基于AMPK/NLRP3通路介导的细胞焦亡探究牡荆素对大鼠分泌性中耳炎的抑制作用

目的 探究牡荆素对分泌性中耳炎大鼠的影响及调控机制。方法 将50只雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、牡荆素（3、12 mg/kg）组、牡荆素高剂量＋AMPK抑制剂（Compound C）组,每组各10只。除对照组外,其余各组大鼠均采取内毒素法复制分泌性中耳炎大鼠模型。造模成功后,牡荆素3、12 mg/kg组分别ip相应剂量的牡荆素;牡荆素＋Compound C组ip 12 mg/kg的牡荆素后,立即ip 20 mg/kg Compound C;对照组和模型组分别ip等量生理盐水。连续给药21 d后,苏木素–伊红（HE）染色观察中耳黏膜组织病理学改变;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平;听觉脑干诱发电位仪测定大鼠听力功能;Western blotting检测中耳黏膜组织腺苷酸活化蛋白激酶/NOD样受体蛋白3（AMPK/NLRP3）通路及细胞焦亡相关蛋白表达。结果 与模型组相比,牡荆素3、12 mg/kg组大鼠中耳黏膜组织病理损伤减轻,中耳黏膜厚度、听力反应阈值、血清TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平均降低（P＜0.05）,细胞焦亡相关蛋白[Caspase-1 p20、焦亡执行蛋白消皮素D-N（GSDMD-N）、IL-1β、IL-18]及NLRP3蛋白表达下调,p-AMPK蛋白表达上调（P＜0.05）,且呈剂量相关性。与牡荆素12 mg/kg组相比,Compound C能够逆转牡荆素对上述指标的改变。结论 牡荆素能够抑制分泌性中耳炎大鼠炎症反应,减轻中耳黏膜病理性损伤,其机制与抑制AMPK/NLRP3通路介导的细胞焦亡相关。     

维生素D3对新生大鼠坏死性小肠结肠炎的肠道保护作用研究

目的 建立坏死性小肠结肠炎（NEC）新生大鼠模型并研究维生素D3干预对肠道保护作用。方法 采用人工代乳品、缺氧和冷应激的方法诱导新生大鼠NEC,干预组提前给予维生素D3干预。HE病理和TUNEL染色检测肠管组织病理变化和细胞凋亡,ELISA实验和免疫组化染色分别检测肠道组织中炎症因子和凋亡蛋白的表达水平。结果 病理结果显示维生素D3干预可明显减少NEC新生大鼠肠道凋亡细胞数量,减轻组织损伤;ELISA和免疫组化染色结果显示维生素D3干预可降低肠道组织炎症因子TNF-α的表达水平,还降低Cleaved-Caspase3、iNOS和COX2表达水平。结论 维生素D3干预可降低NEC大鼠肠道组织炎症因子的表达,抑制细胞凋亡,发挥肠道保护作用。     

基于NLRP3/Caspase-1通路探讨针刀对兔膝骨关节炎软骨细胞的影响

目的 观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔软骨NLRP3/Caspase-1通路的调控作用及软骨细胞焦亡的影响。方法 选用24只新西兰兔雄兔,年龄均为6个月。使用随机数字表法将其分为3组,分别为空白组、模型组、针刀组,每组各8只。造模方法采用改良Videman法进行固定,造模时间为6周,空白组不予固定。针刀组选取经筋病灶点行针刀松解治疗,每周1次,共治疗3次;空白组和模型组正常饲养,行同样抓捕行为。采用HE染色观察软骨形态学改变;并检测软骨Caspase-1、NLRP3、ASC、IL-1βmRNA和蛋白的表达。结果 空白组软骨细胞均匀地分布在软骨基质中,表面相对光滑,层次结构较为清晰,潮线清晰完整。模型组软骨细胞数量较少,且分布状态较不均匀,表层出现缺损,潮线紊乱。与模型组相比,针刀组软骨表面较光滑,且软骨细胞分布较均匀,排列较规整,潮线较完整。与空白组比较,模型组软骨组织Caspase-1、NLRP3、IL-1β mRNA表达显著上调(P<0.05);与模型组比较,针刀组软骨组织Caspase-1、NLRP3、IL-1β mRNA表达显著下调(P<0.05)。与空白组比较,模...     

