不同培养基中CIK的生物学特性及其对肿瘤细胞的杀伤效果

目的比较健康人和肿瘤患者细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）在淋巴细胞无血清培养基及普通无血清培养基中的细胞形态、体外扩增速度、细胞表型及其对肿瘤细胞株的杀伤活性。方法取健康人和肿瘤患者外周血各3例,经密度梯度离心获得外周血单个核细胞（PBMC）,分别在淋巴细胞无血清培养基及普通无血清培养基中,加入基因重组人干扰素γ（rhIFN-γ）、抗人CD3单克隆抗体（OKT3）和基因重组人白细胞介素2（rhIL-2）,体外诱导CIK细胞,比较细胞的形态、扩增速度、细胞表型及杀伤活性。结果在不同培养基中健康人外周血CIK细胞的扩增速度、流式细胞学检测的CD3＋CD8＋和CD3＋CD56＋细胞百分比以及对K562和HL-60肿瘤细胞株的杀伤活性均显著高于肿瘤患者,差异有统计学意义（P〈0.05）;两种来源的PBMC在不同的培养基中经过诱导获得的CIK细胞在增殖速度、流式细胞学分析结果及杀伤活性方面差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论在不同的培养基中肿瘤患者的PBMC经诱导培养获得的CIK细胞可有显著差别,为临床进一步提高CIK细胞的治疗效果提供了实验依据。     

肿瘤自体CIK细胞免疫治疗前后T细胞亚群的变化

细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）具有增殖快、杀瘤活性强和杀瘤谱广的特点。目前，用于临床治疗肿瘤的报告较少。本文用CIK细胞过继性免疫治疗肿瘤患者，探讨其对细胞免疫的影响。方法：用CS-3000得到肿瘤患者未梢血单个核细胞（PBMC），用含有IFN-r、IL-2和CD3单抗的培养液进行培养扩增，于培养的第11天和第12天回输给病人，并检测CIK治疗前后患者的外周血T细胞亚群的变化。结果：38例肿瘤患砉输注CIK细胞一疗程后，患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞都较治疗前明显提高（P〈0．01）。结论：用自身CIK细胞过继性回输治疗能明显提高肿瘤患者细胞免疫功能。     

LDH释放法检测肿瘤患者PBMC和CIK细胞的细胞毒活性

目的建立检测细胞毒活性的乳酸脱氢酶（LDH）测定法，了解肿瘤患者外周血单个核细胞（PBMC）和细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）的抗肿瘤活性，为肿瘤的免疫细胞治疗提供参考。方法采集肿瘤患者和健康成人外周血，常规分离PBMC，体外进行CIK的培养，用LDH释放法分别检测PBMC和CIK对肿瘤细胞K562的细胞毒活性。结果肿瘤患者PBMC对K562的杀伤活力比正常人显著降低（P〈0．05）。经多种细胞因子诱导培养7～10d后，健康人和肿瘤患者的CIK对K562的杀伤活力都有显著提高（P〈0．01），肿瘤患者CIK杀伤活力接近于健康人。结论肿瘤患者PBMC细胞毒活性显著降低，但经诱导培养成CIK后则显著提高。用LDH释放法检测肿瘤病人CIK细胞毒活力，有助于CIK疗法适应病人的选择及个体疗效观察。     

细胞因子诱导杀伤细胞抗淋巴瘤细胞作用的研究

目的:探讨体外细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞对淋巴瘤细胞的杀伤作用.方法:采集健康人外周血单个核细胞(PBMC),经IL-2、CD3Mc-Ab、IL-1、IFN-γ诱导,制备CIK细胞,同时以淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)作为对照,流式细胞仪检测CIK细胞的免疫表型,LDH释放法检测其对淋巴瘤细胞株的杀伤活性.结果:CIK细胞与LAK细胞增殖在前期无明显差异,CIK细胞在培养14d后大量增殖,21d后扩增能力显著高于LAK细胞(P＜0.05);表型分析表明CIK细胞主要由CD3+和CD56+双阳性细胞构成;同一效靶比时,CIK细胞对淋巴瘤细胞株的杀伤活性明显高于LAK细胞(P＜0.05).结论:CIK细胞对淋巴瘤细胞株的杀伤作用强于LAK细胞,具有较强的抗淋巴瘤细胞活性,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀瘤效应细胞.     

