HPLC法测定多烯紫杉醇脂质体药物包封率

目的:建立多烯紫杉醇脂质体药物包封率测定方法。方法:采用HPLC法测定脂质体中多烯紫杉醇的含量及包封率,色谱柱:Diamonsil C18(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(55∶45);柱温:30℃;流速:1.0mL.min-1;紫外检测波长:230nm。结果:多烯紫杉醇在20.4～204μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为97.59%,RSD为1.53%。结论:该方法简单、快速、准确,可用于多烯紫杉醇脂质体包封率的测定。     

PVP包覆β-榄香烯口服脂质体大鼠体内药物动力学研究

目的:研究PVP包覆的β-榄香烯口服脂质体在大鼠体内的药物动力学行为。方法:建立了血浆中β-榄香烯的分析方法,将三种药物对大鼠一次性灌胃后在不同时间眼眶取血。乙醚提取后以气相色谱法定量分析血药浓度,用统计矩方法计算药物动力学参数。结果:PVP包覆β-榄香烯口服脂质体的药物动力学参数如下:T1/2(95.07±20.46)m in,AUC(348.72±32.49)μg/m in.m l,Cm ax(4.39±0.33)μg/m l,Tm ax(60)m in。结论:以普通脂质体为参比制剂时PVP包覆的β-榄香烯口服脂质体相对生物利用度为(140.2±7.5)%。     

马钱子碱脂质体在大鼠体内的药物动力学研究

目的：比较马钱子碱脂质体与游离药物溶液的药物动力学。方法：大鼠尾静脉给药,以士的宁为内标,用HPLC法测定大鼠血浆中马钱子碱的浓度,用3p97程序拟合房室模型并计算药物动力学参数。结果：马钱子碱脂质体大鼠尾静脉单次给药血药浓度经时曲线符合三室模型,而游离马钱子碱溶液符合二室模型。与游离药物相比,马钱子碱脂质体的AUC（增加3.75倍）、CL、T1/2（延长了4.78倍）等药动学参数有显著改善。结论：马钱子碱脂质体具有比马钱子碱溶液更为理想的药物动力学性质。     

针刺对肺癌大鼠体内紫杉醇脂质体趋向性的影响

目的观察针刺“肺俞”、“太渊”对紫杉醇脂质体在肺癌大鼠体内趋向性的影响,为抗肿瘤药物的靶向性研究开辟新的途径。方法,紫杉醇脂质体用”“锝标记,选用单纯尾静脉注射药物以及注射药物分别与针刺“肺俞”、“太渊”（相关穴位）、“神门”（无关穴位）相结合等4种方法对造模成功的肺癌大鼠进行干预（每组18只）。分别于静脉注射后60、90、120min（每个时间点取6只）后处死大鼠,用γ-放射免疫记数器分别测定肺、肝、肾等脏器紫杉醇脂质体的药物含量。结果针剌“肺俞”和“太渊”在全部或部分时间点使肺癌大鼠肺组织紫杉醇脂质体含量增加。针刺“神门”未能使肺组织药物含量升高。结论针刺“肺俞”和“太渊”对紫杉醇脂质体在肺癌大鼠体内的分布具有趋向性影响,“肺俞”对药物在肺脏的靶向性影响大于“太渊”。     

多烯紫杉醇磷脂纳米粒在大鼠体内药代动力学及生物利用度研究

目的研究多烯紫杉醇口服磷脂纳米粒在大鼠体内的药代动力学和口服生物利用度。方法大鼠尾静脉注射多烯紫杉醇注射剂（20μg/g）,大鼠单剂量灌胃给予20μg/g多烯紫杉醇溶液,含环孢素A的多烯紫杉醇溶液或含相等剂量多烯紫杉醇的磷脂纳米粒。采用高效液相色谱法检测给药后各时间点血浆中的多烯紫杉醇浓度,评价药代动力学参数和生物利用度。结果多烯紫杉醇口服磷脂纳米粒单剂量灌胃给药后Cmax为（116．19±28．58）pg／L,tmax为1h,MRT为（5．60±0．34）h,AUC为（490．74±37．28）h·pg·L^-1,口服生物利用度是溶液剂的3．65倍。结论磷脂纳米粒能够显著提高多烯紫杉醇的口服生物利用度。     