细胞焦亡在重症COVID-19中的作用

新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是一种由严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的危及呼吸道以及全身多脏器的传染性疾病,全球现已有超过2亿人感染此病,是一场空前的全球性瘟疫。大部分COVID-19患者仅表现出轻度症状且预后良好,但有大约20%的病例会发展成重症并引起严重的并发症,包括急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)、全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS)、细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome, CRS)等。细胞焦亡是一种以显著炎性反应为特征的细胞程序性死亡方式,常常以炎症caspase介导,以膜打孔蛋白Gasdermin家族为最终效应分子,致使细胞因膜膨胀破裂而死亡,并伴随着大量促炎细胞因子(如IL-1β、IL-18等)的释放。细胞焦亡因其炎...     

基于NLRP3/GSDMD信号通路研究人参皂苷Rb1对高糖诱导的胰岛β细胞焦亡的影响

目的: 研究人参皂苷Rb1(GRb1)抑制高糖诱导的胰岛β细胞焦亡及对NLRP3/GSDMD信号通路的调节机制。方法: 高糖(50 mmol·L^-1)诱导大鼠胰岛细胞瘤细胞(rat insulinoma cells, INS-1)焦亡模型,并构建NLRP3过表达质粒转染INS-1细胞,采用倒置显微镜观察GRb1对细胞形态变化的影响;采用ELISA法检测GRb1对细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素-1β(IL-1β)、胰岛素水平的影响;采用Western blot法和qRT-PCR法检测GRb1对INS-1细胞中核苷酸结合域样受体蛋白3(nucleotide binding domain like receptor protein 3, NLRP3)和切割蛋白D(gasdermin D, GSDMD)表达的影响。结果: 在高糖环境下,GRb1可减轻INS-1细胞形态学改变,显著增加INS-1细胞胰岛素分泌,降低细胞上清液中IL-1β、LDH水平(P＜0.05),且呈剂量依赖性;GRb1呈剂量依赖性抑制高糖诱导的INS-1细胞中GSDMD及上游调节因子NLRP3的表达(P＜0.05);过表达NLRP3后可显著逆转高糖环境下GRb1对INS-1细胞的部分保护性作用(P＜0.05)。结论: GRb1能够改善高糖诱导的INS-1细胞焦亡,减轻炎症反应,其机制可能与抑制NLRP3/GSDMD信号通路有关,从而防治糖尿病及其并发症的发生。     

NLRP3—Caspase-1—IL-1β通路在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中作用研究

目的：探讨NLRP3炎症小体通路在新生大鼠缺氧缺血性脑病中的作用,为临床靶向治疗新生儿缺氧缺血性脑病提供实验依据。方法：将7d龄新生SD大鼠随机分组为正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)及缺氧缺血性脑损伤组(HIE组);造模后6h、48h、72h和7d时间点进行取材,采用免疫组化技术检测NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达水平。结果：脑组织免疫组织化学检测,与Sham组及Control组比较,HIE组不同时间点的NLRP3、Caspase-1和IL-1β水平均明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),且NLRP3、Caspase-1和IL-1β在HIE组6h均可见水平增高,随着时间延长表达逐渐增加,7d表达最明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论：新生SD大鼠缺氧缺血后脑损伤随时间演变逐渐加重,与炎症小体通路的NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达上调有关。新生大鼠缺氧缺血性脑病可能与NLRP3炎症小体通路的启动激活有关。     

