肿瘤放免治疗后免疫功能变化及其与预后关系

目的：通过检测26例胃肠道恶性肿瘤患者接受放射免疫治疗（放免治疗）前、后LAK细胞活性及其白细胞介素-2受体（IL-2R）表达和T淋巴细胞亚群改变,以及研究这些变化与疗效的关系。以求揭示放免治疗对机体免疫功能的影响及放免治疗的抗肿瘤机理。方法：LAK活性检测采用MTT法;白细胞介素-2受体（IL-2R）表达应用免疫荧光法检测;用流式细胞仪检查T淋巴细胞亚群改变。结果：放免治疗后2周患者外周血CD3^ 、CD4^ 细胞增多,CD4^ /CD8^ 比值增高,LAK细胞活性增强,IL-2R受体阳性LAK细胞数明显增多,CD8^ 细胞无明显改变;治疗后显效组外周血CD3^ 、CD4^ 细胞、CD4^ /CD8^ 比值、LAK细胞活性及IL-2R受体阳性LAK细胞数明显高于非显效组,而治疗前无明显差异。结论：放免治疗可增强机体免疫功能,放免治疗可通过增强机体免疫功能来达到抗肿瘤效果。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th1和Th2平衡的研究

目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患外周血中CD4^ 和CD8^ T淋巴3细胞分泌细胞因子的情况以及γ干扰素（IFN-γ)和白介素－4（IL－4）的水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法 采用流式细胞术分析SLE患和正常健康人外周血中淋巴细胞内细胞因子（IFNγ、IL－4）和表面抗原（CD4、CD8），用Dot blot法检测IFN－γ和IL－4mRNA的表达。以ELISA法测定血清中IFN－γ和IL－4的水平。结果 与对照组相比，SLE患外周血中1类辅助T细胞（Th1)、Th1/Th2比率、IFN－γmRNA的表达和IFN－γ水平和IFN－γ／IL－4比值均明显降低（P＜0．01），而Th2细胞、Th0细胞和IL－4 mRNA表达的水平及其外周血中IL－4的水平则无明显改变（P＞0．05）。结论 在SLE患外周血中，Th1细胞的数量及其分泌的细胞因子的水平均明显下调，提示Th1/Th2细胞的失衡在SLE发病中有着重要的作用。     

2型糖尿病患者外周血中调节性T细胞的改变

在正常外周血中,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的5%-10%,表面组成性表达CD25（IL-2Rα）,CTLA4（CD152）,GITR和CD62L[1]。这群细胞具有免疫无能性,对于T细胞受体刺激不产生增殖反应;同时具有免疫抑制性,可以抑制CD4＋或CD8＋T细胞的增殖反应,因此这群细胞参与了许多自身免疫性疾病的发生。现有的研究表明在1型糖尿病中CD4^＋CD25^＋T细胞存在数量的减少和功能的减退。     

高温射频消融对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响

目的 研究非小细胞肺癌患者高温射频治疗后机体免疫功能的变化。方法 在CT引导下经皮肺穿刺，用可扩展锚状电极配合RF－2000射频治疗仪高温射频消融治疗非小细胞肺癌患者30例。采用单克隆抗体和流式细胞仪技术及双抗体夹心法，检测治疗前后外周血T细胞亚群（CD3^ 、CD4^ 、CD8^ ）、NK细胞的百分率及SIL－2R的变化；采用免疫粘附酵母菌花环法检测红细胞免疫功能（RBC－C3bRR、RBC-ICR)。同时选择25例体检正常献血者作对照。结果 治疗前非小细胞肺癌患者外周血中CD3^ 、CD4^ 细胞、NK细胞、RBC-C3bRR的百分率及CD4^ ／CD8^ 细胞的比值与对照组相比，差异有显著性意义，而CD8^ 细胞、RBC－ICR的百分率及SIL－2R水平与对照组相比，差异有显著性意义（P＜0．01）。治疗后CD3^ 、CD4^ 细胞、NK细胞、RBC－C3bRR的百分率及CD4^ /CD8^ 细胞的比值与治疗前相比，差异有显著性意义，而CD8^ 细胞、RBC－ICR的百分率及SIL－2R水平，治疗前后比较差异有显著性意义（P＜0．01）。结论 锚状电极高温射频消融具有免疫激活作用，可使机体的免疫功能得到一定程度的改善。     

