水蛭头、尾抗凝活性的比较及晾干后对活性的影响

水蛭头、尾抗凝活性的比较及晾干后对活性的影响汪文茉张秋海欧兴长(中国中医研究院基础理论研究所北京100700)为考察水蛭哪个部位作用最强及晾干后对活性的影响,我们测定了两种吸血水蛭(菲牛蛭和日本医蛭)的头部、尾部及其全体的比活性。并比较了干品全体和鲜活水蛭全体(折合成干重)的比活性。1材料与方法1.1材料1.1.1水蛭日本医蛭HirudenipponicaWhitman,安徽巢湖地区收集,菲牛蛭PoecilobdelamanillensisLesson,海南岛收集,....     

三种水蛭的薄层色谱与电泳法鉴别

中国的水蛭近百种,与医药有关的有十几种。《中国药典》(1990年版)收载了三种:(1)蚂蟥(宽体金线蛭,Whitmania pigra Whitman):(2)水蛭(日本医蛭,Hirudo nipponica Whitman);(3)柳叶蚂蟥(尖细金线蛭,Whitmaninia acranulata Whitman)。其中宽体金线蛭和尖细金线蛭是非吸血水蛭,日本医蛭是吸血小蛭。关于它们的理化鉴别方法,文献上未见报道。本文研究了日本医蛭和菲牛蛭Poecilobdella javanica及宽体金线蛭的薄层层析(TLC)、电泳(SDS-PAGE)鉴别方法。     

广东菲牛蛭生长和生殖的研究

目的研究室内菲牛蛭生长动态和生殖,为人工饲养菲牛蛭提供基础资料.方法在同一个卵袋产下的幼蛭,放入盛有天然水的80 cm×60 cm×50 cm的玻璃缸内饲养,每10 d称牛蛭体重1次,每天记录水温,每月换水一次,每次在野外采回的水要检测10种化学成分.在活兔身上吸血,每次称出吸血量.观察生长发育变化、记录交配产卵过程.结果从孵化出的幼蛭经14个月时间,吸血5,6次,生长发育达到性成熟,第1,2,3次吸血为幼体阶段,第4次吸血后进人亚成体阶段,第5次吸血后,部分个体达到性成熟,有的个体第6次吸血后进人性成熟.生长动态曲线是一跳跃曲线.记录了交配、产卵过程.结论阐明牛蛭生长动态和生殖过程.在室内饲养牛蛭成功.     

利用丝素固定化凝血酶分离纯化菲牛蛭中的水蛭素

目的:利用制备的丝素固定化凝血酶分离纯化菲牛蛭中的水蛭素。方法:以抗凝血酶活力(ATU)回收率为指标进行牛蛭素的固定化凝血酶萃取,通过正交实验优化萃取及反萃取条件。最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定实验样品的纯度。结果:菲牛蛭素A萃取的最佳条件为:水蛭素初始浓度9 ATU/mL,温度30℃,pH4.30,时间45 min;反萃取温度30℃,pH 7.4,时间30 min,ATU回收率55.73%。菲牛蛭素B萃取的最佳条件为:水蛭素初始浓度9 ATU/mL,温度30℃,p H 5.2,时间45 min;反萃取温度30℃,pH 7.2,时间30 min,ATU回收率23.96%。菲牛蛭素A、B实验样品PAGE图均只有1条带。结论:该文利用制备的丝素固定化凝血酶可以有效的应用于菲牛蛭素的分离纯化。     

菲牛蛭及其制品的抗血栓、溶血栓作用

已有较多的文献报道了水蛭的抗血栓、溶血栓药效学研究结果，而与菲牛蛭相关的抗血栓与溶血栓作用却未见较详细的研究报道。菲牛蛭是一种药典尚未收载的吸血水蛭物种，作者对其氨基酸组成成分、有害元素含量、农药残留量、体外生物活性、急性毒性试验及动物药效学试验进行了较深入的研究，本实验报道其在抗血栓、溶血栓方面的药效学试验结果。     

四种不同品种水蛭生物活性的研究与比较

目的:应用3种酶活性抑制方法测定四种不同品种水蛭的生物活性,为评价水蛭药材质量提供科学依据。方法:分别采用抗凝血酶、抗胰蛋白酶和抗糜蛋白酶3种检测方法,测定了宽体金线蛭、日本医蛭、欧洲医蛭、菲牛蛭样品的生物活性。结果:4种水蛭中,吸血水蛭具有更好的抗凝血酶活性;4种水蛭均具有较好的抗胰蛋白酶和抗糜蛋白酶生物活性。结论:3种酶活性抑制方法可作为水蛭类药材质量控制的依据。     

菲牛蛭规范化养殖标准操作规程(SOP)