紫杉醇脂质体在大鼠体内的组织分布

 目的考察紫杉醇制备成脂质体后对其组织分布的影响。方法建立了大鼠组织中紫杉醇HPLC检测法。色谱条件为:流动相为甲醇-乙腈-水(4:3:3);色谱柱为Turner kromasil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μn);检测波长为227 nm;炔诺酮为内标。结果此色谱条件下各组织的标准曲线、回收率等试验结果表明该方法符合生物样品的分析要求。大鼠静脉注射紫杉醇脂质体及紫杉醇注射液(10 mg·kg^-1)后,紫杉醇脂质体在肝脏、脾脏和肺脏等脏器分布相对较多。结论大鼠给予紫杉醇脂质体及紫杉醇注射液后在各个脏器的分布量几乎均有极显著性差异。     

紫杉醇和多烯紫杉醇致肝损害的实验研究

目的 研究紫杉醇、多烯紫杉醇在小鼠体内出现肝损害的时间,比较两种药物的肝损害程度并探讨其肝损伤作用机制.方法 将小鼠分别尾静脉注射紫杉醇30 mg/kg,多烯紫杉醇17mg/kg及生理盐水,第1天给药,分别于给药第3,7,11,14天测定各组小鼠血清生化指标、肝组织氧化及抗氧化指标,检查肝组织病理学改变.结果 两实验组在给药第3天即出现肝细胞病理学改变,紫杉醇组以肝细胞脂肪变性为主,多数为轻度,少数出现肝细胞点状坏死;多烯紫杉醇组多数出现肝细胞大量变性,肝细胞除了点状坏死,还有片状、桥接坏死,周围有炎性细胞;两实验组丙氨酸转氨酶较对照组无明显变化,天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶较对照组明显升高,多烯紫杉醇组的天冬氨酸转氨酶值明显高于紫杉醇组,直接胆红素值在紫杉醇组无明显变化,多烯紫杉醇组较对照组明显升高,且明显高于紫杉醇组;两实验组的丙二醛较对照组明显升高,多烯紫杉醇组明显高于紫杉醇组;两组的还原型谷胱甘肽值较对照组明显降低,多烯紫杉醇组低于紫杉醇组;紫杉醇组的超氧化歧化酶值与对照组比较无明显变化,多烯紫杉醇组明显低于对照组,亦低于紫杉醇组.结论 紫杉醇、多烯紫杉醇在给药第3天即可引起肝组织损伤,紫杉醇致肝损伤的程度明显轻于多烯紫杉醇.     

β-榄香烯脂质体在大鼠体内的药动学研究

目的:对β-榄香烯脂质体在大鼠体内的药动学进行研究。方法:大鼠尾静脉注射β-榄香烯脂质体和榄香烯注射液后,运用反相高效液相色谱法测定血浆中药物浓度,并应用DAS软件计算药动学参数。结果:β-榄香烯脂质体在大鼠血浆中药时曲线下面积(AUC)及平均滞留时间(MRT)相对于榄香烯注射液有所增加,但差异不显著,达峰浓度(Cmax)有显著性差异。结论:在进行体内分布实验之前还不能得到有关此脂质体是否具有靶向及缓释作用的结论。     

多烯紫杉醇主动靶向脂质体对S180肉瘤细胞小鼠移植瘤生长的影响

目的:研究叶酸受体多烯紫杉醇主动靶向脂质体(FA-PDCT-L)对S180肉瘤细胞小鼠移植瘤的抑制作用及体内毒性。方法:利用自制两亲性嵌段共聚物叶酸-聚乙二醇-聚胆固醇氰基丙烯酸脂(FA-PEG-PCHL)修饰FA-PDCT-L,采用激光共聚焦显微镜检测脂质体与MCF-7细胞的结合机制;建立S180肉瘤细胞小鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为DCT注射液(DCT-I)、未修饰DCT脂质体(DCT-L)和FA-PDCT-L和模型组(生理盐水),按10 mg·kg-1·d-1尾静脉注射给药,观察小鼠移植瘤生长变化并计算抑瘤率;采用TUNEL法测定细胞凋亡;观察各组动物肝功能及骨髓抑制血液生化指标。结果:FA-PDCTL与MCF-7细胞的结合量明显高于其他试验组。与模型相比,DCT-I,DCT-L和FA-PDCT-L组小鼠瘤体积均减少,其中FAPDCT-L的作用最为显著,抑瘤率79.03%,凋亡指数(45.7±3.4)%。FA-PDCT-L组动物的肝功能及骨髓抑制生化指标均与空白组无显著差异。结论:FA-PDCT-L通过FA-PEG-PCHL介导的细胞内化使脂质体进入细胞,显示出了比市售DCT-I更好的抗肿瘤疗效和更低的毒性。     