肝硬化患者血清IL—2，IL—6，IL—8及T细胞亚群检测的临床意义

目的：探讨肝硬化患者血清白细胞介素2（IL－2）,白细胞介素6IIL－6）,白细胞介素8（IL－8）及T细胞亚群变化的意义。方法：应用ELISA法测定肝硬化患者及正常对照组的血清IL－6及IL－8水平含量,应用MTT法检测血清IL－2活性;流式细胞仪检测T细胞亚群水平。结果：肝硬化B级和C级患者IL－2,CD8^ T淋巴细胞,CD4^ /CD8^ 及C级IL－8,CD4^ T淋巴细胞与正常对照组比较差别均有显著性意义（P＜0．01和0．05）,肝硬化B级患者IL－2,IL－6及IL－8高于A级患者,C级患者高于B级患者（P＜0．01和0．05）,结论：肝硬化患者存在着免疫功能紊乱及低,下,肝功能损伤程度可能与血清IL-2,IL-6IL－8增加有关。     

RSV下呼吸道感染患儿辅助性T细胞亚群Th1／Th2及相关因子的研究

目的：探讨辅助性T淋巴细胞Th1/Th2亚群及其相关细胞因子IFN－γ,IL－4在呼吸道合胞病毒（RSV）下呼吸道感染患儿发病机制中的作用。方法：用单克隆抗体双色免疫荧光FITC／PE双标记,流式细胞仪检测30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞（PBMCs)辅助性T淋巴细胞CD4^ 及其Th1亚群CD4^ ,CD45RA^ ,Th2亚群CD4^ ,CD45RO^ 的表达,并用ELISA方法同时检测患儿血清中细胞因子IFN－γ,IL－4水平。同期检测15例年龄,性别无差异的健康婴儿为对照。结果：RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD4^ 明显低于对照组（P＜0．05）,Th1细胞CD4^ CD45RA^ 明显下降（P＜0．05）,Th2细胞CD4^ ,CD45RO^ 虽有下降,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）,Th1/Th2比值与对照组相比明显降低（P＜0．05）,RSV下呼吸道感染组患儿血清中IFN－γ,IL－4水平均有降低,以IFN－γ水平下降最为明显（P＜0．01）,IFN－γ／IL－4比值降低（P＜0．05）,结论：婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为Th1及其功能下降,Th2及其功能对增强,Th1/Th2的失衡是导致该病发生Th2样反应的重要免疫机制。     

卵巢癌患者围手术期细胞免疫功能变化的临床意义

目的：研究手术对卵巢癌患者免疫功能状况的影响及其临床意义。方法：应用间接免疫荧光法，MTT比色法，ELISA检测围手术期卵巢癌患者外周血淋巴细胞（PBL）T淋巴细胞亚群，自然杀伤（NK）活性及血清可溶性白介素2受体（rIL-2R)。结果：卵巢癌患者PBL中CD3^ ,CD4^ ,CD4^ /CD8^ 及NK活性均明显低于良性肿瘤组，而Tac^ ,rIL-2R明显升高；手术后患者T细胞亚群，NK活性无明显改变，但rIL-2R显著减少。结论：卵巢癌患者机体免疫功能存在明显的抑制，手术大块切除肿瘤有利于自身抗瘤活性的恢复，血清rIL-2R水平可反应机体荷瘤的大小。     

脐血和成人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分离及功能特征的比较

目的分离成人外周血、脐血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞,并检测其功能,以了解脐血CD4^＋CD25^＋T细胞的特性。方法应用免疫磁珠分选法从健康成人外周血、脐血淋巴细胞中分离纯化CD4^＋CD25^＋、CD4＋CD25-T细胞。应用流式细胞术检测分离纯度,胎盘蓝染色检测细胞存活率;RT-PCR技术检测CD4^＋CD25^＋、CD4＋CD25-T细胞中Foxp3的mRNA的表达;体外增殖实验检测其对CD4＋CD25-T细胞的免疫抑制作用。结果 MACS分离的CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4＋CD25-T细胞纯度达（92.7±1.6）%、（90.3±1.2）%,细胞存活率达（95.3±2.1）%;体外经抗CD3、CD28单克隆抗体刺激培养的脐血及成人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞同时得到扩增,而且高表达Foxp3;CD4^＋CD25^＋T细胞能有效的抑制效应T细胞的增殖,当效靶比为1︰1时,其抑制效应T细胞的作用最强,成人外周血抑制率为（81.36±1.61）%、脐血抑制率为（90.74±2.43）%。结论脐血和成人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞是一群具有免疫抑制功能的调节性T细胞,与成人外周血相比,培养后的脐血CD4^＋CD25^＋T细胞比成人外周血有更强的免疫抑制功能。     