目的:制定菲牛蛭规范化养殖标准操作规程(S0P)。方法:分别对菲牛蛭的养殖基地环境、养殖技术、病害防治、留种、采收加工、产品质量标准及监测等项目进行研究。结果:平均亩产菲牛蛭活体420.88 kg,平均每1 kg菲牛蛭鲜品含天然水蛭素43万AT-U,产品各项卫生及质量指标均符合国家有关的规定。结论:此S0P适用于广西地区的菲牛蛭养殖。     

菲牛蛭的含量测定方法改进及检测中的注意事项

改进菲牛蛭的水蛭素含量测定方法及总结检测中的注意事项,提高方法的重复性及准确度,更有效地控制菲牛蛭的质量。     

日本医蛭钴^60—γ射线辐照前后抗凝活性比较

水蛭为传统的常用动物药,始载于《神农本草经》,其后历代本草均有记载。现代研究表明,吸血蛭类分泌物含有多种广谱生物化学和药理活性物质,如抗凝血剂、抗血栓剂、麻醉剂、血管扩张剂等,其中主要的活性成分为水蛭素。但水蛭活性物质极不稳定,pH、温度、有机溶剂等均为影响其活性的因素。根据水蛭活     

我国菲牛蛭的研究概况

综述了我国菲牛蛭的地理分布、野生资源情况、生态习性和采收季节、化学成分、生物活性成分、药理学作用、分离纯化以及菲水蛭素基因的克隆和序列测定。认为菲牛蛭可作为一种新的药用资源加以研究。     

中药水蛭品种考证及资源可持续利用发展探讨

该文通过系统地本草文献梳理与研究指出,传统中医使用的水蛭是生于水中,个头较小且能吸食人及牛马血的水蛭.具有这些特性的水蛭的品种有日本医蛭Hirudo nipponia Whitman、丽医蛭H.pulchra Song、南京牛蛭Poecilobdella nanjingensis sp.Nov.、菲牛蛭P.manillensis (Lesson)以及湖北牛蛭P.hubeiensis Yang 5个品种,与2010年版《中国药典》水蛭项下所规定的动物品种来源不完全一致.建议《中国药典》修改并补充水蛭的品种来源,保留原有日本医蛭H.nipponica Whitman,增补菲牛蛭P.manillensis (Lesson),暂时保留宽体金线蛭Whitmania pigra Whitman、尖细金线蛭W.acranulata Whitman,并进一步加强丽医蛭H.pulchra Song、南京牛蛭P.nanjingensis sp.Nov.以及湖北牛蛭P.hubeiensis Yang的化学成分和药理作用以及资源分布的研究,以待作为药用品种补充.     

中药水蛭各部位提取物对高分子葡聚糖所致大鼠血瘀模型的影响

中国将水蛭作为破血逐瘀药而用于血瘀症的治疗。本实验观察水蛭各部位治疗血瘀症的疗效和初步的作用机理。1　实验部分1.1　药品与试剂　水蛭 (宽体金线蛭、菲牛蛭 ,产地 :广东 )各部分提取物配制成一定浓度 ,备用。A .宽体金线蛭水煎液 (1g生药·mL-1) :取宽体金线蛭粗粉10 0g ,浸泡 30min后 ,常法水煎 3次 ,每次 1h ,过滤浓缩成每1mL相当于生药 1g ,备用。B .菲牛蛭水煎液 (1g生药·mL-1) :取菲牛蛭粗粉 10 0 g ,同上法制备。C .宽体金线蛭醇提液 (1g生药·mL-1) :取宽体金线蛭粗粉10 0 g ,用 95 %乙醇回流提取 3次 ,每次 1h ,过滤浓缩…     

中药菲牛蛭化学成分的分析

推牛蛭（Hirudinaria manillensis Lesson）系医蛭科，牛蛭属环节动物，别名为马尼拟医蛭，俗名金边蚂蟥，其资源在我国的广东、广西和海南十分丰富。菲牛蛭是水蛭的一种，水蛭是一味传统的中药，始载于《神农本草经》，     

蚂蝗及其混淆品菲牛蛭的高效毛细管电泳法鉴别

目的 探求更为快捷、准确的水蛭药材的鉴定方法.方法 采用高效毛细管电泳法对蚂蝗和混淆品菲牛蛭进行蛋白多肽的分析.条件为石英毛细管 (75 μm×57 cm ),电解缓冲液为20 mmol/L,硼酸盐溶液(pH 8.5),电压为20KV,检测波长254 nm.结果 蚂蝗与菲牛蛭的高效毛细管电泳图谱之间有明显差异,重复性良好.结论 高效毛细管电泳可作为鉴定方法,用于快速准确地鉴别蚂蝗与菲牛蛭.     

