鉴定蚊胃血的一种快速方法

蚊胃血血源的鉴定是虫媒疾病流行病学调查研究的一个重要内容,本文介绍一种可在现场鉴定蚊胃血血源的琼脂扩散试验方法。按照Templis等(1963)方法制备抗下列3组动物的混台免疫血清,Ⅰ组为抗牛、羊、猪等免疫血清,Ⅱ组为抗人、猴、狗、马、鼠、兔等     

直接免疫荧光抗体试验鉴定蚊胃血血源的研究

近年来,国内学者在改进蚊胃血血源鉴定方法方面进行了不少的研究。为探讨直接免疫荧光抗体试验(下称直接法)鉴定蚊胃血血源的效果,而进行此项研究,同时以胃血环状沉淀试验(下称沉淀法)对照比较,研究结果如下。材科与方法一、材料 1.蚊胃血标本:实验室饲养羽化4～6d饥饿24h大劣按蚊叮刺志愿者前臂吸饱血,然后在不同时间制备胃血滤纸标本;于海口市郊人、牛房采集吸饱血的三带喙库蚊制胃血滤纸标本。装入塑料袋,4℃密封保存。     

醋酸纤维膜对流免疫电泳鉴定蚊胃血血源的研究

以醋酸纤维膜作对流免疫电泳,试用于鉴定蚊胃血,经试验选择的工作浓度:抗血清为1:8,抗原1:500,与常用的环状沉淀试验法同时对比鉴定离体刺吸人血或猪血的中华按蚊胃血标本,吸血后4、12及24小时制作的标本,于4℃冰箱贮存6、16及29个月的标本以及现场采集的蚊胃血标本,两法鉴定结果一致,反应特异性相似,初步证明此法可试用于蚊胃血的鉴定。     

应用多重PCR法鉴定蚊胃血血源的研究

目的建立多重PCR法鉴定蚊胃血来源。方法依据常见蚊吸血对象（人、牛、猪和犬）的线粒体DNA细胞色素b序列的差异,设计种特异引物,建立多重PCR法,并应用该法检测现场按蚊标本。结果应用多重PCR法共检测249只按蚊,血源来自牛和猪的共91只和63只,未检出吸人血按蚊。立即处死并干燥保存的现场按蚊标本检测成功率最高,为92.50%。结论多重PCR法鉴定蚊胃血血源快速、灵敏,结果客观、可靠。     

琼脂双向扩散法鉴定蚊胃血血源的研究

用琼脂双向扩散技术,以全血清为抗原制备多种巳知抗体血清检测未知抗原鉴定蚊虫胃血。并观察了不同抗血清及抗原浓度、反应时间与反应温度的试验结果,证明环状沉淀试验的敏感性比琼脂扩散法高约2倍,但以1:4抗血清检测≤1:1000的抗原浓度,在24～37℃中反应24小时,其结果与环状沉淀试验相似。按此法与环状沉淀试验同时检测离体刺吸牛血的中华按蚊胃血标本,两法牛血阳性率均为100％,但环状沉淀试验尚出现7.8％的马、羊血阳性反应,而琼脂扩散法则否;同时对比鉴定采集于现场的中华按蚊胃血标本,两法符合率在胃血稀释度1:500及1:1000分别为99.3％及98.6％。琼脂扩散法方法简单,可试用于蚊胃血标本的鉴定。     

应用多重PCR法鉴定蚊胃血血源的研揪

目的建立多重PCR法鉴定蚊胃血来源。方法依据常见蚊吸血对象(人、牛、猪和犬)的线粒体DNA细胞色素b序列的差异,设计种特异引物,建立多重PCR法,并应用该法检测现场按蚊标本。结果应用多重PCR法共检测249只按蚊,血源来自牛和猪的共91只和63只,未检出吸人血按蚊。立即处死并干燥保存的现场按蚊标本检测成功率最高,为92.50%。结论多重PCR法鉴定蚊胃血血源快速、灵敏,结果客观、可靠。     