齐墩果酸脂质体在大鼠体内药代动力学的研究

目的:制备齐墩果酸脂质体,研究齐墩果酸脂质体在大鼠体内的药代动力学。方法:采用乙醇注入-探头超声法制备齐墩果酸脂质体;大鼠分别尾静脉注射齐墩果酸脂质体和齐墩果酸溶液剂,用反相高效液相色谱法测定不同时间血浆中齐墩果酸的浓度,采用3p97程序计算药代动力学参数,并进行统计学分析。结果:制得的脂质体透射电镜下为圆形或类圆形的小囊泡,平均粒径为(206.4±4.7)nm,包封率为(97.74±1.34)%;齐墩果酸脂质体和自制的溶液剂经大鼠尾静脉注射后,t1/2α分别为(4.22±1.86)和(0.80±0.34)min;t1/2β分别为(33.59±12.53)和(15.65±7.91)min;AUC分别为(240.13±23.62)和(168.31±18.47)μg/(mL.min),两种制剂的t1/2β和AUC0-t经方差分析后均存在显著性差异(P0.05),齐墩果酸脂质体显著增加了齐墩果酸的AUC,延长了其在血液循环中的时间。结论:制备的齐墩果酸脂质体包封率较高,粒度均匀;与非脂质体相比,齐墩果酸脂质体静脉注射给药后,药代动力学参数发生了明显的改变。     

灯盏花乙素的药动学研究

 目的建立大鼠血浆中灯盏花乙素的HPLC-ECD测定方法,研究大鼠静注及灌胃给药灯盏花乙素的药物动力学。方法色谱柱Kromasil C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,5μm)；流动相pH2.6的50 mmol·L^-1磷酸盐缓冲液-甲醇-四氢呋喃(60：40：10)；流速1 mL·min^-1；分析电压100 mV。结果灌胃给药后,约在1.0 h,血药浓度达第一个高峰,约在5.0 h,血药浓度达第二个峰。结论灯盏花乙素静注给药的药-时曲线符合三室模型,经剂量校正,灌胃给药的绝对生物利用度为2.20%。     

原百部碱在大鼠体内药动学研究

目的 建立原百部碱在大鼠体内HPLC测定方法,研究原百部碱静脉注射后在大鼠体内的药动学特点.方法 大鼠静脉注射原百部碱不同时间点眼眶取血,HPLC测定原百部碱的血药浓度,3P87软件处理数据.结果 大鼠血清样品中原百部碱在0.10～12.60 μg/ml范围内线性关系良好,大鼠静脉注射原百部碱后药时曲线符合双室模型,分布速率常数为2.69h-1, 消除速率常数为0.69 h-1 ,AUC为3.82 mg·h·L-1.结论 所建立的血药浓度测定方法操作简便、准确灵敏、重现性好,可用于原百部碱在大鼠体内的药动学研究.原百部碱静脉注射后分布和消除均较快.     

灯盏花乙素苷元的药动学研究

 目的研究大鼠灌胃给药灯盏花乙素苷元的药动学。方法色谱柱Kromasil C₁₈柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相pH2.6的50mmol·L^-1磷酸盐缓冲液-甲醇-四氢呋喃(60∶40∶10);流速1.0mL·min^-1;分析电压100mV。结果讨论灯盏花乙素苷元灌胃给药后的药-时曲线和主要药动学参数,经剂量校正,绝对生物利用度为7.0%。结论灯盏花乙素苷元口服易于吸收,与灯盏花乙素相比,其相对生物利用度为301.8%。     