菲牛蛭成分与急性毒性试验研究

目的:分析菲牛蛭中的氨基酸成分、有害物质含量与急性毒性,为评价菲牛蛭药材质量提供科学依据。方法:应用日立835-50型氨基酸自动分析仪、原子吸收分光光度法、CGC-ECD和CGC-NPD气相色谱法测定了菲牛蛭中含有的氨基酸成分、有害物质含量,并进行了菲牛蛭的初步急性毒性试验研究。结果:比较分析了宽体金线蛭、日本医蛭、欧洲医蛭、菲牛蛭四种水蛭的氨基酸含量结果,其差别不显著;菲牛蛭中重金属含量和有机氯以及有机磷农药残留量符合国家有关要求;菲牛蛭急性毒性试验结果表明其LD50大于10 g/kg,未见明显毒副作用。结论:菲牛蛭含有较高的氨基酸含量,而重金属和有机氯、有机磷农药残留量则较低,急性毒性试验LD50>10 g/kg,可考虑作为一种新药用资源而加以研究     

水蛭抗凝活性检测两种滴定方法比较

目的:比较药典标准凝血酶滴定法和白瓷板法对中药水蛭抗凝活性检测结果的影响。方法:分别采用《中国药典》中凝血酶滴定法和云南省《菲牛蛭冻干粉中药饮片炮制规范征求意见稿》中白瓷板法对水蛭抗凝活性进行多次平行滴定实验。结果:抗凝活性成分含量较高的菲牛蛭其药典法滴定结果重复性更稳定,白瓷板滴定法结果的重复性会随着单次进样量减少而趋于稳定;宽体金线蛭的抗凝活性结果在两种方法的对比检测下均较为稳定。结论:对于吸血水蛭品种抗凝活性的测量,建议保留原凝血酶滴定法;对于抗凝活性较低,实验中凝血酶溶液浓度较小的水蛭品种,两种滴定法均适用,也可同时应用互相验证。另在滴定操作中,将反应试管改换成玻璃液相进样瓶,且在滴定动作后将反应容器呈一定角度倾斜放置,有助于对反应终点进行判断,提高实验结果的准确性和稳定性。     

水蛭的临床运用和实验研究概要

水蛭为环节动物水蛭科,日本水蛭Hirudoni—pponica Whitman和宽体金线蛭whitmania pigra或尖细金线蛭Wacranulata等的全体。 其生长于全国大部分地区、栖息水田、湖沼中。性辛,味或有小毒。具有破血、逐瘀,通经作用。 1 药理研究 实验中张氐等发现水蛭含有蛋白质,其水解氨基酸含量达49.4％,富含人体必需氨基酸、谷氨酸含量高达8.3％。另含铁、锰、锌等多种人体必需的微量原素。中国药用动物志协作组报道新鲜水蛭的唾液中含有一种抗凝物质——水蛭素(Hirll—din)     

水蛭氨基酸、微量元素的含量测定

本文对不同食性的两类水蛭中所含氨基酸、微量元素进行了含量测定和分析。测定结果表明,两类水蛭中所含氨基酸的种类及其含量无明显差别。微量元素的含量,尤其是活性较强的元素为硒(Se)、镍(Ni)、钴(Co),铬(Cr)等,吸血的日本医蛭具有明显的优势。     

七种水蛭抗血小板聚集与抗凝血研究

七种水蛭体外抗血小板聚集与抗凝血实验研究结果表明，日本医蛭、菲牛蛭、湖北牛蛭在两方均有明显的作用。尖细金线蛭与宽体金线蛭的水煎提取物具有较强的抗血小板聚集作用，尖细金线蛭与光润金线蛭抗凝血作用较好，而宽体金线蛭、尖细金线蛭和光润金线蛭的超声提取物则表现促血小板聚集的作用。     

菲牛蛭提取物对顺铂治疗S180荷瘤鼠减毒作用的研究

目的:研究菲牛蛭提取物联合顺铂治疗S180荷瘤鼠效果及其减毒作用。方法:建立S180荷瘤鼠模型10天后,将40只BALB/c小鼠按肿瘤体积随机分为阴性对照组、顺铂组、菲牛蛭提取物组、菲牛蛭提取物+顺铂组。分组后开始给药,连续给药7天,第8天处死各组小鼠,取血清检测肝肾功能指标;取肾脏进行组织病理学检查;剥离肿瘤称重计算抑瘤率。结果:菲牛蛭提取物与顺铂联合使用具有抑制肿瘤生长的作用(P0.05)。与顺铂组比较,联合用药后菲牛蛭提取物可使S180荷瘤鼠的ALT、AST、TBIL、BUN、CREA含量降低(P0.05)。结论:菲牛蛭提取物与顺铂联合使用治疗S180荷瘤鼠具有相加作用,同时菲牛蛭提取物可减轻顺铂引起的肝肾毒性。