慢性支气管炎性急性发作期危重病人外周血B和T细胞CD分子的检测

目的 对慢性支气管炎急性期和缓解期患者外周血B细胞和T细胞CD分子检测并了解其变化。方法 用荧光单抗CD19^ 、CD4^ 、CD8^ ／CD28^ 对B细胞和T细胞亚群进行标记和记数。结果 慢性支气管炎急性发作期患者与缓解期患者相比,体内辅助性T淋巴细胞无明显变化,抑制性T淋巴细胞增加,细胞毒性T淋巴细胞减少,B淋巴细胞二者间无差异。结论 因慢性支气管炎急性期危重病人T淋巴细胞亚群变化,造成免疫功能紊乱。因此,在治疗疾病过程中,除对症处理外,另须配合使用提高免疫功能的药物,改善免疫功能。     

射频热化疗对膀胱癌术后机体细胞免疫功能的影响

目的：探讨膀胱癌术后射频热化疗对机体细胞免疫功能的影响。方法：58例膀胱移行细胞癌术后患者随机分为热化疗组（n=30)和化疗组（n=28)。采用红细胞花环直接法及放免法，分别检测患者术后1周及热化疗或单纯化疗后第2周外周血T淋巴细胞亚群分布、血清白细胞介素2（IL－2）、肿瘤坏死因子（TNF）含量。30例健康体检者作为正常对照组。结果：热化疗组和化疗组患者术后外周血CD3^ 、CD4^ T淋巴细胞数、CD4^ /CD8^ 比值、IL－2含量显著低于正常对照组（P＜0．01）。CD8^ T淋巴细胞数、TNF含量与正常对照组相比差异无统计学意义。化疗后第2周，热化疗组CD3^ 、CD4^ T淋巴细胞数，血清IL－2含量显著升高，与正常对照组相比差异无统计学意义（P＞0．05），与化疗组相比，差异有统计学意义（P＜0．01）。热化疗组TNF含量升高，与对照组相比差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：射频热化疗对膀胱癌患者的细胞免疫功能有促进作用。     

胃癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞检测的临床意义

目的：探讨胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性检测的临床意义。方法：采用流式细胞仪测定胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性,以正常人作对照分析。结果：胃癌患者外周血CD3^＋、CD4^＋、NK细胞数量及CD4^＋／CD8^＋比值较正常对照组均明显下降（P〈0．05）,而CD8^＋细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞业群和NK细胞数量的改变与胃癌临床病理分期有关,分期越晚,CD3^＋、CD4^＋及NK细胞数量CD4^＋／CD8^＋细胞比值越低,CD8^＋细胞水平越高;Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间有显著差异（P〈0．05）。结论：检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于胃癌患者的免疫状态监测。     

活动期狼疮肾炎外周血T、B淋巴细胞表面Fas及bcl-2表达的研究

目的：探讨活动期狼疮肾炎（lupus nephritis,LN)患者外周血中T、B淋巴细胞表面Fas及bcl-2表达的变化及其与T、B淋巴细胞凋亡变化的关系，淋巴细胞的凋亡改变对疾病活动度及肾功能的影响。方法：采用流式细胞仪对活动期LN患者外周血中T、B淋巴细胞表面Fas及bcl-2进行检测，同时测定T、B淋巴细胞的凋亡状态，分析其与LN肾功能变化，抗dsDNA疾病活动指标变化的相关性。结果：B淋巴细胞，CD8^ T细胞表面bcl-2表达明显高于正常对照组（P均＜0．01），CD4^ T细胞表面bcl-2表达降低（P＜0．05）。CD4^ ,CD8^ T细胞表面Fas表达高于正常对照组（P均＜0．05），B淋巴细胞表面Fas表达降低（P＜0．01）；B淋巴细胞凋亡百分率明显下降（P＜0．01），CD4^ T细胞百分率下降（P＜0．01），CD8^ T细胞百分率增加（P＜0．05）；LN肾功能的变化，体内抗dsDNA的增加与B淋巴细胞凋亡的减少，CD4^ T细胞的减少，CD8^ T细胞的增加均具有明显的相关性。结论：LN患者体内淋巴细胞凋亡的异常变化与淋巴细胞表面凋亡基因的异常表达相关，且在LN发生发展过程中具有重要作用。     

