急性白血病MTS1基因缺失及点突变的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１）突变与恶性血液病间的关系,方法 应用聚合酶链反应－单链查象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分别和ＤＮＡ印迹（ｓｏｕｔｈｅｒｍｂｌｏｔ）方法检测３５例急性白血病患儿ＭＴＳ１基因的改变。结果 急性淋巴细胞白血病（ＡＬ）患儿的ＭＴＳ１基因缺失（包括点突变）为２６％（８／３１）,其中纯合子缺失,Ｂ－ＡＬＬ为１６％（４／２５）,Ｔ－ＡＬＬ为６例中有２例,点突变则两型各占１例。结     

儿童急性白血病p16基因甲基化研究

为探讨ｐ１６基因甲基化与儿童急性白血病（ＡＬ）的发生、发展、预后的关系,采用酶切加ＰＣＲ技术研究３３例初治儿童ＡＬ,１５例复发儿童ＡＬ及３０例对照组ｐ１６基因甲基化情况,并观察ｐ１６基因甲基化与化疗结果的关系。结果３３例初治ＡＬ有３例、１５例复发ＡＬ有６例、３０例对照组中０例存在ｐ１６基因甲基化。可评价疗效的３１例初治ＡＬ中,３例甲基化患者未缓解;２８例非甲基化者中３例获完全缓解,２３例部分缓解,     

儿童急性白血病p16基因的缺失和突变及其意义

目的 探讨Ｐ１６基因缺失、突变在儿童急性白血病发病中的意义。方法 选择白血病初治儿５１例，取其骨髓或外周血标本抽提ＤＮＡ，进行差异聚合酶链反应（Ｄ－ＰＣＲ）和单链构象多态性聚合酶链反应（ＳＳＣＰ－ＰＣＲ）的检测。结果 （１）儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）Ｐ１６基因外显子１、外显了２和外显子３的缺失率分别为３２％（１２／３８）、４４％（１２／４２）。（２）无一例发生基因突变。（３）急性非细胞性白血     

小儿急性白血病P16基因突变的分析

分析小儿急性白血病Ｐ１６基因的突变及其在疾病发生的作用。利用ＰＣＲ扩增Ｐ１５６基因的外显子１、外显子２,并进行缺失突变分析,利用均一变性凝胶电泳（ＣＤＧＥ（对外显子２进行点突变分析。结果显示：小儿急性白血病缺失突变率异常高５７例患者中有１８例发生缺失突变,只有６例发生点突变,总突变率为３１．６％、ＡＬＬ患者Ｐ１６基因的总突变率明显高于ＡＭＬ患者,为６４．７％,而ＡＭＬ患者Ｐ１６基因的总突变率只有８     

小儿急性淋巴细胞白血病p16基因缺失及甲基化的研究

为探讨ｐ１６基因缺失及甲基化在小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）发病中的作用,认识ｐ１６蛋白失活的分子机制。应用差异ＰＣＲ技术检测４２例初治、１７例缓解期小儿ＡＬＬｐ１６基因的纯合缺失及甲基化。结果４２例ＡＬＬ中ｐ１６基因纯合缺失率占３８．１％,Ｔ系ＡＬＬ占８０％,显著高于Ｂ系ＡＬＬ２２．５％,Ｐ〈００１。１７例缓解期ＡＬＬ均无基因缺失。９例ｐ１６基因纯 合缺失是小儿ＡＬＬ,尤其Ｔ系ＡＬＬ最常见的基     