聚合酶链式反应(PCR)扩增基因鉴定蚊胃血血源

目的探寻鉴定蚊胃血来源的实验室快速检测方法。方法对抗人血红蛋白胶体金试纸条(简称试纸条)检测有人血成分的按蚊干血痕标本,依据常见蚊吸血对象(人、牛、猪)的DNA序列的差异,设计特异DNA基因引物,运用聚合酶链式反应(PCR)方法对按蚊胃内干血痕标本进行DNA基因扩增,1.5%琼脂糖电泳检测扩增产物,并对扩增产物进行序列测定后查询其同源性匹配。结果试纸条共检测87只按蚊,血源来自牛和猪的共83只,检出仅含人血痕4份。该4份人血痕蚊标本经PCR扩增检测和基因序列匹配查询,与人基因序列同源性为100%,而无牛和猪基因。结论PCR法鉴定蚊胃血血源快速、灵敏、特异。     

应用单克隆抗体鉴定利什曼原虫的斑点ELISA试验

本文报道用单克隆抗体鉴定自蛉体内自然感染利什曼原虫的虫种,获得较好效果,其中L9E4单克隆抗体对新疆杜氏利什曼前鞭毛体抗原的最高阳性滴度达1:655 360;对吐鲁番亚历山大白蛉自_(10)及自_(11)的阳性滴度为1:81 920,比IFA法提高3～20倍。此法敏感,可用作鉴别白蛉体内利什曼原虫虫株的一种手段.     

应用抗白蛋白单价免疫血清作对流免疫电泳鉴定蚊胃血血源

本研究以血清白蛋白为抗原制备单价抗血清,进行对流免疫电泳鉴定蚊胃血血源。抗血清以水油乳剂佐剂每周1次,每兔每次以1ml注入腹壁和后腿或足垫。两法免疫效果相似,均在5次免疫注射后达到标准抗体效价。用抗白蛋白血清进行对流免疫检测,抗     

酶联免疫吸附试验鉴定蚊胃血

宿主血源鉴定是对大多数节肢动物传播的疾病进行调查研究的一个组成部分。鉴于过去所用的方法不够敏感或特异,作者采用酶联免疫吸附微量滴定试验鉴定蚊胃血。本文使用18种动物血清及鸟类8个科的混合血清的抗血清,采用0.5ml血清与0.5ml弗氏完全佐剂乳化后免疫兔制备,其环状沉淀试验的滴度>100,000。抗兔血清则用豚鼠皮下注射1ml兔血清连续3次制得。     

尿中致病菌的快速鉴定和快速敏感试验

缩短检验报告时间对临床诊断和治疗有很大帮助,以下是一个尿中致病菌快速鉴定和快速敏感试验方法。方法:将敏感试验所用的琼脂培养基溶化,待冷至50℃,加入被检尿液,再加入马血(使含量为10％),立即倾注平碟,厚度为5～6毫米。凝固后,贴上需要的抗菌素敏感试验纸片。平碟底向上,置37℃培养4～5小时,观察敏感试验结果。如细菌生长被抗菌素所抑制,则不能还原血红蛋白,培养基上     

一种检测黑热病患者循环抗原的敏感ELISA法

作者从黑热病患者中分离杜氏利什曼原虫,采用冻融法制备前鞭毛体可溶性抗原(PSA),然后用该抗原免疫兔制备免疫血清。用过氧化物酶标记PSA(1:1000)用于试验,     

斑点按蚊和佛罗里达州其他蚊种对伯氏疟原虫的敏感性

在美国和欧洲伯氏疟原虫作为疟疾研究的模型至少已有30年了。亚洲的斯氏按蚊、非洲的冈比亚按蚊和欧洲的黑小按蚊已证明是这种疟原虫最好的实验媒介。本文报告了美国佛罗里达州吸捕乳动物血的一些蚊种对伯氏疟原虫敏感性的试验结果。试验蚊种包括四斑按蚊、淡色按蚊、埃及伊蚊、带喙伊蚊、黑须库蚊和致乏库蚊的实验室饲养雌蚊以及灾难按蚊、An.bradleyi、An.atropos和斑点按蚊的第1代雌蚊。均以羽化后3～5天的蚊虫作为试验样本。     

