C5a激活Akt1⁃ERK1/2通路促进NSCLC细胞的增殖和迁移

目的：探讨C5a对非小细胞肺癌（non?small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖和迁移的影响及其潜在的分子机制。方法：RT?PCR和Western blot检测人正常支气管上皮细胞系BEAS?2B和3种NSCLC细胞系（H1703、PC9、H1299）中C5a受体（C5aR）的表达;CCK?8和划痕实验检测C5a对PC9细胞增殖和迁移的影响;Western blot检查C5a刺激PC9细胞后蛋白激酶Akt1、细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal?regulated kinase,ERK1/2）和蛋白激酶C?α（protein kinase C?α,PKC?α）表达及磷酸化水平;用Akt1抑制剂Perifosine和ERK1/2抑制剂U0126分别处理PC9细胞后再给予C5a刺激,Western blot检测Akt1和ERK1/2的表达和磷酸化及其上下游调控关系,CCK?8和划痕实验检测Perifosine和U0126对细胞增殖和迁移的影响。结果：PC9细胞C5aR的表达水平显著高于其他细胞;C5a可明显促进PC9细胞的增殖和迁移能力;C5a刺激PC9细胞后,可显著增强Akt1和ERK1/2的磷酸化;Akt1和ERK1/2抑制剂均能明显降低C5a刺激PC9细胞后引起的细胞增殖和迁移,且Akt1抑制剂不仅能减弱Akt1的磷酸化,还能减弱ERK1/2的磷酸化,而ERK1/2抑制剂则仅能阻断其自身的磷酸化。结论：C5a刺激NSCLC细胞后可能通过激活Akt1?ERK1/2通路促进细胞的增殖和迁移。     

羟氯喹抑制MEK/ERK/ROS通路减少中性粒细胞胞外诱捕网形成改善葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎

目的：探讨羟氯喹（hydroxychloroquine，HCQ）对葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium salt，DSS）诱导的结肠炎模型鼠肠道炎症的影响及其影响中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular trap，NET）形成的机制。方法：雄性C57BL/6鼠随机分为正常组、DSS组（自由饮用3%DSS溶液+200 μL纯水每天灌胃）、DSS+HCQ组［自由饮用3%DSS溶液+200 μL HCQ（60 mg/kg）每天灌胃］。评估小鼠疾病活动指数（disease activity index，DAI），造模7 d后处死小鼠，分析小鼠结肠长度，肠组织HE 染色评估肠道炎症水平，荧光显微镜及荧光酶标仪检测各组小鼠结肠组织NET水平。收集志愿者外周血提取中性粒细胞进行细胞实验， 荧光显微镜及荧光酶标仪检测NET水平，DCFH-DA荧光探针孵育后荧光酶标仪检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，蛋白质印迹法检测p-MEK、MEK、p-ERK、ERK蛋白水平。结果：HCQ减轻DSS诱导的小鼠结肠炎并可抑制结肠炎模型鼠肠组织中NET形成。在细胞实验中，HCQ可抑制体外培养中性粒细胞ROS释放和NET形成，同时抑制MEK/ERK信号通路的激活。MEK 激动剂 C16-PAF 可逆转 HCQ 对 MEK/ERK 信号通路的抑制作用，增加 ROS 的释放，并增加 NET 的形成。结论： HCQ 可减轻 DSS 小鼠肠道炎症，机制可能是通过抑制中性粒细胞 MEK/ERK 信号通路，减少 ROS 释放，从而减轻 NET 导致的肠道损伤。     

BRAF及其细胞外信号调节激酶1/2信号通路蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的:研究B F基因及其丝裂原活化蛋白/胞外信号调节激酶的激酶(mitogen-activated protein/extracellular signal-regulated kinase kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路与甲状腺乳头状癌发生的相关性及部分作用机制。方法:收集73例散发的甲状腺乳头状癌患者及16例同期甲状腺瘤患者(对照组)的临床资料及标本。采用免疫组织化学和免疫印迹法检测两组标本组织中的大鼠肉瘤蛋白(ratsarcoma,S),B F,MEK1/2和ERK1/2表达状况。结果:甲状腺乳头状癌组S,B F,pMEK1/2和pERK1/2表达水平明显高于甲状腺瘤组(P<0.05或P<0.01);甲状腺乳头状癌患者S,B F,pMEK1/2和pERK1/2表达与肿块大小、淋巴结转移以及临床分期相关(P<0.05或P<0.01)。结论:S,B F,pMEK1/2及pERK1/2可能与甲状腺乳头状癌发生及其淋巴结转移、临床分期相关;B F可能通过激活MEK/ERK信号通路而发挥其生物作用。     

