伤寒耐药菌株的耐药谱及质粒的临床研究

我院1991年1月至1992年9月,共收治伤寒病人151例,其中伤寒杆菌培养阳性52例,对伤寒菌株的耐药谱及R 质粒进行研究(观察组)。并与1987～1990年随机抽出50例伤寒杆菌培养阳性病人作对比(对照组),现总结如下。材料与方法一、临床资料52例中男29例,女23例,年龄最小8岁,最大60岁,平均30.9岁。对照组性别、年龄构成基本相似。对照组35例采用氯霉素加SMZ—TMP,或氨苄青霉素、庆大霉素、氧哌嗪青霉素等药治疗;15例为氟哌酸加丁胺卡那霉素。观察组选用氟嗪酸加丁胺卡那霉素治疗。     

在新分离的稀有放线菌群体中检测线型染色体、质粒和噬菌体

稀有放线菌属于革兰阳性细菌，具有重要的应用价值。目前对绝大多数稀有放线菌还没有合适的遗传操作系统。本文报道利用脉冲电泳技术和碱变性方法，对土壤中新分离的约200株稀有放线菌的遗传物质进行了检测。结果显示，除约20个菌株的染色体可能为环型结构外，其余染色体为线型结构。在检测到的染色体外遗传因子中，包括在诺卡菌属菌株中检测到1个线型质粒、4个环型质粒和1个噬菌体，此外，在链孢囊菌属中首次检测到1个质粒。这些遗传因子的发现，为发展稀有放线菌类群的遗传操作体系提供了基础。     

庆大霉素耐药基因的分子克隆

利用基因工程技术,从一株流行的致病性大肠杆菌的65Md的可传递的多重耐药质粒pEFM2出发,克隆获得一重组质粒pBY101,它仅表达庆大霉素和四环素抗性,其庆大霉素耐药基因在8.9kb的Pst Ⅰ片段上。再由EcoRⅠ酶解pBY101,亚克隆获得一重组质粒pBY 102,其庆大霉素耐药基因在4.9kb的Pst Ⅰ-EcoRⅠ片段上。经氨基糖苷类抗生素底物谱分析和用生物素标记的2″-O-腺苷转移酶[ANT(2″)]基因探针,以Southern印迹杂交法检测,证明庆大霉素耐药基因不是编码ANT(2″)的。     

应对耐药菌的新方法—噬菌体制剂

噬菌体发现之初,便被前苏联和东欧医学界用来治疗细菌感染。但是,随着抗生素时代的到来,人们慢慢忽略了对噬菌体在抗感染领域的深入研究。近年来由于耐药菌的频频出现,抗生素在抗感染领域面临前所未有的挑战,许多实验室开始把目光投向噬菌体制剂。本文回顾了噬菌体机制用于抗感染治疗的历史,介绍了目前噬菌体制剂的主要种类——活体噬菌体制剂和噬菌体裂解酶制剂的生物学特性、在抗感染领域的优劣势、应用情况和研究进展。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌临床分离株中质粒介导的喹诺酮类耐药基因检测

目的：探讨质粒介导的喹诺酮类耐药（PMQR）基因在碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）临床分离株中的分布情况。方法：收集CRKP29株,聚合酶链反应（PCR）扩增并确定产物基因型。结果：CRKP中PMQR基因检出率为48．3％（14／29）,其中qnrB5株,包括qnrB21株、qnrB43株、qnrB101株;qnrS 5株,均为qnrS1;1株同时携带qnrS1和qnrB4;有3株携带aac（6′）-Ib-cr基因。所有PMQR基因阳性菌株均同时携带β-内酰胺酶基因,其中8株同时携带碳青霉烯酶基因,占57．1％（8／14）,以blaKPC-2（4／14）及blaNDM-1（3／14）为主。结论：PMQR基因在临床分离的CRKP中较为普遍,以qnr基因为主,且qnr阳性菌株碳青霉烯酶基因携带率较高,均为多重耐药株。     

庆大霉素产生菌绛红色小单孢噬菌体防治办法的评价

庆大霉素产生菌绛红色小单孢噬菌体防治办法的评价张菊英（福州抗生素总厂，福州３５０００２）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌａｐｐｒｏａｃｈｅｓｏｆｔｈｅｐｈａｇｅｏｆｇｅｎｔａｍｉｃｉｎｐｒｏｄｕｃｅｒ，...     

多重耐药菌中质粒介导喹诺酮耐药基因的检测和分析

目的分析广州医学院第一附属医院临床分离的60株多重耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮耐药基因存在状况。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗生素的药物敏感性,选择多重耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作为研究对象,用多重PCR法进行质粒介导的喹诺酮耐药基因的检测和分析。结果检测出耐药基因qnrA型2株,qnrB型耐药基因15株,aac（6’）-Ib基因9株,其中aac（6’）-Ib—cr型耐药基因5株。其中有1株肺炎克雷伯菌检测到同时含有qnrA和aac（6’）-Ib—cr基因;还有3株肺炎克雷伯菌检测到同时含有qnrB和aac（6’）-Ib—cr基因。未检测到qnrC、qnrD、qnrS、qepA型的耐药基因。结论临床分离的多重耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌含有多种质粒介导的喹诺酮耐药基因,应引起临床的重视。     