银杏素调节NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路对高糖诱导肾小球内皮细胞焦亡的影响

目的 探讨银杏素调节核转录因子кB/Nod样受体蛋白3/半胱天冬酶-1(NF-κB/NLRP3/Caspase-1)信号通路对高糖诱导肾小球内皮细胞焦亡的影响。方法 将肾小球内皮细胞(HRGECs)作为研究对象,将HRGECs细胞分为正常组(正常5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、银杏素低剂量组(30 mmol/L葡萄糖+5μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(30 mmol/L葡萄糖+10μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素)、BAY组[(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+2.5μmol/L NF-κB的特异性抑制剂BAY 11-7085(BAY)]、MCC950组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+10μmol/L NLRP3抑制剂MCC950)、VX-765组(30 mmol/L葡萄糖+20μmol/L银杏素+20μmol/L Caspase-1抑制剂VX-765),各组细胞加入相应试剂后共培养24 h; MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞焦亡情况;试剂盒法测定细胞...     

姜黄素对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型的抗氧化作用及机制

目的：观察姜黄素作用于新生鼠坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis,NEC）动物模型的疗效,初步探讨其可能的抗氧化作用机制。方法：健康新生SD大鼠24只,随机分成3组,每组8只。Ⅰ组：NEC模型组;Ⅱ组：姜黄素干预组;Ⅲ组：正常对照组。采用三因素联合造模法。姜黄素干预组实验动物以腹腔注射进行干预。实验动物每日定时称量体重,观察并记录动物生长发育及一般情况。实验结束后进行肠组织标本大体观察及HE染色后组织损伤评分,测定肠组织中丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量,免疫组化法检测肠道组织血红素加氧酶（HO-1）的表达。结果： 与Ⅰ组相比,Ⅱ组大鼠的生长发育、一般情况及肠组织大体形态改善均优于Ⅰ组。HE染色组织损伤评分显示Ⅰ、Ⅱ组均高于Ⅲ组,比较有显著性差异（P〈0.05）,Ⅰ、Ⅱ组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。MDA含量在Ⅰ、Ⅱ组较Ⅲ组明显升高,而Ⅱ组低于Ⅰ组（P〈0.05） 。SOD活性Ⅰ组较Ⅱ组 和Ⅲ组显著下降（P〈0.05）,Ⅱ组与Ⅲ组比较差异无显著性。HO-1Ⅰ、Ⅱ组表达较Ⅲ组均明显上调（P〈0.05）,而Ⅱ组大鼠肠道组织HO-1较Ⅰ组明显下降,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：姜黄素是治疗NEC新生大鼠模型的有效药物。姜黄素可能是通过诱导NEC实验动物肠黏膜HO-1的表达从而发挥其对肠道组织的保护作用的。     

白藜芦醇调控NLRP3炎症小体介导的血管平滑肌细胞焦亡抗动脉粥样硬化研究

目的 探讨白藜芦醇对动脉粥样硬化（AS）中血管钙化的影响及机制。方法 将雄性健康SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇（5 mg·kg^-1）组,每组10只。造模前ip预给药21 d,每天1次。模型组、白藜芦醇组均制备AS模型：sc 5 mg·kg^-1维生素D₃5 d后,分离并结扎左颈动脉,0.12 mmol·L^-1的CaCl₂溶液湿敷30 min,随即缝合,对照组湿敷生理盐水。造模后继续给药,1周后所有大鼠同时禁食24 h后处死,取大鼠左颈动脉进行苏木精-伊红（HE）染色和Von Kossa染色。体外钙化培养基诱导CRL-1999细胞钙化,给予白藜芦醇（10μmol·L^-1）干预,茜素红S染色检测钙盐沉积;实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting法检测钙化指标骨形态发生蛋白-2（BMP2）、侏儒相关转录因子2（Runx2）,炎性小体NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）,细胞焦亡相关指标天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）、Gasdermin-D （GSDMD）、白细胞介素（IL）-1β、IL-18蛋白和mRNA表达变化;免疫荧光检测Runx2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达;分子对接验证白藜芦醇与靶蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD、BMP2、Runx2结合活性。结果 HE与VonKossa染色显示模型组血管壁结构紊乱、钙盐沉积,白藜芦醇缓解钙盐沉积。体外实验表明钙化结节可被白藜芦醇缓解;与对照组比较,模型组BMP2、Runx2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白表达均显著上升（P<0.05、0.01、0.001）;经白藜芦醇处理后,上述指标的mRNA和蛋白表达均显著下降（P<0.05、0.01、0.001）。白藜芦醇与Runx2、NLRP3分别形成2、3个氢键,对接活性较好。结论 白藜芦醇抑制AS中血管钙化,机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1信号通路,进而抑制细胞焦亡有关。     

