水飞蓟宾对抗大鼠酒精性脂肪肝改善肝功能的作用

背景：水飞蓟宾（素）可产生抗自由基活性、抗脂质过氧化、抗脂氧酶、抗还原性谷胱甘肽排空、抗肿瘤以及降血脂等广泛的药理效应。在临床上。水飞蓟宾也常用于酒精性肝病的治疗。目的：探讨水飞蓟宾对大鼠酒精性脂肪肝作用的药理学机制。设计：随机对照实验。单位：广州市中医医院。材料：实验于2003—08／10在广东省药物研究所无特殊病原菌级动物实验室完成，选用无特殊病原菌级SD大鼠57只，雌雄各半，体质量（150&;#177;10）g。益肝灵片主要成份为水飞蓟宾，38．5mg／片，湖南省株洲市制药三厂生产。方法：在57只SD大鼠中随机选出18只作为正常对照组。给予生理盐水灌胃，饮用蒸馏水代替乙醇，普通饲料喂养10周。其余大鼠自由饮用100mL／L乙醇，加高脂高热量饲料喂养6周，构建大鼠酒精性脂肪肝模型，经相关指标检测确定模型成立。将剩余大鼠随机分成模型对照组18只和水飞蓟宾组21只。模型对照组给予蒸馏水灌胃，水飞蓟宾组给予水飞蓟宾100mg／kg。同时继续给予100mL／L乙醇和高营养饲料，4周后在麻醉状态下处死大鼠，取大鼠肝块进行病理观察，测定三酰甘油、超氧化物歧化酶、还原性谷胱甘肽和丙二醛水平。主要观察指标：大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶活性和三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、高密度脂蛋白-胆固醇、大鼠肿瘤坏死因子α、大鼠转化生长因子β1的含量。结果：57只无特殊病原菌级SD大鼠全部纳入结果分析。水飞蓟宾能够抑制病鼠血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶活性（2550．5&;#177;400．1），（533．4&;#177;100．0），（2217．1&;#177;750．2）nkat／L，与模型组比较（3600．7&;#177;666．8），（800．2&;#177;100．05，（2900．6&;#177;1333．6）nkat／L，差异有显著性意义（P〈0．05—0．01）；水飞蓟宾组三酰甘油、低密度脂蛋白-胆固醇、大鼠肿瘤坏死因子α和大鼠转化生长因子β1含量（1．8&;#177;0．8），（0．17&;#177;O．04）。（6.66&;#177;1．38）。（24．1&;#177;4．1）mmol／L明显低于模型组（2．8&;#177;1．4）。（0．20&;#177;0．05），（7．81&;#177;1．06），（28．8&;#177;6．3）mmol／L，两组比较差异有显著性（P〈0．05～0．01）；水飞蓟宾能够提高高密度脂蛋白-胆固醇含量；降低肝匀浆三酰甘油和丙二醛含量（P〈0．05-0．01），增强超氧化物歧化酶活性以及改善肝细胞水变性和脂肪变性（P〈0．01），但对还原型谷胱甘肽的含量则未见明显改变（P〉0．05）。结论：水飞蓟素阻止大鼠酒精性脂肪肝形成，其作用机制包括抗氧化、清除自由基代谢产物，抑制脂质过氧化反应，调血脂、减少脂肪在肝脏的沉积，抗免疫性炎症和抗增殖。     

非酒精性脂肪肝模型的建立与逆转状况

目的:探讨非酒精性脂肪肝的发病机制、观察脂肪肝的逆转状况,评价脂肪肝转归的影响因素,筛选有效的防治措施。方法:实验于2004-03/08在福建省厦门市医药研究所药物中心实验室和检验医学实验室共同完成。选择雄性SD大鼠84只,随机分2组,正常对照组24只,饲基础饲料;模型组60只,饲高脂饲料。制备成功的高脂血症性脂肪肝大鼠60只分4组,脂肪肝模型组10只,平脂冲剂抗脂肪肝治疗组18只:改饲基础饲料,同时平脂冲剂18g/kg灌胃,1次/d。东宝肝泰抗脂肪肝治疗组16只:改饲基础饲料,同时东宝肝泰冲剂0.225g/kg灌胃,1次/d。自然恢复组16只:改饲基础饲料,不喂药。第6周末,取血及肝脏组织检测。检验血脂和肝功能;观察肝组织病理变化和肝脏脂肪的多项生化指标。结果:纳入动物84只,血浆检验79只进入结果分析,肝组织脂质和病理检验69只进入结果分析。因死亡和检验误差部分脱落。与正常对照组比较,7周后模型组的大鼠肝脏细胞发生脂肪变性。①大鼠血脂和肝功能指标:三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、丙氨酸氨基转移酶、天门冬酸氨基转移酶、r-谷氨酰转肽酶有不同程度增高(P<0.01),其中三酰甘油含量明显升高正常对照组、脂肪肝模型组、抗脂肪肝治疗组、自然恢复组分别为(1.22±0.89),(2.56±0.97),(1.39±0.88),(1.92±1.03)mmol/L,P<0.001。②大鼠肝脂肪变性与肝脏脂质指标:肝细胞中的胞浆内出现脂滴,肝脂肪变性为 ～。抗脂肪肝治疗和自然恢复后,血脂和肝功能均有不同程度的改善,抗脂肪肝治疗组变化显著(P<0.001)。肝组织脂质和病理也有不同程度逆转康复。结论:高脂饮食饲养大鼠可导致肝细胞的脂肪变性,为理想的脂肪肝动物模型,具备人类脂肪肝特征,多数单纯性脂肪肝如能早期诊治,可以阻止脂肪肝的进一步发展并使其逆转。抗脂肪肝治疗好于自然恢复。     