儿童急性白血病p16基因纯合子缺失和点突变的实验研究

为探讨p1 6基因纯合子缺失和点突变与儿童急性白血病 (AL)发生、发展及预后的关系。用聚合酶链反应 (PCR)、DNA单链构象多态性 (SSCP)分析和DNA测序技术研究 5 3例初治和复发儿童AL及 30例对照组p1 6基因纯合子缺失和点突变的情况。结果 :儿童ALp1 6基因纯合子缺失及点突变为 2 8.30 % (1 5 /33例 ) ,对照组未发现缺失及突变。ALL组p1 6基因纯合子缺失为 35 .0 0 % (1 4/4 0例 ) ,其中HR—ALL为 47.0 6 % (8/1 7例 ) ,SR—ALL8.33% (1 /1 2例 ) ,复发ALL为 45 .45 % (5 /1 1例 ) ,未见点突变 ;ANLL组未见纯合子缺失 ,点突变 1例 ,为 7.6 9% (1 /1 3例 ) ,测序分析发现其位于第 2外显子 (exon2A) 49密码子 ,发生错义突变 ,由GCC突变为ACC ,由苏氨酸取代丙氨酸。结果表明 :①p1 6基因失活与儿童AL ,尤其与儿童ALL的发生、发展关系密切。②在儿童ALL中 ,p1 6基因纯合子缺失是基因失活的主要形式 ,点突变罕见。③在儿童ANLL中 ,p1 6基因纯合子缺失、点突变均罕见。④p1 6基因失活可能成为预测儿童AL病程进展、复发、预后的指标之一。     

MSP检测p15基因甲基化在儿童急性白血病微小残留病灶诊断中的价值

对探讨ｐ１５基因甲基化在儿童急性白血病(ＡＬ)微小残留病灶(ＭＲＤ)诊断中的价值,采用甲基化特异性聚合酶链反应(ＭＳＰ)研究４９例初治儿童ＡＬ(包括ＡＬＬ３１例及ＡＭＬ１８例)和２０例对照组的ｐ１５基因甲基化情况。动态观察４例ＡＬＬ及２例ＡＭＬ治疗前后ｐ１５基因甲基化的变化。结果显示,儿童ＡＬ患者ｐ１５基因甲基化阳性率为６７．３%,ＡＬＬ与ＡＭＬ的阳性率(分别为６１．３%和７７．７%),差异无显著性:对照组２０例均阴性。动态观察的６例儿童ＡＬ,初诊时均呈现ｐ１５基因甲基化;完全缓解时,４例仍呈现甲基化,其中３例分别于３个月、５个月、６个月后复发:另一例甲基化转为阴性,未复发:ＭＳＰ敏感度可达１０－３。因此,ＭＳＰ检测ｐ１５基因甲基化有助于检测儿童ＡＬ的ＭＲＤ。     

P16抑癌基因与小儿白血病

Ｐ１６基因是新近发现的一种肿瘤抑制基因,位于人类染色体９ｐ２１上,其表达产物Ｐ１６蛋白是细胞周期依赖激酶４抑制剂（ＣＤＫ４Ｉ）。在小儿白血病中,尤以小儿急性淋巴细胞白血病中Ｐ１６基因的纯合子缺失常见,少见杂合缺失、突变和甲基化等。     

P16抑癌基因与小儿白血病

Ｐ１６基因是新近发现的一种肿瘤抑制基因,位于人类染色体９ｐ２１上,其表达产物Ｐ１６细胞周期依赖激酶４抑制剂（ＣＤＫ４１）。在小儿白血病中,尤以小儿急性淋巴细胞白血病中Ｐ１６基因的纯合子缺失常见,少见杂合人、突变和甲基化等。     

甘露糖结合凝集素基因多态性与幼年特发性关节炎的相关性

目的 探讨甘露糖结合凝集素（MBL）基因外显子1多态性与幼年特发性关节炎（JIA）易感性的关系。方法 采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR，RFLP）法分析93例JIA和48名正常健康儿童MBL基因外显子1第54和57位密码子的多态性。结果 1．JIA及健康儿童均未发现有57位密码子突变。2．JIA患儿第54位密码子野生型基因型频率为71．0％（66／93），杂合子型为25.8％（24／93），突变纯合子型为3．2％（3／93）；正常对照儿童野生型75．0％（36／48），杂合子型为25．0％（12／48），未发现突变纯合子基因型；各基因型与JIA组比较无差异（P〉0．05）。结论 MBL基因外显子1多态性与JIA无相关。     

