熊胆粉及其活性成分治疗神经系统疾病作用机制研究进展

熊胆粉活性成分熊去氧胆酸(ursodesxycholic acid, UDCA)、牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)在不同的神经系统疾病动物模型中具有神经保护作用。其中UDCA、TUDCA可通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase, ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinasa, JNK)、p38 MAPK的磷酸化发挥抗神经炎症的作用;UDCA通过激活单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mechanistic target of rapamycin, mTOR)和抑癌基因诱导的假定激酶蛋白1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)/RBR E3泛素蛋白连接酶(RBR E3 ubiquitin-protein ligase, ...     

木鳖子淫羊藿合用配比筛选及机制研究

对木鳖子、淫羊藿进行配比筛选,以得到低毒高效的抗肿瘤中药组方,并研究药物合用后,对肿瘤细胞凋亡及相关蛋白的影响,进而揭示木鳖子、淫羊藿合用的抗肿瘤作用机制。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察木鳖子、淫羊藿提取物合用对不同组织来源的肿瘤细胞增殖的影响。通过Compusyn软件分析2味药合用对肿瘤细胞的影响。以平板克隆形成实验观察木鳖子、淫羊藿合用对A549细胞体外增殖的影响。并通过ROS(活性氧)检测试剂盒及Western blot法比较药物作用后细胞内ROS及凋亡相关蛋白p53,Bcl-2,Bax的表达。通过Lewis肺癌模型,观察药物体内抗肿瘤效果。结果显示,木鳖子、淫羊藿醇提物抗肿瘤效应比水提物显著,而以1∶1合用时抗增殖作用最强(P0.05)。Compusyn分析显示2味药合用具有协同增效的作用。进一步研究显示,木鳖子、淫羊藿合用后A549细胞克隆原形成数目显著减少(P0.01),细胞内ROS产生增多,凋亡相关蛋白p53表达上调,Bcl-2/Bax比值下降。小鼠体内给药亦发现,给药高剂量组肿瘤抑制率达53.06%(P0.05)。与2味药单用相比,木鳖子、淫羊藿合用抗肿瘤增殖更显著,最佳配比为1∶1。木鳖子-淫羊藿1∶1合用对多种肿瘤细胞均有抑制增殖的作用,且与其他配比相比,对正常肝细胞LO2的生长无显著影响,初步推测2味药合用具有增效减毒的作用。进一步研究显示,其能显著抑制A549细胞的增殖,作用机制与激活细胞内源性凋亡通路有关。体内动物实验亦显示,随着给药浓度的升高,肿瘤抑制率有所上升。     

红景天苷通过下调ERK1/2信号通路抑制肺癌A549细胞的增殖作用

目的研究红景天苷(Salidroside,Sal)是否通过抑制ERK1/2信号通路介导肺癌A549细胞的增殖作用。方法体外培养A549细胞,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测不同浓度Sal对A549细胞增殖率的影响,筛选药物使用最大剂量。细胞锚定增殖实验检测药物对细胞增殖的抑制作用。蛋白质印迹法(Western Blotting)检测MEK信号通路磷酸化水平的变化。体外激酶试验检测药物对丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK激酶)活性的抑制作用。CNBr-sepharose 4B Beads结合实验检测药物与MEK的结合。裸鼠荷瘤实验检测药物在体内对肿瘤增殖的抑制作用。结果 Sal在50μmol·L~(-1)以内时,细胞毒性较小,当浓度到100μmol·L~(-1)时,细胞死亡明显增加。A549细胞在细胞锚定增殖实验中形成的克隆数目,不同浓度Sal组明显少于阳性对照组(EGF)组,且具有剂量依赖性(P0.05)。Sal处理A549细胞组,相对于阳性对照组EGF组,MAPK信号通路ERK及其下游p90RSK磷酸化水平明显下降,具有时间和剂量依赖性,差异具有统计学意义(P0.05),MEK的磷酸化水平差异无统计学意义(P0.05)。体外激酶和CNBr-sepharose 4B Beads结合实验表明Sal可以结合MEK,并抑制MEK的活性(P0.05)。裸鼠荷瘤实验显示,药物组肿瘤体积明显小于对照组,具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P0.05)。结论在肺癌A549细胞株中,Sal可以通过靶向MEK,抑制ERK1/2信号通路,进而在体内外起到抗肿瘤的作用。     

