血病作用研究进展

绝大多数慢性髓系白血病和部分成人急性淋巴细胞白血病存在Ｐｈ染色体,即９号、２２号染色体易位,ｔ（９;２２）ｑ３４;ｑ１１）。该易位产生ＢＣＲ－ＡＢＬ嵌合基因,并表达ＢＣ－ＡＢＬ蛋白。本文综述近年来酪氨酸激酶抑制治疗进展。     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞增殖活性的影响

本研究表明，灵芝多糖（ＧＬＰ）能直接刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖，并能协同ＰＨＡ刺激ＣＢＭＣ增殖在ｒＩＬ－２诱导人脐血ＬＡＫ细胞（简称ＣＢ－ＬＡＫ）早期加入ＧＬＰ，能明显增强ＣＢ－ＬＡＫ细胞增殖活性，最佳浓度１０μ／ｍｌ；ＧＰＬ本身不能诱导ＣＢＭＣＩＬ－２Ｒ的表达，但能协同ｒＩＬ－２提高ＣＢ－ＬＡＫ细胞表达ＩＬ－２Ｒ的表达。     

连接蛋白CRKL及其相关蛋白与造血调控信号传导

ＣＲＫＬ为具有ＳＨ２及ＳＨ３结构的连接蛋白,可与细胞内不同蛋白结合参与造血调控所涉及的广泛的信号传忸。在ＢＣＲ／ＡＢＬ的细胞,ＣＲＫＬ持崦显著地酪氨酸磷酸化,对ＢＣＲ／ＡＢＬ的恶性转化有重要作用。本文就ＣＲＫＬ来源。结构及功能,ＣＲＫＬ所识别并结合的蛋白以及ＣＲＫＬ在慢性同蛋白血病中的作用进行了综述。     

BCR—ABL嵌合蛋白质信号转导研究进展

ｐ２１０（ＢＣＲ－ＡＢＬ）的ｐ１９０（ＢＣＲ－ＡＢＬ）分别是慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）及部分急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的特征性ＢＣＲ－ＡＢＬ嵌合基因的表达产物，与正常Ｃ－ＡＢＬ蛋白质比较，它们具有极强的蛋白质酷氨酸激酶活性，通过自身磷酸化和使其它胞浆蛋白质磷酸化而干扰控制造血干细胞或造血祖细胞发育的信号转导过程，是相关白血病病理发生的主要原因和标志。本文综述，ＢＣＲ－ＡＢＬ嵌合蛋白质信号转导的近     

红细胞对LAK细胞增殖及杀伤活性的影响

本文采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入及ＭＴＴ法研究了红细胞（ＲＢＣ）对人自体外周血ＬＡＫ细胞增殖及杀伤活生的影响，发现ＲＢＣ对ＬＡＫ的ＤＮＡ合成有抑制作用，ＭＴＴ法证明Ｒ抑制ＬＡＫ细胞增殖并随ＲＢＣ浓度的加大，其抑制作用加强。ＲＢＣ对ＬＡＫ细胞的杀伤活性明显地增强作用，并呈浓度依赖关系。     

连接蛋白CRKL在正常血细胞和表达BCR／ABL细胞中的研究进展

ＣＲＫＬ是由２２号染色体ｑ１１的ｃｒｋｌ基因编码的含ＳＨ２、ＳＨ３结构域的３９ｋＤａ的连接蛋白。ＣＲＫＬ羧基端ＳＨ３结构域与Ｃ３Ｇ、ＳＯＳ、Ｐ１３－Ｋ、ＨＰＫｌ、ｃ－ＡＢＬ或ＢＣＲ／ＡＢＬ结合,ＣＲＫＬ氨基端ＳＨ２结构域与酷氨酸磷酸化的蛋白如ＣＢＬ、ＨＥＦ１、ＣＡＳ、ＳＴＡＴ５或ｐａｘｉｌｌｉｎ结合,在正常造血细胞和白血病中ＢＣＲ／ＡＢＬ的主要底物,与ＢＣＲ／ＡＢＬ和ｃ－ＡＢＬ形成连接复活复合物。     

