硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉增殖细胞核抗原及Bcl-2的调节作用

目的　探讨硫化氢 (H2 S)对低氧性肺动脉高压 (HPH)大鼠肺动脉结构重建和肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡的调节作用。方法　选取体重 180～ 2 0 0g的健康雄性Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为常氧组、低氧组、低氧 硫氢化钠 (NaHS)组。监测其血液动力学变化及肺动脉结构重建 ,采用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)和Bcl 2凋亡蛋白表达 ,并对肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡进行定位和半定量分析。结果　低氧组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)明显升高 (P <0 .0 1) ,右室 / (左室 室间隔 )比值显著增加 (P <0 .0 1) ,肺动脉相对中膜厚度 (RMT)和相对中膜面积 (RMA)增加 (P均 <0 .0 1) ;NaHS可明显降低肺动脉压力及抑制肺动脉重建 (P <0 .0 1)。低氧组大鼠肺小动脉平滑肌细胞PCNA和Bcl 2凋亡蛋白表达分别较对照组增高 (P <0 .0 1) ;NaHS可明显下调肺小动脉平滑肌细胞PCNA和Bcl 2蛋白表达 (P <0 .0 1)。结论　新型气体信号分子H2 S可降低肺动脉压力 ,抑制肺动脉平滑肌细胞增殖 ,在HPH及肺血管结构重建的形成中发挥重要作用     

硫化氢对自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨气体分子硫化氢(H2S)对自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 4周龄雄性自发性高血压(SHR)鼠及韦斯达-克陀鼠(WKY)各自随机分为对照组、 硫氢化钠(NaHS)组、 PPG组，5周后应用免疫组织化学方法检测细胞增殖核抗原(PCNA)、NF-κB、Bcl2、Fas、Fas、caspase-3的表达水平，应用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果 SHR对照组大鼠较WKY对照组大鼠增殖指数(PI)及凋亡指数(AI)均增高；SHR NaHS组大鼠较SHR对照组大鼠PI降低、AI增高；SHR PPG组大鼠AI降低。WKY PPG组大鼠较WKY对照组大鼠PI增高。SHR对照组大鼠主动脉Bcl-2及NF-κB表达均较WKY对照组降低，caspase-3表达升高。SHR NaHS组大鼠主动脉Bcl-2及NF-κB水平低于SHR对照组，而SHR PPG组大鼠主动脉Bcl-2及NF—κB水平高于SHR对照组。SHR NaHS组大鼠主动脉caspase-3水平较SHR对照组高，而SHR PPG组大鼠主动脉caspase-3水平低于SHR对照组。WKY NaHS组及WKY PPG组大鼠主动脉平滑肌细胞的各项凋亡相关因子表达与WKY对照组相似。H2S供体或PPG干预组Fas水平与相应对照组相比无明显改变。结论 H2S可抑制平滑肌细胞增殖，并可能通过下调凋亡抑制因子Bcl-2及NF-κB水平，最终激活效应因子caspase-3而促进血管平滑肌细胞凋亡，缓解自发性高血压血管结构重建。     

脑源性神经营养因子对缺氧缺血胚鼠脑细胞凋亡的作用

目的探讨外源性脑源性神经营养因(BDNF)在宫内缺氧缺血环境下对胚鼠脑神经细胞凋亡的作用及其可能信号传导途径。方法 钳夹孕鼠子宫动脉30 min后,实验组经孕鼠尾静脉注射2 μg BDNF,对照组注入生理盐水、Tunel法测定各组脑组织神经细胞凋亡,免疫组织化学分析不同时间点胞外信号调节酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达情况。结果随缺血再灌注时间延长,胚脑凋亡细胞逐渐增多。实验组胚脑组织同时间点神经细胞凋亡数较对照组少,ERK表达较对照组增强,JNK表达成弱。结论BDNF在宫内缺氧缺血环境下有减少胚脑神经细胞凋亡作用,该作用可能与激活ERK信号途径有关。     