高脂饮食对大鼠非酒精性脂肪肝中解偶联蛋白2的诱导作用

背景:至今非酒精性脂肪肝的发病机制不十分清楚,而线粒体膜上的解偶联蛋白可使线粒体氧化磷酸化解偶联,导致线粒体合成ATP效率降低,通过能量代谢的改变,参与脂肪肝的发生。目的:观察解偶联蛋白2在大鼠非酒精性脂肪肝动物模型各时相点的表达规律。设计:随机对照动物实验。单位:解放军第三军医大学大平医院野战外科研究所消化科。材料:实验于2004-11/2005-12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所国家重点实验室进行。取清洁级Wistar成年雄性大鼠64只,普通饲料正常喂养1周后,随机分为模型组和正常对照组2组,每组32只,每组又分饲养2,4,8,12周4个时间点,每个时间点8只。方法:模型组大鼠喂高脂饮食(基础饲料88%、猪油10%、胆固醇2%)饲养12周,正常对照组普通饲料喂养,分笼(每笼6只)饲养。主要观察指标:两组于相应时间点麻醉后采血,处死动物,迅速取出肝脏。①免疫组织化学和Westernblot技术检测肝组织中解偶联蛋白2表达变化。②生化检测大鼠血清三酰甘油、游离脂肪酸和丙氨酸氨基转移酶活性。③检测肝组织丙二醛含量。结果:64只大鼠全部进入结果分析。①血清生化指标:模型组饲养4,8,12周时血清三酰甘油、游离脂肪酸和丙氨酸氨基转移酶水平明显高于正常对照组,以8,12周最显著(P<0.01)。②模型组解偶联蛋白2蛋白表达随脂肪肝程度的加重,其表达逐渐增强,而正常对照组几乎阴性表达。③肝组织丙二醛含量:模型组饲养4,8,12周明显高于正常对照组,以8,12周最显著[(4.07±0.15),(4.93±0.14),(5.20±0.20)μmol/g;(3.14±0.20),(3.12±0.18),(3.13±0.16)μmol/g,P<0.01]。结论:随着非酒精性脂肪的形成和程度加重,血清三酰甘油、游离脂肪酸和丙氨酸氨基转移酶及肝组织丙二醛含量增加,解偶联蛋白2表达也逐渐增强,提示高脂饮食可诱导肝细胞表达解偶联蛋白2,使细胞内ATP生成减少,促进脂肪肝的形成和发展。     

罗格列酮对高脂血症大鼠拮抗胰岛素抵抗及脂肪性肝损伤作用

背景:有实验表明在胰岛素缺乏的糖尿病动物应用罗格列酮并未发现明显的增加胰岛素和降血糖作用,说明该药不刺激胰岛素分泌,其改善胰岛素抵抗的作用及对肝、肾脏功能的影响有待研究。目的:观察罗格列酮对高脂血症大鼠胰岛素抵抗是否有改善作用并分析其可能的作用机制。单位:广州市中医医院,广州市中医中药研究所。设计:分层随机对照动物实验。材料:选用64只SD大鼠,鼠龄6-8周,雌雄各半,体质量150-180g,均购自广东省医用实验动物中心;基础饲料:总热量6.9kJ/g(其中蛋白质占23%,碳水化合物占53%,脂肪占5%)。高脂乳液:猪油200g/L,胆固醇200g/L,牛胆盐10g/L,丙二醇200g/L,吐温-80200g/L,总热量15.5kJ/g。高脂肪-高糖-高热量饲料:基础饲料加100g/L葡萄糖、200g/L猪油和100g/L蛋黄粉充分混匀后,制成饼块,烘干后用,总热量21.3kJ/g(其中蛋白质占15%,碳水化合物占51%,脂肪占30%);罗格列酮片:葛兰素史克(天津)有限公司生产(5mg/tab,批号:02110012);格列齐特片:法国施维雅药厂天津华津制药厂合作生产(100mg/tab,批号:00232)。方法:实验于2003-04/07在广州中医药大学完成。①按性别、体质量随机抽取16只大鼠作为空白对照组,喂饲普通饲料,共6周。其余大鼠按照参照文献方法灌服高脂乳液,取空腹血糖≥6.1mmol/L或2h血糖≥7.8mmol/L的大鼠,按体质量和血糖值将大鼠分成3组:模型组、罗格列酮组和格列齐特组,每组16只。空白对照组大鼠不给予处理。罗格列酮组及格列齐特组大鼠分别灌胃给予罗格列酮(5mg/kg)及格列齐特(100mg/kg),模型组灌胃蒸馏水,同时分别继续喂饲高脂饲料,1次/d,共28d,第21天开始同时灌服高脂乳液,1次/d,共7d,末次给药后,禁食18h,第29天采用血糖仪检测各组大鼠空腹血糖,按体质量分别灌胃2.78mol/10mL·kg葡萄糖溶液或葡萄糖-药物混合液10mL/kg,2h后测2h血糖。②全部大鼠眼眶放血并分离血清,分别测定空腹血清血糖、胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清尿素氮、肌酐、肿瘤坏死因子α及胰岛素含量,同时按李光伟方法计算胰岛素敏感指数:胰岛素敏感指数=In[1/(空腹胰岛素浓度×空腹血糖浓度)]。处死大鼠,制肝匀浆,测肝三酰甘油,超氧化物歧化酶,还原型谷胱甘肽和丙二醛水平。主要观察指标:①大鼠空腹血糖及2h血糖检测结果。②大鼠血清大鼠血糖、血脂、肿瘤坏死因子α、胰岛素含量及胰岛素敏感指数检测结果。③大鼠肝细胞三酰甘油含量、还原型谷胱甘肽贮量、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量检测结果。④大鼠血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶,血清尿素氮及肌酐检测结果。结果:①大鼠空腹血糖及2h血糖检测结果:罗格列酮组大鼠空腹血糖及2h血糖分别为(3.2±0.3),(6.3±1.2),mmol/L,低于模型对照组[(3.8±0.5),(8.1±2.1)mmol/L,P<0.01]。格列齐特组大鼠空腹血糖为(3.3±0.7)mmol/L,低于模型对照组。②大鼠血清血糖、血脂、肿瘤坏死因子α、胰岛素含量及胰岛素敏感指数检测结果:罗格列酮组大鼠空腹血糖、肿瘤坏死因子α及空腹胰岛素浓度分别为(4.2±1.2)mmol/L,(246±45)μg/L,(133±45)pmol/L,低于模型对照组[(6.6±1.5)mmol/L,(294±65)μg/L,(264±76)pmol/L,P<0.05-0.01],胰岛素敏感指数高于模型对照组(-6.33±0.46,-7.46±0.95,P<0.01)。格列齐特组大鼠空腹血糖及肿瘤坏死因子α浓度分别为(4.1±1.1)mmol/L,(251±62)μg/L,低于模型对照组(P<0.05-0.01)。③大鼠肝细胞三酰甘油含量、还原型谷胱甘肽贮量、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量检测结果:罗格列酮组大鼠肝细胞三酰甘油、丙二醛含量分别为(1.00±0.38),(40±17)mmol/g,低于模型对照组[(2.40±0.60),(171±63)mmol/g,P<0.01],还原型谷胱甘肽贮量、超氧化物歧化酶活性分别为(51±14)mg/g,(583.45±50.01)nkat/g,高于模型对照组[(2.40±0.60)mg/g,(450.09±66.68)nkat/g,P<0.05-0.01]。格列齐特组大鼠肝细胞三酰甘油、丙二醛含量分别为(1.20±0.38),(100±30)mmol/g,低于模型对照组,还原型谷胱甘肽贮量(46±15)mg/g,高于模型对照组。④大鼠血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶,血清尿素氮及肌酐检测结果:罗格列酮组大鼠血清尿素氮,肌酐含量分别为(14.3±3.8)mmol/L,(33±9)μmol/L,低于模型对照组[(19.2±5.6)mmol/L,(45±13)μmol/L,P<0.05]。结论:罗格列酮和格列齐特均能改善高脂饲养引发的胰岛素抵抗,罗格列酮在降低高脂病鼠高胰岛水平、降低血清尿素氮及肌酐含量、提高还原型谷胱甘肽贮量作用和增强超氧化物歧化酶活性的趋势方面优于格列齐特。     

