宫内生长受限大鼠骨骼肌蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4的表达和活性变化

目的 研究宫内营养不良造成的宫内生长受限(IUGR)子鼠骨骼肌中蛋白激酶B(PKB)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达和胰岛素诱导活性变化,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制.方法 通过妊娠期全程低蛋白饮食法建立大鼠IUGR模型,采用Western blot方法检测雄性子鼠(8周)基础状态下骨骼肌PKB的表达和胰岛素刺激后磷酸化水平的变化,同时测定GLUT4的表达和胰岛素刺激后向细胞膜的转位.结果 胰岛素刺激前后,IUGR鼠骨骼肌中PKB和磷酸化的PKBSer473表达水平都明显低于对照鼠(P<0.01),胰岛素刺激使对照组的PKBSer473磷酸化水平明显增加(P<0.01),IUGR组仅轻度增加.两组子鼠骨骼肌中总GLUT4的蛋白表达没有差别,胰岛素刺激后,对照组细胞膜中GLUT4蛋白浓度显著升高(P<0.01),IUGR组增高的幅度明显低于对照组(P<0.01).结论 宫内蛋白营养不良造成的IUGR鼠骨骼肌中PKB的表达和活性降低,导致胰岛素介导的GLUT4转位受阻,可能引起葡萄糖摄取和利用障碍,促进糖尿病发生.     

高脂饮食导致胰岛素抵抗物质基础的实验研究

目的探讨高脂饮食所致肥胖导致胰岛素抵抗的物质基础。方法将30只雄性Wistar大鼠分为正常对照组、高脂组,正常对照组喂饲普通块料,高脂组喂饱和脂肪酸提供59%热卡的高脂饲料。各组共喂饲3月后测定体重,空腹血糖,糖负荷30、60、120min血糖,空腹胰岛素,胰岛素耐量,血脂,血清游离脂肪酸谱。结果与正常对照组比较,高脂组大鼠从第4周开始体重明显升高,空腹血糖和糖负荷30、60、120min血糖,糖耐量试验中葡萄糖曲线下面积,皮下注射胰岛素后40、90、120min血糖,胰岛素耐量试验中葡萄糖曲线下面积,血清胰岛素,胰岛素抵抗指数,血清瘦素,血清胆固醇和甘油三酯含量均明显升高。高脂组大鼠血清游离脂肪酸谱中饱和脂肪酸明显升高、不饱和脂肪酸明显下降。结论肥胖导致胰岛素抵抗的物质基础与脂肪代谢异常,特别是和饱和脂肪酸的升高、不饱和脂肪酸的下降有关。     

宫内生长迟缓致大鼠胰岛素抵抗的实验研究

目的:了解母鼠孕期营养不良所致宫内生长迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠成年后胰岛β细胞分泌功能及胰岛素敏感性变化.方法:采用妊娠第1天Wistar孕鼠以对照组孕鼠50%的饲料喂养建立IUGR模型,以低于对照组新生鼠出生体重均值的2个标准差判断为IUGR.以子代12～15周成年雄鼠为实验对象,采有葡萄糖耐量试验和正常血糖高胰岛素钳夹技术,计算胰岛β细胞功能数(Modified Beta-Cell function Index,MBCI)、胰岛素介导的稳态葡萄糖输注率(steady-state glucose infusion rate,SSGIR,mg/(kg·min),对胰岛β细胞分泌功能及外周组织胰岛素敏感性进行评价.结果:(1)饥饿组新生鼠平均出生体重明显低于对照组均值的2SD(4.37±0.34g vs6.42±0.2g,P＜0.001),为IUGR.至12～15周时IUGR组体重仍低于对照组(279.8±30.3vs341.3±36.6g,P＜0.01);到成年期约有25%IUGR幼鼠死亡;(2)饥饿组幼鼠成年后(12～15周)胰岛β细胞功能指数与对照组比较差别无显著性(66.52±21.66 vs 57.43±10.82,P=0.286);饥饿组幼鼠成年期SSGIR明显低于对照组(9.97±2.65mg/(kg·min)vs 22.55±4.05mg/(kg·min),P＜0.001).结论:母鼠孕期营养不良导致胎鼠宫内生长迟缓并延续至成年期;IUGR大鼠代谢综合征的发生与其成年期严重的外周组织胰岛素抵抗有关.     