L-精氨酸对胎儿生长受限胎盘Bcl-2、Bax凋亡蛋白及脐动脉血流的影响

目的 观察L-精氨酸对胎儿生长受限(FGR)脐动脉血流及胎盘Bcl-2、Bax凋亡蛋白表达的影响,探讨L-精氨酸对FGR的疗效.方法 选择FGR患者60例,随机分为常规组30例和L-精氨酸组30例.孕期定期应用B型超声监测二组胎儿脐血流参数;分娩后称新生儿体质量,10 min内取胎盘中央组织,100 g/L甲醛固定后石蜡包埋,免疫组织化学法检测各组胎盘Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达.采用SPSS 11.5软件进行统计学分析.结果 L-精氨酸组新生儿平均出生体质量显著高于常规组(P<0.01).治疗后,与常规组比较,L-精氨酸组快速血流比值较高(P<0.05),搏动指数、阻力指数较低(Pa<0.05).常规组较L-精氨酸组Bax表达量相对增强,而Bcl-2表达相对减弱.结论 L精氨酸可降低胎盘细胞凋亡相关基因Bax蛋白的表达,增加Bcl-2的表达,减少胎盘细胞凋亡,改善胎盘功能,促进胎儿发育.     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌细胞凋亡及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的变化

目的 了解缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的变化.方法 通过结扎7 日龄新生大鼠一侧颈总动脉,吸入低浓度氧复制缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的动物模型,并没假手术对照(NC)组,两组分别于HIBD后1 h、4 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d取心脏组织,应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,SP法检测心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 NC组偶见心肌阳性凋亡细胞1～4个/mm~2,各时间点阳性细胞数差异无统计学意义(F=0.5,P>0.05).HIBD组12 h心肌阳性凋亡细胞开始增多,为(14.40±3.21)个/mm~2;72h达高峰,为(26.80 ±2.28)个/mm~2,12～72 h各时间点阳性凋亡细胞明显高于NC组(P<0.05);7 d阳性细胞数减少,但仍高于NC组.NC组大鼠心肌组织Bax呈阳性表达,Bcl-2呈弱阳性表达.HIBD组Bax于24 h开始增高.72 h表达最明显,7 d时表达有所降低,24 h～7 d表达高于NC组(P<0.05);Bel-2于24 h表达开始增高,以后缓慢增高,72 h达高峰,24 h～7 d较NC组表达增高,差异有统计学意义(P<0.05).HIBD组Bcl-2/Bax比值逐渐降低.Bax、Bcl-2的表达与凋亡细胞数之间均星直线正相关(r=0.921、0.980,P均<0.01).Bcl-2/Bax的比值与凋亡细胞数无相关性(r=0.702,P>0.05).结论 HIBD新生大鼠心肌细胞存在凋亡,心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达增加,且与心肌细胞凋亡有关.     

显性脊椎裂胎鼠脊髓神经细胞凋亡及凋亡相关基因表达的意义

目的 观察胎鼠显性脊椎裂脊髓神经细胞凋亡的发生及神经细胞内凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达,探讨显性脊椎裂畸形发生过程中脊髓神经细胞凋亡及上Bcl-2和Bax在神经细胞表达的意义.方法 采用原位末端标记法和免疫组化SABC法检测30例脊椎裂胎鼠和14例正常胎鼠脊髓神经细胞凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达.神经细胞凋亡用凋亡指数(AI)表示,AI=凋亡细胞数/500×100%.基因Bcl-2、Bax蛋白的表达强度用平均灰度值G表示,蛋白表达越强G值越小.结果 显性脊椎裂胎鼠脊髓神经细胞凋亡数明显增多,正常脊髓神经细胞凋亡指数为0.5%,畸形脊髓神经细胞凋亡指数24%,统计学差异有极显著意义.正常胎鼠脊髓神经细胞Bcl-2蛋白表达强,而脊椎裂胎鼠脊髓神经细胞Bax蛋白表达强,统计学分析二组脊髓神经细胞Bcl-2、Bax蛋白表达差异有显著性意义.结论 在显性脊椎裂发生过程中脊髓神经细胞过度凋亡,提示神经细胞的过度凋亡与显性脊椎裂畸形的发生密切相关.脊椎裂畸形胎鼠脊髓神经细胞Bax蛋白表达强,Bcl-2蛋白表达弱,促进细胞凋亡,推测在脊椎裂畸形发生过程中,Bcl-2和Bax基因对脊髓神经细胞凋亡的发生起重要作用.     

