PLC-γ1对血小板生长因子介导的细胞增殖的影响

目的 观察磷酸脂酶C-γ1（PLC-γ1）对血小板生长因子(PDGF)介导的细胞增殖的影响。方法 应用无内源性PLC-γ1小鼠成纤维细胞株,观察在PDGF作用下细胞增殖情况（包括细胞内钙离子动员及DNA合成）,并与正常细胞株对照。结果 缺失PLC-γ1的细胞与正常细胞DNA合成显著增强,均出现细胞内钙动员;但PLC-γ1-/-细胞DNA合成时间显著延长,钙流较PLC-γ1+/+值小且峰值出现较晚(P<0.01)。结论 PLC-γ1在PDGF作用下成纤维细胞的增殖过程中有重要作用,当其缺乏时功能可被其他途径代偿。     

磷酸酯酶C—γ1对血小板生长因子介导的细胞迁移的影响

目的 生长因子诱导产生的细胞内信号分子参与调节细胞的增殖分化,磷酸脂酶C－γ1（PLC－γ1）被认为是连接生长因子和其下游信号传递分子之间的主要桥梁,但它在细胞分裂信号传递中是否必需。目前说法不一。本研究旨在阐明PLC－γ1在细胞分裂信号传导中的作用。方法 应用无内源性PLC－γ1小鼠成纤维细胞株,观察在血小板生长因子作用下细胞的迁移情况。结果 缺失PLC－γ1的细胞与正常细胞无显著差异。结论 当PLC－γ1缺乏时,在血小板生长因子作用下,成纤维细胞的迁移过程中其功能可被代偿。     

磷酸脂酶C-γ1对血小板生长因子介导的细胞迁移的影响

目的生长因子诱导产生的细胞内信号分子参与调节细胞的增殖分化,磷酸脂酶Ｃ－γ１（ＰＬＣ－γ１）被认为是连接生 长因子和其下游信号传递分子之间的主要桥梁,但它在细胞分裂信号传递中是否必需,目前说法不一。本研究旨在阐明 ＰＬＣ－γ１在细胞分裂信号传导中的作用。方法应用无内源性ＰＬＣ－γ１小鼠成纤维细胞株,观察在血小板生长因子作用 下细胞的迁移情况。结果缺失ＰＬＣ－γ１的细胞与正常细胞无显著差异。结论　当ＰＬＣ－γ１缺乏时,在血小板生长因子作 用下,成纤维细胞的迁移过程中其功能可被代偿。     

磷脂酶C—γ1和γ2在PDGF促成纤维细胞克隆形成中的不同作用

目的 探讨磷酯酶Cγ1和γ2（PLC－γ1和γ2）在血小板源性生长因子（PDGF）诱导小鼠成纤维细胞克隆形成信号传导中的作用。方法 将全长PLCγ2cDNA亚克隆进真核细胞表达载体，转染小鼠成纤维细胞株PLC－γ1－／－和PLC－γ1^ / ，使PLC－γ2在成纤维细胞中表达，同时以未插入目的基因的空载体转染这两种细胞作为实验对照。用有限稀释法随机挑选几个单细胞克隆，经Western Blotting鉴定其PLC－γ2表达量，转染细胞及其相应对照被用来测量克隆形成能力。结果 PLC－γ2可在PDGF的作用下活化，对克隆形成有显的正调控作用，而PLC－γ1基因对克隆形成无任何影响。并且γ2利于细胞低密度时的存活，因而，PLC－γ2可显促进低密度细胞的克隆形成,γ1可能有相反作用。结论 PLC－γ1和γ2在PDGF诱导小鼠成纤维细胞克隆形成中的有不同作用。     

血小板衍化生长因子对离体牙周膜细胞增殖的影响

目的：探讨血小板衍化生长因子-β（Platelet-derived growth factor-β，PDGF-β）对离体人牙周膜细胞（periodontal ligament cells,PDLCs)增殖的影响。方法：体外培养人PDLCs，与不同浓度的的PDGF-β作用，用噻唑蓝（MTT）比色法进行观察。结果：PDGF-β作用后PDLCs的增殖较对照组有明显的升高，而且具有浓度效应。结论：PDGF-β可促进离体人PDLCs的增殖。     

