子宫内膜异位症患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化

观察子宫内膜异位症患者外周血单个核细胞CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的数量变化,初步探讨其意义。采用流式细胞术检测20例健康对照者(对照组)及46例子宫内膜异位症患者(疾病组临床r-AFS分期:Ⅰ～Ⅱ期26例,Ⅲ～Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数目,并计算CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞占CD4~+T淋巴细胞的百分率;分析不同分期子宫内膜异位症患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化。结果显示,与健康对照组相比,疾病组PBMC中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T淋巴细胞的百分率及CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg绝对数均明显升高(P<0.01,P<0.05);疾病组中,Ⅲ～Ⅳ期的PBMC中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T淋巴细胞的百分比及CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg绝对值较Ⅰ～Ⅱ期均明显升高(P<0.01,P<0.05)。提示子宫内膜异位症患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数目和比例增多,可能存在自身免疫调节功能的紊乱,且与病程发展紧密相关。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞和Foxp3在不同病理类型乳腺癌患者外周血和组织中表达水平及其临床意义

目的 探讨乳腺癌(breast cancer)患者外周血和乳腺组织中CD4+ CD25+、Foxp3 mRNA和蛋白水平表达情况,初步阐明二者在乳腺癌患者免疫调节中的作用和意义.方法 选取乳腺癌患者25例,15例正常乳腺组织作为对照.采用流式细胞术检测乳腺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Treg的表达水平.RT-PCR和Western blot分别用于检测患者癌变组织中Voxp3mRNA和蛋白表达水平.结果 相对于正常对照组,各组乳腺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Treg表达水平明显升高(P＜0.05);同时,乳腺癌各组中Foxp3 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 CD4+ CD25+ Treg和其标记分子Foxp3可能参与了乳腺癌中机体的免疫调节过程,其二者表达水平的检测对于乳腺癌临床判断和进一步的治疗具有一定指导意义.     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在子宫内膜癌患者外周血中的表达及意义

探讨在子宫内膜癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况及意义。采用流式细胞术检测84例术前子宫内膜癌患者及40例子宫肌瘤患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+细胞比例及Foxp3平均荧光强度,采用qRT-PCR检测两组患者外周血中Foxp3的mRNA表达情况,同时采用ELISA检测外周血中TGF-β1和IL-17含量。与子宫肌瘤组比较,子宫内膜癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例虽略有升高但没有统计学意义(P=0.08),而CD4+CD25+细胞内Foxp3的平均荧光强度明显升高(P<0.001)。子宫内膜癌患者外周血中Foxp3的mRNA表达要明显多于子宫肌瘤组(P<0.001)。子宫内膜癌患者外周血中TGF-β1、IL-17的含量要多于子宫肌瘤组。子宫内膜癌患者外周血中的Foxp3+Treg细胞表达增多,这些细胞可能通过增加细胞因子TGF-β和IL-17的分泌从而调节机体对肿瘤细胞免疫反应的方向,最终促进子宫内膜癌的发生和发展。     

外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞影响先兆流产的妊娠预后

分析先兆流产患者妊娠结局与外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的联系。对先兆流产患者采用黄体酮针40mg im qd,HCG针2000 u im qod,地屈孕酮片1片Bid po,维生素E丸1粒Tid po的治疗方案保胎;采用细胞内染色流式细胞术,分析外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞亚群。结果:28例先兆流产患者经用以上治疗方案保胎后,18例成功,10例失败。经治疗后,保胎成功组外周CD4~+CD25~+Foxp3~+/CD4~+、CD4~+Foxp3~+、CD25~+Foxp3~+T细胞比例显著高于保胎失败组(P0.05),并显著高于保胎治疗前(P0.05)。外周调节性T细胞升调节有利于成功妊娠。     

妊娠期高血压患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及意义

目的:研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在妊娠期高血压疾病患者(HDCP)外周血中比例改变,并探讨其在妊娠期高血压疾病进程中的意义。方法:选取2007年11月至2008年6月在镇江市妇幼保健院、镇江市润州区人民医院门诊及住院妊娠期高血压疾病患者56例,其中妊娠期高血压20例,轻度子痫前期16例,重度子痫前期20例。选择同期正常妊娠妇女20例,正常育龄妇女16例。采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测调节性T细胞Foxp3的表达。结果:(1)轻度子痫前期和重度子痫前期妇女外周血中CD4+CD25+T细胞比例分别为6.78%±1.18%、4.79%±1.17%,显著低于正常妊娠妇女11.95%±3.73%(P0.01)和正常育龄妇女8.99%±2.40%(P0.05);重度子痫前期CD4+CD25+T细胞比例明显低于妊娠期高血压的10.17%±1.46%(P0.05);正常妊娠妇女外周血CD4+CD25+细胞比例显著高于正常育龄妇女(P0.05)。(2)妊娠期高血压、轻度子痫前期和重度子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3+细胞分别为1.80%±0.45%、1.36%±0.21%和0.72%±0.25%,显著低于正常妊娠妇女的4.23%±1.28%(P0.01)和正常育龄妇女的2.75%±1.09%(P0.05),而轻度子痫前期和重度子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞明显低于妊娠期高血压(P0.05);正常妊娠妇女外周血CD4+CD25+Foxp3+细胞显著高于正常育龄妇女(P0.05)。(3)Foxp3mRNA表达水平与蛋白质水平相一致。结论:妊娠期高血压疾病发病时CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞明显减少,这些调节性T细胞改变可能参与了妊娠高血压疾病的病理进程。     

