氯化硝基四氮唑蓝还原法检测血清糖化低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白的方法学研究及应用

目的建立用氯化硝基四氮唑蓝(NBT)还原的方法测定血清糖化低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白(SGLP-VP).方法采用在碱性条件下,SGLP-VP可使NBT还原为紫色的甲(月替),其颜色的深浅与SGLP-VP的含量成正比的原理,在721型分光光度计上测定血清中的SGLP-VP.结果150例正常健康成年人SGLP-VP指数为20.20±9.13(-x±SD);批内CV为2.96%～4.25%;批间CV为2.73%～5.96%;与空腹血糖水平比较有显著性差异(r=0.935,P＜0.005).结论该法简便,反应迅速,重复性好,无需特殊仪器和试剂,基层实验室均可使用.     

促红细胞生成素放射免疫分析及临床应用

目的 :建立促红细胞生成素 ( EPO)的放免分析方法 ,并探讨血清 EPO浓度测定的临床意义。　方法 :用rh EPO免疫动物制备了高质量的抗血清 ,建立了 EPO放免分析方法 ,并测定了正常人和贫血、肾衰患者血清 EPO值。　结果 :灵敏度为 0 .2 2 μg/L,批内 CV为 6.9%～ 8.4% ,批间 CV为 8.0 %～ 9.6% ,回收率为 93 .8%～110 .4%。正常血清 EPO值为 ( 1.5 9± 0 .69) μg/L,贫血患者为 ( 3 .64± 1.2 8) μg/L,肾衰患者为 ( 0 .85± 0 .2 5 ) μg/L,与正常人之间有显著性差异 ( P<0 .0 0 1)。　结论 :EPO的放免分析方法是一种简单、灵敏、特异的分析方法 ,可满足临床的需要 ,测定血清 EPO浓度对许多疾病的诊断和治疗有重要的意义     

高效液相色谱法快速直接测定血清苯丙氨酸和酪氨酸

目的 :建立快速、直接、同时测定血清苯丙氨酸和酪氨酸的方法。方法 :血清标本加高氯酸去蛋白后取上清 ,采用固定流量洗脱高效液相色谱紫外检测法测定。结果 :苯丙氨酸的线性范围为 6～ 1 51 2 μmol·L- 1 ,最低检测浓度为 0 75μmol·L- 1 ;平均回收率为 98 6 % ,批内CV为 3 68% ,批间CV为 4 0 1 %。酪氨酸的线性范围为 5 4～ 1 380μmol·L- 1 ,最低检测浓度为 0 7μmol·L- 1 ,平均回收率 98 9% ,批内CV为 1 87% ,批间CV为 2 59%。健康儿童血清苯丙氨酸浓度为 (61 4± 1 0 8) μmol·L- 1 ,血清酪氨酸浓度为 (1 31 8± 2 8 0 ) μmol·L- 1 。健康成人血清苯丙氨酸浓度为(69 3± 8 6) μmol·L- 1 ,血清酪氨酸浓度为 (83 6± 9 4) μmol·L- 1 。 4例苯丙酮尿症患儿的血清苯丙氨酸浓度为 1 2 96～1 759μmol·L- 1 ,血清酪氨酸为 2 9 5～ 53 5μmol·L- 1 。结论 :本方法灵敏度高 ,特异性好 ,方法简便快速 ,适合临床使用     

NBT还原法测糖化血清蛋白的方法学评价

目的 对NBT法测糖化血清蛋白进行方法学评价. 方法对受检者血清在Olympus AU640上进行糖化血清蛋白检测,系统研究了NBT还原法测糖化血清蛋白的精密度、稀释线性及干扰因素等. 结果NBT法精密度较高,批内和批间变异系数(CV)分别为4 2%～5 52%和5 32%～7 3%,回收率为94 58%～100 98%. 结论NBT法测糖化血清蛋白精密度较高,结果可靠,适合基层医院检验科应用.     