乌司他丁对体外循环下心脏瓣膜置换术患者外周血单个核细胞焦亡的影响

目的 探讨乌司他丁(UTI)对行体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换术患者围术期炎性反应和外周血单个核细胞(PBMCs)焦亡的影响及其机制。方法 选择行CPB下心脏瓣膜置换术患者60例,采用随机数字表法分为2组：乌司他丁组(UTI组)和生理盐水组(NS组),每组30例。UTI组患者接受总剂量为20 000 U/kg的UTI,半量于手术切皮前输注完毕,另半剂量经CPB管路给药。NS组以等容量生理盐水替代。于麻醉诱导后切皮前(T₁)、CPB开始后30 min(T₂)、CPB停止即刻(T₃)及停止后24 h(T₄)时采集颈内静脉血样,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆白细胞介素(IL)-18、IL-1β的浓度,采用Western blot法检测单核细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRP3)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶1 (Caspase-1)及消皮素-D (GSDMD)的表达。记录术中丙泊酚用量、舒芬太尼用量、去甲肾上腺素用量、术后机械通气时间及重症监护室(ICU)停留时间。结果 与T<...     

益气升清方调节HIF-1α/NLRP3信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响

目的 探究益气升清方调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组（S组）,模型组（M组）,益气升清方低、中、高剂量组（3.465、6.930、13.860 g/kg）及益气升清方高剂量+HIF-1α激活剂DMOG组（13.860 g/kg益气升清方+40 mg/kg DMOG）,每组15只。采用线栓法构建脑卒中模型。造模成功后进行神经功能缺陷评估;TTC染色评估脑梗死体积;ELISA法检测血清白细胞介素（IL）-1β、IL-18水平;HE染色检测缺血皮质区病理变化;TUNEL染色检测神经元凋亡;Western blot检测焦亡及HIF-1α/NLRP3通路相关蛋白表达。结果 与S组比较,M组神经功能缺陷评分、梗死体积、IL-1β含量、IL-18含量、神经细胞凋亡率、胞膜穿孔蛋白D-N端（GSDMD-N）、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、HIF-1α、NLRP3蛋白水平均上升（P<0.05）;与M组比较,低、中、高剂量益气升清方组神经功能缺陷评分、梗死体积、I...     

酚妥拉明治疗新生儿坏死性小肠结肠炎的效果及对新生儿免疫功能的影响

目的 探讨酚妥拉明治疗新生儿坏死性小肠结肠炎（Necrotizing enterocolitis,NEC）的效果及对新生儿免疫功能的影响。方法 根据治疗方法不同将2021年7月～2023年7月我科收治的78例NEC新生儿分为对照组和观察组,各39例。对照组给予常规治疗,观察组在对照组治疗基础上同时给予酚妥拉明。对比两组的临床疗效、症状改善时间、炎性指标、免疫功能。结果 观察组治疗有效率高于对照组（97.43%vs 84.61%,P<0.05）,腹胀改善、大便改善、肠内营养恢复的时间短于对照组（P<0.05）,治疗后的白细胞介素-10(IL-10)高于对照组,C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)低于对照组（P<0.05）,治疗后的免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、补体3(C3)、补体4(C4)高于对照组（P<0.05）。结论 酚妥拉明治疗新生儿NEC的效果显著,能够促进患儿恢复,改善炎性指标,提高免疫功能。     

