脑胶质瘤p53基因突变与临床病理的关系

[目的]探讨p53突变在脑胶质瘤发生发展中的作用及其与临床病理特征的关系.[方法]利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)及LSAB免疫组化法对已确诊的48例脑胶质瘤进行p53基因突变以及蛋白表达的检测.[结果]48例胶质瘤中p53蛋白阳性表达率41.7%(20/48).在高级别(Ⅲ、Ⅳ级)中p53表达率明显高于低级别(Ⅱ级)的肿瘤,分别是63.2%、27.6%(P＜0.05).PCR-SSCP检测发现17例(35.4%)呈现p53基因突变,均位于5～8外显子,突变例数依次为7(41.2%)、1(5.9%)、4(23.5%)、5(29.4%).两种方法检测的符合率为89.6%(43/48).p53基因的突变与患者性别、年龄、肿瘤部位及大小无关.[结论]胶质瘤中p53突变多在第5～8外显子,p53基因突变在胶质瘤的发生进展中起重要作用.     

Ki-67、p53在脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨Ki-67和p53与脑胶质瘤分级的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例脑胶质瘤标本和10例正常脑组织标本Ki-67和p53的表达。结果 Ki-67和p53在正常脑组织与脑胶质瘤中的表达差异均有统计学意义（Ki-67：χ2=13.081,P=0.004;p53：χ2=11.667,P=0.009）;Ⅰ～Ⅱ级胶质细胞瘤与高度恶性Ⅲ～Ⅳ级胶质细胞瘤Ki-67和p53的表达差异均有统计学意义（Ki-67：χ2=12.589,P=0.006;p53：χ2=12.721,P=0.005）。结论脑胶质瘤中Ki-67及p53的阳性表达率与其恶性度相关,均可作为判断胶质瘤恶性程度的指标。     

p16基因的不同转染方法对脑胶质瘤细胞的不同作用

目的：探讨Ｐ１６基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用。方法：分别采用脂质体、磷酸钙＋ＤＭＳＯ休克转染的方法,观察外源野生型Ｐ１６基因短暂转染与长期稳定转染对人胶质瘤细胞系Ｕ２５１、ＳＷＯ的作用,并筛选阳性克隆。同时以空载体质粒ＰＣＤＮＡ３为对象。免疫组化、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测Ｐ１６基因表达,对转染后细胞生长、细胞周期及细胞凋亡的变化进行分析。结果：Ｐ１６基因短暂转染有明显的凋亡诱导作用;而Ｐ１６     

一氧化氮在脑胶质瘤血管生成中的作用及其与VEGF、p53的关系

目的　探讨一氧化氮在脑胶质瘤血管生成中的作用及其调控途径。方法　采用免疫组化法 ,检测 40例脑胶质瘤组织中iNOS的表达及iNOS阴性组和阳性组中Ⅷ因子、VEGF和突变型 p5 3蛋白的表达 ,分析其相互关系。 结果　胶质瘤中iNOS阳性表达率为 62 .5 % ,明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;iNOS阴性组微血管密度为 ( 2 2 .40± 12 .62 )个 /视野 ,iNOS阳性组为 ( 36.90±2 2 .2 1)个 /视野 ,两者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;iNOS阳性组VEGF阳性细胞数明显高于iNOS阴性组 (P <0 .0 1) ;p5 3突变组iN OS阳性表达率明显高于未突变组 (P <0 .0 5 ) ;p5 3蛋白与iNOS共同表达时 ,Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中两者共同表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ级 ,且有相关性。结论　NO参与了胶质瘤的血管生成 ,促进了肿瘤的生长和侵袭 ,NO在胶质瘤生物学行为中的作用与VEGF和p5 3蛋白密切相关 ,存在 1种相互控制的关系 ,VEGF和 p5 3蛋白对NO通路的调控为胶质瘤基因治疗提供了新的思路     

p53基因对胶质瘤细胞系U251生长抑制作用的研究

背景与目的：肿瘤抑制基因p53是调节多种与细胞周期、凋亡、DNA修复等有关基因表达的转录因子。p53基因在大约30％的胶质瘤中发生突变，在胶质瘤的发生和发展中起重要作用。本文主要探讨野生型p53基因过表达对脑胶质瘤细胞系U251细胞生长抑制的机制。方法：通过p53腺病毒表达载体pAdCMV-p53及空载体pAdCMV-lacZ分别感染U251细胞系，RT-PCR及Westem blot方法检测转染效率；并通过MTT检测生长抑制率、流式细胞仪检测细胞周期及TUNEL检测分析细胞凋亡等指标观察p53基因对U251细胞生长的影响。结果：MOI为100时，野生型p53基因的过表达可引起U251细胞G0、G1期阻滞、诱导U251细胞凋亡以及引起U251细胞生长抑制。结论：p53基因可以通过细胞周期G0、G1期阻滞及诱导细胞凋亡抑制胶质瘤细胞系U251的生长。     