不同饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型的比较

目的:应用不同饮食喂养大鼠,观察大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,同时观察大鼠游离脂肪酸(FFA)的变化。方法:分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法检测大鼠血清中游离脂肪酸,测量大鼠体重、附睾脂肪垫重量。结果:高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸明显高于非胰岛素抵抗大鼠,胰岛素抵抗组大鼠体重及附睾脂肪垫重量明显高于非胰岛素抵抗大鼠。结论:高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功地诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸有关。     

早期营养对IUGR大鼠糖耐量和胰岛素敏感性的远期影响

【目的】了解宫内发育迟缓(IUGR)和生后早期蛋白质营养不良对IUGR大鼠糖耐量和胰岛素敏感指数(ISI)及胰岛素抵抗指数(IRI)的远期影响。【方法】采用被动吸烟法制作IUGR大鼠动物模型,新生正常鼠仔102只和IUGR鼠仔105只随机分为4组:①正常对照组;②IUGR模型组;③正常大鼠低蛋白饮食组(CLP组);④IUGR大鼠低蛋白饮食组(SLP组)。观察各组大鼠在生后4周(幼年期)、12周(成年期)和48周龄(老年期)时糖耐量和胰岛素释放试验变化。【结果】①SLP组大鼠宫内发育迟缓和生后早期蛋白质营养不良其远期葡萄糖-胰岛素代谢功能受损明显,至48周时空腹血糖(5.2±1.4)mmol/L已升高,胰岛素(31. 2±3.4)mU/L水平明显升高,ISI(1.7±0.4)明显下降,IRI(8.7±1.8)明显升高,与正常对照组[(4.5±1.1)mmol/L,(12.9±1.0)mU/L和2.8±0.2,2.3±0.41比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。②CLP组大鼠生后早期单纯蛋白质营养不良的远期影响主要表现为糖负荷后胰岛素对血糖升高的应答分泌反应延迟和糖耐量减低。③IUGR模型组大鼠生后即给予正常营养供给,其葡萄糖-胰岛素代谢紊乱的程度减轻,但仍有糖耐量减低。【结论】在宫内和/或生后早期机体发育的关键时期,蛋白质营养不良将对葡萄糖-胰岛素代谢功能产生长期的不良影响,主要表现为糖耐量减     

宫内缺氧对成年大鼠胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的影响

目的研究宫内慢性缺氧对成年大鼠胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的影响。方法SD孕鼠16只随机分为对照组和宫内慢性缺氧组。观察子鼠生长发育状况,于12周龄每窝随机选取雄性子鼠各1只,采用稳态模式评估胰岛素抵抗（HOMA-IR）;胰腺切片H-E染色观察胰岛形态;免疫组织化学染色及图像分析检测胰岛中胰岛素、Bcl-2、Bax、NF-κB表达。结果宫内慢性缺氧组子鼠出生时及12周龄胰腺质量／体质量比值明显低于对照组;成年大鼠HOMA-IR明显高于对照组;胰岛多数增生肥大;胰岛胰岛素的表达明显减弱;胰岛Bax、NF-κB的表达高于对照组,Bcl-2的表达差异无统计学意义。结论宫内慢性缺氧可导致子代大鼠胰腺发育受损;大鼠成年后存在胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍,后者可能与胰岛β细胞胰岛素抵抗、凋亡增加有关。     