DC、CIK联合培养对肿瘤细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨DC(dendritic cells)、CIK(cytokine-induced killer cells)联合培养对肺腺癌细胞A549的杀伤活性的影响,并与单独CIK对A549杀伤活性进行比较,为肿瘤生物治疗提供有效方法。方法分别培养DC、CIK细胞,经鉴定后进行联合培养,联合培养3天后,对A549细胞进行杀伤活性实验,检测DC联合CIK及单独CIK对A549的杀伤活性,同时用流式细胞检测DC、CIK联合培养细胞及单独CIK细胞中淋巴细胞亚群的表达。结果 DC联合CIK对A549的杀伤活性为88.38%,CIK对A549的杀伤活性为66.24%,两者对A549的杀伤活性比较有显著差异(P0.01);DC、CIK联合培养的淋巴细胞亚群中的CD3+、CD4+、NK、NKT、CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+的数量均高于CIK细胞。结论 DC、CIK联合培养对肺癌细胞A549的杀伤活性明显高于单独CIK对A549的杀伤活性(P0.01);抗肿瘤淋巴细胞(CD3+、CD4+、NK、NKT、CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+)数量也明显高于CIK细胞。     

细胞因子诱导的杀伤细胞

正常人或患者外周血、骨髓单个核细胞/淋巴细胞中定期加入γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、抗CD3抗体(CD3mAb)经2～4周的诱导可获得大量的新型肿瘤杀伤细胞——细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK),增殖旺盛及肿瘤杀伤活性高,包含大量CD3~+CD56~+细胞。有关基础及临床研究证明,CIK细胞较细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、淋巴细胞因子活化的杀伤细胞(lymphokine-activated killer,LAK)、肿瘤细胞浸润的淋巴细胞(tumer infiltrating-lym-phocyte,TIL)更适用于肿瘤的生物治疗。本文就CIK细胞的来源与生物学特征、对肿瘤细胞的杀伤及临床应用进行综述。     

脐血CD3AK细胞治疗恶性肿瘤的观察与护理

目的研究用脐血单个核细胞制备CD3AK细胞的抗肿瘤作用,探讨肿瘤生物治疗近期疗效的免疫指标及临床应用中的护理规范.方法分离脐血单个核细胞,用IL-2+CD3Ab诱导CD3AK细胞;测定肿瘤患者用CD3AK细胞治疗前后外周血单核细胞(PBMC)的自然杀伤(NK)活性,静脉滴注过程中严密观察患者体温和脉搏等反应.结果肿瘤患者输注CD3AK细胞一个疗程后,其PBMC的NK杀伤活性由63%升高到81%,平均升高28%,发热反应不到3%,大多在38 ℃以下,未经处理自行消退.结论 (1)CD3AK细胞输注能明显提高肿瘤患者PBMC的NK活性;(2)CD3AK细胞输注安全有效,无明显副作用;(3)肿瘤患者PBMC的NK活性测定可望成为肿瘤生物治疗近期疗效的一个参数.     

梅毒血清固定患者淋巴细胞亚群的表达及临床意义

目的?观察梅毒血清固定患者外周血中淋巴细胞亚群的相对及绝对计数水平，探讨其与梅毒患者产生血清固定的关系。方法?选取2019年5月至2020年11月大连市皮肤病医院梅毒血清固定患者48例、快速血浆反应素试验（RPR）滴度转为阴性的梅毒治疗有效患者29例及体检健康者30 例，用流式细胞仪检测外周血各淋巴细胞亚群的相对计数及绝对计数水平，并进行统计分析。结果?血清固定组、梅毒治疗有效组外周血中的B 淋巴细胞相对计数和绝对计数较健康人对照组少，差异有统计学意义（P＜0.05）；与健康人对照组比较，梅毒血清固定患者淋巴细胞计数、CD4＋T淋巴细胞计数及B 细胞计数均较少，差异有统计学意义（P＜0.05）；而血清固定组与梅毒治疗有效组各细胞相对计数及绝对计数差异均无统计学意义（P均＞0.05）。结论?梅毒患者外周血CD4＋T淋巴细胞、B淋巴细胞的减少特别是绝对计数水平的降低可能与梅毒患者发生血清固定有关。     