Foxp3和CD4+CD25+调节性T细胞研究进展

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分,其对免疫反应具有抑制效应,在体外增殖能力低,在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面都有一定作用.最近发现Foxp3在调控调节性T细胞的一重要亚群CD4+CD25+T细胞的发育上起很重要的作用.本文就CD4+CD25+T细胞特性、Foxp3在其发育和功能发挥中的作用以及其活性调节方面作一综述.     

小鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞体外扩增

目的:本研究旨在探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增的方法。方法:采用磁珠分选小鼠CD4+T细胞,αCD3单克隆抗体包被24孔板,加入αCD28单克隆抗体、雷帕霉素、rhIL-2,培养3周后,流式细胞仪测定培养细胞中CD4+CD25+T细胞的含量,实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达;单向混合淋巴细胞反应和增殖抑制试验测定扩增的CD4+CD25+T细胞的增殖及其抑制功能;ELISA检测培养上清中IL-10和TGF-β1的含量。结果:小鼠CD4+T细胞培养3周后,CD4+CD25+T细胞达(76.05±2.73)%,高于未加雷帕霉素组(52.17±1.36)%(P<0.001),磁珠分选的CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达是未加雷帕霉素组的5倍(P<0.001),增殖能力是未加雷帕霉素组的0.29倍(P<0.001),对CD4+T细胞增殖抑制能力是未加雷帕霉素组的3.6倍(P<0.001),培养上清中IL-10和TGF-β1分别是对照组的1.8倍和1.6倍(P<0.001)。结论:小鼠CD4+T细胞在含有1μg/ml的αCD28、rhIL-2 100 U/ml和终浓度为10 nmol/L雷帕霉素的培养体系中培养3周后能有效扩增CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。     

不同结核病患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达的变化

Objective To investigate the expression of CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in patients with tuberculosis, and to discover its role in the immune response to mycobacterium tuberculosis. Methods Thirty-three patients with tuberculosis and 30 healthy controls were selected who were consulted in our hospital. Patients were classified by their chemotherapy and smear sputum and CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell were detected by flow cytometry. Results Expression of CD4 + CD25high and CD4+ CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in experimental group were ( 8.84 ± 2.55 ) % and (6.30 ± 1.38 ) % respectively, which were significantly higher than they were in control group (t = 3.57,4. 01, P ＜ 0. 01 ). The expression of CD4 + CD25high and CD4+ CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in patients with positive smear sputum were also significant higher than that in patients with negative smear sputum ( t = 2. 51,2. 42,P ＜ 0.05). No significance was founded between the first-visit group and revisit group ( t = 0. 03, 0. 02, P ＞ 0.05 ). Conclusions CD4 + CD25high and CD4 + CD25 + Foxp3 + regulatory T cell in patients with tuberculosis were higher than healthy control, which may result in immune suppression.     

胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及临床意义

目的研究胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞频数的变化,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤的病理类型及临床分期的相关性.方法应用流式细胞仪分析胃癌患者和健康对照组外周血中单个核细胞(pBMCs)的CD4+CD25+调节性T细胞频数,并探讨该种细胞频数的变化与胃癌的相关性.结果32例胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞19.40%±8.76%,高于25例健康对照组的10.68%±3.57%(P＜0.01).分化较好的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞16.79%±4.21%,低分化胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞20.02%±10.42%,两者之间差异显著(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞22.43%±8.36%,明显高于Ⅰ、Ⅱ期的胃癌患者(CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的15.27%±6.85%,P＜0.05).结论CD4+CD25+T细胞在胃癌患者中比例升高,可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25+T细胞的高表达可作为胃癌患者肿瘤进展的重要标志.     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+和CD4~+CD25~-Foxp3~+T细胞