PI3K/Akt抑制剂对内质网应激下肝癌细胞MEK/ERK途径的影响

目的:研究内质网应激介导的PI3K/Akt抑制剂对肝癌细胞MEK/ERK途径的影响。方法:采用PI3K抑制剂LY294002/激活型突变载体myr-Akt分别阻断/激活内质网应激介导的Akt和ERK活化,并利用Western blot ting技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt和MEK/ERK途径间的关系。结果:阻断PI3K/Akt促进内质网应激介导的MEK/ERK活化,过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的MEK/ERK活化。结论:PI3K/Akt和MEK/ERK信号途径间在内质网应激肝癌细胞中可能存在信号交流。     

内质网应激下肝癌细胞Akt和ERK通路间的cross-talk研究

目的 研究内质网应激介导的肝癌细胞PI3K/AKt和MEK/ERK途径间的信号交流。方法 采用PI3K抑制剂LY294002/Akt激活型突变载体myr-Akt和MEK抑制剂U0126分别阻断/激活内质网应激介导的Akt和ERK活化,并利用Western blot分析内质网应激条件下PI3K/Akt和MEK/ERK途径间的信号交流。结果 阻断PI3K/Akt明显促进内质网应激介导的MEK/ERK活化,而过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的MEK/ERK活化。阻断MEK/ERK对内质网应激介导的PI3K/Akt活化无影响。结论 PI3K/Akt和MEK/ERK信号途径问在内质网应激肝癌细胞中存在信号交流。     

BRAF基因突变与消化道肿瘤

近年来,BRAF基因在肿瘤中的作用越来越受到重视.BRAF基因编码一种丝/苏氨酸特异性激酶（a serine/theronine-specific kinases）,是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK通路（MEK：mitogen/extracellular signalregulated kinase;ERK：extracellular signal-regulated kinase;MAPK：mitogen-activated protein kinase）重要的转导因子,参与调控细胞内多种生物学事件,如细胞生长、分化和凋亡等.     

细胞外信号调节激酶与缺血性脑卒中

细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2）是丝裂原活化蛋白激酶家族中的一员。脑缺血缺氧后,细胞外各种刺激因素通过三级级联反应激活ERK。磷酸化的ERK在脑缺血后升高,其在脑缺血中的作用是多方面的,一方面通过炎症和反应性氧族加重缺血性脑损伤,另一方面又通过减少细胞内钙超载而减轻缺血后脑损伤。     

内毒素耐受对人中性粒细胞抗炎反应的影响

目的：探讨脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的耐受对人中性粒细胞分泌抗炎因子白介素（interleukin,IL）-10及细胞凋亡水平的影响。方法：采用1 μg/mL牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgingivalis,P.gingivalis）LPS或者1 μg/mL大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）LPS刺激人中性粒细胞12 h,诱导细胞耐受。洗脱后,分别采用2种LPS再次刺激20 h,采用ELISA技术检测细胞分泌IL-10水平。同法诱导细胞耐受,洗脱后,再次刺激3 h,采用AV-PI法检测细胞凋亡水平。结果：P.gingivalis LPS或E.coli LPS单次刺激人中性粒细胞后,IL-10分泌水平均较刺激前明显增加（P<0.05）,凋亡水平则无明显改变（P>0.05）。2种LPS分别重复刺激之后,IL-10分泌水平均较单次刺激后显著增加（P<0.05）。P.gingivalis LPS重复刺激3 h后,中性粒细胞短期内凋亡水平与单次刺激后无明显改变（P>0.05）,而E.coli LPS重复刺激3 h后,细胞短期内凋亡水平较单次刺激后明显下降（P<0.05）。结论：内毒素耐受能促进人中性粒细胞分泌IL-10,但不同LPS诱导的耐受对细胞凋亡水平的影响可能存在差异。     

Atorvastatin induces autophagy of mesenchymal stem cells under hypoxia and serum deprivation conditions by activating the mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase pathway

Background The survival ratio of implanted mesenchymal stem cells （MSCs） in the infarcted myocardium is low.Autophagy is a complex self-eating process and can be utilized for cell survival. We have found that atorvastatin （ATV）can effectively activate autophagy to enhance MSCs survival during hypoxia and serum deprivation （H/SD）. The mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase （MEK/ERK） pathway is a non-canonical autophagy pathway.We hypothesized that the MEK/ERK pathway mediated ATV-induced autophagy of MSCs under H/SD.     

PI3K/Akt信号通路在SLE患者中性粒细胞胞外诱捕网形成中的作用

目的:探讨PI3K/Akt信号通路在系统性红斑狼疮(SLE)患者中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成中的作用.方法:密度梯度离心法分离6例健康体检者外周血中性粒细胞(PMN)后,瑞士染色及台盼蓝拒染实验检测PMN的纯度及活性;加入PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002或MK2206的情况下,荧光光度法检测经佛波酯...     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。