自体CIK过继免疫治疗恶性肿瘤的最佳输注时间

摘要：目的:研究恶性肿瘤患者自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的免疫表型与细胞毒活性的变化规律,探讨肿瘤患者CIK过继免疫治疗输注的最佳时间。 方法:采集40例恶性肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),由IFN-γ、rhIL-1α、rhIL-2等细胞因子和CD3单克隆抗体体外诱导培养成CIK。用流式细胞术动态监测免疫表型,MTT法分析细胞毒活性。 结果：随着诱导时间的延长,PBMC中CD3⁺、CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD56⁺表型细胞所占比例呈上升趋势。CD3⁺CD4⁺细胞在7 d达到峰值,随后缓慢下降。CD25⁺细胞在培养的早期(3～7 d)即达峰值,7～14 d缓慢下降,14～21 d快速下降。HLA-DR+细胞在0～14 d处于上升期,14 d达峰值后快速下降。成熟CIK细胞毒活性［(52.49±7.70)%］较未活化的PBMC［(7.02±2.00)%］显著增高(P<0.01)。 结论:14 d左右能诱导出典型的CIK,CD3⁺CD56⁺细胞处于对数生长期。确立自体CIK过继免疫治疗恶性肿瘤的最佳输注时间为第14天。     

DC/CIK联合免疫治疗晚期肿瘤患者的护理体会

树突状细胞(DC)是体内最有效的专职抗原递呈细胞(APC),通过MHCⅠ、Ⅱ类途径将外源性抗原呈递给CD3 CD4及CD3 CD8 T细胞,诱导机体产生抗原特异性CTL,识别和杀伤肿瘤细胞,并能抑制肿瘤血管生成,同时激发免疫记忆保护[1]。细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK),是人外周血单个核细胞(PBMC)在体外经多种细胞因子刺激后获得的一群异质细胞,具有增殖性、杀癌活性强、杀瘤谱广的特点[2]。临床上曾经使用CIK单独治疗,它主要用于手术、放化疗后肿瘤微小残留病灶的清除[3-6]。而在CIK细胞培养的过程中加入自体DC后CIK细胞的杀瘤活性显著增强[7…     

Effect of blood donation on the establishment of normal ranges of lymphocyte subsets

BACKGROUND: Absolute counts of CD4+ T-lymphocytes are used in the management of patients with human immunodeficiency virus infection. Low absolute counts of CD3+CD4+ cells have also been observed in healthy people–a phenomenon called idiopathic CD4 lymphocytopenia. It is common practice for normal ranges for lymphocyte subsets to be derived from samples taken from blood donors. STUDY DESIGN AND METHODS: A sample of EDTA blood was taken through the donation line tubing, after donation from 565 blood donors in Sydney, Australia, who were selected from a range of age groups. An additional 12 donors provided a predonation sample as well as a postdonation sample. Hematologic assays were performed on two analyzers. Samples were stained for CD3, CD4, CD8, CD19, and CD56 and analyzed on a flow cytometer. RESULTS: Three donors were found to have absolute CD3+CD4+ counts < 300 cells per microL. The percentage of CD3+CD4+ cells was found to increase with age. Both the percentage and the absolute count of CD3+CD8+ cells decreased with age, which resulted in an increased CD4:CD8 ratio with age. Men had consistently higher absolute counts of CD3-CD56+ cells than women. The 12 additional donors all had greater percentages of CD3+CD4+ cells and lower absolute counts for CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD19+ and CD3-CD56+ cells after donation than they had before donation (p < 0.001). CONCLUSION: It is not satisfactory to base normal ranges for lymphocyte subsets on donor blood, from which the blood sample has been obtained after donation.     

树突状细胞疫苗联合细胞因子诱导的杀伤细胞治疗鼻腔及鼻窦恶性黑色素瘤的近期疗效观察

目的探讨负载自体肿瘤抗原的树突状细胞(DC)疫苗联合细胞因子诱导的杀伤细胞(C IK)治疗鼻腔、鼻窦恶性黑色素瘤的疗效。方法对15例鼻腔鼻窦恶性黑色素瘤患者在常规手术后2周,通过体外培养扩增DC及C IK细胞,并静脉回输,进行免疫治疗,观察患者临床症状改善及生活质量改善状况及近期疗效,利用流式细胞仪检测回输前后患者T细胞亚群及NK细胞变化。结果15例接受自体DC及C IK细胞治疗患者中,治疗前后患者临床症状有明显改善,提高率达86%,自体回输免疫治疗后,CD3+、CD4+T细胞和NK细胞(CD16+、CD56+)及CD4+/CD8+比例均显著提高(P0.01)。结论负载自体肿瘤抗原的DC疫苗联合C IK治疗鼻腔、鼻窦恶性黑色素瘤可以提高患者免疫功能,改善临床症状,提高生存质量。     