酪氨酸激酶抑制剂 Herbimycin A 联合化疗药物对 K562 细胞凋亡的影响

目的：探讨慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）细胞抗凋亡机制和诱导ＣＭＬ细胞凋亡的有效方法。方法：采用Ｋ５６２细胞培养，观察酪氨酸激酶抑制剂ＨｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ（ＨＭＡ）联合化疗药物对ＣＭＬ细胞凋亡的影响，探讨ＨＭＡ对ＣＭＬ细胞的作用。结果：ＨＭＡ或化疗药物单独应用可抑制Ｋ５６２细胞增殖，但不能明显诱导其凋亡。ＨＭＡ能明显增强化疗药诱导Ｋ５６２细胞凋亡。加入外源性巯基化合物阻断ＨＭＡ与酪氨酸激酶的结合可完全取消这种作用。结论：ＨＭＡ通过抑制ＣＭＬ细胞内酪氨酸激酶活性促进细胞凋亡而增加对化疗药物的敏感性，表明酪氨酸激酶抑制剂作为治疗ＣＭＬ药物具有潜在的应用价值。     

慢性乙肝病人自体LAK细胞培养和治疗分析

本文通过对２３例慢性乙肝病人自体ＬＡＫ细胞培养,分析得出白细胞介素Ⅱ、ＣＤ３单抗、植物血球凝集素（ＰＨＡ０）等ＬＡＫ细胞活性地强因子,可以明显提高ＬＡＫ细胞的主增能力和活性,适量的ＲＢＣ可促进ＬＡＫ细胞增殖及活性;ＬＡＫ／ＩＬ－２回输疗法对ＨＢｅＡｇ阳性的慢性乙肝病人转阴率好,疗效巩固;ＬＡＫ细胞最佳的回输时间是７～１６天。     

儿童急性淋巴细胞白血病 TEL／AML1融合基因的检测及其临床意义

目的 研究我国儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中伴有ｔ（１２；２１）易位的发生率及其临床预后特征。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＰＴ－ＰＣＲ）技术检测ＴＥＬ－ＡＭＬ１融合基因转录本。结果 在６０例儿童（Ｂ系４５例，Ｔ系１３例，Ｔ、Ｂ系双表达２例）中共发现８例Ｂ系ＡＬＬ中有ＴＥＬ－ＡＭＬ１融合基因转录本，治疗后８例均获得完全缓解（ＣＲ）。结论 ｔ（１２；２１）Ｂ系ＡＬＬ是儿童ＡＬＬ中最多见且预后     

BCR—ABL融合蛋白多样性及其与白血病表型的关系

本文报告ＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白的变化及其与白血病表型的关系。首先报告各种ＢＣＲ－ＡＢＬ融合基因的结构及其转录本。可分为三种类型，即Ｍ－ｂｃｒ，ｍｂｃｒ和μ－ｂｃｒ，以及它们见于那些白血病。其次报告ＢＣＲ断点位置的变化，ＡＢＬ的特殊断点，ＢＣＲ－ＡＢＬ信息ＲＮＡ的拼接。ＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白的结构和白血病的关系。引外ＢＣＲ／ＡＢＬ细胞还带有染色体的其它异常，Ｐｈ染以体的变种等。最后论述了ＢＣＲ／ＡＢ     

粒-巨噬系集落刺激因子和红细胞生成素诱导 JAK2 酪氨酸磷酸化并使之激活

目的：确定与细胞内蛋白质酪氨酸磷酸化相关的激酶。方法：用粒－巨噬系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）依赖细胞株ＵＴ－７以及Ｅｐｏ依赖细胞株ＵＴ－７／Ｅｐｏ进行酪氨酸磷酸化的研究。结果：当ＧＭ－ＣＳＦ或Ｅｐｏ刺激其生长依赖细胞时可快速诱导分子量为１４５０００，１３００００，８００００和４００００等多种蛋白质酪氨酸磷酸化。鉴定了分子量为１３００００酪氨酸磷酸化的蛋白质为ＪＡＫ２，一种非受体型酪氨酸激酶。同时，ＧＭ－ＣＳＦ或Ｅｐｏ刺激亦可激活ＪＡＫ２激酶活性。酪氨酸磷酸化和激活ＪＡＫ２只发生在ＧＭ－ＣＳＦ或Ｅｐｏ生长依赖细胞。结论：ＪＡＫ２信号传导途径在ＧＭ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ诱导的细胞增殖中起重要作用。     