分光光度法在血清精氨酸酶活性检测中的应用

目的:建立一种检测血清精氨酸酶活性的快速比色方法。方法:利用对硝基苯乙醛(PNPG)能特异地与精氨酸反应,并在480nm处有最大吸收,同时根据水解后剩余精氨酸的含量来推算精氨酸活性水平。结果:通过精密实验可得批内CV为3.8%,批间CV为4.7%。并测定32份正常人血清,男性0～75(44±10)U/L,女性0～79(44±10)U/L,男女间无显著差异(P>0.05)。结论:该方法特异、准确,操作简捷,灵敏度高,适宜于临床实验室中广泛开展。     

人血清中视黄醇结合蛋白的激光散射比浊测定及临床应用

本文介绍了血清视黄醇结合蛋白(RBP)的激光散射比浊测定法。此法操作简单、快速、且能自动化。视黄醇结合蛋白浓度在9.0～146.0mg/L之间呈线性;批内CV9.1％;批间CV11.6％;回收率为97.5～109.0％。测定41名健康成人正常参考值为47.6±9.0mg/L(X±SD)。肝脏损害患者血清RBP为18.6±11.0mg/L,明显低于正常人。而肾脏损害患血清RBP为244.5±15.2mg/L,明显高于正常人。     

人血清免疫反应性胰蛋白酶快速RIA及对急性胰腺炎的诊断作用

人血清免疫反应性胰蛋白酶(IRT)快速RIA能在2h内完成。该方法灵敏度为1.5ng/ml,批内CV为4.0％,批间为7.2％,回收率103％,健全性呈线性关系,稳定性能保持2个月。国人血清IRT正常值(X±SD)为30.2±12.3ng/ml(12～70ng/ml,n=120),22例急性胰腺炎病人的血清IRT显著增高(793.9±618.8     

吡啶偶氮酚比色法应用于自动生化分析仪测定血清锌

目的　将吡啶偶氮酚 (5 Br PAPS)比色法应用于自动生化分析仪 (简称本法 )测定血清锌 ,以寻求简便、易行的测定血清锌的方法。方法　用本法对 12 2 2例入托体检正常儿童进行血清锌测定 ,同时用火焰原子吸收分光光度法测定作为对照。统计方法采用卡方检验。结果　用本法检测的显色络合物最大吸收峰为 5 60nm ,线性范围 0～ 5 9.98μmol·L-1,回收率98.7%～ 10 4.5 % ,批内CV =2 .5 % ,批间CV =3 .0 4%。本法与火焰原子吸收分光光度法比较 ,r =0 .970 ,P <0 .0 0 1,两法具有良好的相关性。用本法调查 12 2 2例入托体检正常儿童血清锌 ,平均值为 (12 .61± 2 .2 4) μmol·L-1。结论　使用本法测定血清锌可以取代手工比色法和火焰原子吸收分光光度法 ,能满足临床需要 ,试剂易得 ,显色稳定、敏感 ,且省力、省时 ,具有推广应用价值     

唾液T3,T4甲状腺激素测定及临床应用

本文用血清 T_3、T_4甲状腺激素~(125)I放射免疫试剂盒测定方法予以改良后用于唾液 T_3、T_4(ST_3、ST_4)测定。正常人 ST_3、ST_4值分别为0.057±0.022及2.05±0.78nmol/L.甲状腺功能亢进症(甲亢)患者 ST_3、ST_4值明显增高(P 均<0.001)。ST_3、ST_4与 T_3、T_4相关(P<0.05及<0.05)。ST_3、ST_4批内变异系数(CV)分别为2.42%、1.99%;批间CV14.14%、10.12%。唾液容量与结合率呈线性关系。结果表明 ST_3、ST_4能反映血清甲状腺激素水平,可作为一种非侵入性检测手段.     