自体外周血单个核细胞制备CIK细胞治疗恶性实体肿瘤应用价值研究

目的探讨自体外周血单个核细胞(PBMC)应用于恶性实体瘤过继性免疫治疗的有效性。方法选取恶性实体瘤患者100名,粒细胞动员后,单采PMBC并计数,分析相关因素;流式检测CIK细胞中NKG2D受体率及CIK细胞治疗前后外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+、CD3+CD56+百分率;采用LDH释放法检测PMBC及CIK细胞的杀伤活性;利用Kaplan-Meier生存曲线对比分析CIK治疗组与非治疗组的生存期差异。结果 PMBC数与采血前外周血象的WBC及MNC总数相呈正相关,相关系数r分别为0.62、0.72(P<0.05),而与采集时间及血液流速无关。对照组、实验组各组CIK的杀伤活性与PMBC杀伤活性呈正相关(r分别为0.523、0.627,P<0.05)。培养前、培养至d 7、培养至d 14时CIK细胞杀伤活性都与NKG2D受体表达率成正相关r,分别为0.413、0.5460、.657(P<0.01)。CIK回输治疗前、后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+、CD3+CD56数量分别为38.66±8.34及62.15±12.36(P<0.05)、30.16±10.26及38.15±9.46(P<0.05)、37.42±11.12及25.74±10.35(P<0.05)1、.15±0.12及1.89±0.12(P>0.05)、17.63±4.25及25.89±8.96(P<0.05)、0.93±0.31及5.67±1.84(P<0.05)。对照组及CIK治疗组的3年生存率平均为86.5%及79%(P<0.05)。结论实体瘤患者的自体PMBC可以用于CIK细胞的制备及治疗。     

射波刀联合CIK细胞对中晚期恶性肿瘤的治疗分析

目的分析射波刀（Cyber knife）联合CIK多因子诱导自体细胞免疫疗法在中晚期恶性肿瘤患者治疗中的应用价值,探讨局部放射同步全身免疫优化的效应关系。方法对400例中晚期恶性肿瘤患者、1167个肿瘤病灶行射波刀治疗,其中200例同步CIK细胞免疫治疗,纳入观察组;200例行射波刀辅助中药滋阴补气颗粒治疗,纳入对照组。治疗后随访1～6个月,依据实体瘤疗效评价标准（RECIST）评定近期疗效,通过流式细胞术检测治疗前后患者T淋巴细胞、T辅助细胞、NK细胞评定免疫功能的变化,综合探讨射波刀联合CIK细胞治疗中晚期恶性肿瘤的疗效。结果中位随访期为5个月。两组患者近期治疗有效率分别为77％（观察组）和72．5％（对照组）,P〈0．05;射波刀联合CIK组T淋巴细胞、T辅助细胞、NK细胞均较射波刀联合中药颗粒组增强（P〈0．05）。结论通过射波刀精确影像追踪定位联合全身CIK细胞免疫治疗,综合优化肿瘤治疗的物理和生物效应,使部分中晚期恶性肿瘤患者变不治为可治,值得临床推广应用。     