恶性肿瘤患者外周血中IL-2、IL-2R的表达以及CD_3、CD_4、CD_8、NK细胞活性的变化观察

目的 :观察恶性肿瘤患者外周血中IL - 2、IL - 2R的表达以及CD3、CD4 、CD8和NK细胞的活性变化 ,探讨IL - 2、IL - 2R以及CD3、CD4 、CD8和NK细胞的活性变化在恶性肿瘤发病机理、疾病转归、预后判断方面的意义。方法 :采用FLISA法检测恶性肿瘤患者外周血IL - 2、IL - 2R的含量 :采用S -P(链亲和素 -过氧化物酶 )一步法测定恶性肿瘤患者外周血中CD3、CD4 、CD8和NK细胞的活性。结果 :恶性肿瘤患者血清中sIL - 2含量是 141.5 6± 77.87pg/ml,sIL - 2R含量 15 9.81± 5 3 .96 pmol/ml,与对照相比 ,sIL - 2含量明显下降 (P <0 .0 1) ,sIL - 2R明显升高 (P <0 .0 1) ;CD3、CD4 、NK细胞与对照组相比活性降低 (P <0 .0 1) ,CD8与对照组相比活性无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论 :上述实验结果说明恶性肿瘤患者免疫功能低下 ,尤其是T细胞免疫功能低下与紊乱 ,表现在Th细胞分泌IL - 2的能力减少 ,存在于细胞表面的膜受体 (mIL - 2R)或游离的可溶性受体 (sIL - 2R)表达与释放增多 ,NK细胞的活性降低 ,CD3、CD4 细胞减少 ,CD8细胞数增多。该研究在探讨恶性肿瘤的发病机理、临床治疗和预后判断方面有重要意义     

特发性血小板减少性紫癜T淋巴细胞功能异常的研究

目的 研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者T淋巴细胞功能变化，探讨T细胞在ITP发病机制中的作用。方法 采用FACS分析CD3^ T细胞表面CD28的表达；ELISA法检测血清IL-2水平。结果 ITP患者CD3^ T细胞表面CD28的表达率和血清IL-2水平均显著高于正常对照组，两者呈正相关。结论 ITP患者T淋巴细胞异常活化，细胞因子分泌失调，破坏自身免疫耐受。     

乌贼墨对小鼠T细胞亚群和T细胞活化的影响

目的：研究乌贼墨对小鼠T细胞亚群和T细胞活化的影响。方法：实验组小鼠每天灌胃5%的乌贼墨0.5ml,连续7d。对照组小鼠给予等量生理盐水。流式细胞术检测小鼠外周血CD4^＋T细胞百分比、CD4^＋/CD8^＋比值及IL-2αR（CD25）表达。结果：实验组小鼠外周血CD4^＋T细胞百分比、CD4^＋/CD8^＋比值及IL-2αR（CD25）表达较对照组小鼠均有明显升高,而CD8^＋T细胞却无显著性变化。结论：乌贼墨通过增高CD4^＋T细胞百分比、CD4^＋/CD8^＋比值及IL-2αR（CD25）表达对小鼠免疫功能进行调节。     

脑囊虫患儿细胞免疫功能观察

目的：探讨脑囊虫患儿细胞免疫功能。方法：T淋巴细胞亚群测定采用APAAP法,血清IL－2、sIL-2R测定采用ELISA法,IL－6和IL－8测定采用双抗体夹心ELISA法。结果：与对照组比较,脑囊虫患儿CD3^ 、CD4^ 和CD4^ /CD8^ 比值及血清IL－2水平明显降低（P＜0．01）;sIL-2R、IL－6和IL－8水平明显升高（P＜0．01）。结论：脑囊虫患儿细胞免疫功能低下和紊乱,细胞免疫功能测定可为患儿免疫疗法的应用提供可靠依据。     