玉叶金花苷酸甲酯在大鼠体内的药代动力学研究

目的：研究玉叶金花苷酸甲酯在大鼠体内的药代动力学。方法：采用以栀子苷为内标的HPLC法,作为检测大鼠血浆中玉叶金花苷酸甲酯含量测定的方法,色谱条件为：Diamonsil C18（2）色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：甲醇∶0.5%醋酸水溶液（30∶70）;流量为1.0 mL·min-1;检测波长为238 nm;柱温为30℃。以DAS 2.0 软件对玉叶金花苷酸甲酯一次性静脉注射给药后,大鼠体内的平均血药浓度-时间数据进行隔室模型拟合。结果：大鼠静脉注射MU 后,以二室模型（权重为1）计算血药浓度与实测值契合较好,优于其他模型。分布半衰期（t1/2α）为9.892 min,消除半衰期（t1/2β）为55.384 min。结论：检测玉叶金花苷酸甲酯建立的方法简便、准确、稳定,可用于Mussaenoside的药物代谢动力学研究;MU在大鼠体内分布较快,在大鼠体内主要以消除过程为主,代谢速度中等。     

安息香在大鼠体内的药代动力学研究

目的 建立安息香主要成分苯甲酸在大鼠体内的RP-HPLC测定方法,研究安息香在大鼠体内的药代动力学规律.方法 Agilent TC-C18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水-磷酸(50∶50∶0.05,V/V);流速为1.0ml·min-1;检测波长为228 nm;柱温:25℃.结果 主要药代动力学参数为:雌性Cmax=(0.055 8±0.050 8)mg·ml-1,tmax =(1 ±0)h,t1/2=(0.168±0.084 5)h,AUC(0-∞)=(0.076 3±0.076 7)h·mg-1·ml-1;雄性Cmax=(0.077 4±0.0369) mg·ml-1,tmax=(1±0)h,t1/2=(0.533±0.417 4)h,AUC(0-∞)=(0.115 4 ±0.058 1)h·mg-1·ml-1.结论 所建立的RP-HPLC方法操作简便、准确灵敏、重复性好,可用于安息香在大鼠体内药代动力学研究.     

金丝桃苷在大鼠体内的药代动力学研究

目的:研究金丝桃苷灌胃给药后在Wistar大鼠体内的吸收、分布和排泄。方法:大鼠分别灌胃和静脉注射金丝桃苷,于给药后不同时间收集大鼠血浆、组织和排泄物。生物样品先用β-葡萄糖苷酸酶将样品水解成苷元槲皮素,再以山奈酚为内标,HPLC测定槲皮素浓度并折算成金丝桃苷。结果:大鼠灌胃给药12.5,25,50 mg·kg-1金丝桃苷后测得的t1/2e分别为(3.47±0.76),(3.52±0.87),(4.17±1.02)h;tmax均为0.5 h;Cmax分别为(0.528±0.230),(1.136±0.451,(2.033±1.147)mg·L-1;AUC分别为(2.67±0.28),(4.11±0.37),(6.72±0.83)mg·L-1·h-1。Cmax和AUC均与剂量呈正相关,相关系数分别为0.998,0.999,表明其消除符合线性动力学特征。与静脉注射相比,大鼠灌胃给药金丝桃苷的绝对生物利用度为26.0%。大鼠灌胃给药25 mg·kg-1金丝桃苷后0.5,3,6 h的药物组织分布由高到低的顺序大致是胃>肠>肾、肝、肌肉、肺、心>脑、子宫>脾、睾丸>脂肪。排泄试验结果显示,72 h内由尿排出的总量约占给药剂量的(0.71±0.13)%,粪排泄量占所给药剂量的(2.04±0.36)%;给药后24 h内,由胆汁排出的总量约占给药剂量的(1.56±0.22)%。结论:灌胃给药后,金丝桃苷在大鼠体内吸收迅速,消除半衰期较长,血液及主要脏器无药物蓄积,金丝桃苷的主要排泄方式不是以原形或苷元(包括苷元的其他糖基化衍生物)形式从尿、粪或胆汁排泄。     