冰片对血肿瘤屏障通透性的影响及机制

目的观察天然冰片对体外血肿瘤屏障(blood tumor barrier,BTB)模型通透性和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPKs)信号转导通路相关激酶表达与激活的影响。方法大鼠C6脑胶质瘤细胞与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共培养建立BTB模型后,设空白组,冰片低、中、高剂量组(25、50、100μg/m L),每组7个时点(0、10、30、60、120、180、240 min),每个时点3个样本。空白组在冰片组给药同时更换空白培养基,冰片组给不同剂量冰片,给药后不同时间点收集细胞。辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)流量测定BTB通透性,Western blot检测细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK),磷酸化ERK(phosphorylation extracellular signal regulated protein kinase,P-ERK),P38MAPK,磷酸化P38MAPK(phosphor-P38,P-P38MAPK),氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和磷酸化JNK(phosphorylation c-Jun N-terminal kinase,P-JNK)的表达。结果与本组0 min比较,低、中、高剂量组各时间点通透率升高(P0.01),P-ERK表达先升高,在30 min达极高值,逐渐恢复初始水平(P0.05)。与空白组比较,低剂量组10~240 min HRP通透率升高(P0.01),30、60 min PERK蛋白表达升高(P0.05),低、中、高剂量组180 min P-JNK表达升高(P0.05),240 min P-JNK表达降低(P0.05)。与低剂量组比较,中剂量组10~180 min P-ERK表达升高(P0.05),30~180 min通透率升高(P0.05),180 min和240 min P-JNK表达降低(P0.05)。与中剂量组比较,高剂量组10~180 min通透率升高(P0.05),10~180 min P-ERK表达升高(P0.05),180 min和240 min P-JNK表达降低(P0.05)。结论冰片通过激活MAPKs信号通路的ERK磷酸化进而可逆性下调相关蛋白的表达,达到调节可逆性BTB开放的效果。     

白藤梨根提取物体内外抗肿瘤作用研究

目的:研究白藤梨根提取物体内外抗肿瘤的活性和作用机制。方法:体外人肺癌A549细胞培养考察白藤梨根对肺癌细胞的抑制作用;体内采用S180实体瘤裸鼠实验考察白藤梨根对S180肉瘤、体重、胸腺指数、脾脏指数以及Bcl-2/Bax表达的影响。结果:白藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞增殖有较为明显的抑制作用,其IC50值为0.39mg/ml;体内可显著抑制S180肉瘤的生长(P0.01),其平均抑制率为30.8%,显著降低脾脏指数,但对胸腺无明显抑制作用;白藤梨根乙酸乙酯提取物能显著降低Bcl-2蛋白(P0.05),升高Bax蛋白(P0.01),使Bax/Bcl-2的比值升高。结论:白藤梨根乙酸乙酯提取物能抑制肺癌A549细胞的增殖;体内能抑制荷瘤裸鼠S180肉瘤的生长,并通过调节Bax/Bcl-2的比值来诱导细胞凋亡,进而发挥抑瘤作用。     

中药多糖防治骨质疏松症作用及机制的研究进展

骨质疏松症是一种进行性的全身骨骼疾病,其发病机制极为复杂。多糖是广泛存在于中药材中的生物大分子,具有多种药理活性。从基因、蛋白、体内外实验等多维度研究综述了中药多糖防治骨质疏松症的作用和机制,总结发现,中药多糖能够通过激活或/和抑制Wnt、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）、活化T细胞核因子（nuclear factor-activated T cell 1,NFATc1）、内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）、骨保护素（osteoprotegerin,OPG）/核因子-κB受体活化因子（receptor activator of NF-κB,RANK）/RANK配体（RANK ligand,RANKL）、Hippo(Hpo)、细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）/糖...     