p16基因对脑胶质瘤细胞作用的实验研究

目的 探索ｐ１６基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及ｐ１６基因在脑胶质瘤临床诊断、治疗中的应用前景。方法 采用脂质体转染的方法,将外源野生型ｐ１６基因导入胶质瘤细胞株Ｕ２５１、Ｃ６,筛选阳怀克隆。同时以空载体质粒ｐＣＤＮＡ３为对照,免疫组化检测ｐ１６基因表达,用ＭＴＴ 测定瘤细胞生长曲线及对转染的瘤细胞在裸鼠体内形成瘤块的变化进行分析。结果 转染ｐ１６基因的Ｕ２５１、Ｃ６细胞有外源ｐ１６基因的整合     

miR-339-5p通过靶向调节p53表达影响脑胶质瘤细胞的转移活性分析

目的 研究miR-339-5p对脑胶质瘤U87细胞的影响,并探讨相关机制。方法 将U87细胞分为4组：空白组、miR-339-5p mimic组、si-p53组、miR-339-5p mimic+si-p53组。通过MTT实验检测细胞增殖率;通过Transwell实验检测U87细胞侵袭能力;通过流式细胞术检测细胞凋亡率;通过荧光素酶报告基因实验检测miR-339-5p与p53的靶向关系;通过实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分析miR-339-5p和p53的表达水平。结果 miR-339-5p mimic组和miR-339-5p mimic+si-p53组细胞的miR-339-5p表达水平高于空白组和si-p53组,miR-339-5p mimic组细胞的p53 mRNA和蛋白水平均高于空白组、si-p53组和miR-339-5p mimic+si-p53组(P<0.05)。miR-339-5p mimic和p53-WT共转染的细胞荧光素酶活性明显增加(P<0.05)。miR-339-5p mimic组细胞增殖率和细胞侵袭数量低于空白组、si-p53组和miR-339-...     

Wip1基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性研究

背景与目的：野生型p53诱导的磷酸酶1（wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1）是一种新发现的癌基因,其在多种肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨Wip1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性。方法：收集52例原发胶质瘤及8例脑外伤或脑出血后行内减压术的正常脑组织标本,采用实时荧光定量PCR（real-time fluorogentic quantitative,RFQ-PCR）法检测脑胶质瘤组织中Wip1mRNA的表达,Western blot法检测Wip1蛋白的表达,DNA直接测序法检测脑胶质瘤组织中p53基因的突变情况。统计学分析不同脑胶质瘤病理分级及p53的突变状态间Wip1的表达水平的差异。结果：52例脑胶质瘤中22例（42.3%）发生p53基因突变。Wip1 mRNA在高级别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）中的表达水平较低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）及正常脑组织中的表达要略高,但差异无统计学意义（P〈0.05）。Wip1基因在无p53基因突变的胶质瘤组织中的表达水平较p53基因突变组要高,差异有统计学意义（P=0.009）。Wip1在野生型p53的胶质瘤中存在选择性的过表达,Wip1在胶质瘤中的过表达与病理分级无明显相关,而与p53的突变状态有关。结论：Wip1基因在脑胶质瘤中存在选择性地过表达,其过表达与p53基因野生型状态相关,可能是胶质瘤恶性进展中除p53基因突变外的另一关键作用因素。     

41例人脑胶质瘤组织中p53基因突变的研究

背景与目的:p53抑癌基因在细胞周期的调控、维持细胞基因组的完整性、诱导细胞分化和凋亡中起着重要作用。胶质瘤尤其是星形细胞肿瘤中,经常发生p53基因突变。本研究探讨人脑胶质瘤中p53突变及与胶质瘤发生发展的相关性。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerase chainreaction-single-strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)及DNA测序技术对41例不同类型人脑胶质瘤p53基因突变进行检测。结果:通过PCR-SSCP检测发现在41例人脑胶质瘤组织中有17例(41.5%)呈现p53基因的单链构象多态性改变,均位于5～8外显子,突变例数依次为7(41.2%)、1(5.9%)、4(23.5%)、5(29.4%)。Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中p53基因突变率明显高于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤(58.3%vs.17.6%,P<0.01);DNA序列分析显示,17例PCR-SSCP检测阳性的肿瘤p53基因相应外显子均存在基因点突变或缺失,其中错义突变13例,占76.5%;同义突变2例,占11.8%;移码突变2例,占11.8%;碱基突变以G→A或A→G最多,占55.6%。结论:胶质瘤中p53突变多发生于第5、8外显子,基因突变类型以错义突变为主,该基因的突变与胶质瘤的发生及恶性进展过程相关。     