血清门冬氨酸基移换酶测定的两种方法比较

目的 :为了提高AST的测定水平。方法 :采用速率法和比色法对三个水平的定值血清同时进行AST的重复性和高值血清的 10个稀释样本的准确性检测 ,并对以上两种方法所测结果进行统计学分析。结果 :两种方法的重复性尚可 ,三个质控血清速率法和比色法的 2 0次测定结果分别为 2 6 3 2± 1 76,CV =6 69% ,48 5 4± 2 17,CV =4 47% ,10 5 13± 3 61,CV =3 43 % ;2 7 65± 1 5 2 ,CV =5 5 0 % ,5 4 10± 2 0 3 ,CV =3 75 % ,96 78± 3 2 4,CV =3 3 5 %。速率法和比色法对 10个定值样本 2 0次测定值与预期值的符合率分别为 (96 2 8± 8 65 ) % ,CV =8 87% ;(97 15± 5 43 ) % ,CV=5 5 9%。两种方法准确性无明显差异 (t =0 3 81,P >0 0 5 )。结论 :以上两种测定血清AST差别不大 ,可以同时采用 ,以利工作。     

胰岛素检测与临床评估

目的　对血清胰岛素 (Ins)检测进行方法学考核 ,并测定 2型糖尿病、高血压病、高血脂的Ins水平。方法　用放免法检测 6 8例健康人作为对照组 ,116例为病例组 (其中 2型糖尿病 2 1例 ,高血压病 34例 ,高胆固醇血症 32例 ,高甘油三酯 2 9例 )的空腹血清Ins进行比较分析。结果　对照组Ins为 10 .5 6± 3 .0 7mIU/L( x±s) ,批内变异系数 (CV) 3.8%～ 8.9% ,批间变异系数 (CV) 6 .8%～ 9.6 % ,反应误差关系 (RER) 0 .0 35 ,平均回收率 95 .7% ,非特异性结合率 (NSB) 3.82 %。对照组与病例各组比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　通过实验将进一步论证高胰岛素血症、胰岛素抵抗在多种代谢相关疾病发病中起着重要的作用 ,同时已成为相关疾病的共同病理生理基础。     

硝酸盐还原酶一步法测定血清中硝酸盐浓度

为建立简便快速的一氧化氮(NO)间接测定方法,根据硝酸盐还原酶还原硝酸盐(NO3-)至亚硝酸盐(NO2-)的过程中,所消耗的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)的量与NO-3浓度呈正比的原理,用340nm处NADPH吸光度的下降值,推算出NO-3的量.所建体系的反应时间为90min,NADPH浓度为6mmol/L,硝酸盐还原酶浓度为500U/L.NaNO3在0 u-mol/L～200umol/L范围内,与NADPH吸光度的变化量具有良好的线性关系,r=0.993.批内变异系数(CV)=4.4%,批间CV=10.5%;回收率为92.36%.20例25～55岁的正常人血清中NO-3浓度为52.42±19.76umol/L.用此法测定血清中NO3-浓度简便快速、特异性高、干扰因素少,不需昂贵仪器,适合实验室常规测量及临床推广使用.     

TBARS比色测定血浆低密度脂蛋白的研究

目的 :建立和改良血浆低密度脂蛋白 (LDL)直接测定法。方法 :TBARS比色法。结果 :该方法线性范围 0～ 10mmol/L ,与酶法相关 r=0 .985 3 ,批内CV =1.5 1% ,批内CV =2 .84% ,平均回收率 10 0 .4%。结论 :该法结果准确可靠 ,灵敏度高 ,测定范围大 ,适于临床应用。LDL C正常参考值 18～ 42岁为 2 .5 3± 0 .82mmol/L ;43～ 63岁为 3 .0 1± 1.2mmol/L。     

单一试剂法测定血清总胆红素和直接胆红素

试用单一试剂,以柠檬酸、尿素和咖啡因作加速剂,在极强酸性条件下采用同一波长、同一计算因数,测定血清总(直接)胆红素。总胆红素批内和批间CV 分别为2.83%和3.61%;直接胆红素批内和批间CV 分别为3.14%和3.95%。平均回收率,总胆红素101.1%±2.5%,直接胆红素100.5%±1.2%;与J-G 法比较结果两法显著相关,(?)=0.967x+0.045,相关系数r=0.997。该法简便、快速、稳定,易于实现自动化分析和实行质量控制。     