转化生长因子—β对骺软骨细胞增殖和PCNA表达的影响

采用１４天鸡胚股骨无血清培养、５－溴尿嘧啶核苷（ＢｒｄＵ）掺入标记和细胞核增殖抗原（ＰＣＮＡ）免疫染色方法,研究转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）对骺软骨细胞增殖的作用。结果显示：ＢｒｄＵ阳性软骨细胞数目与分布都位于ＴＧＦ－β作用剂量和时间密切相关,ＴＧＦ－β可以促进骺板成熟区和肥大区软骨细胞增殖,与ＢｒｄＵ标记相比,ＰＣＮＡ阳性细胞分布区域和数目远多于前者,根据染色情况可以将ＰＣＮＡ阳性细胞分为Ｓ期和Ｓ期细胞两种。结论：ＴＧＦ－β参与和调节骺软骨各部位软骨细胞增殖活动,并能诱导非增殖软骨细胞表达ＰＣＮＡ,用ＰＣＮＡ作为细胞增殖的指标是不适宜的。     

IL—1α诱导牛脑微血管内皮细胞释放血小板衍生性生长因子

目的；研究白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）诱导牛脑微血管 细胞（ＢＣＭＥＣ０释放血小板衍生性生长因子（ＰＤＧＦ），以及药物地由之引起的牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＭＳＭＣ）增殖拮抗作用。方法；体外培养ＢＣＭＥＣ和ＢＣＭＳＭＣ，结晶紫染色法测定细胞增殖。结果；ＩＬ－１α不能直接促进ＢＣＭＳＭＣ的增殖；但经ＩＬ－１α刺激的ＢＣＭＥＣ培养上清能显著地促进ＢＣＭＳＭＣ的增殖。这种增殖作用与ＩＬ－１α剂量呈正相     

脂蛋白脂酶对VLDV致肾小球系膜细胞增殖和血小板原性生长因子-A mRNA表达影响

目的 :探讨脂蛋白脂酶 (L PL)对极低密度脂蛋白 (VL DL)引起的肾小球系膜细胞增殖和细胞因子血小板原性生长因子 (PDGF) - A m RNA表达的影响。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定不同浓度 L PL对 VL DL引起的肾小球系膜细胞的影响 ;逆转录 - PCR伴还原磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH)同管共扩增方法检测 L PL 对VL DL引起的肾小球系膜细胞 PDGF- A m RNA表达的影响。结果 :(1) VL DL对系膜细胞的作用存在一定的剂量—效应的线性增殖关系 (r=0 .989,P<0 .0 1) ;L PL 组与不加入组相比有统计学意义 (P<0 .0 1) ,在 L PL 浓度为 3μg·ml- 1 对系膜细胞的增殖作用较其它浓度显著 ;VL DL 与 L PL 的交互作用存在 (P<0 .0 1)且呈协同关系。(2 ) VL DL 组、L PL 组及 VL DL L PL 组系膜细胞的 PDGF- A m RNA表达均高于对照组 (P<0 .0 1) ,与对照组相比分别为 1.4倍、1.7倍和 2 .5 3倍。 VL DL与 L PL的交互作用存在 (P<0 .0 1) ,VL DL增加系膜细胞的 PDGF- A m RNA表达可因L PL 的存在而增强约 5倍。结论 :L PL能增强 VL DL 引起的系膜细胞增殖及细胞因子 PDGF- A m RNA的表达     

IGF—1在成骨样细胞增殖中的作用及与钾离子通道的关系

目的：研究胰岛素样生长因子－1（IGF－1）促大鼠成骨样肉瘤细胞（UMR106）增殖作用及钾离子通道活动的关系。方法：采用磺基罗丹明（SRB）染色法观察细胞增殖并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用3H－TdR掺入测定DNA合成的改变。结果：IGF－1可以明显地促进UMR106细胞的增殖，且使3H－TdR掺入率增加93．57％，在含有生长因子IGF－1（10^-8M)的培养液中培养12h后，钾通道电流比对照有明显增加，而且用钾通道阻断剂后，3H－TdR掺入率下降。结论：IGF－1可促进大鼠成骨样肉瘤的DNA合成和细胞增殖，且细胞膜钾通道的活动与此促增殖活动密切相关。     

血小板衍生生长因子对缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖作用的研究近况

肺血管结构改建是缺氧性肺动脉高压(PHT)形成的重要基础,主要表现形式是中膜平滑肌的增殖及迁移,其中心环节是平滑肌细胞的增殖,而平滑肌细胞的增殖依赖于多种生长因子的作用,尤其是血小板衍生生长因子(PDGF).[1]本文就PDGF在缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用,综述如下.     