中等强度游泳运动大鼠非酒精性脂肪性肝病模型血生化指标的变化

目的:观察中等强度游泳运动对大鼠非酒精性脂肪性肝病模型体质量、肝脏质量和血生化指标的影响。方法:实验于2005-03/07在河北省医学科学院实验室进行。取22只雄性SD大鼠单纯随机分为3组:①对照组(n=6):给予普通饮食8周。②模型组(n=8):喂高脂饲料(普通饲料的基础上加10%猪油和2%的胆固醇)8周。③运动组(n=8):喂高脂饲料,并进行中等强度的游泳运动,游泳每周5d,1次/d,90min/次,共8周。8周后测定各组大鼠体质量后处死大鼠,测定肝脏质量(湿),检测血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶、三酰甘油、游离脂肪酸水平,并比较各组肝脏组织切片观察肝细胞脂肪变性程度。结果:21只大鼠进入结果分析。①实验8周后模型组体质量和肝脏质量(湿)显著高于对照组和运动组(P<0.05)。②模型组血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶都显著高于对照组[(912.18±252.71),(419.25±74.34)nkat/L;(3.28±0.78),(2.19±0.33)μkat/L,P<0.05],运动组谷丙转氨酶显著低于模型组[(536.94±186.7)nkat/L,P<0.05]。③模型组和运动组三酰甘油水平都高于对照组[(0.96±0.10),(0.68±0.06),(0.57±0.04)mmol/L,P<0.05],但运动组低于模型组(P<0.05)。④各组大鼠游离脂肪酸水平差异无显著性意义(P>0.05)。⑤模型组肝细胞脂肪变性程度显著重于对照组(P<0.05),运动组显著轻于模型组(P<0.05),但仍然显著比对照组严重(P<0.05)。结论:中等强度的游泳运动能降低非酒精性脂肪性肝病模型大鼠血清谷丙转氨酶活性和三酰甘油水平,减轻肝细胞脂肪变性程度,提示中等强度的游泳能在一定程度上预防高脂饮食造成的非酒精性脂肪性肝病。     

非酒精性脂肪肝模型小鼠的建立

背景:以往非酒精性脂肪肝模型建立的常用诱导方法均有其局限性,因此,有必要建立高质量的非酒精性脂肪肝模型。目的:拟利用复合高脂饮食和低浓度四氯化碳诱导小鼠非酒精性脂肪肝模型。方法:取昆明小鼠随机分为3组:对照组,高脂模型组和高脂模型+四氯化碳组。观察饲养第2,4,6和8周末肝脏形态和病理变化,测定第8周末血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶,胆固醇和三酰甘油,以及肝脏胆固醇和三酰甘油水平。结果与结论:复合高脂饮食+5%四氯化碳腹腔注射的方式造模,第2周末开始出现炎症细胞浸润,第4周末出现少量脂滴,第6周末出现脂肪病变,第8周末在脂肪病变的基础上,部分小鼠出现了肝纤维化,8周末小鼠肝指数、血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶,胆固醇和三酰甘油,肝脏胆固醇和三酰甘油浓度明显升高(P<0.05或P<0.01)。通过8周复合高脂饮食和5%四氯化碳腹腔注射成功建立小鼠非酒精性脂肪肝模型。     