小儿单纯性肥胖脂蛋白脂酶基因的多态性研究

检测分析肥胖儿童脂蛋白脂酶（ＬＰＩ）基因多态及其与脂代谢的关系。结果表明：肥胖组较对照组ＬＰＬ ＰｖｕⅡ酶切点＋／＋基因型频率显著升高（Ｐ〈０．０５）；肥胖组ＰｖｕⅡ＋／＋基因型者较－／－基因型者高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－ｃ）水平显著降低（Ｐ〈０．０５）；ＨｉｎｄⅡ＋／＋基因型者较－／－和＋／－基因型者血ＴＧ、ＴＣ水平显著升高（Ｐ〈０．０５）；有Ｓｅｒ＾４４７－Ｓｔｏｐ突变产无此突变者血低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ｃ）水平显著降低（Ｐ〈０．０５）、ＨＤＬ－ｃ水平显著升高（Ｐ〈０．０５）。提示肥胖儿童脂代谢异常有遗传倾向，ＬＰＬ基因ＰｖｕⅡ＋／＋、ＨｉｎｄⅡ＋／＋、无Ｓｅｒ＾４４７－Ｓｔｏｐ突变基因型肥胖儿童较其它基因型者成人后患冠心病的危险性更大。     

孕妇乙型肝炎病毒感染与新生儿乙型肝炎基因疫苗免疫效果关系的 …

目的 探讨孕妇乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染对新生儿乙型肝炎（简称乙肝）基因疫苗免疫接种效果的影响。方法 采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）法对乙肝基因疫苗免疫效果进行了前瞻性研究。结果 在新生儿系列血清中均未检聘书国型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ和血清学感染标志；对照组和感染组新生儿免疫保护率分别为９３％（２８／３０）和８３％（３９／４７）（ｘ＾２＝１．７４，Ｐ〉０．０５），两组     

判断高阴离子间隙代谢性酸中毒时AG界限值的探讨

对６１例危重患儿同步测定血乳酸和阴离子间隙（ＡＧ）。结果表明，若以ＡＧ≥３０ｍｍｏｌ／Ｌ作为判断高ＡＧ代谢性酸中毒（代酸）的界限值，则有５８例（９５．０９％）乳酸增高的代谢漏诊，若以界限定于超过２０ｍｍｏｌ／Ｌ仍有３７例（６０．２６）漏掉。而将〉１６ｍｍｏｌ／Ｌ作为判断高ＡＧ代酸的界限，则ＡＧ与乳酸同步增高的吻合率达７３．７７％，故作者认为，在目前尚无公认的统一的标准之前，将ＡＧ〉１６ｍｍｏｌ／Ｌ     

乙型肝炎疫苗免疫失败儿童S基因变异株研究

目的 探讨乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫失败与Ｓ－基因变异的关系。方法 １０６名乙肝疫苗免疫失败儿童血清为研究标本,从中提取ＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增乙肝病毒（ＨＢＶ）Ｓ区基因片段,Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ转移至尼龙膜,与Ｓ区标准序列探针杂交,选择ＰＣＲ阳性与寡核苷酸探针不杂交的标本作序列分析。结果 免疫失败儿童中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９３．４％（９９／１０６）,９９份样本中有２０份与与探针不杂交,占３０．３％     

急性链球菌感染后肾炎患儿血、尿白介素-8的变化和意义

为探讨急性链球菌感染后肾炎（ＡＰＳＧＮ）患儿血、尿白介素－８（ＩＬ－８）的变化和意义。用ＥＬＳＩＡ方法检测３４例ＡＰＳＧＮ患儿急性期和恢复期及１６例对照组儿童血、尿ＩＬ－８浓度。急性期必肾功能衰竭降低１１例,肾功能正常２３例,结果：ＡＰＳＧＮ患儿急性期尿ＩＬ－８水平（５５．８４ｐｇ／ｍｇ肌酐）较恢复期（３２．５５ｐｇ／ｍｇ肌酐）和对照组（１１．２１ｐｇ／ｍｇ肌酐）显著升高。急性期肾功能降低患儿尿Ｉ     

抗胸腺细胞球蛋白治疗再生障碍性贫血的疗效分析

应用抗胸腺细胞球蛋白（ＡＴＧ）治疗儿童再生障碍性贫血（简称再障）３０例。其中急性再障（ＳＡＡ－Ｉ）１０例，慢性重型再障（ＳＡＡ－ＩＩ）１１例，普通慢性再障（ＣＡＡ）９例。总有效率为５６．７％。３０例中有重型丙障（ＳＡＡ－Ｉ及ＳＡＡ－ＩＩ）共２１例，其中６例缓解，７例明显进步，总有效率为６１．９％。重型再障长期生存率为６８．４％。再障患儿治疗前有关临床资料与ＡＴＧ疗效关系分析提示，疗前外周血网织红细胞绝对计数＞１０×１０￣９／Ｌ及病程较短（＜６个月）者有效率高（Ｐ＜０．０５）。ＡＴＧ疗效与其他因素，如年龄、性别、免疫状态及疗前外周血粒细胞和血小板计数的高低无关。上述资料可以作为儿童再障应用ＡＴＧ治疗的病例选择及疗效预测参考指标。     