自体LAK细胞对白血病细胞清除作用的实验研究

采用￣（５１）Ｃｒ４小时释放试验，细胞培养及组化分析技术，研究了２６例初诊急性髓细胞白血病患者（ＡＰｓ）和其中的１２例缓解期患者（ＲＰｓ）的ＬＡＫ细胞对自体白血病细胞（Ａｕｔｏ－ＬＢ）的清除作用。ＡＰｓ的外周血或骨髓通过双层Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙｐａｑｕｅ分离所得富含淋巴细胞层中含２０％～５０％的Ａｕｔｏ－ＬＢ，在ｒＩＬ－２１０００Ｕ／ｍｌ的培养基中培养１～２周Ａｕｔｏ－ＬＢ消失。而￣（５１）Ｃｒ４小时释放试验的结果是ＡＰｓ－ＬＡＫ和ＲＰｓ－ＬＡＫ细胞胞对Ａｕｔｏ－ＬＢ的杀伤活性分别为１２．９％±１２．３％和２４．１％±１２．０％，均较其对Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性（３６．０％±３２．０％和６６．２％±１８．１％）显著减低（Ｐ＜０．０１），提示：Ａｕｔｏ－ＬＢ细胞表面能被ＬＡＫ细胞识别的决定簇较Ｒａｊｉ细胞系低。但体外培养过程中Ａｕｔｏ－ＬＢ能被清除。提示：清除机制除了有ＬＡＫ细胞的直接杀伤外，尚有其它机制参与，体外培养过程中Ａｕｔｏ－ＬＢ表面决定簇表达增加。     

多表位BCR—ABL融合基因的合成,克隆及表达研究

慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３     

GATA—2与免疫球蛋白重链胚系基因Cμ在白血病细胞中的表 …

应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对不同类型白血病患者骨髓（ＢＭ）或外周血（ＰＢ）细胞ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因ＣμｍＲＮＡ的表达进行检测，探讨ＧＡＴＡ－２与ＩｇＨ胚系基因Ｃμ在白血病细胞中的表达与共表达及意义。在正常人ＢＭ和ＰＢ细胞中未检测到ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因Ｃμ。在急性髓性白血病（ＡＭＬ）和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）以及慢怀粒细胞白血病慢性期（ＣＭＬ－ＣＰ）ＧＡＴＡ－２检出     

胆固醇调节元件结合蛋白

胆固醇调节元件结合蛋白（ＳＲＥＢＰｓ），是一类能与胆固醇调节元件１（ＳＲＥ－１）结合的“碱性螺肇－环－螺旋－亮氨酸拉链”蛋白，在细胞内缺乏胆固醇的情况下，ＳＲＥＢＰｓ通过和ＳＲＥ－１的结合，激活具有ＳＲＥ－１的基因，如低密度脂蛋白受体（ＬＤＬＲ）基因、羟甲基戊二酸单酰ＣｏＡ合酶（ＨＭＧＣｏＡｓｙｎｔｈａｓｅ）基因，发挥调节基因翻译的作用，从而维护细胞内胆固醇含量的平衡。对ＳＲＥＢＰｓ的研究，可能会     

维甲酸诱导HL-60细胞分化中对细胞周期素依赖性激酶活性的影响

目的探讨维甲酸（ＲＡ）对ＨＬ６０细胞的增殖抑制和诱导分化作用与细胞周期素依赖性激酶（ＣＤＫ）活性变化的相关性。方法用５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）或芳维甲（ＡＥ）处理ＨＬ６０细胞１～４天,在观察细胞生长、四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原实验以及细胞周期分析的基础上,用组蛋白Ｈ１激酶活性分析技术检测ＣＤＫ２的活性,免疫沉淀法分析结合于ＣＤＫ２和ＣＤＫ４上的相应的细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｅ和Ｄ的量。结果ＨＬ６０细胞在ＡＴＲＡ或ＡＥ作用下,细胞增殖减慢,对ＮＢＴ的还原能力明显增强,９０％左右的细胞被阻滞在Ｇ１／Ｇ０期;在Ｇ１到Ｓ期转换过程中起关键作用的ｃｙｃｌｉｎＥ／ＣＤＫ２的活性显著下降,结合于ＣＤＫ４上的ｃｙｃｌｉｎＤ１的量减少。结论ＲＡ抑制ＨＬ６０细胞增殖并诱导其分化可能与ＣＤＫ２和ＣＤＫ４的活性下降有密切关系     

抗PML—RARα反义核酸对NB4细胞形态,PML—RARα mRNA及蛋白质？…

目的 探讨抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸（ＦＵＡＳ）对ＮＢ４细胞的分化、ＰＭＬ－ＲＡＲα ｍＲＮＡ表达及ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白细胞内定位的影响。方法 以ＮＢ４细胞为研究对象,细胞形态观察采用Ｗｒｉｇｈｔ染以法;ＰＭＬ－ＲＡＲαｍＲＮＡ表达采用ＲＴ－ＰＣＲ法;ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白细胞内定位采用免疫荧光技术。结果 ＦＵＡＳ处理后第５天,细胞出现部分分化。处理后２４,７２,１２０小时,ＰＭＬ－