益气活血解毒中药及肾上腺髓质素抑制醛固酮诱导的 HK2 细胞自噬作用研究

目的:观察益气活血解毒中药血清及肾上腺髓质素(Adrenomedullin,ADM)抑制醛固酮(Aldosterone,ALD)诱导的人近端肾小管上皮细胞HK2自噬的作用。方法:本实验采用1μmol/L的ALD诱导HK2细胞自噬,给予10%的益气活血解毒含药血清及100 nmol/L的ADM治疗。实验分为对照组(CON组),ALD组,ALD+益气活血解毒含药血清组(ALD+TCM组),ALD+ADM组,48 h后收集细胞并观察变化。采用免疫细胞荧光、Western blot法检测血清糖皮质激素诱导蛋白激酶1 (Serum and glucocorticoid induced kinase,SGK-1)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2 (Phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,P-ERK1/2)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Phosphorylated mammalian target of rapamycin,P-mTOR)/mTOR、自噬相关基因5(Autophagy associated gene,Atg5)、酵母自噬基因6 (Atg6)的同源物Beclin1、自噬标志微管相关蛋白1轻链3 (Microtubularassociated protein 1 light chain 3,LC3)的表达。结果:与CON组比较,ALD组SGK-1、P-ERK1/2、Atg5、LC3和Beclin1表达明显增强(P 0.01),P-mTOR/mTOR表达减弱(P 0.01);与ALD组比较,ALD+TCM组、ALD+ADM组这些指标表达均减弱(P 0.01),P-mTOR/mTOR表达增强(P 0.01)。结论:益气活血解毒中药、ADM均可抑制ALD诱导的HK2细胞自噬,从而减轻肾小管的损伤,减缓肾脏损伤的进程。     

异甘草素对人肾透明细胞癌786-O细胞抗癌作用及分子机制

目的:研究异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)对人肾透明细胞癌786-O细胞的抗癌作用,并探讨其可能存在的分子机制。方法:通过噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测ISL(0,10,25,50,75,100μmol·L~(-1))对786-O细胞增殖的作用;细胞划痕和Transwell实验检测ISL对786-O细胞迁移、侵袭能力的影响;吖啶橙染色,Ad-GFP-LC3转染实验观察细胞自噬状态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白的表达,并分析磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)信号通路变化,探讨其可能的作用机制。结果:MTT比色法结果显示,与空白组比较,ISL能够明显抑制786-O细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖性(P0.05);划痕和Transwell实验结果表明,与空白组比较,ISL能够抑制785-O细胞的迁移和侵袭(P0.05);吖啶橙染色和Ad-GFP-LC3转染实验表明ISL能够诱导786-O细胞发生自噬。此外,与空白组比较,ISL能够诱导细胞内自噬标志物-Ⅱ(LC3-Ⅱ),自噬相关蛋白Beclin1,Atg5蛋白表达(P0.05),并显著下调p62蛋白表达(P0.05),当加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)可逆转上述现象(P0.05);同时ISL能够抑制Akt,m TOR的磷酸化水平(P0.05),加入抑制剂LY294002和雷帕霉素(rapamycin,Rap),LC3-Ⅱ,Beclin1,Atg5蛋白表达明显上调(P0.05),p62蛋白表达明显下调(P0.05)。结论:ISL能够抑制肾透明细胞癌786-O细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路诱导细胞发生自噬。     