宫内发育迟缓出生后追赶生长大鼠脂肪组织LRP6/β-catenin通路表达变化

目的：探讨宫内发育迟缓出生后追赶生长（CG-IUGR）大鼠脂肪组织低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）/β-联蛋白（β-catenin）通路表达变化。方法：随机将SD孕鼠分为两组,一组孕鼠全程限食喂养,生产后通过减少喂养子鼠数量,建立子鼠CG-IUGR模型（CG-IUGR组）;另一组孕鼠正常喂养,生产的子鼠作为对照组。为排除性别因素的干扰,CG-IUGR组和对照组均选取雄性子鼠。CG-IUGR组和对照组在12周龄时进行葡萄糖耐量试验,并取肾周脂肪组织标本,通过苏木素-伊红染色观察脂肪结构,共聚焦显微镜下观察脂肪组织LRP6、β-catenin及胰岛素受体底物1（IRS-1）的免疫活性,蛋白质印迹法检测LRP6、β-catenin、IRS-1蛋白表达。结果：CG-IUGR组在60?min时血糖浓度及曲线下面积均大于对照组（均P<0.05）,表明CG-IUGR组葡萄糖耐量受损。CG-IUGR组脂肪细胞面积较对照组增大,脂肪组织中LRP6、β-catenin和IRS-1免疫活性较对照组降低（均P<0.05）。结论：CG-IUGR大鼠脂肪组织胰岛素抵抗可能与LRP6/β-catenin通路表达下调有关。     

宫内发育迟缓对大鼠肝糖异生关键酶的影响

目的：通过检测宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠肝组织中糖异生关键酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄
糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的mRNA表达变化,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的机制。方法：通过孕期全程给予孕鼠10%
低蛋白饲料建立IUGR仔鼠模型,对照组给予孕鼠21%正常蛋白饲料建立正常出生体质量仔鼠模型。每组仔鼠出生1
周、3周、8周时测定其体质量、空腹血糖、血清胰岛素水平及胰岛素抵抗指数,并采用反转录-聚合酶链反应(RTPCR)
法检测仔鼠肝组织中PEPCK和G-6-Pase的mRNA表达。结果：IUGR组仔鼠出生体质量明显低于对照组(P<0.001),
1周、3周、8周时亦低于对照组(P<0.05)。各时间点IUGR仔鼠空腹血糖、血清胰岛素水平及胰岛素抵抗指数与对照组
无明显差异(P>0.05)。IUGR仔鼠各时间点肝组织PEPCK和G-6-Pase mRNA的表达水平均高于对照组(P<0.01)。结论：
IUGR仔鼠肝糖异生关键酶PEPCK和G-6-Pase的表达明显增高,可能增加肝糖异生,是IUGR个体发生胰岛素抵抗和糖
尿病的重要机制之一。     

早期营养干预改善 IUGR大鼠胰岛素抵抗及其与血清瘦素的关系

【目的】探讨生后早期不同饮食构成喂养对宫内生长迟缓(IUGR)大鼠胰岛素抵抗的远期影响及其与瘦素、腹部内脏脂肪的相关关系。【方法】IUGR新生雌鼠48只和正常新生雌鼠10只随机分为5组予下述相应饮食饲料喂养母鼠3周:①IUGR模型组(S/N组)予常规饮食,②IUGR高碳水化合物饮食组(A组),③IUGR高脂肪饮食组(B组),④IUGR高蛋白质饮食组(C组)⑤正常对照组(C/N组)予常规饮食。第4周起各组幼鼠断乳后均予常规饮食饲料喂养至实验结束。各组大鼠于12周(成年期)分别测定体质量、肾周脂肪质量(肾脂)、血清瘦素、血糖、胰岛素并计算胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(IRI)。【结果】12周时IUGR模型组大鼠肾脂增多,血清瘦素和IRI升高、ISI下降(P<0.05)。IUGR高蛋白饮食组体质量(242.6±17.5)g虽高于C/N组(192.1±37.2)g,但与S/N组(213.4±27.3)g比较无显著性差异(P>0.05),且不伴肾脂(1.46±0.67)g增多,血清瘦素(0.43±0.26)μg/L、ISI(4.47±0.45)和IRI(0.78±0.45)也与正常对照组(1.41±0.42)g,(0.42±0.34)μg/L,4.46±0.42和0.77±0.31比较差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】生后哺乳期给予高蛋白质饮食早期营养干预然后恢复正常饮食,可使IUGR大鼠既能达到体格追赶生长,又可避免其成年后胰岛素敏感性下降而产生I     

