大枣中性多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的研究大枣中性多糖（ＪＤＰ－Ｎ）对小鼠脾细胞增殖作用及其对刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）活化脾细胞内游离Ｃａ２＋浓度 （［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。方法采用ＭＴＴ法测定脾细胞增殖程度,用激光扫描共聚焦显微镜技术测定细胞内［Ｃａ２＋］ｉ。结果 ＪＤＰ－Ｎ能促进小鼠脾细胞自发增殖反应和混合淋巴细胞培养反应,但对经ＣｏｎＡ活化、ＩＬ－２诱导的脾细胞无促进增殖 作用,且对ＣｏｎＡ活化的脾细胞内［Ｃａ２＋］ｉ无影响。结论ＪＤＰ－Ｎ仅对未活化的小鼠脾细胞有促进增殖作用。     

粉防己碱对实验性胸膜炎的防治作用的研究

角叉菜胶（Ｃａｒｒａｇｅｅｎｉｎ，Ｃａｒ）致大鼠胸膜炎后８ｈ，胸膜腔渗出液中中性白细胞游离钙浓度（Ｎｅｕ［Ｃａ＾２＾＋］ｉ）升高，中性白细胞钙调素活性（Ｎｅｕ－ＣａＭＡ）增强，粉防己碱（Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，Ｔｅｔ）（１０－８０ｍｇ．ｋｇ＾－＾１）于致炎前３０ｍｉｎ和致炎后４ｈ给大鼠灌胃可明显减少炎症胸膜腔渗出液量，蛋白渗出量和白细胞游出数，同时能降低Ｎｅｕ［Ｃａ＾２＾＋］ｉ和Ｎｅｕ－ＣａＭＡ；     

TMB-8对去甲肾上腺素BHQ引起新生大鼠单个脑细胞内游离钙增高的影响

应用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统，研究ＴＭＢ－８对体外新生ＳＤ大鼠单个脑细胞内游离钙的抑制作用及其机制。结果表明，在无细胞外钙情况下，静息［Ｃａ２＋］ｉ为７９±１３ｎｍｏｌ·Ｌ－１。ＴＭＢ－８１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１能明显降低静息［Ｃａ２＋］ｉ。ＴＭＢ－８１００μｍｏｌ·Ｌ－１对高钾去极化引起的［Ｃａ２＋］ｉ显著增高无明显影响。在细胞外钙为１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，去甲肾上腺素诱导的细胞内［Ｃａ２＋］ｉ升高可部分被ＴＭＢ－８抑制；ＴＭＢ－８（３０μｍｏｌ·Ｌ－１）对ＢＨＱ引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高无明显抑制作用。而当细胞外液［Ｃａ２＋］ｉ为０时，ＴＭＢ－８几乎完全抑制了去甲肾上腺素和ＢＨＱ的作用。提示ＴＭＢ－８降低脑细胞内游离钙的作用机制是通过促使细胞内钙进入肌浆网以抑制内钙的释放，并通过饱和肌浆网内Ｃａ２＋间接地阻滞细胞膜钙通道     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

创伤后T细胞功能受抑与信号转导变化的关系

目的 研究创作小鼠Ｔ细胞功能受抑与信号转导变化之间的关系。方法 将Ｂａｌｂ／ｃ小鼠６０只,随机分为正常对照、伤后１、２、４、７、１０天共６组（每组１０只）,制备小鼠闭合性创伤模型,以尼龙毛纤维分离脾细胞中的Ｔ细胞,测定Ｔ细胞功能,并探讨其与细胞内信号转导变化之间的关系．结果 创伤小鼠活化Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ及ＩＬ－２受体α（ＩＬ－２Ｒα）ｍＲＮＡ水平降低,ＩＬ－２生成、ＩＬ－２Ｒ     

反复吗啡处理对小鼠淋巴细胞Ca^2＋含量膜流动性及原癌基因…

应用递增剂量急性吗啡处理４天后，小鼠胸腺细胞或脾细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ下降，脾淋巴细胞膜脂流动性降低，同时ＣｏｎＡ活化的脾脏Ｔ细胞表达Ｃ－ｍｙｂ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ明显减少，提示反复吗啡处置对免疫细胞内的信息传导系统及膜脂系统已产生明显影响。     

钙拮抗剂TMB-8抑制BHQ,NE和KCl引起的培养乳牛基底动脉单个平滑肌细胞内游离钙的升高

用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）,研究８－（Ｎ,Ｎ－二乙胺）－ｎ－辛基－３,４,５－三甲氧基苯甲酸酯（ＴＭＢ－８）对培养乳牛基底动脉平滑肌［Ｃａ２＋］ｉ的作用。在细胞外钙浓度为１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时,Ｔ...     