小金胶囊药材组分过敏性研究

目的:探讨小金胶囊主要药材组分的过敏性。方法:实验分为12组,包括空白对照组、阳性对照组和10组不同药材组,通过灌胃方式对大鼠给药,隔天1次,15 d后取抗血清,对RBL-2H3细胞进行培养,进行抗原攻击后,检测培养液中组胺和β-氨基己糖苷酶的释放量。结果:制木鳖子组的细胞组胺释放量明显高于空白对照组(P0.05),人工麝香组、制木鳖子组和乳没组的细胞β-氨基己糖苷酶释放量明显高于空白对照组,但自制木鳖子组和制乳没组的细胞组胺和β-氨基己糖苷酶释放量与空白对照组差异无统计学意义。结论:小金胶囊致敏药材可能为人工麝香、木鳖子和乳没,经适当方法炮制可降低其致敏性。     

蒲葵子抗肿瘤活性部位筛选及抗血管生成作用

目的：筛选蒲葵子抗肿瘤作用的活性部位,探讨蒲葵子抗血管生成的作用机制。方法：采用MTT法检测蒲葵子醇提物各分离部位对肿瘤细胞株增殖的影响,ELISA法检测对肿瘤细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）水平的影响。以活性部位作用于VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）,RT-PCR和Western Blotting方法分析内皮细胞Flk-1 mRNA和蛋白的表达变化。结果：蒲葵子醇提物乙酸乙酯部位可选择性抑制结肠癌细胞株HT-29和膀胱癌细胞株T24肿瘤细胞的生长,其抑制率可分别达74.66%和86.52%,并可显著降低各肿瘤细胞株分泌VEGF水平。石油醚部位对HT-29和T24生长也有一定的抑制作用,其最高抑制率分别为43.80%和38.67%,并可降低各肿瘤细胞分泌VEGF水平,但作用强度均不及乙酸乙酯部位。水和正丁醇部位未表现抗肿瘤活性。对VEGF诱导内皮细胞表达FlK mRNA和蛋白,乙酸乙酯部位表现出明显的抑制作用。结论：蒲葵子醇提物乙酸乙酯分离部位有较好的抗肿瘤作用,是抗肿瘤作用的主要活性部位,其作用机制可能与降低肿瘤细胞分泌VEGF,抑制VEGF诱导内皮细胞表达Flk-1 mRNA和蛋白有关。     

白花蛇舌草-半枝莲药对组分诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡的机制

目的:考察白花蛇舌草-半枝莲药对的活性组分诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及其作用机制。方法:超高效液相色谱法对药对活性组分中化学成分进行测定,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖力,克隆形成实验考察克隆形成的数量变化,流式细胞仪检测凋亡细胞的比例,蛋白质免疫印迹法检测蛋白及信号通路的变化。结果:制备药对以3种配比(1∶1,1∶2,2∶1)进行水煎后脱脂浸膏的乙酸乙酯组分(YDW11,YDW12,YDW21)。YDW11含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种成分。通过比对这3个组分对乳腺正常上皮细胞10A1和三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外增殖的影响,发现YDW11在25~50 mg·L-1对10A1细胞无细胞毒性,且抑制MDA-MB-231的体外增殖(P0.01),其抑制活性强于YDW12,YDW21。YDW11呈质量浓度和时间依赖性抑制三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,HS578T,BT549的体外增殖(P0.05,P0.01),但对MCF-7体外增殖影响不大。YDW11呈浓度依赖性抑制MDA-MB-231的克隆形成(P0.01),并诱导其凋亡(P0.01)。YDW11提高p21 mRNA和蛋白表达的同时,抑制增殖细胞核抗原(PCNA)的表达(P0.05,P0.01),抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中p38,c-Jun氨基末端激酶(JNK),细胞外调节蛋白激酶(ERK)的磷酸化(P0.05)。YDW11处理MDA-MB-231后,VASP在Ser157位点和Ser239位点的磷酸化水平提高(P0.05,P0.01),提示激活环状核苷酸(c AMP)和环磷酸鸟苷(c GMP)信号通路的活化。结论:白花蛇舌草-半枝莲药对等比配伍的乙酸乙酯组分(YDW11)在对乳腺正常上皮细胞10A1无毒的剂量25,50 mg·L-1,呈剂量和时间依赖性显著抑制三阴性乳腺癌细胞MDAMB-231的体外增殖、克隆形成并诱导凋亡。呈浓度依赖性提高周期抑制蛋白p21在mRNA和蛋白的表达水平,抑制PCNA的表达,抑制p38,JNK,ERK的磷酸化水平,提高VASP在Ser157和Ser239位点的磷酸化,部分通过c AMP/c GMP和抑制MAPK信号通路而诱导MDA-MB-231的凋亡。     

