2，4－二硝基氟苯柱前衍生化反相快速HPLC测定核糖霉素

本文选用２，４－二硝基氟苯（ＤＮＦＢ）柱前衍生化，二极管阵列紫外检测器检测，建立了核糖霉素及杂质新霉胺的反相快速ＨＰＬＣ测定方法。按ＵＳＰ（ＸＸⅡ）版附录分析方法评价的要求，对本方法的重现性、灵敏度、准确度、线性范围等指标作考察，结果满意。因采用高效细颗粒短柱进行分离，整个分析时间于５ｍｉｎ内，实现了高效快速测定。运用所建立的分离测定方法，对硫酸核糖霉素原料药及注射液中核糖霉素及新霉胺的含量分别进行了测定。     

反相快速HPLC测定核糖霉素方法的研究

本文选用３，５－二硝基苯甲酰氯作衍生化试剂，柱前衍生，采用二极管阵列紫外检测器检测，研究并建立了核糖霉素及杂质新霉胺的反相快速ＨＰＬＣ测定方法。采用高效细颗粒短柱进行分离，整个分析时间少于５ｍｉｎ，实现了高效快速测定。     

高效液相色谱法考察硫酸核糖霉素中新霉胺的稳定性

目的:考察硫酸核糖霉素(原料药)中杂质新霉胺的稳定性。方法:色谱柱为C18,流动相为水-冰醋酸-甲醇(25∶5∶70)配制的0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液,流速为1.0ml/min,紫外检测波长为330nm。结果:将试验数据进行配对t检验(α=0.05),新霉胺杂质在60℃高温、强光照射条件下试验前后差异具有显著性意义;在40℃高温、高湿度条件下,试验前后差异无显著性意义。结论:新霉胺杂质在60℃高温、强光照射条件下不稳定;在40℃高温、高湿度条件下稳定。     

硫酸核糖霉素及新霉胺的反相高效液相色谱分析

我国核糖霉素(Ribostamycin,Vista-mycin)于1984年正式投产,并用于临床。产品中常含有少量的新霉胺,由于抗菌活性和毒副作用的差异,控制核糖霉素中新霉胺的含量是十分必要的。目前,法定分析核糖霉素的方法主要依赖于微生物法测定总生物效     

注射用硫酸核糖霉素有关物质的检查

［摘要］目的建立硫酸核糖霉素有关物质的检测方法。方法采用薄层色谱法，以硅胶G为吸附剂，以2 丁酮 甲醇 异丙醇 浓氨水 水（10：12：3：8：2）为展开剂，用0.2%茚三酮的水饱和正丁醇溶液显色。结果核糖霉素主斑点与新霉胺及其他杂质斑点分离完全；检测限为0.08 μg。结论该方法专属性强且操作简便，可用于硫酸核糖霉素及其制剂的有关物质的检查。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定预混剂中硫酸安普霉素

目的:建立预混剂中硫酸安普霉素的柱前衍生化-高效液相色谱检测方法。方法:采用2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,以Thermo C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,乙腈-水(含0.5%乙酸)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长350 nm,柱温30℃。对3批次的预混剂中硫酸安普霉素含量进行了测定。结果:硫酸安普霉素浓度在0~100μg·m L-1范围内与其衍生物峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8);平均回收率(n=6)为98.70%,RSD=1.3%。3批次的预混剂中硫酸安普霉素含量的测定结果(n=3)分别为24.42、24.39和24.63 mg·g-1,RSD分别为0.27%、0.49%和1.0%。结论:经方法学验证,本法能准确测定预混剂中硫酸安普霉素的含量。     

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定硫酸小诺霉素的含量

目的:建立测定硫酸小诺霉素含量的柱前衍生化反相高效液相色谱法。方法:色谱柱:KromasilC18柱（4.6mm×150mm,5μ）;流动相:水-冰醋酸-甲醇（30:5:65）配制的0.02mol/L的庚烷磺酸钠溶液;检测波长:330nm。结果:线性范围为0.0976-0.9760mg/ml（r=0.9999）,重复性试验的相对标准偏差RSD为1.0％（n=6）。结论:本法专属性强、准确、灵敏,可以作为硫酸小诺霉素含量测定的首选方法。     