非酒精性脂肪肝模型小鼠的建立

背景：以往非酒精性脂肪肝模型建立的常用诱导方法均有其局限性,因此,有必要建立高质量的非酒精性脂肪肝模型。目的：拟利用复合高脂饮食和低浓度四氯化碳诱导小鼠非酒精性脂肪肝模型。方法：取昆明小鼠随机分为3组：对照组,高脂模型组和高脂模型＋四氯化碳组。观察饲养第2,4,6和8周末肝脏形态和病理变化,测定第8周末血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶,胆固醇和三酰甘油,以及肝脏胆固醇和三酰甘油水平。结果与结论：复合高脂饮食＋5%四氯化碳腹腔注射的方式造模,第2周末开始出现炎症细胞浸润,第4周末出现少量脂滴,第6周末出现脂肪病变,第8周末在脂肪病变的基础上,部分小鼠出现了肝纤维化,8周末小鼠肝指数、血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶,胆固醇和三酰甘油,肝脏胆固醇和三酰甘油浓度明显升高（P〈0.05或P〈0.01）。通过8周复合高脂饮食和5%四氯化碳腹腔注射成功建立小鼠非酒精性脂肪肝模型。     

化痰活血方调脂及保护内皮细胞的作用

目的:观察中药方剂化痰活血方对高脂血症大鼠的调脂作用及含药血清对牛主动脉内皮细胞的保护作用。方法:整体实验于2002-03/2004-02在湖北中医学院中医临床基础学科实验室完成。选取健康Wistar大鼠60只,随机数字表法分为6组,空白组、高脂血症模型组、力平脂组、化痰活血方高、中、低剂量组,每组10只。采用高脂乳剂饲养10d诱导大鼠高脂血症模型,然后加用化痰活血方提取物喂养20d,然后检测大鼠血中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇及一氧化氮水平;在原代培养的牛主动脉内皮细胞中加入化痰活血方提取物喂养的动物血清干预,并用MTT法和WesternBlot杂交技术分别观察化痰活血方含药血清对牛主动脉内皮细胞细胞增殖及内皮型一氧化氮合酶表达的影响。结果:纳入动物60只,均进入结果分析。①化痰活血方高、中、低剂量组均能显著降低高脂血症大鼠血中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平,显著提高高密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇亚组分、一氧化氮水平,与高脂血症模型组比较差异有显著性意义眼总胆固醇分别为(1.73±0.07),(1.74±0.07),穴1.42±0.07雪,穴2.62±0.09雪mmol/L鸦三酰甘油分别为穴1.03±0.08雪,穴0.95±0.06雪,穴1.19±0.12雪,穴4.38±0.34雪mmol/L鸦低密度脂蛋白胆固醇分别为穴0.30±0.05雪,穴0.25±0.04雪,穴0.15±0.03雪,穴0.46±0.04雪mmol/L;高密度脂蛋白胆固醇分别为(0.99±0.06),(1.06±0.05),(0.89±0.10),(0.69±0.04)mmol/L;高密度脂蛋白胆固醇亚组分分别为(0.38±0.07),(0.39±0.05),(0.43±0.06),(0.24±0.05)mmol/L;一氧化氮分别为(16.3±1.39),(14.3±1.02),(15.6±2.47),(15±1.6)μmol/L,P<0.05或P<0.01演。②50,100,150g/L化痰活血方含药血清明显促进牛主动脉内皮细胞细胞增殖和内皮型一氧化氮合酶蛋白表达。结论:化痰活血方对高脂血症大鼠不仅有明显的调脂作用,还可改善血管内皮功能。     

2型糖尿病大鼠大网膜和皮下脂肪组织抵抗素基因的表达

目的:观察实验性2型糖尿病大鼠大网膜与皮下脂肪组织抵抗素基因的表达,探讨抵抗素与胰岛素抵抗的关系。方法:实验于2003-09/2004-06在郑州大学第一附属医院内分泌实验室完成。选择雌性Wistar大鼠30只,随机抽签法分为普通饲料组(8只)和高脂饲料组(22只),高脂饲料组大鼠采用0.1mol/L链脲佐菌素尾静脉注射加高脂喂养的方法建立2型糖尿病模型15只,随机抽取8只作为糖尿病组,普通饲料组为正常对照组。检测两组大鼠的空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感性指数、血清胆固醇及三酰甘油。采用反转录-聚合酶链反应检测两组大鼠大网膜和皮下脂肪组织中抵抗素基因的表达。结果:纳入动物16只,均进入结果分析。①糖尿病组大鼠胰岛素敏感性指数与正常对照组大鼠相比明显降低(分别为-4.89±0.20,-2.63±0.42,P<0.01),空腹血糖、胰岛素、三酰甘油和胆固醇明显升高[空腹血糖分别为(12.89±1.18),(4.86±0.68)mmol/L;胰岛素分别为(10.51±1.93),(3.07±1.15)μU/L;三酰甘油分别为(2.63±0.71),(1.13±0.17)mmol/L;胆固醇分别为(1.73±0.15),(1.25±0.17)mmol/L,P<0.01]。②以A值比表示,糖尿病组大网膜脂肪组织的抵抗素基因表达与正常对照组皮下和大网膜脂肪组织、糖尿病组皮下脂肪组织比较明显升高(分别为0.27±0.03,0.15±0.02,0.15±0.03,0.17±0.02,P<0.01),而后三者间相比差异无显著性(P>0.01)。结论:抵抗素基因在2型糖尿病大鼠大网膜脂肪组织中表达升高,可能是腹型肥胖更易导致胰岛素抵抗的重要原因之一。     