美洲大蠊不同提取物及不同提取方法对肿瘤细胞的细胞毒性作用

目的:研究美洲大蠊不同提取物及不同提取方法对肿瘤细胞的细胞毒性,为美洲大蠊的抗肿瘤细胞研究提供实验依据。方法:以人肝癌SMMC-7721细胞株,红白血病细胞株K562,人结肠癌细胞株HCT116 3种肿瘤细胞为研究对象,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法,比较不同的提取物(乙醇提取液、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位)和不同的提取方法(渗漉法、超声法、回流法)对3种肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性。结果:美洲大蠊乙醇提取液和乙酸乙酯部位对上述肿瘤细胞增殖均有不同程度的抑制作用,其中以乙醇提取液的活性最强;3种提取方法提取的美洲大蠊均表现出不同程度的体外抗肿瘤活性,其中以渗漉法提取的美洲大蠊对3种肿瘤细胞的抑制作用最强,所计算出的半数抑制浓度(IC50)均最小。结论:美洲大蠊乙醇提取液的体外抗肿瘤活性最强,乙酸乙酯部位次之,美洲大蠊宜选择渗漉法提取。     

马甲子叶抑菌有效部位的筛选

目的:探讨马甲子叶不同提取部位的抑菌作用,并筛选其有效部位。方法:系统溶剂法将马甲子叶提取为石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水5个部位后,用纸片法考察不同溶剂部位对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门氏菌的体外抑菌活性,采用琼脂平板涂布法测定有明显抑菌作用的有效部位的最小抑菌浓度(MIC)。结果:石油醚、三氯甲烷和水部位无抑菌效果。乙酸乙酯、正丁醇部位对受试病原菌有不同程度的抑菌效果,其中正丁醇部位抑菌活性达显著性差异,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门氏菌的MIC值分别为0.714,0.714,0.357,0.357 g·L-1。乙酸乙酯部位对4种细菌均具有明显抑制效果。综合抑菌效果比较:正丁醇部位乙酸乙酯部位水部位。结论:正丁醇、乙酸乙酯部位是马甲子叶的有效抑菌部位,是寻找新抑菌活性成分的基础,为后期开发利用提供理论依据。     

雪灵芝醇提物不同极性萃取部分的体外抗氧化活性

目的:通过体外抗氧化和还原活性评价实验,研究藏药雪灵芝乙醇提取物不同极性溶剂萃取部分的抗氧化作用。方法:用体积分数95%的乙醇回流提取雪灵芝粉末,浓缩的乙醇浸膏依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各部分分别配制成适当浓度的溶液,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法,2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸-6)二铵盐(ABTS)自由基法和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)法分别测定各部分的自由基清除能力和铁离子还原力。结果:雪灵芝醇提物的4个萃取部分均具有一定的体外抗氧化作用,其中乙酸乙酯与正丁醇部分清除DPPH·,ABTS+·及还原Fe3+的能力均比二氯甲烷与石油醚部分强。结论:雪灵芝提取物清除能力与提取物样品浓度在一定范围内具有良好的量效关系,其中极性较大的乙酸乙酯部分和正丁醇部分的抗氧化活性及还原能力相对较强。     