IL－1α诱导牛脑微血管内皮细胞释放血小板衍生性生长因子

目的：研究白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）诱导牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ）释放血小板衍生性生长因子（ＰＤＧＦ），以及药物对由之引起的牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＭＳＭＣ）增殖的拮抗作用。方法：体外培养ＢＣＭＥＣ和ＢＣＭＳＭＣ，结晶紫染色法测定细胞增殖。结果：ＩＬ－１α不能直接促进ＢＣＭＳＭＣ的增殖；但经ＩＬ－１α刺激的ＢＣＭＥＣ培养上清能显著地促进ＢＣＭＳＭＣ的增殖。这种增殖作用与ＩＬ－１α剂量呈正相关，并且可被抗ＰＤＧＦ抗体中和。欧芹素乙（Ｉｍｐ），异欧芹素乙（ｉｓｏ－Ｉｍｐ），６－（α，α－ｐｈｅｎｙ－ｌａｃｅｔｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ－５－ｍｅｔｈｙｌ－４，５－ｄｉｈｙｄｒｏ－３（２Ｈ）－ｐｙｒｉｄａｚｉｎｏｎｅ（ＰＭＤＰ）不影响ＩＬ－１α诱导ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ，但对ＰＤＧＦ促ＢＣＭＳＭＣ增殖呈剂量依赖的拮抗。结论：ＩＬ－１α促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ。ＩＬ－１α对ＢＣＭＳＭＣ增殖的促进作用需经ＰＤＧＦ等生长因子的介导。Ｉｍｐ，ｉｓｏ－Ｉｍｐ，ＰＭＤＰ拮抗ＰＤＧＦ引起的ＢＣＭＳＭＣ增殖。     

苦参碱抑制血小板衍生生长因子诱导的小鼠皮肤成纤维细胞增殖

目的：探讨苦参碱对血小板衍生生长因子－ＢＢ（ＰＤＧＦ－ＢＢ）诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响。方法：取新生ＩＣＲ小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞。用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法和细胞计数法分析细胞增殖情况。结果：５０￣２５０μｇ／ｍｌ的苦参碱能剂量依赖地降低血清刺激的细胞增殖,撤除苦参碱后抑制作用能完全逆转。苦参碱（１００￣５００μｇ／ｍｌ）亦能剂量依赖地抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ诱导的细胞增殖。结论：苦参碱显示了     

血小板生长因子对肌醇磷酸代谢的影响

血小板生长因子（ＰＤＧＦ）能明显地影响细胞肌醇磷酸代谢，在亲代ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞（简称ＮＩＨ３Ｔ３细胞）和多瘤病毒ｍｉｄｄｌｅＴ抗原转化的ＮＩＨ３Ｔ３成纤维（简称ＭＴ３细胞）中，表现出不同的应答。在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中，ＰＤＧＦ刺激１ｍｉｎ时，表现为肌醇－１、４、５－三磷酸［Ｉｎｏｓｉｔｏｌ１，４，５－Ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ；Ｉｎｓ（１，４，５）Ｐ３］明显地增加并达到峰值，持续时间的３￣４ｍ     

磷脂酶C—γ1在人胚组织中的表达

目的 研究磷脂酶C－γ1（PLC－γ1）在人胚组织中的表达情况。方法 收集人胚组织（包括软骨、软骨膜、骨骼肌）并行石蜡包埋及切片,采用免疫细胞化学ABC染色法观察人胚组织细胞中PLC－γ1的表达情况。结果 PLC－γ1在这几种细胞中均有较强的表达,主要位于胞质中。结论 PLC－γ1相关的细胞内信号传递途径对于人早期胚胎细胞的发育、增殖具有重要的生物学意义。     