喂饲褐藻酸小鼠血脂水平和抗氧化能力的变化

目的:观察褐藻酸对高脂膳食小鼠血脂水平和抗氧化能力的影响。方法:实验于2004-03/07在中南大学公共卫生学院测试中心完成,选择昆明种小鼠40只,随机分为4组,即对照组、高脂模型组及褐藻酸0.2,0.5mg/g组,每组10只。对照组每日给予普通饲料;高脂模型组每日给予高脂饲料(2%胆固醇、0.4%胆盐、10.0%猪油、87.6%普通饲料);褐藻酸0.2,0.5mg/g组小鼠在每日给予高脂饲料的同时,分别给予褐藻酸0.2,0.5mg/g,喂饲6个月。分别于实验第1周及6个月末,经小鼠眼球采血测定血清三酰甘油、胆固醇、丙二醛含量。结果:纳入40只小鼠,全部进入结果分析,无脱失。①各组小鼠血清三酰甘油、胆固醇含量比较:喂养6个月后褐藻酸0.2,0.5mg/g组血清三酰甘油含量显著低于高脂模型组[(2.135±0.432),(2.059±0.172),(2.461±0.153)mmol/L(q=4.1162,4.5762,P<0.05～0.01)];褐藻酸0.2,0.5mg/g组血清胆固醇含量显著低于高脂模型组[(5.531±0.871,4.871±1.086,6.574±1.027)mmol/L(q=3.9971,4.6831,P<0.05～0.01)]。②各组小鼠血清丙二醛含量比较:喂养6个月后褐藻酸0.2,0.5mg/g组血清丙二醛含量显著低于高脂模型组[(2.325±0.267),(2.013±0.310),(2.571±0.654)μmol/g(q=1.2541,1.0833,P<0.05)]。结论:褐藻酸对高脂膳食致小鼠血脂升高有一定的抑制作用,同时亦有减少脂质过氧化反应的作用。     

黄芪对急性脑损伤后一氧化氮合酶活性的抑制作用

背景黄芪在机体免疫功能调节中具有重要作用,而在对急性颅脑损伤干预中是否具有神经元保护作用,且其发挥作用的途径何在?目的观察黄芪对脑损伤后脑组织一氧化氮合酶活性的影响.设计随机对照的实验.单位兰州军区神经外科研究所.对象实验于2001-09/12在兰州军区神经外科研究所实验室完成.取健康雄性SD大鼠54只,随机分为3组脑损伤组(n=24),黄芪组(n=24),对照组(n=6),损伤组与黄芪组均分为伤后0.5,2,6和24 h4个时间点,每个时间点6只动物.方法脑损伤组和黄芪组制备脑损伤模型,对照组仅开骨窗,不致伤.黄芪组致伤后立即腹腔注射黄芪200 mg/kg,用化学定量法检测大鼠脑损伤后不同时间点脑组织中一氧化氮合酶的活性.主要观察指标各组大鼠脑组织中一氧化氮合酶活性.结果54只大鼠全部进入结果分析.脑损伤组、黄芪组大鼠在伤后0.5 h一氧化氮合酶活性较对照组升高[46.44±13.45)(43.15±12.43),(40.46±12 85)nkat/L,P＜0.05],伤后2 h达高峰[(67.49±22.45),(64.26±19.78)nkat/L,P＜0.01],伤后6 h开始下降[(63.46±24.68),(52.91±21.36)nkat/L,P＜0.01],伤后24 h降至基础水平[(41.23±12.57),(40.92±12.25)nkat/L,P＞0.05].黄芪组在伤后2,6 h一氧化氮合酶活性较损伤组明显降低(P＜0.01,0.05).结论颅脑损伤后,受损脑组织中一氧化氮合酶活性呈节段性升高,黄芪可通过抑制损伤后脑组织中一氧化氮合酶活性,起到保护创伤神经元的作用.     

黄芪干预缺血缺氧性脑损伤幼鼠脑组织一氧化氮及丙二醛含量的变化

背景幼鼠脑缺氧缺血后,脑组织水肿加重,脑组织中一氧化氮及丙二醛水平增高.黄芪具有增强免疫、耐缺氧以及改善心肌缺血再灌注损伤等药理作用.目的观察黄芪对缺血缺氧性脑损伤幼鼠脑组织一氧化氮及丙二醛含量的影响.设计随机对照实验.单位河北医科大学第二医院儿科,河北医科大学中医药研究院内科,河北医科大学病理生理教研室.材料实验于2004-02/04在河北医科大学病理生理学教研室完成.选取新生7 d龄SD大鼠40只,随机分为正常对照组、造模组、黄芪低剂量组、黄芪高剂量组,10只/组.黄芪注射液每10 mL相当于生药20g(由成都地奥九泓制药厂生产,批号0005028,河北医科大学中医药研究院医院提供).方法除正常对照组外,其余各组新生大鼠在清醒局麻状态下,行右侧颈总动脉结扎术建立缺氧缺血性脑损伤幼鼠模型.正常对照组给予生理盐水0.1 mL腹腔内注射;造模组每天腹腔注射质量浓度为9g/L的盐水0.1 mL;黄芪低剂量组与黄芪高剂量组每天分别腹腔注射黄芪注射液0.1,0.5 mL/次.各组于注射后即刻、第2,4天测头部血流量后断头取脑,进行脑组织含水量、一氧化氮及丙二醛含量的测定.主要观察指标[1]各组脑组织含水量.[2]各组头部血流量、一氧化氮及丙二醛含量测定结果.结果实验纳入40只大鼠全部进入结果分析.[1]各组脑组织含水量与正常对照组比较,造模组在造模即刻明显增加[(87.316±0.275),(88.259±0.297)%,P＜0.05],第2天仍未恢复正常水平[(86.973±0.265),(88.173±0.445)%,P＜0.05];与造模组比较,黄芪高剂量组第2天明显降低[(88.173±0.445),(86.542±0.141)%,P＜0.05].[2]各组头部血流量测定结果与正常对照组比较,造模组在造模即刻明显降低[(231.88±13.33),(139.54±10.58)mV,P＜0.05],至第4天仍未恢复正常水平[(234.57±14.38),(145.38±13.33)mV,P＜0.05];与造模组第4天比较,黄芪低、高剂量组均明显增加[(145.38±13.33),(288.45±12.89),(313.82±21.74)mV,P＜0.01].[3]各组头部一氧化氮及丙二醛含量测定结果造模组在造模即刻均明显高于正常对照组[(26.55±5.23),(19.67±7.17)μmol/L,P＜0.05;(7.88±2.55),(4.22±0.12)μmol/L,P＜0.01],第4天均显著高于正常对照组[(48.65±17.06),(18.65±2.12)μmol/L,P＜0.01;(5.29±0.68),(4.06±0.39)μmol/L,P＜0.05];与造模组比较,黄芪低、高剂量组第4天均明显降低[(48.65±17.06),(23.77±12.79),(24.67±11.54)μmol/L,P＜0.01;(5.29±0.68),(4.51±2.30),(3.68±0.39)μmol/L,P＜0.01].结论黄芪可明显消除缺氧缺血性幼鼠脑组织水肿,增加其脑组织血流量.通过降低一氧化氮及减少自由基损伤代谢产物丙二醛的含量,从而发挥抑制脂质过氧化损伤的作用.     