氧介导的动脉导管收缩作用机制

动脉导管是主动脉和肺动脉之间的管道 ,胎儿期肺动脉血大多经未闭的动脉导管入降主动脉 ,但出生后须及时关闭 ,如关闭延迟或不能关闭即为动脉导管未闭。维持宫内动脉导管开放和出生后动脉导管的关闭受体内许多因素调节 ,动脉导管的紧张性调节依赖氧介导的收缩作用和前列腺素(ＰＧ)等介导的舒张作用之间的平衡［１］。胎儿期动脉导管的血氧分压约为１８ｍｍＨｇ～２８ｍｍＨｇ,出生后因血流方向逆转使血氧分压急剧升高 ,当血氧分压达到５０ｍｍＨｇ 时导管壁开始收缩 ,导管壁收缩缺氧使管腔达到功能性和解剖学关闭。大部分血管平滑肌在低氧环…     

神经节苷脂治疗新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的研究

目的：观察神经节苷脂(GM1)对缺氧缺血(HI)新生大鼠的治疗作用及对凋亡相关基因Bax/Bcl-2表达的影响。方法：应用生后第7天的SD大鼠,制备缺血缺氧性脑病(HIE)模型。用TUNEL法检测细胞凋亡,用免疫组织化学SABC法检测Bax/Bcl-2的表达。结果：新生大鼠HI后脑细胞存在凋亡。GM1治疗能减少细胞凋亡。治疗组皮质凋亡细胞数为55.75±6.71,较HI组75.25±4.94下降(P<0.01);治疗组海马凋亡细胞数较对照组也有下降(47.25±6.6 vs 32.14±4.88),P<0.01。各组Bax和Bcl-2表达皆为阳性,但在HI对照组,Bax表达更强,而Bcl-2表达较弱。结论：应用GM1治疗HI脑损伤可减少脑细胞凋亡,GM1治疗对凋亡相关基因Bax/Bcl-2表达有一定的影响,HI脑损伤后细胞凋亡可能与这两种基因相关。     

硫化氢对大鼠高肺血流性肺血管重构机制影响的研究

目的 探讨硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对大鼠高肺血流性肺血管重构的影响及其机制。方法 雄性SD大鼠32只,随机分为分流组、分流＋硫氢化钠（sodiumhydrosulfide,NaHS）组、对照组和对照＋NaHS组。分流组和分流＋NaHS组大鼠经腹主动脉一下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型。用敏感硫电极法测定大鼠肺组织H2S含量;计算大鼠肺肌型动脉（muscularized artery,MA）的百分比及MA的相对中膜厚度（relativemedialthickness,RMT）;应用蛋白质免疫印迹技术（Westernblot）定量分析大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen．PCNA）、细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERKl）、磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylation extracellular signal-regulated kinase,P-ERK）;应用免疫组织化学法对PCNA进行定位及半定量分析。结果 分流11周后,与对照组比较,分流组大鼠肺组织H2S含量降低（P〈0．05）、肺动脉MA百分比及RMT升高（P〈0．05）;肺动脉PCNA阳性百分比、P-ERK／ERK1增高（P均〈0．01）。与分流组比较,分流＋NaHS组MA百分比及RMT低于分流组（P〈0．01）;肺动脉PCNA阳性百分比、肺动脉P-ERK／ERK1低于分流组（P〈0．01）。结论 H2S通过丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）／ERK信号转导通路调节大鼠高肺血流性肺血管重构。     

