大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用

目的　观察不同胎龄大鼠小脑提取液 (cerebellum extracts,CE)对体外培养小脑神经细胞的影响。方法　制备不同蛋白浓度的 14、16、18、2 0 d胎鼠 (E14、E16、E18、E2 0 )及新生 1d鼠 (P1) CE,加入原代培养的E18胎鼠小脑神经细胞中 ,2 4h后以微量快速自动比色法检测细胞活性。结果　实验组各胎龄 CE均能促进培养小脑神经元的存活 ,并有蛋白浓度依赖关系 ,各胎龄都有各自不同的最适浓度 ,E16和 E18CE显示了更强的神经营养活性 ,与对照组及其他实验组相比差异有极显著性 (P<0 .0 0 1)。结论　 CE对培养小脑细胞具有高度神经营养活性。     

银杏内酯B对胚胎大鼠中脑神经细胞的作用研究

目的:研究银杏内酯B(GBE)促进和保护胚胎大鼠中脑神经细胞的作用。方法:采用14d胚胎大鼠中脑神经细胞原代培养,实验分为7组,即正常对照、GBE对照(50mg·L-1)、海人藻酸(KA,100 μmo·lL-1)、神经生长因子(NGF,50mg·L-1+KA100 μmol·L-1)和GBE高、中、低剂量(100、50、25mg·L-1+KA100 μmol·L-1)组。分别培养胚胎大鼠中脑神经细胞10d,NSE免疫组化法染色鉴定神经元;硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量;改良的硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物岐化酶(SOD)活性。结果:GBE高、中、低剂量组细胞生长、分化程度明显好于KA组。与正常对照组比较,KA组SOD活性显著减弱,MDA、NO含量显著增加;与KA组比较,GBE高、中、低剂量组SOD活性显著增强,MDA、NO含量显著减少。结论:GBE可促进中脑神经细胞生长与分化,对抗KA毒性作用,其机制可能与GBE减轻细胞脂质过氧化、抗自由基作用有关。     

用大鼠体外胚胎培养法检测蓝籽类叶牡丹中具潜在致畸作用的生物碱

蓝籽类叶牡丹 Caulophyllum thalictroi-des(L.)Michx.的根茎用于某些食品补充剂,但该植物的安全性和有效性未曾进行广泛研究。鉴于含该植物的食品补充剂为育龄妇女所食用,而其所含的臭豆碱可能具有致畸作用,因此作者对具有潜在致畸作用的生物碱进行了指导分离。该植物根茎的甲醇提取物用乙酸乙酯提取,所得提取物再用正丁醇提取。乙酸乙酯提取物在浓度为250μg/mL 时可使大鼠胚胎     

神经细胞微团法检测化学物的致畸作用

神经细胞微团法检测化学物的致畸作用席小平，李建国，郭琳，贾继峰山西省卫生防疫站（太原０３００１２）大鼠胚胎中脑神经细胞微团培养（简称微团法），这一体外测试系统筛选化学物的致畸作用，国内外报道其测试结果可靠性达９０％［１］。我们对已知致畸物维生素Ａ（Ｖ...     

硫酸铝钾对大鼠胚胎中脑神经细胞相对蛋白质含量的影响

目的探讨硫酸铝钾对大鼠胚胎中脑神经细胞的影响。方法利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养,从细胞形态学角度观察不同浓度硫酸铝钾对细胞生长的影响;同时测定蛋白质含量并与对照组进行比较。结果硫酸铝钾浓度为40~100μg/mL时,而且出现细胞脱落、漂浮、细胞明显崩解、细胞碎片等现象,同时相对蛋白质含量有明显降低。结论硫酸铝钾能抑制胎鼠中脑神经细胞的分化,可能与其蛋白质合成有关。     

碱性成纤维生长因子对体外培养鼠胚胎中脑神经细胞缺氧反应的影响

目的:观察不同浓度碱性成纤维生长因子(bFGF)对胚胎中脑神经细胞缺氧的保护作用.方法:14 d的大鼠胚胎中脑取材,分离、消化后作原代培养,分为对照组,单独缺氧组,不同浓度的(1.0,5.0,10.0,50.0,100.0 ng/mL)bFGF+缺氧组;采用羟胺比色法对超氧化物歧化酶(SOD)活性进行测定,采用硫代巴比妥酸比色法进行丙二醛(MDA)测定;采用考马斯亮蓝法进行相对蛋白质含量测定,同时进行细胞形态学观察.结果:单独缺氧组中脑神经细胞MDA含量升高,SOD活性、相埘蛋白质含量及细胞集落存活率下降,与对照组比较(P<0.01),并出现细胞形态学损伤;5.0～50.0 ng/mL bFGF+缺氧组中脑神经细胞MDA含量下降,SOD活性、相对蛋白质含量、细胞集落存活率升高,与单独缺氧组比较(P<0.01),细胞无明显形态学损伤;当bFGF剂量为1.0 ng/mL和100 ng/mL时神经细胞MDA含量、SOD活性、相对蛋白质含量及细胞集落存活率与单独缺氧组比较无明显改变(P>0.05),细胞有明显的形态学损伤.结论:适当的bFGF剂量能对胚胎中脑神经细胞缺氧损伤具有明显保护作用.     