黄芩茎叶总黄酮对大鼠实验性高脂血症的预防作用

背景黄芩是一味常用中药,传统药用其根,茎叶一0是被废弃,为充分利用黄芩茎叶资源,本研究所对黄芩茎叶的药理药化进行了系统研究. 目的探讨黄芩茎叶的主要药效部位总黄酮对大鼠实验性高脂血症的预防作用. 设计随机对照实验. 单位承德医学院中药研究所. 对象实验于1999-03/2000-01在承德医学院中药研究所完成.wistar大鼠60只,雄性,初始体质量(200±10)g,由中国医学科学院实验动物繁育场提供,合格证号01-3008. 干预大鼠60只被随机分为6组,每组10只,正常对照组,高脂模型组,总黄酮小、中、大剂量组(剂量分别为12.5,25,50 mg/kg)和氯苯丁酯组(剂量为25 mg/kg).正常对照组饲喂基础饲料,高脂模型组饲喂高脂饲料,总黄酮大、中、小剂量组和氯苯丁酯组,在喂高脂饲料的同时给予相应剂量的药物.连续给药30 d,观察大鼠的血脂变化. 主要观察指标应用CL-7200型全自动生化分析仪,检测大鼠血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇的含量,并计算动脉粥样硬化指数(总胆固醇-高密度脂蛋白/高密度脂蛋白). 结果纳入60只大鼠均进入结果分析.①大鼠血清总胆固醇含量高脂模型组明显高于正常对照组[(5.01±1.05,2.33±0.35)mmol/L,(P＜0.01)];总黄酮小、中、大剂量组分别为(4.15±1.12,3.03±0.31,2.98±0.56)mmol/L,小剂量组与模型组比较差异无显著性(t=1.74,P＞0.05),中、大剂量组与模型组比较差异显著(t=5.66～5.23,P＜0.01).②大鼠血清三酰甘油的含量总黄酮小、中、大剂量组分别为[(1.22±0.56,1.56±0.41,1.24±0.45)mmol/L],与模型组[(2.14±0.74)mmol/L]比较差异显著(t=2.19～3.45,P＜0.05～0.01).③大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇含量总黄酮小、中、大剂量组分别为[(2.67±0.45,1.41±0.23,1.29±0.23)mmol/L],与模型组[(3.94±0.42)mmol/L]比较差异显著(t=5.77～12.71,P＜0.05～0.01].④大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇含量总黄酮小、中、大剂量组分别为[(0.72±0.23,0.91±0 32,1.05±0.23)mmol/L],小剂量组与模型组[(0.56±0.21)mmol/L]比较差异无显著性(t=1.51,P＞0.05),中、大剂量组与模型组比较差异显著(t=2.92～4.38,P＜0.05～0.01).⑤动脉粥样硬化指数总黄酮小、中、大剂量组分别为(2.96±1.35,2.10±0.97,1.55±0.41),与模型组(4.23±0.65)比较差异显著(t=3.54～9.49,P＜0.01). 结论黄芩茎叶总黄酮对大鼠长期喂以高脂饲料所造成的血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇的升高有明显的抑制作用,并使高密度脂蛋白胆固醇的含量有一定程度的升高,表明总黄酮对大鼠实验性高脂血症有明显的预防作用.     

甘草配伍芜花对大鼠心肝肾功能及病理形态的影响

目的探讨中药十八反中甘草与芫花同用对大鼠心、肝、肾功能及病理形态的影响.方法取单味甘草及单味药芫花各100 g,分别加水200 mL煎煮浓缩药液至50 mL,配伍组将甘草及芫花各100 g加水400 mL,煎煮浓缩药液至50 mL.20只大鼠按随机抽签法分成甘草组、芫花组、甘草加芫花组及对照组4组,每组各5只大鼠,采用灌胃法,药物剂量按0.02 mL/g大鼠计算,每日灌胃1次,连续7 d;对照组灌服生理盐水.观察大鼠心、肝、肾功能及病理形态的变化.结果甘草组及对照组的心、肝、肾功能均无明显变化;单味芫花可致大鼠肝功中谷丙转氨酶(alaninetransaminase,ALT)升高[(1 493.13±150.20)nkat/L],与对照组、甘草组[(687.30±67.01),(723.64±71.01)nkat/L]比较,t=10.96,10.36,P＜0.05;心肌酶谱中肌酸激酶升高,与对照组、甘草组比较,t=9.70,9.76,P＜0.05;乳酸脱氢酶(1actic dehydrogenase,LDH),γ-羟丁酸脱氢酶(γ-hydroxybutyric dehydrogenase,γ-HBD)升高,与对照组、甘草组比较,t=11.34～12.82,P＜0.05;配伍甘草后以上指标升高更加明显,ALT,肌酸肌酶,LDH,γ-HBD 值与对照组、甘草组及芫花比较,t=13.40～20.55,P＜0.01,t=7.16,12.46,P＜0.05,t=0.79,P＞0.05.心、肝、肾脏组织病理检查显示,心脏间质血管充血、肝血管充血、肝细胞浊肿、肾小球间质充血、肾小管上皮轻度浊肿等.结论单味芜花对动物肝功能及心肌酶谱等指标有一定影响,但配伍甘草后对以上指标的影响有加重的趋势,对大鼠心、肝、肾脏组织病理形态有一定影响,甘草、芫花同用后可能存在着配伍禁忌,对大鼠心、肝、肾脏有一定损害作用.     