OLETF大鼠胰岛素抵抗及相关因素分析

目的　探讨自发持续高血糖动物模型雄性OLETF(otsukalong evanstokushimafatty)大鼠的胰岛素抵抗状态以及各相关因素。方法　选择 14周OLETF大鼠 10只 ,LETO大鼠 10只作为对照。记录 2 4h大鼠进食量。在禁食 10～ 14h后 ,测定大鼠的体重 ,采血测定空腹血脂谱 ,行口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)。大鼠处死后 ,测定腹内脂肪 ,取大鼠股四头肌测定脂肪酸谱。留尿 ,测定尿酮兰蛋白 (U CP)、尿白蛋白 (U Alb)和肌酐(Cr) ,计算U CP/Cr和U Alb/Cr。采用正常血糖高胰岛素钳夹技术 ,评价其胰岛素抵抗状态。结果　①OLETF大鼠进食量明显高于LETO大鼠 ;②OLEFT大鼠体重明显高于LETO大鼠 ,腹内脂肪、大网膜脂肪和肾周脂肪也高于LETO大鼠 ;③OLETF大鼠三酰甘油、胆固醇均高于LETO大鼠 ;④OLETF大鼠U CP/Cr高于LETO大鼠 ;⑤除空腹血糖外 ,OLETF大鼠葡萄糖负荷后各点血糖均较高 ;⑥OLETF大鼠的葡萄糖输注率 (GIR)明显降低 ;⑦OLETF大鼠和LETO大鼠的多不饱和脂肪酸 (PUFA)相似 ,但OLETF大鼠以n 6PUFA含量较高 ,而LETO大鼠以n 3PUFA含量较高。结论　 14周的OLETF大鼠已存在胰岛素抵抗 ,体重和腹内脂肪重量增加 ,同时存在三酰甘油和胆固醇的增高及肌肉组织磷脂中n 6PUFA/n 3PUFA含量的改变。     

宫内发育迟缓胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK基因的表达变化

目的宫内发育迟缓(IUGR)是胰岛素抵抗的独立危险因素,通过检测IUGR胎鼠肝脏糖代谢相关酶的表达,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制。方法通过孕期蛋白质营养不良法建立大鼠IUGR模型,孕21天时剖宫产,测量胎鼠的体重和肝重,采用RT-PCR和蛋白印迹技术检测胎鼠肝脏PGC-1和PEPCK的mRNA及蛋白表达的变化。结果与正常对照相比,IUGR胎鼠肝脏PGC-1的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.01),肝中PEPCKmRNA的表达也明显增高(P<0.01)。结论IUGR胎鼠肝脏PGC-1表达增加诱导了糖异生关键酶PEPCK的表达,促进肝脏糖异生,这是IUGR鼠成年后发生胰岛素抵抗的原因之一。     

参芪复方合剂对胰岛素抵抗大鼠的治疗作用及机制

目的 观察参芪复方合剂对胰岛素抵抗大鼠的治疗作用及机制。方法 雄性SD大鼠建立胰岛素抵抗大鼠模型。参芪复方组给予参芪复方合剂，8周后检测空腹血糖（FBG）、空腹血清胰岛素（FINS）和瘦素（LP），计算稳态模型抵抗指数（HOMA—IR）值。结果 高脂肪饲料组较对照组FINS、LP和HOMA—IR显著升高，FBG无明显变化；高脂肪饲料组大鼠LP与FINS、HOMA—IK显著正相关；参芪复方组大鼠HOMA—IR、FINS和LP显著降低；参芪复方组较二甲双胍组胰岛素、IR值和瘦素差异无显著性。结论 高脂肪饲料喂养SD大鼠4周能形成IR大鼠模型，并伴有高瘦素血症。参芪复方合剂能有效改善大鼠IR。     