葛花对大鼠胚胎致畸作用的观察

目的 观察葛花对SD大鼠胚胎的致畸作用.方法 受孕的雌性SD大鼠随机不分为低、中、高剂量组及对照组,称重并编号.大鼠受孕第7 ～16天,以葛花受试物灌胃,第20天处死,分析大鼠胚胎发育指标与胎仔发育指标,观察胎鼠外观和骨骼有无异常.结果 样品各剂量组孕鼠体重、体重增重、子宫连胎重与对照组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;样品各剂量组活胎率、死胎率、吸收胎率与对照组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;样品各剂量组胎仔胎盘重、体重、身长、尾长与对照组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;样品各剂量组胎仔外观畸形率、内脏畸形率、骨骼畸形率与对照组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 安全剂量的葛花对大鼠无母体毒性、胚胎毒性和致畸作用,人体每天葛花摄入量7.5g,属安全推荐量.     

银杏内酯B促进体外培养胚胎大鼠脊髓神经细胞生长发育的研究

目的探讨GB对体外培养的胚鼠脊髓神经元存活和生长发育的作用。方法胚胎大鼠脊髓神经细胞原代培养,相差显微镜下进行细胞计数和显微测量,观察GB对神经元存活和生长发育的作用。对培养7d细胞行NSE免疫组化染色,光镜下观察GB对NSE染色阳性神经元生长发育的影响。结果GB及NGF能够促进体外培养胚胎大鼠脊髓神经细胞及NSE染色阳性神经元的存活,促进其细胞及突起的生长。其促进脊髓神经细胞的存活、胞体及突起发育的作用与NGF一致,而其促进神经突起分化与生长的作用强于NGF。结论NGF和GB能促进培养大鼠发育期脊髓神经元存活、分化和生长,并且表现出各自作用的特异性。     

碱性成纤维细胞生长因子对培养大鼠胚胎脊髓神经细胞的作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对大鼠胚胎脊髓神经细胞的作用。方法在培养孕 18d的大鼠胚胎脊髓神经细胞中加入bFGF ,通过培养细胞并计数存活的脊髓神经细胞集落数 ,检测超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛的含量 ,并观察bFGF对脊髓神经细胞生长发育的影响。结果bFGF可促进脊髓神经细胞分化、增殖 ,SOD活力、丙二醛含量明显变化 ,脊髓神经细胞胞体较大、突起较长 ,培养 14d后脊髓神经细胞的数量也明显增高。结论bFGF能促进脊髓神经细胞生长发育 ,增加脊髓神经细胞的胞体和突起长度 ,增强脊髓神经细胞内SOD活力 ,降低丙二醛含量。     

利用小鼠全胚胎培养研究环磷酰胺致畸作用

本文应用小鼠全胚胎培养技术 ,通过妊娠 d8分别 ip5,1 0 ,1 5和 2 0 mg·kg-1环磷酰胺 ( CP) ,研究了该药对器官原基形成期胚胎的致畸作用 ,并对其致畸机理作了初步探索 .给药 4h后取胚胎进行培养 ,于 d 1 0 .5收获胚胎 ,测量其卵黄囊直径 ,头长及颅臀长并记录其大体形态的变化 .结果表明 ,1 5mg· kg-1组尾畸形率最高 ;2 0 mg· kg-1组生长迟缓率最高 .电镜观察所显示的细胞凋亡的形态学变化及 DNA琼脂糖凝胶电泳的结果均提示 CP致畸作用可能与其诱导的细胞凋亡有关 .     

体外试验检测二甲基呋喃酮的潜在致畸作用

体外试验检测二甲基呋喃酮的潜在致畸作用商瑞明，李袭丽，孙浩东天津医科大学卫生系毒理教研室（３０００７０）二甲基呋喃酮（ＨＤＭＦ）是食品和化妆品工业中广泛使用的一种香料。近几年陆续出现了关于ＨＤＭＦ可能具有致突变作用的报道［１，２］。我们用体外培养大鼠...     