脊肌萎缩症临床及基因诊断研究

３０例脊肌萎缩症（ＳＭＡ），其中Ⅰ型１３例，Ⅱ型１７例。临床表现肢体及躯干进行性对称性肌无力及肌萎缩，合并肋间肌麻痹及肌束震颤。血清肌酸磷酸肌酶（ＣＰＫ）４３～２９０ＩＵ／Ｌ。肌电图（ＥＭＧ）特点：静止状态可见纤颤正向电位，轻收缩时运动单位电位时限增宽，重收缩时为单纯相。肌活检可见萎缩肌纤维及正常肌纤维相间分布，周边可见肥大肌纤维，Ⅰ型病例可见成群或成束状萎缩肌纤维。单链构象多态性（ＳＳＣＰ）检测患儿和父母及无亲缘关系的正常人运动神经元存活基因（ＳＭＮ）外显子７缺失。结果：３０例ＳＭＡ中纯合缺失Ⅰ型１１例，Ⅱ型１３例，总缺失率为８０％。患儿父母及正常人共６８例，其中１例患儿母亲为纯合缺失，其余均无纯合缺失。     

增强化学发光酶免疫法测定血清促甲状腺激素方法的建立及初步应用

目的进一步提高血清促甲状腺激素（ＴＳＨ）检测的敏感性。方法通过正交试验,并经方差分析,获得增强发光酶免疫检测法的最佳实验条件,将其与ＴＳＨ酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）试剂盒相结合,建立ＴＳＨ的增强化学发光酶免疫检测法,并用此方法对５９例健康儿童和４９例甲状腺疾病患儿进行了血清ＴＳＨ的检测。结果该方法检测人血清ＴＳＨ的灵敏度为０．０１ｍＩＵ／Ｌ。５９例健康儿童ＴＳＨ的９０％正常值范围为０．７４～８．５３ｍＩＵ／Ｌ;１７例甲状腺功能亢进患儿ＴＳＨ值范围为０．０２～０．４０ｍＩＵ／Ｌ,无一例与正常值重叠;１６例甲状腺功能正常的弥漫性甲状腺肿患儿ＴＳＨ值均在正常范围上限;１６例甲状腺功能低下患儿的ＴＳＨ值均大于３０ｍＩＵ／Ｌ。结论该方法与ＲＩＡ、ＥＬＩＳＡ比较,有良好的相关性,可基本分清甲状腺功能亢进、低下、正常三种状态,适于临床甲状腺功能的评估。     

p16抑癌基因与急性淋巴细胞白血病

ｐ１６抑癌基因的失活与急性淋巴细胞白血病的发生发展十分密切。ｐ１６抑癌基因的纯合缺失及半合缺失在ＡＬＬ,尤其是Ｔ细胞型ＡＬＬ中占有相当比例,Ｐ１６蛋白表达缺失较基因缺失更常见。Ｐ１６基因缺失可能与ＡＬＬ的复发和死亡有关。通过转基因诱导ｐ１６表达是ＡＬＬ的治疗方向之一。     

婴儿急性白血病HRX基因重排及其意义

为探讨婴儿急性白血病细胞遗传学和分子生物学特征，采用ｈｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ（ＤＮＡ印迹）方法，用Ｒ／Ｓ４探针作分子杂交，在１２例＜２４个月的婴儿急性白血病（ＩＡＬ）中检测出７例有ＨＲＸ（同源于果蝇三胸基因）基因的重排，染色体１１ｑ２３上几乎所有的断裂点都集中在ＨＲＸ基因上一个狭窄的区域内。＜１８个月的７例ＩＡＬ中，有５例异常。结果提示，这种ＩＡＬ肿瘤细胞负荷大，预后差。