益寿饮颗粒对衰老动物模型免疫功能的影响

目的探讨益寿饮颗粒剂对衰老动物模型免疫功能的影响。方法模型大、小鼠各60只，按20只分组，分为生理盐水对照组、益寿饮小剂量组和益寿饮大剂量组。各组连续灌胃30d，停药后小鼠摘取眼球取肝素抗凝静脉血，大鼠自尾静脉取血，测IL-1α，IL-2，IL-6，RBC—C3bRR，RBC-ICR以及外周血T淋巴细胞亚群。结果大、小剂量组与对照组比较，IL-1α，IL-2，IL-6水平明显升高，RBC—C3bRR结合率明显升高，RBC—ICR结合率明显下降，CD3^＋，CD4^＋淋巴细胞的比值明显升高，CD8^＋淋巴细胞的比值明显降低，各项指标均具有统计学意义。结论益寿饮颗粒提高衰老动物模型T淋巴细胞增殖和产生白介素-1（IL—1）、白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）的能力，增强红细胞膜RBC—C3bRR活性及粘附IC的能力，影响外周血T淋巴细胞亚群分类的水平，影响外周血T淋巴细胞亚群的数量、活性及亚群细胞之间的比例，调节T细胞的免疫功能，改善机体免疫调节功能。     

特发性肺纤维化患者IL-6水平与T细胞功能的检测

采用生物活性检测法，观察特发性肺纤维化（IPF）患者外周血单个核细胞（PBMC）自泌白细胞介素6（IL－6）水平及白细胞分化抗原3（CD3）单克隆抗体（McAb）诱导下的T细胞功能。结果表明：IPF患者IL－6自泌水平明显高于正常对照组（P＜0．001）；在体外CD3McAb诱导下，IPF患者T细胞对抗原免疫应答能力与T细胞在体内的活化过程大致相符，且对IL－6分泌呈异常高表达。提示IL－6分泌水平与IPF病情相关。     

HER2阳性乳腺癌细胞株上清液对树突状细胞表型及功能的影响

目的探讨人HER2阳性乳腺癌细胞对树突状细胞表型及功能的影响。方法分离培养外周血单个核细胞来源的树突状细胞。培养的第5天,实验组HER2’MCF-7细胞的培养上清液孵育24小时,以不加上清液的树突状细胞作为对照组,流式细胞术检测树突状细胞表面标志CDS0、CD86、CD40、CD83和HLA—DR的表达水平,ELISA法检测树突状细胞细胞因子IL-12、TNF—α、IL-6和IL-10的分泌水平。用改良的MTT比色法检测上清液处理的树突状细胞刺激同种异体T细胞增殖的能力和ELISA法检测树突状细胞刺激T细胞分泌细胞因子的能力。结果树突状细胞与HER2’MCF-7细胞的上清液共培养后,树突状细胞表面分子CD80、CD83、CD86及CD40均表达升高,同时伴随着IL-12、TNF-α、IL-6的分泌增加。与对照组相比较,上清液处理的树突状细胞对激活同种异体T细胞增殖和分泌细胞因子的能力明显增强（P〈0．01）。结论HER2’MCF-7细胞能改善树突状细胞的抗原递呈功能和刺激T细胞活化增殖的能力,提示HER2’MCF-7细胞对树突状细胞是免疫刺激作用,对于HER2’的乳腺癌可采用基于树突状细胞疫苗的免疫治疗。     

病原体抗原刺激的正常人外周血CD4^＋T细胞对γδT细胞的影响

CD4 T辅助（Th）细胞和γδT细胞在抗微生物感染中发挥着重要作用，两者相互作用有待阐明。本文报道以胞内感染体结核杆菌、人类VI型疱疹病毒及胞外寄生虫阴道毛滴虫刺激活化从正常人外周血经洗淘法分离纯化的CD4 T细胞，结果各组活化的细胞均表现明显增殖和产生以白介素-2（IL－2）、γ干扰素（IFN－γ）显著升高为主的Th1型细胞因子分泌谱。利用细胞隔离渗透性共培养体系，将抗原活化的CD4 T细胞和γδT细胞共培养，结果显示γδT细胞的增殖和细胞毒作用均可为CD4 T细胞产生的可溶性因子所显著增强。这提示在抗感染免疫中，CD4 Th1细胞可通过Th1型细胞因子促进γδT细胞功能。