HPLC柱前衍生化测定组织液中妥布霉素的含量

目的:建立HPLC柱前衍生化法测定组织液中妥布霉素的含量。方法:使用含异硫氰酸-1-奈酯(NITC)的吡啶溶液在70℃衍生化,然后使用甲胺/乙腈溶液消除过度衍生化。HPLC使用AgilentHypersilODS色谱柱,流动相为乙腈:水(60:40),流速0.9mL/min,检测波长:230nm。结果:较好的检测出了组织液中妥布霉素的含量,检测范围为0.9μg/mL～20.0μg/mL,检测限为0.75μg/mL(信:噪=3,注射10μL),日内变异率小于2.0%(n=6),日间变异率小于5.3%,相对回收率大于99%。结论:NITC柱前衍生化HPLC分离测定注射用硫酸妥布霉素的含量方法简单,衍生化稳定可靠,使用高效液相可进行大规模样本测试。     

柱前衍生化HPLC测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量

目的:建立HPLC法测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量.方法:采用Shim-pack CLC-ODS色谱柱,柱前衍生化,流动相A为50%乙腈,流动相B为醋酸盐缓冲液;检测波长362 nm;用外标法检测.结果:本色谱条件下2种氨基酸衍生物能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰.平均回收率:盐酸精氨酸为102.8%,RSD为0.83%;亮氨酸为103.8%,RSD为0.92%.结论:本方法准确,方便,费用低,可用于人纤维蛋白粘合剂中2种氨基酸含量的控制.     

柱前衍生化HPLC法测定人纤维蛋白原中精氨酸的含量

目的：建立人纤维蛋白原中精氨酸的含量测定方法。方法：以丙氨酸为内标，2，4-二硝基氟苯（DN—FB）为柱前衍生刺，50％乙腈-0．05mol／L醋酸盐缓冲液（35：65）为流动相，紫外362nm处检测。结果：精氨酸在0.16～0．80mg／mL浓度范围内线性关系良好（r=0．9998），平均空白加样回收率为102．4％，RSD为1.4％。结论：方法准确、简便，费用低，可用于人纤维蛋白原中精氨酸含量的控制。     

柱前衍生化HPLC测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量星

目的：建立HPLC法测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量。方法：采用Shim—pack CLC—ODS色谱柱,柱前衍生化,流动相A为50％乙腈,流动相B为醋酸盐缓冲液;检测波长362nm;用外标法检测。结果：本色谱条件下2种氨基酸衍生物能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰。平均回收率：盐酸精氨酸为102．8％,RSD为0．83％;亮氨酸为103．8％,RSD为0．92％。结论：本方法准确,方便,费用低,可用于人纤维蛋白粘合剂中2种氨基酸含量的控制。     

HPLC柱前衍生法测定妥布霉素

方法 对妥布霉素HPLC测定方法进行了研究。目 的 选用2,4- 二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生化,以Agilent Hypersil ODS为色谱柱,0.25%三羟甲基氨基甲烷溶液-乙腈-0.5mol·L-1硫酸溶液(40∶59∶1)为流动相,流速为1.2ml·min -1,检测波长365nm。结果 在10～100μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,r＝0.9999。平均回收率为100.9%,RSD为1.5%。结论 本方法简便准确,重 现性好,可用于妥布霉素的质量控制。     