解决细菌耐药问题新探索--噬菌体抗菌策略

随着抗菌药物广泛大量地使用及滥用,且细菌对抗菌药物产生耐药性,而且耐药程度愈演愈烈,其中细菌同时对多种结构各异的抗菌药物的耐药性———多重耐药性,尤为焦虑。如何面对耐药性的挑战成为非常现实和严肃的问题,从噬菌体病毒开发新抗菌药物的策略为此带来希望。     

国产庆大霉素链球体外释放研究

本实验结果证明,庆大霉素链珠用EB-Ⅱ和GN-515作基质比用骨水泥作基质为优.含成孔剂40%的链珠释放庆大霉素量较其他低含成孔剂量及无成孔剂链珠为高.以EB-Ⅱ为基质和43%RT_3为成孔剂的含庆大霉素5%之链珠释放总量大,释放率高,释放时间长,浸泡液中庆大霉素浓度下降缓慢.建议该链珠可于临床试用.     

螺旋霉素链霉菌噬菌体的分离和鉴定

从螺旋霉素的异常发酵液及土壤样品中分离到19株螺旋霉素链霉素噬菌体,对每一噬菌体进行了纯化,根据血清中和反应,这些噬菌体可分为4种血清型(P_(11)型、1010型、1012型及4031型)。P_(11)型和1012型噬斑小而清晰,4031型和1010型大而不清晰。观察了4种血清型的代表性噬菌体形态和它们的DNA的限制性内切酶酶切片断长度,多态性。     

磁场在庆大霉素菌种选育中的应用

本文报道磁场对庆大霉素产生菌降红小单孢菌GB_5的孢子、发芽孢子和原生质体的磁致诱变效应。在所选用的九种磁场剂量处理后,三种状态的菌种的死亡率均在60％以上,其中原生质体的死亡率达96％以上,正变率12％以上,最高达49.1％,变异率在21％以上,摇瓶初筛获得抗生素产量提高10％以上的菌种占过筛菌株数的6.1％,其中产量提高30％以上的占1.5％.     

用荧光偏振免疫法和微生物法比较研究庆大霉素在人体内的药代动力学

本文用新建立的荧光偏振免疫法(FPIA)和微生物法(MA)平行测定90例临床庆大霉素血清浓度,线性回归分析发现两种方法有较高的相关性(r=0.98)。但用MA法测得庆大霉素的平均浓度明显高于FPIA的平均浓度。5例病人庆大霉素药动学研究表明,两种方法所得血浓数据经计算机拟合符合单室模型,动力学参数Vd,k,T_(1/2)和CL及由此推算的给药剂量均无显著差异(p>0.05)。     

庆大霉素在小鼠的时辰毒性及时辰药代动力学

本文研究了庆大霉素对小鼠的毒性及其药代动力学的昼夜节律性变化。雄性ICR小鼠自实验前两周置于标准的明期和暗期下饲养,自由进食进水。毒性实验剂量为庆大霉素290mg/kg,Sc:药代动力学实验剂量为45 mg/kg,Sc。结果表明,庆大霉素毒性及药代动力学因用药时间不同呈明显的昼夜节律性变化。明期中点用药毒性最大,血药浓度最高,AUC值最大:暗期用药毒性小,血药浓度低,AUC值小。提示了庆大霉素毒性的昼夜节律变化与其药代动力学的的昼夜节律变化有密切关系。     

吸水链霉菌应城变种质粒的分离研究

采用蔗糖浓度为13％的YEME培养基培养吸水链霉菌应城变种10-22菌株,能获得生长量较高且分散状况良好的菌丝体。在探索链霉菌质粒DNA的分离方法时,以T.Kieser的方法为基础,提高国产溶菌酶的用量和延长酶解时间,首次从吸水链霉菌应城变种中分离到一种质粒DNA分子,将它命名为pSH_(47)。同时,通过pock形成能力的检测。进一步证实这个质粒的存在。吸水链霉菌应城变种10-22菌株经吖啶橙处理后获得的部分或全部丧失5102抗生素生物合成能力的几个阻遏突变株的质粒检测结果表明,它们都有与10-22菌株相同的质粒带。     

庆大霉素突变菌株与生产菌株混种发酵提高庆大霉素产品质量

庆大霉素生产菌株经LiC1、~(60)Co诱变处理,筛选到突变株No.ZF-108,HPLC测定表明C_1组份达70％。将该菌株与庆大霉素生产菌株No.12-1按不同比例在一级罐或三级罐作混合发酵,可提高庆大霉素成品中C_1含量。混合发酵143罐共32批产品全部符合中国药典1990版标准。     

细胞分裂素产生菌质粒DNA的分离和鉴定

本文首次报道从细胞分裂素产生菌泾阳链霉菌A_3中分离得到两种质粒,并经电镜观察得到了证实。琼脂糖凝胶电泳分析,表明质粒DNA的分子量分别为4.8×10~6道尔顿(7.3kb)和3.4×10~6道尔顿(5.7kb),并命名为pSJ_1、和pSJ_2。快中子消除质粒处理,得到的无质粒菌株(B_(11))与原株(A_3)比较,两者在培养特征方面没有差异,但在产生细胞分裂素及硝酸盐还原酶方面存在差异。菌株B_(11)的细胞分裂素产量和酶活性高于和显著高于原株A_3。结果表明,质粒pSJ_1和pSJ_2可能携带调控细胞分裂素生物合成及硝酸盐还原酶的某些基因。