桑叶提取物对MSG肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响

[目的] 研究桑叶提取物改善L-谷氨酸钠诱导的MSG大鼠胰岛素抵抗的影响。[方法] 选取桑叶中总多糖、总黄酮和总生物碱提取物作为受试药物。复制MSG大鼠模型,随机分为模型对照组、罗格列酮组、非诺贝特组、桑叶总多糖高、低剂量组,桑叶总黄酮高、低剂量组,桑叶总生物碱高、低剂量组;另选健康SD大鼠作为正常对照组。连续给药8周,实验期间进行蔗糖耐量和胰岛素耐量实验。给药8周后腹主动脉取血,检测空腹葡萄糖和血清胰岛素含量,并计算胰岛素敏感指数。[结果] 桑叶提取物各给药组对MSG大鼠空腹血糖和血清胰岛素有明显的抑制作用,并具有一定的改善糖耐量和胰岛素耐量,升高胰岛素敏感指数的作用。[结论] 桑叶总多糖、总黄酮和总生物碱能够明显改善MSG大鼠胰岛素抵抗,为桑叶改善糖尿病前期糖脂代谢异常的药效基础提供实验依据。     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠血清C反应蛋白表达水平的抑制作用

目的 观察高脂喂养的胰岛素抵抗大鼠模型C反应蛋白(CKP)水平的动态变化;观察罗格列酮对肥胖大鼠血清CRP水平的影响.方法 将190～240 g健康清洁级近交系SD雄性大鼠36只,按完全随机法分为两组,正常对照组(NC组)和高脂饲养实验组,8周后胰岛素抵抗大鼠造模成功.将高脂饲养大鼠随机分为单纯高脂喂养组(HF组)、罗格列酮干预组(HFR组),于实验过程中取血检测空腹血糖、空腹胰岛素和血清CKP.结果 经高脂饲料喂养8周后,模型组胰岛素敏感指数降低,与对照组比较,差异具有显著性(P＜0.001).经高脂饲料喂养8周后,模型组C反应蛋白水平明显升高,与正常对照组比较,差异具有显著性(P＜0.001).经过8周的干预治疗,HFR组与HF组比较,HFR组ISI显著增高(P＜0.001).但仍低于NC组(P＜0.001).而HFR组经过干预后血清CRP均较为稳定,与HF组相比明显改善,差异有显著性(P＜0.001),但而高于NC组(P＜0.001).结论 随着胰岛素抵抗的加重,血清CKP水平逐渐升高,罗格列酮治疗可改善胰岛素抵抗,降低CKP水平.     

小剂量地塞米松诱发的胰岛素抵抗大鼠模型

【目的】用小剂量地塞米松诱发大鼠出现胰岛素抵抗,建立胰岛素抵抗动物模型,并对模型的稳定性进行初步评价。【方法】大鼠4组,给药组皮下注射20、60、120μg/kg 3种不同剂量地塞米松溶液,2次/d,对照组皮下注射等量的生理盐水。【结果】20μg/kg组大鼠在21 d时空腹血糖升高,胰岛素耐量实验结果表明其存在胰岛素抵抗,体重只有轻度下降,停药7 d后,胰岛素敏感性从抵抗状态恢复到正常水平。【结论】小剂量的地塞米松连续皮下注射将诱发大鼠出现一过性的胰岛素抵抗,模型动物的一般状态好。     