长期单采血小板献血者甲状旁腺激素水平改变及其对献血者免疫功能的影响

目的 探讨长期单采血小板献血者甲状旁腺激素(PTH)水平的改变及其对献血者免疫功能的影响.方法 采用简单随机抽样法按性别构成比为1∶1,选择2015年10月7日至2015年12月5日于烟台市中心血站行单采血小板捐献的30例献血者作为研究对象,纳入研究组(n=30).研究组纳入标准:①献血品种为单采血小板;②捐献单采血小板5年以上,且每年捐献单采血小板次数≥10次;③献血前相关体检和血液学检查结果均符合《献血者健康检查要求》(GB18467-2011).排除标准:①献血者献血前相关体检和血液学检查结果中,任何一项不符合《献血者健康检查要求》(GB 18467-2011);②不愿意参加试验者.按性别、年龄匹配后,随机选择同期于本站首次捐献全血的献血者30例纳入对照组(n=30).对照组纳入标准:①首次献血;②献血品种为全血;③献血前相关体检和血液学检查结果均符合《献血者健康检查要求》(GB18467-2011).排除标准:①献血者献血前相关体检和血液学检查结果中,任何一项不符合《献血者健康检查要求》(GB 18467-2011);②不愿意参加试验者.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测研究组献血者献血前,献血后1、24 h及7d,以及对照组献血者献血前的血浆PTH水平和免疫球蛋白(Ig)M、IgG、IgA水平;采用流式细胞术(FCM)检测研究组献血者献血前,献血后1、24 h及7d,以及对照组献血者献血前的CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+ CD8+T细胞等T细胞亚群表达水平;并采用统计学方法比较上述各指标水平变化情况.两组献血者年龄、性别构成比等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).献血者本人认可对献血与健康相关性进行研究的必要性,自愿配合本项研究,并与之签署知情同意书.结果 ①研究组献血者献血前PTH水平与对照组相比,水平增高,但差异无统计学意义(P＞0.05);血浆IgM、IgG、IgA水平,以及CD3+T细胞绝对数、CD4+T细胞绝对数、CD8+T细胞绝对数、CD4+ CD8+T细胞绝对数、CD4+T细胞百分比、CD8+T细胞百分比、CD4+ CD8+T细胞百分比、CD3+CD4+T细胞/CD3+ CD8+T细胞比值,与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).②研究组献血者献血后1 h PTH水平为(72.47±7.25)ng/L,较采集前的(54.70±6.59)ng/L和对照组的(51.90±7.62)ng/L均显著增高,且差异有统计学意义(t=9.937、10.712,P＜0.01);研究组献血者献血后24 h及7 d PTH水平与采集前及对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);研究组献血者献血后1、24 h和7d的IgM、IgG、IgA水平与采集前及对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).③研究组献血者献血后1、24 h和7d的CD3+T细胞绝对数、CD4+T细胞绝对数、CD8+T细胞绝对数、CD4+ CD8+T细胞绝对数、CD4+T细胞百分比、CD8+T细胞百分比、CD4+ CD8+T细胞百分比、CD3+CD4+T细胞/CD3+ CD8+T细胞比值,与采集前和对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 长期单采血小板献血者PTH水平有短暂升高,但未发现其对献血者机体免疫功能产生影响,我国目前的单采血小板捐献模式不会影响无偿献血者的健康.     

阿德福韦酯抗病毒治疗对慢性乙肝患者免疫功能的影响

目的探讨阿德福韦酯抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞各亚群的影响。方法对41例慢性乙型肝炎患者采用流式细胞术检测阿德福韦酯(ADV-dpv)治疗前、治疗12周和24周后与11例对照者外周血T淋巴细胞亚群进行比较,并结合血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TbiL)水平及乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量水平进行统计学分析。结果治疗前各组患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组患者血清中ALT、TBiL水平及HBV-DNA载量水平与T淋巴细胞亚群失衡存在一致性,表现为慢性乙型肝炎(CHB)组和慢性重型肝炎(SH)组的ALT高于肝炎肝硬化(LC)组,差异有统计学意义(P<0.05),LC组和SH组患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显低于CHB组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ADV-dpv治疗12周和24周患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);各组患者ALT和TBiL水平及HBV-DNA载量较治疗前明显好转。结论慢性乙型肝炎在发展为重度和肝硬化的过程中外周血T淋巴细胞随病情的进展显著减少,经ADV-dpv抗病毒治疗后,肝功能明显改善,HBV-DNA复制明显减少,外周血淋巴细胞亚群绝对细胞数CD3+、CD4+、和CD8+进行性升高,T细胞亚群的状态呈逐渐改善的趋势。     