磷酸川芎嗪脂质体大鼠在体鼻黏膜吸收研究

目的研究磷酸川芎嗪脂质体的鼻黏膜吸收特性。方法采用大鼠在体鼻腔循环灌流法,考察循环液流速、药物浓度对磷酸川芎嗪脂质体鼻黏膜吸收的影响,并对磷酸川芎嗪脂质体和磷酸川芎嗪溶液的鼻黏膜吸收进行比较。结果在流速为1.2～2.4mL/min范围内,磷酸川芎嗪脂质体鼻黏膜吸收速率常数随流速的增加而增加;在浓度为0.245～0.98mg/mL范围内,鼻黏膜吸收速率常数随浓度的增加而增加。与同浓度的磷酸川芎嗪溶液比较,脂质体吸收更快,鼻黏膜经时吸收量更高。结论磷酸川芎嗪脂质体比磷酸川芎嗪溶液鼻黏膜吸收更加完全。     

多西他赛冻干脂质体复溶后粒径分布影响因素考察研究

 目的 考察多西他赛冻干脂质体复溶后粒径分布的影响因素,为制备满足临床运用的产品提供依据。方法 采用单因素法,分别以不同种类的负电荷磷脂、不同磷酯酰胆碱（PC）含量的卵磷脂、不同种类与浓度的冻干保护剂及不同冻干工艺制备多西他赛冻干脂质体,考察各因素对其冻干复溶后粒径的影响。结果 最佳膜材组成为二棕榈酰磷脂酸（DPPA）、PC含量92%的卵磷脂,最佳冻干保护剂为20%的海藻糖;最佳冻干工艺为速冻、升华干燥时间19 h、解析干燥时间9 h。结论 负电荷磷脂、冻干保护剂、卵磷脂的PC含量及冻干工艺对多西他赛冻干脂质体复溶后的粒径均有影响。     

大鼠体内的葛根素浓度及药代动力学

目的:评价大鼠体内葛根素浓度及药代动力学,为临床葛根素用药方案制定选择提供参考。方法:建立葛根素在大鼠体内浓度测定方法,采用该方法进行葛根素药代动力学实验室研究,分析文献报道的高效液相色谱(HPLC)分析法检测葛根素含量方法制定色谱条件:色谱柱:AcclaimC_(18)色谱柱(5μm,4.6 mm×150 mm),流动相:甲醇:水,检测器:Modle 500UV检测器;检测波长:250 nm色谱工作站:N2000双通道工作站。配制葛根素标准液、外标物溶液、待测血浆样品液、空白对照液等。分别进样行梯度洗脱,验证方法的专属性、线性关系、回收率、精密度、稳定性。选择12只洁净大鼠,雌雄各半,随机分为2组,将采用药典葛根素推荐剂量下限给予腹腔灌胃设为低剂量组,给予药典推荐剂量上线腹腔灌胃设为高剂量组。2组大鼠分别于灌胃后不同时间采集眼眶静脉血采用已验证的HPLC分离检测方法检测血浆葛根素药物浓度采用DAS2.0统计软件处理葛根素浓度-时间数据绘制药时曲线图,计算药代动力学指标并行组间比较。结果:1)拟定色谱条件下,大鼠血浆空白溶液、葛根素对照溶液、葛根素血浆样品溶液中主要成分保留时间差异明显,未发生重叠,说明该方法专属性较好。2)加入不同浓度葛根素对照品于大鼠血浆中,所得浓度-峰面积呈良好的线性关系,回归方程为:Y=3.957×10~6X-697.329,r=0.998 3,检测限:0.055～0.660μg/mL。不同浓度葛根素对照品回收率为(103.110±0.521)%高浓度和低浓度2组回收率比较差异无统计学意义(P0.05)。日内精密度为:3.14%,日间精密度5.26%;12 h内,放置不同时间的样品间葛根素含量检测相对偏差(RSD)为3.95%;不同灌胃剂量大鼠药时曲线均符合二室模型;大鼠灌胃葛根素后不同剂量大鼠的AUC_(0-t)、C_(max)、MRT_(0-t)、CL差异有统计学意义(P 0.05)。结论:采用HPLC检测大鼠体内葛根素方法可行,采用低剂量用药方案即可获得较好的药物吸收代谢效果,高剂量则影响葛根素吸收。