冠突散囊菌不同溶剂提取物体外抗氧化活性研究

目的：研究冠突散囊菌体外抗氧化活性。方法：采用萃取法对冠突散囊菌甲醇提取物萃取获得石油醚,乙酸乙酯和正丁醇3种提取物,并以维生素C（VC）为阳性对照,用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基和（ABTS）自由基测定法,对冠突散囊菌3种提取物抗氧化活性进行测定。结果：冠突散囊菌石油醚提取物清除 DPPH和ABTS⁺自由基半数清除浓度（IC₅₀）分别为0.078,0.083 g·L^-1 ,乙酸乙酯提取物IC₅₀分别为0.21,0.13 g·L^-1;正丁醇提取物对DPPH和ABTS⁺自由基几乎没有清除作用;3种提取物清除DPPH和ABTS⁺自由基的能力均比阳性对照VC（IC₅₀分别为0.032,0.024 g·L^-1）弱。结论：冠突散囊菌石油醚和乙酸乙酯提取物均具有抗氧化活性,且石油醚提取物活性较强。     

铁皮石斛内生真菌的分离及其体外抑菌和抗肿瘤活性初步研究

目的分离铁皮石斛Dendrobium officinale内生真菌,研究内生真菌的分布并初步探讨和筛选具有抑菌和抗肿瘤活性的特异菌株。方法利用组织分离法和分子生物学方法分离、鉴定内生真菌;以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌作为受试对象,采用对峙法和管碟法分别对内生真菌及其发酵代谢产物的醋酸乙酯萃取相进行抑菌实验;采用MTT法对内生真菌代谢产物醋酸乙酯萃取相进行体外抗肿瘤活性检测。结果从铁皮石斛中分离得到28株内生真菌,分子鉴定结果显示,分离的内生真菌归属于10个属,其中镰刀菌属为优势属。抑菌实验结果显示28株内生真菌中,有7株至少能对1种指示菌有抑菌作用,其代谢产物的醋酸乙酯萃取相对3种指示菌和Hep G2细胞具有不同程度的抑制作用。结论铁皮石斛内生真菌种群丰富,从中分离得到的内生真菌具有潜在的抑菌和抗肿瘤活性,为进一步开发抑菌、抗肿瘤候选药物奠定基础。     

柿叶不同极性部位对H22腹水瘤及H22,S180实体瘤小鼠的抑瘤作用

目的:研究柿叶不同极性部位对小鼠H22及S180抑瘤作用的影响。方法:柿叶乙醇提取物分别用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到相应不同极性部位;乙醇提取后的柿叶晾干后水煮,得水提部位。分别建立H22腹水瘤小鼠模型和H22,S180实体瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为空白组,模型组,环磷酰胺组(0.1 g·kg-1),不同极性部位(柿叶三氯甲烷、柿叶水提、柿叶乙酸乙酯、柿叶正丁醇)高、中、低剂量组,连续ig 10 d。观察各用药组对H22腹水瘤小鼠腹围、腹水抑制率和肝组织病理学形态的影响,以及对H22和S180实体瘤小鼠摄食量、体重、抑瘤率、生命延长率、胸腺和脾脏系数等的影响。结果:与模型组比较,柿叶乙酸乙酯部位、水提部位和正丁醇部位能明显减少H22腹水瘤小鼠的腹水量,不同程度改善肝细胞肿胀、溶解等状况;不影响H22和S180实体瘤小鼠的摄食量,能明显提高荷瘤小鼠的抑瘤率、延长生命延长率,增加胸腺系数和脾脏系数(P<0.01,P<0.05)。结论:柿叶乙酸乙酯部位、水提部位和正丁醇部位对H22和S180荷瘤小鼠有不同程度的抑瘤作用,可为柿叶抑瘤作用的有效部位。柿叶乙酸乙酯部位对肝癌H22小鼠(包括实体瘤和腹水瘤)的影响比对肉瘤S180小鼠更显著。     