一种敏感的种及种下分类的分子生物学方法—用于赫坎按蚊种团的种及株的鉴定

我们用改进了的方法,抽提并纯化了按蚊亚属赫坎按蚊种团的中华按蚊A.sinensis的上海地理株,广西株、武汉株和郑州株。雷氏按蚊嗜人亚种A.leeteri anthropophagus的广西地理株和无锡株。凉山按蚊A.liangshannesis,小宽按蚊A.xiaokuanus,克劳按蚊的基因组DNA。结果表明,用这种方法制备的蚊基因组DNA完整,能用于以后的限制酶切等进一步的分子生物学实验。建立了能显示蚊基因组DNA中重复序列DNA的最佳酶切条件,从九种限制     

一种检测华支睾吸虫病的快速ELISA

ELISA测定技术已向快速化方向迈进。郭恒昌等(1981,1982)报告,HBs_Ag的ELISA各阶段的反应完成时间为1h或5min.侯林浦等(1981)报告,钩端螺旋体的ELISA各阶段反应完成时间为30min。田荣福等(1981)报告,在HBsAg的ELISA检测中,血清在50℃水浴温育2h,其P/N值最大。     

一种快速简便检查蚊体内子孢子的方法

早在五十多年前发现蚊体内鸟疟原虫和间日疟原虫的子孢子可通过循环系统散布于卵巢以外的蚊体各个部位。鉴于此种情况,作者在委内瑞拉用以下方法检查了鸟疟的媒介 An.squamipennis。将捕获的蚊虫杀死,鉴定蚊种,解剖切成头、胸、腹3部分,分别置于1小滴生理盐水中,用针捣碎、涂片,干后用甲醇固定,吉氏液染色,镜检记录结果。如果阳性,可发现单个或成群的子孢子,偶尔也可见到锥虫、螺旋体、真菌和细菌。     

以酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定按蚊体内子孢子和卵囊期疟原虫种

本文报道应用恶性疟(P.f.)、三日疟(P.m.)和卵形疟(P.o.)的环子孢子(CS)抗原作 ELISA 鉴定从冈比亚按蚊和致死按蚊解剖得到的子孢子和卵囊的虫种。蚊虫采自肯尼亚西部基苏木附近全疟区的2个点。当地居民感染虫种     

一种快速繁殖白魔按蚊的可靠方法

作者在萨尔瓦多沿海地区的牛棚内捕捉白魔按蚊10天,将每天捕获的雌蚊置于61×61×61cm的纱笼或盛有5ml肝粉和干酵母1:1浸液的塑料瓶内各50只。两组蚊虫放置于同一室内,室温为26±2℃,相对湿度在70%以上,用4盏40瓦荧光灯照10小时,其余14小时黑暗。蚊笼底放入浸有10%糖水的棉垫。每天用动物膜法饲以脱去纤维蛋白的牛血3次。晚上笼内放一盛有水的塑     

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定伊朗的按蚊胃血的人血指数

按蚊人血指数是判定传播媒介的一项重要指标,血清学的沉淀试验是过去广泛被使用的鉴定技术。本文介绍一种改进的ELISA用于现场测定按蚊的人血指数。 1982～84年在伊朗19个省的村庄自人房、牛棚、贮藏室及村庄周围户外栖息场所等     

非洲南部冈比亚按蚊复合体蚊种PCR鉴定的评价

冈比亚按蚊(An.gambiae)复合体由6个形态不易区分的种组成,但各蚊种传播疟疾的能力不同。已有报告不同蚊种rDNA基因之间间隔序列不同,据此可用PCR进行蚊种鉴别。本研究用PCR鉴别非洲南部各地野外采集或实验室饲养的米勒按蚊(An.merus)、四环按蚊(An.quadriannulatus)和