抑制血清TNF-α对大鼠脂肪肝的影响的实验研究

目的观察肿瘤坏死因子-α抑制剂己酮可可碱,对乙醇及高脂饮食诱导造模的大鼠脂肪肝形成的影响。方法将24只大鼠分成对照组、造模组和己酮可可碱组（PTX组）三组,造模组、PTX组采用乙醇及高脂饮食诱导进行脂肪肝造模,同时分别给予蒸馏水、己酮可可碱预防治疗12周。治疗后测定各参数及肝脏病理检查。结果PTX组大鼠血清TNF—α、ALT、AST浓度及肝脂的含量、肝病理脂肪化程度均低于造模组（P〈0．05）。结论肿瘤坏死因子-α抑制剂己酮可可碱能有效防治大鼠脂肪肝形成。     

番茄红素对臭氧致大鼠肺氧化损伤的拮抗作用

背景臭氧是一种强氧化剂,在体内引发脂质过氧化反应,损伤机体抗氧化酶类,形成氧化损伤.肺是人体与外界进行气体交换的主要器官,直接与外界相通,最早受到臭氧的攻击而形成氧化损伤.番茄红素是一种重要的类胡罗卜素,具有多种生物学作用,如抗氧化,抗肿瘤,诱导细胞间隙连接通讯等.目的探讨臭氧对大鼠造成的氧化损伤和番茄红素的保护作用.设计随机对照的实验研究.单位哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验中心,黑龙江省疾病控制中心,哈尔滨医科大学附属第一医院检验科.材料实验地点为哈尔滨医科大学公共卫生学院动物室.选用纯种雄性SD大鼠40只,由哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心提供.干预分为正常对照组、臭氧损伤模型组、番茄红素低剂量组(10 mg/kg)和番茄红素高剂量组(20 mg/kg).除对照组外,其余各组大鼠吸入臭氧染毒,番茄红素组给予番茄红素,模型组和对照组不给番茄红素,3周后处死,取血清和肺组织并制备匀浆.主要观察指标血清和肺匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxiduse,GSH-Px)活力及丙二醛含量.结果臭氧能够明显影响大鼠抗氧化酶活性,降低SOD活性血清[(4 645.60±891.85)μkat/L,肺(566.28±164.70)nkat/g],GSH-Px活力[血清(1 921.38±336.23)μkat/L,肺(399.25±157.86)nkat/g],升高丙二醛含量[血清(10.21±2.86)μmol/L,肺(3.88±0.79)nmol/g].给予番茄红素后可使大鼠SOD活性升高[血清(6 014.20±1 152.40)μkat/L,(6 489.96±1 107.72)nkat/g,肺(814.66±208.88)nkat/g,(934.19±236.38)nkat/g],GSH-Px活力上升[血清(2 853.07±493.77)μkat/L,(2 898.41±397.58)μkat/L,肺(560.28±110.52)nkat/g,(583.95±116.86)nkat/g,丙二醛含量降低[血清(6.48±2.24)μmol/L,(6.29±1.68)μmol/L,肺(2.03±0.51)nmol/g,(1.87 ±0.48)nmol/g,与模型组相比,差异有显著性意义(P＜0 05).结论吸入臭氧能够造成机体氧化损伤,番茄红素可以拮抗臭氧造成的氧化损伤.     

参麻益智胶囊对血管性痴呆大鼠体内过氧化状态的影响

背景血管性痴呆的发生和发展与氧自由基代谢的异常关系密切,在痴呆病的药效学实验中常以氧自由基的代谢作为主要指标.目的建立多发性脑梗死动物模型,测定大鼠血液与脑组织内的脂质过氧化物含量、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性,从而分析参麻益智胶囊对血管性痴呆大鼠体内过氧化状态的影响.设计随机对照单一样本实验.单位辽宁省基础医学研究所药理研究室.材料实验于1997-07/1998-11在辽宁省基础医学研究所药理研究室完成.选取健康Wistar大鼠96只,随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、阳性药对照组、参麻益智胶囊高剂量组、参麻益智胶囊中剂量组、参麻益智胶囊低剂量组,16只/组.参麻益智胶囊由人参、天麻等中药总提取物组成,每克药粉含生药2.7 g,由中国中医研究院西苑医院提供.方法除正常对照组外,其余各组均建立多发性脑梗死动物模型.正常对照组及模型对照组均灌胃给予生理盐水0.5 mL;参麻益智胶囊高、中、低剂量组分别灌胃给药3.2,1.6,0.8g/kg;阳性药对照组灌胃给予双氢麦角碱1 mg/Kg.各组于栓塞后1周开始给药,1次/d,连续6周.脂质过氧化物含量按荧光法测定,超氧化物歧化酶活性应用邻苯三酚自氧化法测定,谷胱甘肽过氧化物酶活性按Hafenam方法测定.主要观察指标各组大鼠血浆与脑组织中脂质过氧化物含量、谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性的测定.结果实验纳入96只大鼠全部进入结果分析.①各组大鼠血浆中各项生化指标测定结果脂质过氧化物含量模型对照组及阳性药对照组明显高于正常对照组[(16.0±1.6),(16.0±1.7),(13.4±1.0)μmol/L,t=4.20～10.58,P均＜0.01],参麻益智高、中、低剂量组显著高于模型对照组[(13.1±1.5),(13.3±0.8),(13.9±1.0),(16.0±1.6)μmol/L,t=4.39～11.69,P均＜0.01];与正常对照组谷胱甘肽过氧化物酶活性比较,模型对照组、参麻益智高、中、低剂量组均明显降低[(5.0±1.6),(3.6±0.8),(3.6±1.1),(3.6±0.8),(3.7±0.9)μmol/(g·s),P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01];与正常对照组超氧化物歧化酶活性比较,阳性药对照组明显升高[(31.7±6.7),(38.4±8.4)μmol/(g·s),t=2.57～3.64,P＜0.05].②各组大鼠脑组织中各项生化指标测定结果脂质过氧化物含量模型对照组、阳性药对照组及参麻益智低剂量组均明显低于正常对照组[(140.0±20.0),(130.0±20.0),(102.0±12.0),(83.0±21.0)μmol/L,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05],参麻益智高、中、低剂量组显著高于模型对照组[(95.0±13.0),(96.0±32.0),(102.0±12.0),(140.0±20.0)μmol/L,t=4.28～11.87,P均＜0.01];与正常对照组谷胱甘肽过氧化物酶活性比较,模型对照组及阳性药对照组均明显降低[(0.5±0.1),(0.3±0.1),(0.4±0.1)μmol/(g·s),P＜0.01,P＜0.05],参麻益智中、低剂量组显著高于模型对照组[(0.5±0.2),(0.5±0.1),(0.3±0.1)μmol/(g·s),t=4.28～11.87,P均＜0.01];与正常对照组超氧化物歧化酶活性比较,模型对照组及阳性药对照组明显降低[(23.4±3.3),(16.7±3.3)(16.7±3.3)μmol/(g·s),t=4.45～10.69,P均＜0.01],与模型对照组比较,参麻益智高、中、低剂量组均显著升高[(16.7±3.3),(23.4±3.3),(21.7±6.7),(21.7±3.3)μmol/(g·s),t=4.28～11.87,P均＜0.01].结论血管性痴呆大鼠超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶抗过氧化活性降低,体内过氧化反应增强.参麻益智胶囊通过提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性而改善过氧化状态,对血管性痴呆具有治疗作用.     