RT-PCR检测人白细胞钙调素mRNA表达水平与初步应用

目的：检测人白细胞钙调素ｍＲＮＡ表达水平。方法：采用以β２微球蛋白（β２Ｍ）为内标的反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术。结果：建立了人白细胞钙调素ｍＲＮＡ表达水平的半定量测定方法。结论：初步了解不同时期内服用钙拮抗剂（ＣａＡ）的心血管病患者细胞内ＣａＭｍＲＮＡ表达的变化规律，从而为临床疾病的防治及治疗提供一定的依据     

肿瘤坏死因子受体实验研究

应用本室制备的肿瘤坏死因子生物素（ＴＮＦＢ），藉ＡＢＣ法对几种肿瘤细胞坏死因子受体（ＴＮＦＲ）进行定位分析，结果与文献报道的放射受体结合分析法一致，３株胃癌细胞ＴＮＦＲ存在情况与ＴＮＦ对这３株胃癌细胞的抑制率相吻合。应用荧光分光光度法测定胃癌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ），ＴＮＦ可引起胃癌细胞ＦＧＣ－８５的［Ｃａ＾２＋］ｉ急性升高，提示ＴＮＦ对［Ｃａ＾２＋］ｉ有明显影响。     

反复呼吸道感染患称T细胞增殖及胞浆游离钙浓度的变化

目的：探讨反复呼吸道感染（ＲＲＴＩ）患儿Ｔ细胞增殖（ＴＬＰ）及其胞浆游离钙浓度（〔Ｃａ＾２＋〕ｉ）的关系。方法：采用ＭＴＴ比色法测定３０例ＲＲＴＩ患儿及３１名健康儿童ＴＬＲ，使用ＦＵＲＡ－２／Ａｍ做荧光探剂，双波长荧光分光光度仪测定Ｔ细胞活化及未活化时〔Ｃａ＾２＋〕ｉ。结果：ＲＲＴＩ患儿ＴＬＰ明显低于对照组，Ｔ细胞未活化时两组间〔Ｃａ＾２＋〕ｉ的差异无统计学意义，当Ｔ细胞活化时ＲＲＴＩ患儿〔Ｃａ＾     

缺锌大鼠活化T细胞内Ca^2＋,CaM和IL—2,IL—2Rα变化的研究

缺锌大鼠活化Ｔ细胞内Ｃａ２＋、ＣａＭ和ＩＬ┐２、ＩＬ┐２Ｒα变化的研究ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｕｌａｒＣａ２＋，ＣａＭ，ＩＬ┐２ａｎｄＩＬ┐２Ｒαｉｎａｃ┐ｔｉｖａ┐ｔｅｄＴｃｅｌｓｏｆｚｉｎｃ┐ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｒａｔ...     

内皮素-1对成纤维细胞内游离钙的影响

目的研究内皮素（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎＥＴ）对成纤维细胞（ＨＬＦ）内钙离子浓度（［Ｃａ＋２］ｉ）的影响及维拉帕米（Ｖｅｒ）对ＥＴ促［Ｃａ＋２］ｉ效应的阻断作用。方法采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ钙荧光指示剂测定ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度。结果ＥＴ在很短时间内即可明显提高ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度（Ｐ＜０．０１～０．００１）。并且在细胞外液无Ｃａ＋２存在情况下，亦可提高［Ｃａ＋２］ｉ，且有明显的量效关系（Ｐ＜０．０５～０．０１）。同时，Ｖｅｒ对ＥＴ的上述作用具有显著的作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＥＴ对Ｖｅｒ的调控作用是通过［Ｃａ＋２］ｉ转运而产生的。     

呼吸中枢M受体亚型与细胞内钙

目的探讨呼吸中枢Ｍ受体亚型与细胞内钙的关系。方法采用Ｆｕｒａ－２双波长荧光法测定Ｍ１和Ｍ２受体激动剂和拮抗剂对胎鼠桥脑和延脑神经细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。结果在静息状态下，其［Ｃａ２＋］ｉ为７２±６ｎｍｏｌ／Ｌ，加入２００μｍｏｌ／ＬＡｃｈ，［Ｃａ２＋］ｉ升高３８％，匹鲁卡品（Ｐｉｌ）０．４～２００μｍｏｌ／Ｌ无明显的升高细胞内钙的作用，而Ｍ２受体激动剂６β－乙酰氧基去甲托烷（６β－ＡＮ）１～１０μｍｏｌ／Ｌ。对神经细胞内的游离钙均无明显影响。Ｍ１－Ｒ拮抗剂哌仑西平（Ｐｉ）６０μｍｏｌ／Ｌ能拮抗Ａｃｈ升高细胞内钙的作用，Ｍ２－Ｒ拮抗剂ＡＦ－ＤＸ１１６２０μｍｏｌ／Ｌ不能拮抗。结论Ｍ１－Ｒ兴奋与细胞内钙升高有关。     

颅通定对猪肺动脉平滑肌细胞胞浆游离钙浓度的影响

采用钙荧光探针Ｆｕｒａ－２／ＡＭ观察了颅通定对培养的猪肺动脉平滑肌细胞胞浆游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）的影响。结果发现：颅通定可显著抑制高钾和ＢａｙＫ８６４４所致的［Ｃａ＾２＋］ｉ增加，并且有剂量－效应关系，对静息状态［Ｃａ＾２＋］ｉ无明显影响，其作用与维拉帕米相似，但较弱。提示：颅通定降低平滑肌细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ的作用与其抑制电压依赖性钙通道有关，此为其降压作用机制之一。     