褪黑素对苯妥英所致小鼠胚胎体外致畸效应的拮抗作用

采用体外着床后全胚培养模型研究苯妥英诱发的胚胎脂质过氧化和形态异常 ,确定褪黑素 (MT)的胚胎保护作用 .d 8.5的小鼠胚胎经苯妥英单独或与MT联合作用 4 8h后测定胚胎生长 ,形态发育 ,全胚蛋白质含量及脂质过氧化产物 .结果表明苯妥英导致胚胎生长发育迟滞并诱发脂质过氧化产物增高 4倍 .MT 1mmol·L- 1有轻微生长抑制作用 ,但可完全拮抗苯妥英诱发的脂质过氧化作用 ,并降低或完全拮抗苯妥英导致的形态生长发育异常 .表明MT有拮抗苯妥英胚胎致畸效应的作用     

碳铂对大鼠胚胎毒性与致畸作用的研究

碳铂(卡铂,Carboplatin)是继顺铂之后第二代铂类抗癌新药,它与顺铂有相似的抗癌谱,而消化道和肾毒性明显较低,国内自80年代末广泛用于临床。本文报道它的胚胎毒性和致畸作用。 材料与方法 碳铂,水溶性白色粉末,溶于6％葡萄糖溶液中使用,昆明贵金属研究所杨懿昆和熊惠周等同志合成和提供。动物用Wistar大鼠,体重223±229(X±SD)。方法参照Keller等[1～3]。雌雄2:     

体外培养新生大鼠海马神经细胞方法的探究

海马作为边缘系统的一个重要部分,主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节。是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。为了能在细胞水平和分子水平深入研究发育中海马神经细胞的生化、代谢、生理、药理及形态,建立海马神经细胞原代分散培养技术,越来越引起基础医学和临床医学的重视。     

环磷酰胺体外致畸作用的研究进展

环磷酰胺单独或联合用于肿瘤化疗，具有致癌、致畸和致突变作用，是典型的化学致畸原，在致畸和致癌研究中广泛用作阳性对照药。本文就其体外致畸作用及机理的研究近况作一概述。     

首乌提取液致畸作用检测

何首乌属蓼科植物,学名Polygonum mult-iflorum Thunb,是多年生草本植物,含有丰富的淀粉和人体必需的氨基酸及Fe、Zn、Ca等元素。首乌中卵磷酯含量为3.7％,羟基蒽醌衍生物为1.1％,均为二苯烯化合物,可降低血清胆固醇,     

重组人Neurturin对体外培养的胚胎大鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的建立大鼠胚胎多巴胺能神经元原代培养方法 ,研究重组人Neurturin(rhNTN)体外对黑质多巴胺能神经元的营养和保护作用。方法孕 14dWister大鼠 ,取出胎鼠中脑腹侧区组织 ,经胰酶消化、分散 ,接种至涂有多聚左旋赖氨酸基质的 6孔板中 ,37℃培养 2 4h后将培养液更换为B2 7无血清培养基 ,实验组同时加入纯化的rhNTN。继续培养 ,于培养第 7、14、2 1天直接观察及TH免疫细胞化学染色观察结果。结果培养 14、2 1d ,对照组中多数神经元已经萎缩、死亡 ,少量存活的多巴胺能神经元胞体小 ,突起细短 ;实验组中存活的多巴胺能神经元数目较多 ,神经元胞体粗壮 ,突起长 ,生长状况良好。结论rhNTN能促进中脑黑质多巴胺能神经元的存活及突起生长 ,对多巴胺能神经元具营养和保护作用。     

体外诱导人胚胎干细胞向神经细胞分化的研究进展

研究表明胚胎干细胞（embryonic stemcells,ES细胞）在体外可以发育分化出神经组织细胞,这对于了解神经发育的机制和研究神经组织退化性或脑组织损伤性疾病的治疗具有重要的意义。本文就胚胎干细胞分化为神经组织细胞的常用方法和机制做一综述。     

水蛭提取物对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的影响

目的 研究水蛭提取物对体外缺氧性新生大鼠大脑皮层神经细胞凋亡的作用.方法 采用NSE染色法,观察体外培养大脑皮层神经细胞的含量,TUNEL法检测神经细胞的凋亡率,Hochest 33342荧光染色法观察其对缺氧性神经细胞凋亡的保护作用,Bcl-2及Bax凋亡蛋白染色法对抗凋亡的可能机理进行研究.结果 新生大鼠大脑皮层神经细胞原代培养NSE染色的结果 显示其神经细胞含量为93.28%±1.18%;水蛭提取物给药组神经细胞凋亡率明显低于凋亡模型组;荧光染色除水蛭提取物组250 μg·ml<'-1>组外,各组神经细胞凋亡率明显降低;药物干预组表达Bcl-2的神经细胞较凋亡诱导模型组显著(P<0.01);水蛭提取物组中表达Bax的神经细胞较凋亡模型组略少,其1、2 mg·ml<'-1>组与模型组有显著性差异.结论 水蛭提取物具有明显的抗脑神经细胞凋亡的作用,抗凋亡机理与其对Bcl-2及Bax蛋白的调控有关.