邻苯二甲醛柱前衍生化HPLC法测定复方制剂中盐酸赖氨酸的含量

目的:建立测定复方制剂中盐酸赖氨酸含量的方法。方法:采用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生化高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为0.04 mol/L磷酸二氢钠溶液(10%氢氧化钠溶液调节p H至7.2)-甲醇-乙腈(70∶15∶15,V/V/V),流速为1.5 ml/min,检测波长为338 nm,柱温为35℃,供试品与OPA衍生剂及硼酸盐缓冲液按设定程序自动混匀后进样。结果:盐酸赖氨酸质量浓度在0.027 4~0.438 8 mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤0.84%;在五维赖氨酸颗粒、赖氨肌醇维B12口服溶液、赖氨酸磷酸氢钙片中盐酸赖氨酸的平均加样回收率分别为99.8%(RSD=0.86%,n=9)、100.1%(RSD=0.79%,n=9)、99.6%(RSD=0.65%,n=9)。对3批含盐酸赖氨酸的复方制剂进行含量测定,所得结果与原质量标准测定方法中的结果一致。结论:该方法样品处理简单快速,可用于含有盐酸赖氨酸的复方制剂的质量控制。     

柱前衍生化HPLC测定大鼠血浆中的盐酸美金刚胺

目的 建立测定大鼠血浆中盐酸美金刚胺浓度的方法.方法 采用柱前衍生化HPLC-UV法,色谱柱为Luna C_(18)柱(150 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-三乙胺(70:30:0.5,磷酸调pH7),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为225nm;以盐酸金刚烷胺为内标,采用液-液萃取法,经衍生化后进样测定.结果 大鼠血浆中的内源性成分对美金刚胺的测定无干扰;美金刚胺0.14～9.20μg·mL~(-1)与峰面积线性关系良好(r=0.9950),低、中、高浓度样品的平均提取同收率分别为83.46%、80.34%、82.77%,平均方法回收率分别为112.01%、99.96%、99.10%,日内RSD分别为10.24%、8.97%、6.94%,日间RSD分别为12.10%、8.77%、4.60%.结论 所建方法灵敏、准确,可为盐酸美金刚胺的体内研究提供参考.     

邻苯二甲醛柱前衍生化高效液相色谱法测定组织中肌肽含量

目的建立测定小鼠各组织肌肽含量的高效液相色谱法。方法采用C18色谱柱,以甲醇和0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 3.5)为流动相,用邻苯二甲醛为柱前衍生剂,在柱温38℃下采用二元梯度洗脱,对小鼠各组织中的肌肽含量进行了测定。结果肌肽在0.63~10.00μg/mL时峰面积与进样质量浓度有良好的线性关系,其相关系数为0.999 6。回收率在98.2%~99.7%之间。检测限为0.05μg/mL(S/N=10)。结论该法灵敏可靠、专属性强、重现性好。小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑皮层和海马中肌肽含量分别为123.67,22.86,158.86,76.57,81.86 mg/g。     

柱前衍生化HPLC法测定齿瓣石斛中总氨基酸的含量

目的:建立测定齿瓣石斛中总氨基酸含量的方法。方法:以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,与齿瓣石斛中氨基酸柱前衍生,采用高效液相色谱法测定其含量。色谱柱为SymmetryC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相A为0.05mol·L-1醋酸钠-醋酸缓冲液(pH6.4)-1%N,N-二甲基甲酰胺,流动相B为乙腈-水(1:1,V/V),梯度洗脱,检测波长为360nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:13种氨基酸的线性相关系数均>0.9990,平均加样回收率范围在99.34%～101.93%之间,RSD在0.54%～1.91%之间(n=6)。结论:本方法快速、简便、结果准确,可为齿瓣石斛的深入研究奠定基础。     

反相高效液相色谱-柱前衍生化法测定大青叶中氨基酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定大青叶中精氨酸和脯氨酸含量的方法。方法:采用2,4—二硝基氟苯柱前衍生化,将氨基酸在碱性条件下衍生后直接进样测定;色谱柱为KromasilC18,流动相为醋酸钠缓冲溶液(pH=6.4)-乙腈(850∶150),检测波长为360nm,外标法计算含量。结果:精氨酸和脯氨酸进样量分别在0.627μg～5.016μg(r=0.9996)、0.874μg～7.000μg(r=0.9995)范围内线性关系良好;平均回收率均为98.2%(RSD=2.3%、2.2%)。结论:本法简便、准确、可靠,适用于大青叶中氨基酸的含量测定。