miR-301a对小鼠坏死性小肠结肠炎的影响及作用机制

目的 观察miR-301a对小鼠坏死性小肠结肠炎（NEC）的影响及作用机制。方法 将60只新生BALB/c小鼠采用随机数字表法分为对照组、NEC组、miR-301a拮抗剂组,每组20只。NEC组、miR-301a拮抗剂组通过人工喂养、缺氧和冷刺激5 d建立NEC模型,miR-301a拮抗剂组给予miR-301a拮抗剂。实验期间记录小鼠体质量,HE染色观察各组肠道组织病理改变,并对肠组织进行损伤评分;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组小鼠血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6和IL-8的含量。采用TUNEL法测定不同组小鼠肠组织的细胞凋亡情况,qPCR检测miR-301a和胱天蛋白酶（Caspase）-1基因表达水平,Western blot检测Caspase-1蛋白表达水平。结果 与对照组相比,NEC组小鼠体质量减轻,肠组织出现明显的炎症损伤,损伤评分升高;血清中TNF-α、IL-6和IL-8的含量升高,肠组织细胞凋亡指数增加,miR-301a和Caspase-1的表达水平升高（均P<0.05）。与NEC组相比,miR-301a拮抗剂组小鼠NEC症状明显减...     

灯盏花乙素对J774A.1巨噬细胞中ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响

目的以LPS致敏的小鼠巨噬细胞J774A.1作为炎症细胞模型,研究灯盏花乙素对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法利用碘化丙锭(PI)染色法检测LPS+ATP诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞发生细胞焦亡的情况;免疫印迹法检测细胞裂解液和上清中IL-1β、caspase-1、HMGB1等蛋白的表达水平;基于微珠的免疫测定法(CBA)检测细胞上清中IL-1β的分泌水平。结果 ATP能够明显诱导LPS致敏的J774A.1巨噬细胞中caspase-1活化、成熟IL-1β(17 ku)和HMGB1释放至培养上清中,并诱导细胞焦亡;而灯盏花乙素预处理能够剂量依赖性地抑制ATP诱导的caspase-1活化以及成熟IL-1β、HMGB1的释放,并抑制细胞焦亡;同时,经腺苷酸环化酶抑制剂MDL12330A和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89处理,可以逆转灯盏花乙素对ATP诱导的细胞焦亡的抑制作用。结论灯盏花乙素通过调节PKA活性,抑制NLRP3炎症小体的活化与细胞焦亡,从而发挥抗炎作用。     

紫杉醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠细胞焦亡的影响及其机制的研究

目的 探讨紫杉醇（PTX）通过抑制NLRP3/caspase-1通路减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠细胞焦亡的影响机制。方法 将50只雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、EAE模型组及PTX低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余组建立EAE模型。PTX低、中、高剂量组每日分别腹腔注射PTX1、2、4 mg/（kg·d）,正常对照组和EAE模型组腹腔注射等量生理盐水,连续14 d。从免疫当日开始,每日定时观察并记录小鼠体质量变化、精神、活动情况及进行神经功能障碍评分;对各组脊髓组织进行尼氏染色和LFB染色观察病理改变;荧光定量PCR(qPCR)检测脊髓组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及胱天蛋白酶（caspase）-1 mRNA表达水平。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血白细胞介素（IL）-18和IL-1β含量。结果 正常对照组小鼠无明显症状,EAE模型组和PTX低、中、高剂量组体质量下降、活动减少、反应迟钝。与EAE模型组相比,PTX各剂量组发病潜伏期延长,高峰期延迟,神经功能障碍评分降低（P<0.05）,脊髓组织尼...     

NLRP3和TLR4调控的细胞焦亡在痛风性关节炎中的作用

细胞焦亡是一种强烈促炎性的程序性细胞死亡过程,由半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)介导,NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体和Toll样受体蛋白4(TLR4)信号通路共同调控,其在痛风性关节炎发病过程中扮演了重要角色.本文对痛风性关节炎中细胞焦亡的调控机制进行系统阐述,为新药研究提供方向.     