蒲黄的抗血栓有效部位筛选

目的:确定蒲黄抗血栓作用的主要活性部位。方法:对蒲黄不同提取部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)对体外血小板聚集作用进行筛选,进一步研究蒲黄活性部位对胶原蛋白-肾上腺素和角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成的影响,蒲黄有效部位对大鼠体内血栓模型及血管壁的作用。结果:蒲黄乙酸乙酯部位对花生四烯酸、二磷酸腺苷、胶原、凝血酶诱发家兔体外血小板聚集的抑制率分别为40.08%,33.09%,37.91%,34.71%,水部位则为29.29%,28.65%,28.33%,32.29%;而蒲黄乙酸乙酯部位对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠死亡和偏瘫的保护率为50%,对角叉菜胶诱发小鼠黑尾发生率为50%;同时乙酸乙酯部位可明显抑制大鼠体内血栓的形成,并对血管内皮有明显的保护作用。结论:初步认为乙酸乙酯部位为蒲黄抗血栓作用的主要活性部位。     

野生和栽培金铁锁镇痛功效及有效部位的比较

目的:比较野生和栽培金铁锁的镇痛效果及其具镇痛活性的有效部位.方法:提取分离获得野生和栽培金铁锁根部不同极性的化合物,运用醋酸扭体法和热板法研究其对小鼠疼痛的抑制效果.结果:无论是野生还是栽培的金铁锁,其浸膏的镇痛效果相似,均含有高活性的镇痛成分.从化学刺激致痛的抑制效果来看,栽培与野生金铁锁活性成分均存在于正丁醇(扭体抑制率分别为99.1％ ±3.0％和100.0％±0.0％)、乙酸乙酯(97.9％±6.3％和81.9％±11.7％)和石油醚部分(78.8％±17.7％和70.9％±10.3％),但栽培金铁锁乙酸乙酯部分的镇痛效果(97.9％±6.3％)明显优于野生金铁锁(81.9％±11.7％,P＜0.05).从热刺激致痛模型的镇痛作用来看,野生金铁锁的活性部位为正丁醇部分(30 min痛阈提高率为166.5％ ±71.6％,60min为186.9％±79.0％),栽培金铁锁的活性部位为正丁醇部分(30 min痛阈提高率为128.3％±53.1％,60 min为136.5±65.2％)和乙酸乙酯部分(30 min为53.7％±24.4％,60 min为186.9％±79.0％).结论:虽然人工栽培金铁锁的镇痛活性成分与野生药材有所不同,但其镇痛功效与野生药材无明显区别,可作为镇痛药物等效替代野生药材.     

侧柏炭不同溶剂提取物对LPS诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的: 研究侧柏炭各溶剂提取物对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,探讨侧柏炭保护血管内皮细胞的有效提取物及其可能作用物质。 方法: 体外培养HUVECs,采用LPS诱导制备人脐静脉内皮细胞损伤模型。采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活力、TBA法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量,UPLC/Q-TOF-MS法分析侧柏炭各溶剂提取物中黄酮类成分的差异。 结果: 与模型组比较,正丁醇提取物(100 mg·L^-1)及乙酸乙酯提取物(100,50 mg·L^-1)可显著提高细胞活力(P<0.05),显著降低MDA,NO含量,提高SOD活性(P<0.05)。4个溶剂提取物中,乙酸乙酯提取物中的黄酮总量含量最高,水提取物中黄酮总量含量最低,正丁醇提取物中的黄酮总量与石油醚提取物相当,只是其所含的槲皮苷、杨梅苷含量仅次于乙酸乙酯提取物中的槲皮苷、杨梅苷含量。 结论: 侧柏炭乙酸乙酯提取物可显著拮抗LPS对HUVECs的损伤,为侧柏炭保护血管内皮细胞的最有效提取物,其所含的槲皮苷、杨梅苷或者多种黄酮类成分可能为其保护血管内皮细胞作用的活性物质,其机制可能与其能减少NO的产生,抑制细胞内脂质过氧化有关。