利妥昔单克隆抗体联合CIK治疗高龄眼眶弥漫大B细胞性淋巴瘤

高龄侵袭性弥漫大B细胞性非霍奇金淋巴瘤患者治疗存在一定难度。本研究探讨在利妥昔单克隆抗体单独或联合化疗的基础上,采用自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗高龄眼眶弥漫大B细胞性淋巴瘤的疗效及安全性。1例89岁男性患者经右眼眶肿物部分切除术后病理诊断为弥漫大B细胞性非霍奇金淋巴瘤,在利妥昔单克隆抗体联合小剂量化疗治疗基础上,采用CIK细胞治疗5个疗程,每疗程输注(2-3)×109CIK细胞2次,同时给予rhIL-2 1 MU/d皮下注射,连续10 d,观察CIK细胞疗效及不良反应。结果显示:该患者的外周血单个核细胞能成功扩增出所需的CIK细胞,培养后的CIK细胞以CD3+和CD8+细胞为主,CD3+CD56+细胞得到大量扩增。CIK细胞治疗2个疗程后,原发眼眶淋巴瘤及左肾上极病变完全消失,5个疗程结束后患者达到完全缓解。CIK细胞治疗中未见到明显不良反应。结论:对于高龄眼眶淋巴瘤侵袭性较高、分期较晚的患者,在利妥昔单克隆抗体单独或联合小剂量化疗的基础上,采用自体CIK细胞治疗,可能更有助于预防肿瘤复发,延长无病生存期,改善患者生存质量。     

American blood donors seropositive for human T-lymphotropic virus types I/II exhibit normal lymphocyte subsets

Recent reports have demonstrated that some lymphocyte subsets are abnormal in Japanese blood donors who are seropositive for human T-lymphotropic virus type I (HTLV-I). To determine if similar changes characterize American blood donors who are seropositive for HTLV-I/II, lymphocyte subsets were measured in 42 HTLV-seropositive and 42 HTLV-seronegative blood donors. The seronegative individuals were matched by age, race, and gender to the seropositive individuals. Peripheral blood mononuclear cells were treated with a panel of 12 monoclonal antibody pairs and then analyzed by two-color flow cytometry. No significant differences were observed between the seropositive and seronegative groups with respect to the absolute number of circulating lymphocytes or the percentages of lymphocytes belonging to the subsets assessed. These subsets included B, T, CD4, and CD8 cells and subpopulations of CD4 and CD8 cells defined by the coexpression of markers that appear (CD25, HLA-DR, CD38) or disappear (Leu 8, CD45RA) after activation. These findings indicate that HTLV-seropositive persons in the American blood donor pool do not exhibit the lymphocyte subset alterations reported for HTLV-I-seropositive blood donors in Japan.     

局部消融术联合细胞因子诱导的杀伤细胞治疗肝转移瘤临床效果观察

目的 观察局部射频消融(RFA)联合细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞疗法治疗肝转移瘤的临床疗效. 方法 50例肝转移瘤患者分为RFA联合自体CIK细胞治疗23例(研究组)和单纯RFA治疗27例(对照组).于治疗前后检测血清肿瘤标志物水平及CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+,局部复发率和Kamofsky评分变化. 结果 联合治疗组局部复发率(13.04%)明显低于对照组(40.74%)(P<0.05);CD3+、CD4+、CIM+/CD8+均明显升高(P<0.01);肿瘤标志物下降者和Kamofsky评分升高者的比例均明显高于对照组(P<0.05). 结论 RFA联合CIK细胞治疗肝转移瘤有较好的临床疗效,明显提高患者的细胞免疫功能,且改善生活质量.     

CIK与DC-CIK培养特性及体外存活时间的比较

目的比较细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)及树突状细胞-CIK(DC-CIK)在体外培养特性及收获后室温放置不同时间的存活情况。方法选择中晚期恶性肿瘤住院患者50例,分为CIK组和DC-CIK组,采血前检测患者的血常规,采血后记录分选淋巴细胞的数量和收获淋巴细胞总数,在培养的第15天进行流式细胞术检测CIK及DCCIK细胞的表面标志CD3、CD4、CD8、CD56的表达,收获后胎盘蓝染色法检测细胞在室温下放置不同时间存活率的变化。结果两组初始淋巴细胞数、收获淋巴细胞总数相比差异无显著性,扩增倍数DC-CIK组显著高于CIK组;CD3+、CD8+、CD3+CD8+和CD3+CD56+T细胞比例DC-CIK组显著高于CIK组,两组细胞活率随时间延长而降低,2 h细胞活率与初始有显著性差异,4 h细胞活率低于95%。相同时间两组间细胞活率比较差异无显著性。结论 DC-CIK细胞比CIK细胞增殖更快,效应细胞比例更高,因而具有更高的生物活性。收获后细胞在室温下放置,随时间延长活率逐渐下降,所以细胞收获后应尽快回输给患者。