目的：研究初发系统性红斑狼疮患者（Systemic lupus elythematosus，SLE）外周血CD4^＋T细胞中CD25和Foxp3表达及其在SLE发病中的意义。方法：根据SLE疾病活动积分（SLEDAI）将初发SLE患者分为活动组（10例）和不活动组（11例），流式细胞仪检测治疗前后外周血CD4^＋T细胞中CD25、Foxp3和CD127表达百分率，并对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和anti-ds-DNA相关性进行研究。结果：初发活动组和不活动组SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞表达百分率分别为（1．91％～6．75％）和（2．74％～7．01％），与正常对照（2．11％～9．90％）相比没有统计学差异（P=0．524，P=0．794）；且初发SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞在体外增殖反应和增殖抑制功能与正常对照相比无明显差别（P=0．174，P=0．689）；外周血CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞百分率在初发活动组（3．71％～10．94％）和不活动组（2．97％～7．69％）SLE患者均比正常对照（1．01％～3．62％）显著增高（P〈0．01和P〈0．01）；而CD4^＋CD2^＋Foxp34^-T百分率在初发活动组SLE患者（1．19％～9．23％）显著低于正常对照（2．67％～11．26％）和初发不活动组SLE患者（3．73～8．27％）（P=0．039，P=0．048）；与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞类似，90％左右的CD4^＋CD25一Foxp3^＋T细胞不表达或低表达CD127，其百分率与anti-ds-DNA浓度呈正相关，且尽管未达到统计学意义，但激素和免疫抑制治疗后其水平下降。结论：初发未经治疗的SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞数量和功能无明显异常，而CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞数量增多，与SLE疾病活动相关，可能具有调节功能。     

SLE患者外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的分析

目的分析SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达,以初步阐述其在SLE患者免疫稳态调节中的作用和意义。方法以流式细胞术检测SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达。结果稳定期及活动期SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞比例显著低于健康对照(P<0.05),且活动期SLE患者Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞比例高于稳定期SLE患者(P>0.05)。SLE患者外周血CD3 CD4 T细胞和CD3 CD8 T细胞上GITR表达显著增加(P<0.05);随着疾病活动性增加,CD3 CD4 T细胞上GITR表达降低(P>0.05),CD3 CD8 T细胞上GITR表达增加(P>0.05)。结论SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞表达降低,而患者T细胞亚群上GITR表达增加,其共同作用在诱导SLE患者外周耐受障碍中具有重要意义。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在HDCP外周血中水平变化及其意义

目的:探讨妊娠期高血压疾病患者(HDCP)外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平变化及其意义。方法:选取2013年1月至2014年8月在我院治疗的妊娠期高血压疾病(HDCP)患者46例,其中轻度子痫前期22例,重度子痫前期24例,同时选取同期正常孕妇25例,采用流式细胞术检测各组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。结果:重度子痫前期组CD4+CD25+T细胞比例为(5.01±1.04)%,低于轻度子痫前期组的(7.38±1.26)%和正常孕妇组的(12.59±2.48)%,差异有统计学意义(P0.05);轻度子痫前期组和重度子痫前期组CD4+CD25+Foxp3+T细胞绝对数分别为(0.96±0.11)×107和(0.63±0.12)×107,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T分别为(2.58±0.93)%和(1.84±0.85)%,均低于正常孕妇组的(1.85±0.17)×107和(5.11±0.99)%,差异有统计学意义(P0.05);轻度子痫前期组和重度子痫前期组血清雌三醇分别为(6.16±2.17)mg/L和(3.27±1.15)mg/L,明显低于正常孕妇组的(11.34±2.4)mg/L,差异有统计学意义(P0.05)。结论:妊娠高血压疾病患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞明显减少,同时血清雌三醇也有所降低,这些可能与妊娠期高血压疾病的发病机制以及免疫耐受有关。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞及Foxp3基因在不同淋巴结转移状态的非小细胞肺癌患者中的表达差异

目的:比较CD4+CD25+调节性T细胞及Foxp3基因在不同淋巴结转移状态的非小细胞肺癌患者外周血及肿瘤微环境中的表达差异。方法:46例初诊、初治的非小细胞肺癌患者根据有无淋巴结转移分为两组,采用流式细胞仪检测两组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的比例,Real-time PCR检测Foxp3基因的表达,免疫组化法检测肿瘤微环境中Foxp3的表达情况,ELISA法检测外周血及肿瘤组织匀浆中的TGF-β和IFN-γ水平。结果:Foxp3基因在转移淋巴结中的表达明显强于无转移的淋巴结,有淋巴结转移的非小细胞肺癌患者肿瘤微环境中的Foxp3表达明显强于无淋巴结转移的非小细胞肺癌患者,前者肿瘤组织匀浆中的TGF-β水平也明显高于后者,差异均具有显著性。两组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞比例、Foxp3基因的表达及TGF-β、IFN-γ水平比较无显著性差异。结论:有淋巴结转移的非小细胞肺癌患者肿瘤微环境中存在Foxp3基因表达增强及TGF-β水平增高的现象,提示该类患者存在较为严重的局部肿瘤免疫抑制状态。     

外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与丙型肝炎病毒感染的相关性

CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)可抑制T细胞免疫反应,Foxp3+是Treg的主要转录因子,可调控Treg的生长发育与功能效应.本研究旨在探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染时外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg出现的频率及其与HCV RNA含量的相关性.     