单向火箭免疫电泳测定大鼠血清载脂蛋白AI浓度

单向火箭免疫电泳测定大鼠血清载脂蛋白AI(Apo AI)浓度,操作简单,定量准确。待测样品采用9M脲致变性使抗原决定簇暴露,减少了样品处理时间,得到较好的测定结果。用此法测得雄性和雌性SD大鼠血清Apo AI浓度分别为45.76±6.0mg/dl(n=10)、60.60±9.4mg/dl(n=10)。批内CV为4％,批间CV为7％。正常大鼠注射胰岛素,血清Apo AI浓度明显降低。     

改良血清异柠檬酸脱氢酶测定方法的研究

本文介绍血清异柠檬酸脱氢酶(ICD)活性检测的改良方法。该法以公式计算法取代标准反应曲线法,并进行了改良的方法学研究。精密度实验显示,一份血清ICD(U/L)(?)±为4.68±0.13,CV为2.77％;另一份血清ICD(U/L)(?)±s为5.14±0.17,CV为3.30％;回收实验结果,回收范围93.8～106.8％,该酶活力在0～80U/ml范围内呈线性,相关系数r为0.996。本法测定135例健康成人血清ICD(U/L)(?)±s为6.43±2.56。     

ND-ELISA在预测麻风复发中应用的潜在远景

为进行麻风复发的预测研究 ,本室以一种人工合成的二糖抗原 (natural disaccharide octylborine serum albumin)为基础建立了间接酶联免疫吸附测定 (ND-ELISA)法 [1,2 ] ,该法的阈值 (cut off value,CV)设定为 (x± 3 s)。结合麻风病抗体水平实际状况 ,本实验设定实用光密度 (OD)测定的 CV值为 :CV1=0 .1 0和 CV2 =0 .1 6。在 CV2 的条件下方法的敏感性为 96% ,特异性为 1 0 0 % ,阳性预测值为 1 ,阴性预测值为 0 .98,正确指数为 0 .91 4;批内变异系数为 0 .0 2～ 0 .0 8,批间变异系数为 0 .0 1～ 0 .0 9。现将本室用之于早期麻风…     

消除葡聚糖及脂血对血清总蛋白测定干扰的新方法探讨

本文介绍了一种能够同时消除葡聚糖及脂血对血清总蛋白测定干扰的新方法。本法血清总蛋白浓度在0～140g/L 呈良好线性;实验批内 CV0.88%、批间 CV1.26%;平均回收率为99.4%。具有除干扰效果显著、配方简单、重复性好、准确度高、线性良好、呈色时间快及稳定性好等优点。是日常测定总蛋白的理想方法。     

干化学法测定血清淀粉酶的应用与评价

目的:评价全自动干化学法测定血清淀粉酶的效果。方法:在VITROS-250干式生化分析仪上测定血清淀粉酶,与日立7170全自动生化分析仪比较。结果:血清淀粉酶的检测限为30～1200U/L;高、中、低浓度的批内CV分别为3.5%、4.1%和4.2%,,批间CV分别为3.8%、4.8%和4.9%;回收率为96.8%～103.1%;与日立7170全自动生化分析仪(X)相关系数r=0.991,相关方程Y=1.016X+19.7;血红蛋白浓度2.8g/L以下,胆红素浓度378μmol/L以下,甘油三酯浓度7.2mmol/L以下,对该法测定基本无干扰。结论:该法测定血清淀粉酶简便、快速、准确可靠,适用于急诊检测。     

血清C反应蛋白测定的方法学比较

目的:对全自动干化学法测定血清C反应蛋白(CRP)进行应用评价。方法:在VITROS-250型干式生化分析仪上测定血清CRP,并同时在日立7600型全自动生化分析仪上检测。结果:血清CRP的检测限为7.0～110.0 mg/L;高、中、低浓度的批内CV分别为1.79%、1.90%和2.46%,批间CV分别为1.95%、2.53%和3.62%;回收率平均为98.2%;与日立7600型全自动生化分析仪相关系数R2=0.989 5,相关方程为Y∧=0.970 2X+0.431 9;血红蛋白2.0 g/L,胆红素浓度356μmol/L,三酰甘油浓度7.8 mmol/L,对全自动干化学法测定基本无干扰。结论:干化学法测定CRP快速、准确、可靠。