糖皮质激素对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞内游离钙浓度的快速影响

目的：探讨糖皮质激素（ＧＣ）快速抑制肾上腺髓质嗜铬细胞（ＡＭＣＣ）受刺激后分泌的机制。方法：用Ｆｕｒａ－２作Ｃａ＾２＋指示剂，观察ＧＣ对乙酰胆碱（ＡＣｈ）刺激引起的ＡＭＣＣ内游离钙（［Ｃａ＾２＋］ｉ）浓度升高的影响，并用放射免疫方法测定了ＧＣ对ＡＣｈ刺激后ＡＭＣＣ的环核苷酸含量的影响。结果：ＧＣ对ＡＣｈ引起的ＡＭＣＣ的［Ｃａ＾２＋］ｉ升高有快速抑制作用，但对ＡＣｈ刺激引起的环核苷酸含量升高无明显作     

钙调素与细胞膜上Ca~（2＋）－ATP_（ase）结合域之间亲和性常数的测算

钙调素（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）是一种多功能的酶调节物。Ｃａ２＋－ＣａＭ复合物可激活Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ，并触发Ｃａ２＋从细胞内移出或进入肌浆网内，以维持细胞内钙的平衡。Ｃａ２＋－ＣａＭ与Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ之间的相互作用可用亲和性常数来衡量。本文应用ＢＣＡ方法测定钙调素的浓度，应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳技术测定钙调素的分子量，再用钙调素滴定ＤＣ２０Ｗ，同时测定相应的荧光，从而决定出两者相互作用的亲和性常数。     

aFGF对肺腺癌AGZY—83A细胞株TPK,PKC活性及Ca^2＋浓度的影响

目的：观察ａＦＧＦ与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径，探讨ａＦＧＦ导致细胞增殖的机理。方法：以不同浓度的ａＦＧＦ处理ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞，利用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性（ＴＰＫ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性；用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：随着ａＦＧＦ浓度增加，ＴＰＫ及ＰＫＣ活性随之升高。当ａＦＧＦ浓度为１．１２μｇ／ｍｌ时ａＦＧＦ处理组的ＴＰＫ是对照组的４倍；膜ＰＫＣ活性也是对照组的４倍，胞浆ＰＫＣ活性是对照组的１．７５倍。［Ｃａ２＋］ｉ是对照组的３倍。结论：该细胞株中ａＦＧＦ受体具有ＴＰＫ活性。ＴＰＫ激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化，而使ＰＫＣ活性及［Ｃａ２＋］ｉ升高，即ＰＫＣ和Ｃａ２＋是ＴＰＫ的下游信号分子，进一步促进ｃ－ｆｏｓ、ｊｕｎ基因表达增加，导致细胞增殖     

成年大鼠脑细胞内钙的测定

目的：探讨成年大鼠脑细胞分离及其细胞内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的测定。方法：低浓度胰蛋白酶消化及机械吹打等方法分离脑细胞，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为Ｃａ２＋－敏感的荧光指示剂，应用荧光分光光度计测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：分离的脑细胞存活率在９５％以上，在细胞外Ｃａ２＋１ｍｍｏｌ／Ｌ的情况下［Ｃａ２＋］ｉ为（２７０±３５）ｎｍｏｌ／Ｌ，高钾使［Ｃａ２＋］ｉ急剧增加。结论：本方法分离成年大鼠脑细胞简单、可靠，且能准确反映［Ｃａ２＋］ｉ的变化。     

反复吗啡处理对小鼠淋巴细胞Ca~（2＋）含量膜流动性及原癌基因表达的影响

应用递增剂量急性吗啡处理４天后，小鼠胸腺细胞或脾细胞［Ｃａ２＋］ｉ下降，脾淋巴细胞膜脂流动性降低，同时ＣｏｎＡ活化的脾脏Ｔ细胞表达Ｃ－ｍｙｂ和Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ明显减少，提示反复吗啡处置对免疫细胞内的信息传导系统及膜脂系统已产生明显影响。     

外源性神经节苷脂GM3对Ca^2^＋—ATP酶及红细胞浆Ca^2^＋—浓度…

研究神经节苷脂ＧＭ３（简称ＧＭ３）对部分纯化的人红细胞膜Ｃａ＾２＾＋－ＡＴＰ酶的作用和对完整兔红细胞浆［Ｃａ＾２＾＋］的影响。结果表明：外源性ＧＭ３对Ｃａ＾２＾＋－ＡＴＰ酶的作用呈浓度依赖性双相调节，即浓度为１－６．５μｍｏｌ／Ｌ时抑制酶活性，浓度大于６．５μｍｏｌ／Ｌ时激活酶活性，ＧＭ３不影响钙调素（ＣａＭ）对酶的激活；ＧＭ３对兔红细胞浆［Ｃａ＾２＾＋］也呈浓度依赖性双相调节即在ＧＭ３浓度低于６