血小板衍生生长因子-BB激活Rac1对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与迁移的影响

目的 探讨Rac1活化在血小板衍生生长因子(PDGF-BB)刺激引起的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与迁移中的作用.方法 贴块法分离培养主动脉平滑肌细胞,CCK8法和Transwell小室检测Rac1抑制剂NSC23766和Rac1siRNA对PDGF-BB诱导的平滑肌细胞增殖和迁移的影响.GST-pulldown法和免疫印迹(Western印迹)检测PDGF-BB对Rac1活性和pi-JNK表达的时间特性以及NSC23766和Rac1 siRNA对Rac1活性和pi-JNK表达的影响.结果 PDGF-BB(50 μg/L)显著促进了大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖和迁移.在给予不同浓度NSC23766( 25、50、100 μg/L)以及Rac1 siRNA( 50 nmol/L)后,其增殖和迁移显著受到了抑制.PDGF-BB刺激后Rac1活性和pi-JNK逐渐升高,并分别在5 min和15 min达到最高峰后下降.给予NSC23766和Rac1 siRNA处理后Rac1活性(5 min)和pi-JNK( 15 min)表达均明显受到了抑制.结论 Rac1活性影响JNK磷酸化并在调节PDGF-BB诱导的主动脉平滑肌细胞增殖与迁移中起着重要的作用.     

血小板衍生生长因子-BB和转化生长因子-β对人牙周膜细胞增殖的影响

目的探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和转化生长因子-β(TGF-β)对人牙周膜(PDL)细胞增殖的影响。方法体外培养人PDL细胞,与不同浓度的PDGF-BB、TGF-β或PDGF-BB+TGF-β作用,用噻唑盐(MTT)法观察PDL细胞增殖的情况。结果PDGF-BB和TGF-β均明显促进PDL细胞增殖,在1～50ng/ml和5d范围内,呈浓度-时间依赖关系,PDGF-BB最佳效应时间为3d,最佳效应浓度为10ng/ml,其增殖比对照组增加了256.1%(P<0.001),TGF-β最佳效应时间为4d,最佳效应浓度为5ng/ml,比对照组增加了187.7%(P<0.01),在时间上TGF-β的促增殖作用晚于PDGF-BB。PDGF-BB与TGF-β联合应用时,二者有协同作用,可非常显著地促进PDL细胞增殖,其最大效应作用发生在用药后3d,此时与对照组相比增加了326.9%(P<0.001)。结论PDGF-BB、TGF-β可促进人PDL细胞的增殖,二者联合应用有协同效应。     

转化生长因子-β1对人眼眶成纤维细胞增殖的影响

目的：观察转化生长因子β1(TGF—β1)对人眼眶成纤维细胞(orbital fibroblasts．OFs)增殖的影响．探讨增殖性玻璃体视网膜病变(proljferative vitreoretinopathy．PVR)的发病机制。方法：OFs体外培养，用不同浓度TGF—β1(0.1、1.0、5．0、10．0、100．0μg／L)对细胞进行处理。计算细胞的数量，绘制细胞生长曲线；椎虫蓝染色计算活细胞比例、MTT比色法测定吸光度(A)值：流式细胞仪(FCM)检测细胞周期分布。结果：0．1、1．0、5、0、10、0μLg／L的TGF-β1作用后OFs生长曲线上移，活细胞数增加，A值上升，处于增殖期(S G2)的细胞比例增多。100.0μg／L的TGF-β1对OFs作用相反。结论：TGF-β1对人眼眶成纤维细胞增殖有双相调节性．其不同作用的发挥依赖TGF—β1的浓度，TGF—β1的促成纤维细胞的增殖作用可能诱发PVR。     

血小板衍生生长因子诱导人血管平滑肌细胞增殖时钙调素的变化

目的:观察血小板衍生生长因子(PDGF)对培养的人血管平滑肌细胞增殖及钙调素含量变化的作用.方法:应用3H-TdR掺入法和磷酸二酯酶法,观察不同浓度(1、10、20、30、40 ng/ml)PDGF-BB对培养的人血管平滑肌细胞DNA合成和钙调素含量变化的影响及其时间效应.结果:不同浓度PDGF-BB作用后,处于静止状态的人血管平滑肌细胞DNA的合成增加,并呈现明显的浓度依赖关系,在40 ng/ml浓度时DNA的合成达到高峰(P＜0.01).平滑肌细胞在进入细胞增殖周期后,细胞内钙调素含量逐渐增加,在9 h时出现一个短暂的高峰,随后逐渐下降;不同浓度PDGF-BB作用后,钙调素含量增加,并呈现出明显的浓度依赖关系,30 ng/ml浓度时作用最为显著(P＜0.01).结论:PDGF可促进培养的人血管平滑肌细胞增殖,该作用可能与增加钙调素含量有关.