Bax与p53、Bcl-2、PCNA在不同类型神经母细胞瘤中的表达及意义

目的探讨Bax与p53、Bcl-2、PCNA在不同神经母细胞瘤（组织结构不良型,UFH;组织结构良好型,FH）中的表达及意义。方法收集近6年来上海儿童医学中心保存的儿童神经母细胞瘤石蜡标本33例（UFH型10例,FH型23例;男17例,女16例;年龄1个月至15岁,平均年龄33．1个月）。利用组织芯片的高通量、低误差、经济省时等优点,将两组标本制作成组织芯片,再行免疫组化SP法检测Bax与p53、Bcl-2、PCNA在神经母细胞瘤中的表达。并采用荧光原位杂交法（FISH）检测神经母细胞瘤中p53、Bcl-2基因的表达。采用SAS统计软件对结果进行统计学处理,两样本比较采用Wilcoxon秩和检验。结果两组神经母细胞瘤（UFH型和FH型）中Bax与p53均呈低表达,差异无统计学意义（P〉0．05）;而Bcl-2和PCNA在两组肿瘤中表达均较高,差异无统计学意义（P〉0．05）。p53、Bcl-2基因检测结果与免疫组化染色结果一致。结论UFH型和FH型神经母细胞瘤在表征细胞增殖和凋亡的4个指标（Bax与p53、Bcl-2、PCNA）检测中显示小完全的一致性,表明不同组织结构类型对神经母细胞瘤的细胞增殖和凋亡无显著影响。在两组神经母细胞瘤中Bcl-2的高表达与Bax的低表达呈负相关,说明Bcl—2可能参与了儿童神经母细胞瘤的发生,而Bax可能对肿瘤的发生起抑制作用。两组神经母细胞瘤中p53基因发生突变的比例较低,而细胞增殖功能均较旺盛。     

Hypokalemia and Hyperkalemia in Infants and Children: Pathophysiology and Treatment

Potassium is the second most abundant cation in the body. About 98% of potassium is intracellular and that is particularly in the skeletal muscle. Electrical disturbances associated with disorders of potassium homeostasis are a function of both the extracellular and intracellular potassium concentrations. Clinical disorders of potassium homeostasis occur with some regularity, especially in hospitalized patients receiving many medications. This article will review the pathophysiology of potassium homeostasis, symptoms, causes, and treatment of hypo- and hyperkalemia.     

Neuromuscular function and balance of prepubertal and pubertal blind and sighted boys

Aim : To compare the neuromuscular function and balance of blind prepuberty- and puberty-aged boys to those with normal sight. Methods : Thirty-three prepubertal (aged 9–13 y) and pubertal (aged 15–18 y) blind and sighted boys were tested for muscle mass thickness, electromyography and maximal isometric strength, dynamic explosive actions, and balance. Results : There was no difference in the muscle mass thickness, maximal strength or vertical jump between the blind and sighted boys. However, fitness-ball throwing and five-jump distances were significantly shorter in both blind groups compared to the sighted groups. One-leg stance of the prepuberty-aged sighted boys was 109 (67) s and in blind boys 32 (12) s, and in the puberty-aged boys 120 (57) s and 31 (8) s, respectively. When vision was blocked in the sighted boys, differences between the blind and sighted boys disappeared.
Conclusion : The results showed comparable performance between prepubertal and pubertal blind and sighted boys in the static physical fitness tests. However, balance and performance in dynamic multi-joint tests did not improve similarly in the blind groups compared to sighted groups, indicating that maturation, learning and experience by themselves cannot compensate for the loss of sight.     

镇痛镇静治疗的发展历史与现状

疼痛和焦虑等是ICU患者常见的不良感受.现代医学已越来越认识到提高危重患者治疗舒适性的重要性.镇痛镇静治疗日趋受到重视并不断完善,已成为ICU等多学科综合治疗的重要组成部分.该文仅就古今中外镇痛镇静治疗的发展历史、国内外ICU镇痛镇静治疗现状、儿童与成人的区别等几个方面进行介绍.     

Fetal brady- and tachyarrhythmias: new and accepted diagnostic and treatment methods

Sustained bradyarrhythmias are typically the result of symptomatic sinus bradycardia, atrial bigeminy or complete atrioventricular (AV) block. Fetal tachyarrhythmias relate to sinus tachycardia, atrial flutter and supraventricular tachycardia as the main aetiology. Ultrasound is essential to understand the underlying arrhythmia mechanism, to study the impact on cardiac function, to exclude cardiac defects or tumours, and to survey the fetal heart rate and well-being, e.g. during anti-arrhythmic treatment. Based on retrospective studies, several more or less safe, effective and well-tolerated anti-arrhythmic agents are currently available for the treatment of atrial and supraventricular tachycardia. Isolated congenital complete AV block is mainly related to maternal anti-Ro/La auto-antibodies. The rationale to treat a fetus at this irreversible stage of AV nodal damage is primarily to mitigate or prevent concomitant myocardial inflammation and to augment cardiac output. A recently published study demonstrated a significant improved outcome with transmaternal dexamethasone and β-stimulation.