新生儿脐带血CD4+CD25high调节性T细胞Foxp3的表达

目的:检测新生儿脐带血CD4 CD25high调节性T细胞(Treg)数量及胞内转录因子Foxp3的表达,探讨Treg细胞在新生儿期的表达特点.方法:采集新生儿脐带血(n=15)和成人外周血(n=12),密度梯度离心法获取单个核细胞用荧光标记单克隆抗体(mAb)作表面和胞内染色后,在流式细胞仪上检测CD4 CD25highTreg细胞的数量及其胞内转录因子Foxp3的表达.结果:脐带血Treg细胞占CD3 CD4 T细胞的比例(3.86%±1.63%)明显高于成人外周血(0.87%±0.74%,P<0.01);而脐带血Treg细胞中表达Foxp3的比例明显低于外周血Treg细胞(23.21%±8.9%vs71.3%±11.6%,P<0.01).结论:虽然新生儿脐带血CD4 CD25highTreg细胞数量明显高于成人外周血,但Foxp3 细胞数量明显低于成年人,提示在功能上可能尚未成熟.     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞与LSCC发病的相关研究

为研究调节性T细胞在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)、发展中的变化及其参与疾病进展的作用机制,收集2010～2011年上海市五官科医院收治的50例LSCC患者的肿瘤组织和外周血,应用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞及趋化因子受体CCR6的表达变化,Real-time PCR法检测转录因子Foxp3以及细胞因子mRNA的表达量。结果发现:LSCC患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分比较正常人显著增加,并与临床分期相关;CD4+CD25+CCR6+Treg Foxp3的表达,以及肿瘤组织Foxp3mRNA的表达皆明显高于对照组,且与临床分期、淋巴结转移相关。同时发现,LSCC患者外周血中TGF-β和IL-10mRNA的检出水平分别高于对照组,但IFN-γ、IL-2、IL-12mRNA的水平低于对照组。提示此类Foxp3+Treg属于一类诱导性T抑制细胞(Foxp3+iTreg),可通过产生IL-10和TGF-β抑制LSCC患者的细胞免疫功能。Foxp3的检测可能对判断LSCC的预后有一定价值。     

胃癌患者外周血CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋调节性T细胞的检测及临床意义

目的:研究CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞(Treg)在胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)的比例变化,探讨其在抗肿瘤免疫调节中的作用及临床意义.方法:采用流式细胞术检测37例胃癌患者治疗前后PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞比例,以及 CD4+CD25+及CD4+CD25highT细胞中Foxp3+T细胞的比例,并与30例正常人对照组的上述指标进行比较.结果:胃癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞比例以及CD4+CD25+及CD4+CD25highT细胞中Foxp3阳性表达细胞的水平较正常人对照组明显增高(P＜0.05),治疗后上述指标较治疗前明显减低(P＜0.05), 虽仍高于正常对照组,但差异无显著性(P＞0.05).结论:胃癌患者外周血调节性T细胞比例增高,可能是其免疫功能异常的主要原因之一.     

再生障碍性贫血患者外周血CD4~＋CD25~＋调节性T细胞及Foxp3的变化及临床意义

目的:探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tress)及Foxp3的表达及临床意义.方法:25例AA病人,其中含非重型再障(nSAA)18例、重型再障(SAA)7例,采用四色流式细胞检测技术分析从患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+T细胞、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+T细胞百分比及绝对计数,并进一步分析AA患者PBMC的CD4++CD25+、CD4+CD25low及CD4+CD25highT细胞中Foxp3+T细胞的百分比,同时利用RT-PCR方法检测PBMC中Foxp3mRNA表达水平,并与29例正常对照组的上述指标进行比较.结果:与正常对照组相比,SAA患者及nSAA患者PBMC中CDM+T细胞、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+百分比及绝对计数减低(P<0.05),并且SAA组明显低于nSAA组(P<0.001);从患者CD+CD25+、CD4+CD25low及CD4+CD25highT细胞中Foxp3的表达较正常对照组减低(P<0.05);AA患者PBMC中Foxp3 mRNA表达水平与正常对照组没有明显差别(P>0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞减低可能与从的发病有关,SAA的Treg表达低于nSAA,为其作为从病情变化的判断指标提供进一步的依据.