针刺对实验性大鼠胰岛素抵抗的逆转作用

[目的]观察针刺对实验性胰岛素抵抗大鼠胰岛素抵抗的逆转作用。[方法]将24只大鼠随机分成正常组、模型组和治疗组3组,每组8只。采用高糖饲料喂养方法复制胰岛素抵抗模型;观察针刺内关、足三里、三阴交以及肾俞等穴位对大鼠空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(PI)以及胰岛素敏感性指数(ISI)的影响。[结果]模型组大鼠的FBG、PI均较正常组升高,而ISI则降低(均P<0.01);给予针刺治疗后,模型大鼠的FBG、PI均下降,而ISI则上升(与模型组比较,均P<0.01)。[结论]针刺对胰岛素抵抗有一定的逆转作用。     

左旋精氨酸对宫内发育迟缓胎鼠脑组织中NO、MDA和SOD的影响

目的了解左旋精氨酸对被动吸烟所致大鼠宫内发育迟缓及胎鼠脑发育的影响,通过其与NO、MDA和SOD的关系探讨其作用机制。方法利用被动吸烟法建立大鼠IUGR模型,孕鼠随机分为5组:对照组、模型组、低剂量左旋精氨酸组、中剂量左旋精氨酸组、高剂量左旋精氨酸组。孕21天剖宫取胎,观察胎仔体重、脑重、肝重;检测胎鼠脑组织中NO含量及MDA、SOD活性。结果与对照组比较,模型组胎仔体重、脑重、肝重均明显降低(P<0.01),胎鼠脑组织NO含量升高,MDA水平升高,SOD活性降低(P<0.01)。低剂量及中剂量左旋精氨酸组与模型组相比,胎仔体重、脑重、肝重各项指标均有所改善,NO含量降低,MDA水平降低,SOD活性增高(P<0.01),但高剂量左旋精氨酸组与模型组比较差异无显著性(P>0.05)。结论孕中期应用一定剂量左旋精氨酸可有效防治被动吸烟孕鼠IUGR的发生并对胎仔脑发育有显著促进与保护作用,其作用与机体的氧化与抗氧化平衡失调有关。     

六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素水平的影响

目的 观察六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠模型血浆脂联素水平的影响.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠40只,随机分为六味地黄丸干预组和对照组,LETO鼠10只作为正常对照组.干预组从8周龄起以六味地黄丸2.4 mg·kg-1·d-1灌胃给药,其余两组以等量清水灌胃.定期OGTT试验,监测各组大鼠摄食及体质量增长情况,每周称量大鼠体质量和摄食量.于8、32和40周龄时分批宰杀大鼠.检测血浆脂联素、血浆胰岛素水平.结果 与对照组相比,干预组的血浆脂联素水平均明显增加.对照组血浆脂联素水平与LETO组相比显著降低.结论 OLETF鼠血浆脂联素水平与胰岛素敏感性呈正相关.六味地黄丸早期干预能明显增加OLETF鼠血浆脂联素水平,改善OLETF鼠胰岛素抵抗.     

2型糖尿病患者血清脂联素、超敏C-反应蛋白与胰岛素敏感性相关性分析

[目的]探讨2型糖尿病（T2DM）患者血清脂联素、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）与胰岛素敏感性相关性。[方法]测定2型糖尿病组、T2DM合并肥胖组、单纯性肥胖组及正常对照组空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、脂联素及超敏C反应蛋白（hs-CRP）,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及胰岛素敏感指数（ISI）;前3组给予罗格列酮8周治疗后,重复测定,并对前后数据进行统计学比较。[结果]2型糖尿病及肥胖较正常对照组FINS、hs-CRP、HOMA-IR升高,脂联素、ISI降低;给予罗格列酮8周后,FINS、hs-CRP、HO-MA-IR明显下降,脂联素、ISI明显升高,差异有统计学意义;hs-CRP与FPG、FINS、HOMA-IR呈正相关,与脂联素、ISI呈负相关。[结论]血清标志物hs-CRP、脂联素的检测,对2型糖尿病早期诊断、治疗、预后、胰岛素抵抗及生理机制的研究具有重要意义。