脑胶质瘤组织p14^ARF、p53和p21^WAF1的表达及其意义

目的：探讨p14^ARF、p53和p21^WAF1蛋白在不同级别脑胶质瘤组织中的表达及其在胶质瘤发生、发展中的生物学意义。方法：应用免疫组化SP法检测Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤组织中p14^ARF、p53和p21^WAF1蛋白的表达,并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系。结果：Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中,p53蛋白的阳性表达率分别为28．00％（7／25）及60．87％（14／23）（P=0．022）,其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而升高,Spearman等级相关分析显示,p53的表达与胶质瘤分级呈正相关（P〈0．05）;p21^WAF1的阳性表达率分别为76．00％（19／25）及39．13％（9／23）（P=0．010）,P14^ARF的阳性表达率分别为76．00％（19／25）及34．78％（8／23）（P=0．004）,二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而降低,Spearman等级相关分析显示,p21^WAF1、p14^ARF的表达与胶质瘤分级呈负相关（P〈0．05）。结论 胶质瘤组织中,p53呈不同程度的过表达,且随胶质瘤恶性程度的增加而表达水平升高;p21^WAF1、p14^ARF随胶质瘤恶性程度的增加表达水平降低。突变型p53蛋白的过表达以及p21^WAF1、p14^ARF蛋白的低表达,可促进胶质瘤的发生、发展。     

p53基因与放射敏感性

肿瘤放射敏感性是肿瘤放射治疗成败的关键,如何提高肿瘤细胞的放射敏感性,一直是放射肿瘤学家和放射生物学家关注的问题。传统的预测肿瘤放射敏感性的方法是在整体或细胞水平上进行测算与估计,但未能给临床治疗和评价预后提供足够的信息。近年来,开始在基因水平上研究预测和提高肿瘤放射敏感性及评价预后的方法。目前的研究发现与放射敏感性相关的基因很多,一些癌基因如ras、myc、raf等及抗癌基因RB、p53基因等均与放射敏感相关。p53基因是经广泛研究的抗癌基因,该基因突变与50%人类肿瘤相关。现就p53基因对肿瘤放射敏感性的影响综述如下。…     

脑胶质瘤EGFR,p53蛋白和PCNA的表达与生物学行为

本文联合检测了５８例脑胶质瘤ＥＧＦＲ，ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的表达，结果表明，三者的表达率均随胶质瘤的级别升高而增高增强，高级别组与低级别组相比较，有显著差异，复发与未复方组相比较，有显著差异，提示肿瘤的生物学行为与表达的高低有关，肿瘤的生物学行为越差，表达率就超高，染色强，预后越差。     

X—刀治疗后脑胶质瘤中PCNA和p53基因表达的变化及意义

为了探讨经Ｘ－刀治疗后脑胶质瘤中ＰＣＮＡ和ｐ５３基因表达的变化，作者采用组织免疫组化ＡＢＣ法，检测３６例经Ｘ－刀治疗后脑胶质瘤和３０例对照组的标本，分别计算增殖细胞核抗原标记率（ＰＣＮＡ－ＬＩ）和ｐ５３基因表达标记率（ｐ５３－ＬＩ）。结果表明，治疗组的ＰＣＮＡ－ＬＩ明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），治疗组的ｐ５３－ＬＩ明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；治疗组和对照组内ＰＣＮＡ与ｐ５３基因的表达均呈显著性正相关关系。作者认为，ＰＣＮＡ和ｐ５３基因的表达可作为脑胶质瘤对放射敏感性和恶性程度的标志之一。     

脑胶质瘤 p16基因的纯合性缺失、高甲基化、突变及表达

目的：研究p16基因在脑胶质瘤中的纯合性缺失、高甲基化和突变等结构变化及其与表达之间的关系。方法：应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)和PCR甲基化银染分析技术（PCR-methylation assay with silver staining,PCR-MASS)对50例脑胶质瘤标本进行了p16基因纯合性缺失和甲基化检测；用PCR－SSCP和DNA测序技术进行了p16基因突变分析，用免疫组化检测了p16蛋白的表达。结果：50例脑胶质瘤中23例p16蛋白表达阳性，27例表达阴性，表达缺失率54％；9例（18％）纯合性缺失、7例（14％）高甲基化、2例（4％）突变。结论：p16基因在脑胶质瘤中有多种形式的结构异常，其结构的变化使p16蛋白表达障碍。p16基因纯合性缺失和高甲基化是基因失活的重要机制，在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。     