血红素氧合酶-一氧化碳系统与新生儿坏死性小肠结肠炎的关系

新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis, NEC)是新生儿期常见的胃肠道急症,是严重威胁新生儿生命的常见疾病之一,后期容易引起脓毒症及多器官功能障碍综合征,治疗效果差,预后不理想,病死率较高。虽然目前关于NEC的确切发病机制尚无定论,但是有学者认为过度的氧化应激损伤及炎症反应在NEC发生发展中可能起到重要作用。     

胞外酸化对大鼠关节软骨细胞焦亡的影响及可能机制

目的观察胞外酸化对大鼠关节软骨细胞焦亡的影响,研究该过程中可能机制。方法利用酶消化法获得原代大鼠关节软骨细胞。软骨细胞分为不同pH处理组(pH7.4、pH 7.0、pH 6.5和pH 6.0)以及pH6.0酸化不同时间组(0、6、12、24、48 h),经ROS还原剂NAC预处理的酸化组和正常组,Real-time PCR和Western blot观察各组促炎细胞因子IL-1β、IL-18和炎症小体组成成分ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表达情况,ELISA检测各组细胞培养基中的IL-1β、IL-18含量,AO/EB染色和LDH细胞毒性检测试剂盒分析细胞的死亡情况,ROS测定试剂盒观察细胞内ROS荧光强弱。结果与pH 7.4组比较,酸化组的促炎细胞因子IL-1β、IL-18和炎症小体组成成分ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表达明显增加,荧光显微镜观察到ROS荧光明显增强,AO/EB染色和LDH检测实验发现酸化可以诱导软骨细胞死亡,且pH 6.0酸化处理组效果最明显;ROS还原剂NAC预处理可以明显下调IL-1β、IL-18、ASC、NLRP3、caspase-1基因和蛋白的表达,并且明显减弱软骨细胞内ROS荧光,同时明显下调细胞死亡率。结论胞外酸化可能通过上调细胞内ROS的含量,促使软骨细胞发生焦亡。     

肠三叶因子对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型IL-10的影响及意义

目的:研究肠三叶因子(in testina l trefo il factor,ITF)对坏死性小肠结肠炎(necrotizing en teroco litis,NEC)新生大鼠的肠粘膜组织中IL-10的含量的影响,探讨ITF对NEC保护作用机理。方法:建立NEC模型,取肠组织待检。新生鼠32只随机分为4组,每组8只。A组为正常对照组;B组为NEC模型组;C组为NEC模型后予以皮下注射生理盐水0.2m l;D组为NEC模型后予以皮下注射ITF0.2m g。取近回盲部1~2cm肠道组织固定包埋、切片、HE染色做病理学检查,其它肠道组织制备组织匀浆取上清液检测IL-10的含量。结果:B、C组组织匀浆中IL-10的含量(pg/m g.pro)较A组无显著差异(P>0.05);D组较A、B、C组明显升高(P<0.01)。病理切片显示B、C组HE染色切片见肠壁损伤轻重不一,可见全肠粘膜绒毛坏死,病理评分的中位积分为3分;D组肠上皮细胞少量脱落,顶端绒毛坏死,病理评分的中位积分为1分。结论:通过皮下注射ITF可以减轻NEC后的肠道炎症反应,ITF有可能为治疗NEC提供新的方法。     

大黄素调控组蛋白乙酰化促进HpG2肝癌细胞焦亡及凋亡的发生

目的 研究天然产物大黄素是否能够影响HpG2肝癌细胞中组蛋白乙酰化水平,进而加速肝癌细胞焦亡和凋亡,为肝癌的治疗提供新的靶点。方法 CCK-8法检测不同浓度大黄素对Hp G2细胞活力的影响;生物信息学分析TCGA数据库中肝癌患者组蛋白乙酰化相关基因表达情况,验证候选基因赖氨酸乙酰基转移酶2A(KAT2A)与细胞凋亡通路的相关性;实时荧光定量PCR(q PCR)检测Hep G2细胞与L02细胞KAT2A m RNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大黄素对Hp G2细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT)、组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的影响;流式细胞术检测大黄素对肝癌细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞凋亡、细胞焦亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2-相关X蛋白质(Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin家族成员D N端(GSDMD-N)及KAT2A的表达情况。结果 大黄素能降低Hp G2细胞活性,半抑制浓度(IC₅₀)95%置...