健脾补肾药对脾虚大鼠细胞因子水平的影响

背景健脾补肾中药对实验性脾虚证有较好的防治作用,细胞因子水平的变化是否与药物作用机制有关.目的观察健脾补肾方药对实验性脾虚证大鼠细胞因子的影响,探讨脾虚证与细胞因子的关系及脏腑相关的意义.设计随机对照的实验研究.地点和材料实验地点为广州中医药大学核医学教研室.实验动物为雄性SD大鼠,体质量190～230 g,3月龄,普通级,由中山大学实验动物中心提供(动物合格证号为2001A032).干预将大鼠随机分为正常对照组(n=10)、脾虚模型组(n=12),健脾补肾方高剂量组(n=12)和健脾补肾方低剂量组(n=12),采用大黄复制脾虚证动物模型,分别给予生理盐水、大黄、健脾补肾方煎液(高剂量22 g/kg,低剂量11g/kg)灌胃,测定各组大鼠血清中肿瘤坏死因子(tunmor necrosisfactor,TNF)、白细胞介素6(interleukin6,IL-6)、IL-2水平的变化,以及各组动物造模前后体质量和脾、胸腺、睾丸、肝、肾脏质量的变化.主要观察指标①观察各组动物造模前后体质量和脾、胸腺、睾丸、肝、肾脏质量的变化.②各组大鼠血清中TNF,IL-6和IL-2水平的变化.结果脾虚模型组大鼠血清TNF[(1.06±0.07)μg/L],IL-6(72.41±11.04)ng/L],IL-2[(4.74±0.64)μg/L]含量均比正常对照组显著降低,差异有显著性意义(q=6.55,6.17,6.65;P均＜0.01).健脾补肾方药能明显升高TNF[(1.53±0.27)μg/L],IL-6[(96.64±36.91)ng/L],IL-2[(5.74±0.59)μg/L]含量,与脾虚模型组比较,差异有显著性意义(q=6.55,3.86,4.96;P＜0.05～0.01);并使体质量增加[实验前后分别为(213.25±15.65)和(257.11±11.88)g];脾脏(0.49±0.09)和胸腺(0.16±0.02)质量比值增大.结论脾虚证的发生与细胞因子网络调节系统的失衡有关,而脾肾相关理论有助于指导临床辨证施治.     

甘草大戟同用对大鼠心肝肾功能及病理形态的影响

背景甘草与大戟配伍,属中药"十八反"传统禁忌.在临床实践中,有部分相反、相畏中药使用后并未发现明显毒副作用,甚至部分相反药配伍,有相辅相成的作用,可能提高疗效.目的探讨中药十八反中甘草与大戟同用对大鼠心、肝、肾功能及形态的影响.设计随机对照试验.地点、材料和干预本实验在解放军第三军医大学新桥医院动物室完成.采用Wistar大鼠共20只,雌雄各半.将实验动物分为甘草组、大戟组、甘草加大戟组及对照组4组,每组5只.对照组灌服生理盐水,服药剂量、方法、时间及检测指标等均同实验组.甘草组、大戟组、甘草+大戟组给药均采用灌胃法,药物剂量按0.2 mL/10 g计算,每日灌胃1次,连续灌服7 d.用药7 d后断头取血检测肝功、肾功及心肌酶谱.同时取肝脏、肾脏及心脏组织作病理切片.主要观察指标甘草、大戟同用对大鼠肝功能、心肌酶谱、肾功能的影响.结果甘草+大戟组大鼠血谷丙转氨酶水平[(1465.3±140.0)nkat/L]明显高于对照组、甘草组、大戟组[(625.1±60.0),(723.5±70.0),(1 310.3±131.7)nkat/L](t=47.16～54.99,P＜0.01).甘草+大戟组大鼠血肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶、羟丁酸脱氢酶均较对照组、甘草组及大戟组高(t=55.64～91.85,P＜0.01).各组大鼠血尿素氮、肌酐水平比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论单纯大戟对动物肝功能有一定影响,但配伍甘草后对肝功能影响加重;甘草加大戟对大鼠心功能有明显影响,对肾功则无影响.