胶质瘤中p14ARF甲基化分析及其与p53表达的相关性研究

目的:探讨p14ARF甲基化与胶质瘤发生和预后的关系,及其与突变型p53 (mutant type p53,mtp53)蛋白表达的相关性.方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction, MSP)法检测33例胶质瘤和12例正常脑组织中p14ARF的甲基化状况.免疫组织化学法检测58例胶质瘤和12例正常脑组织中p14ARF和mtp53蛋白的表达.结果: 胶质瘤与正常脑组织中p14ARF甲基化率分别为39.4%(13/33)和0(0/12),2组间差异有统计学意义(P<0.01).低级别组胶质瘤甲基化率(6/15)与高级别组(7/18)间差异无统计学意义(P>0.05).p14ARF甲基化情况与患者预后无明显相关性.mtp53蛋白在胶质瘤和正常脑组织中的阳性率分别为56.9%(33/58)和8.3% (1/12),2组间比较,差异有统计学意义(P<0.01),其表达在肿瘤高级别组中明显高于低级别组(P<0.05).胶质瘤中mtp53蛋白表达与p14ARF甲基化呈负相关(P<0.05).结论:p14ARF甲基化与胶质瘤发生密切相关,为胶质瘤发生的早期事件,检测p14ARF甲基化情况可作为胶质瘤早期诊断的分子生物学指标.     

脑胶质瘤中p14ARF、MDM2及p53的表达及其意义

目的：探讨p14^ARF、MDM2和p53蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及p14^ARF-MDM2-p53通路在胶质瘤进展中的意义。方法：应用免疫组化SP法检测25例Ⅱ级和23例Ⅳ级胶质瘤组织中-p14^ARF、MDM2和-p53蛋白的表达，并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系。结果：Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中，MDM2蛋白的阳性表达率分别为24．00％（6／25）及56．52％（13／23）（P=0．021），p53蛋白的阳性表达率分别为28．00％（7／25）及60．87％（14／23）（P=0．022），二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而升高，Spearman等级相关分析显示，MDM2、p53的表达与胶质瘤分级呈正相关；p14^ARF的阳性表达率分别为76．00％（19／25）及34．78％（8／23）（P=0．004），其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而降低，Spearman等级相关分析显示，p14^ARF的表达与胶质瘤分级呈负相关（P〈0．05）。结论：脑胶质瘤组织中，MDM2和p53均呈不同程度的过度表达，且随恶性程度的增加表达水平增高；而p14^ARF随恶性程度的增加而表达水平降低。MDM2扩增、p53突变及p14^ARF蛋白低表达均与胶质瘤的进展有关。     

白血病p53基因测序临床研究

目的：通过Ｐ５３基因测序，了解其与白血病的发展，治疗及转归的关系，方法：用聚合酶链式反应和双链直接测序方法，分析Ｐ５３基因外显子５、６、７、８，共检测急性白血病３２例，慢性白血病３１例，结果：急性白血病３２例中５例（１５．６２％）Ｐ５３基因突变，突变点分别在密码子２２６ＧＧＣ→ＧＴＣ，２３７ＡＴＧ→ＡＴＴ，２４７ＡＡＣ→ＡＧＣ，２８５ＧＡＣ→ＧＧＧ〈２５９ＧＡＣ→ＧＴＣ等五个点。慢性白血病３１例中     

脑胶质瘤p15基因缺失及5‘CPG岛甲基化研究

目的 探讨ｐ１５基因变异及其与脑胶质瘤的发生、恶性进展的关系。方法 利用ＰＣＲ和ＰＣＲ－ｂｓｅｄ甲基化检测技术检测了５６例脑胶质瘤中ｐ１５基因外显子１缺失及５’ＣＰＧ岛甲基化情况。结果 ４３例高级别的脑胶质瘤中，１４例发生了ｐ１５基因缺失（３２．６％），而１３例低级别的脑胶质瘤中无一例发生ｐ１５基因缺失，差异具有显著性（Ｐ〈０．０５）。１例低级别的脑胶质瘤、３例高级别的脑胶质瘤发生了ｐ１５基因５’ＣＰＧ岛甲基化。结论 ｐ１５基因异常可能参与脑胶质瘤的发生、恶性进展。基因纯合缺失是脑胶质瘤中ｐ１５基因失活的主要机制。     

p16基因对脑胶质瘤细胞生长及化疗敏感性的影响

目的：探讨ｐ１６基因在脑胶质瘤发生发展过程中的作用及其与脑胶质瘤细胞对鬼臼噻吩苷、顺铂化疗敏感性间的关系。方法：将外源野生型ｐ１６基因导入胶质瘤细胞株Ｕ２５１,观察ｐ１６基因长期稳定转染对胶质瘤细胞的作用,并筛选阳性克隆。同时以空载体质粒ＰＣＤＮＡ３为对照。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ｐ１６基因表达,对转染后细胞生长情况、细胞周期、裸鼠致瘤能力的变化及细胞对鬼臼噻吩苷和顺铂敏感性的变化进行分析。结果：