高温对体外培养大鼠海马锥体细胞凋亡的影响

目的探讨高温下新生大鼠海马锥体神经元凋亡形态学及生物化学变化。方法建立体外海马神经细胞培养模型,以37、40、42 ℃3种温度作为环境刺激因素,应用流式细胞仪、荧光染色、琼脂糖凝胶电泳和原位细胞凋亡检测试剂盒对其观察。结果随作用温度升高细胞凋亡率及凋亡小体数增加,电泳呈现DNA Ladder表现,荧光显微镜观察能够看到凋亡小体及其出芽现象。结论高温能够诱导体外培养的大鼠海马锥体细胞发生凋亡,且不同温度诱导其凋亡的程度及时程表现亦不同。     

短暂性脑缺血后海马CA1锥体细胞延迟性神经元死亡(DND)的新的凋亡证据

我们怀着巨大的兴趣阅读了Colbourne等人最近在《卒中》杂志上发表的文章。作者研究了作为缺血持续时间的一个指标的海马CA1区神经元损害程度和成熟率，他认为短暂的前脑缺血引起的Q～1区神经元缺失比剧烈的损伤引起的缺失更慢。而且，作者报道某些神经保护因子如a-氨基酸甲基恶唑丙酸拮抗剂NBQX等仅通过延迟神经元损害而影响成熟率。我们认可这些结果，同时同意该篇文章的编者按中的关注：延迟性细胞死亡不是凋亡，实际上是坏死。     

补肾健脾养血活血法对VCI大鼠海马锥体细胞的影响

目的观察补肾健脾养血活血法对VCI大鼠海马锥体细胞形态学和计数的影响。方法采用改良2VO法建立VCI大鼠模型,通过Morris水迷宫观察模型大鼠逃避潜伏期和穿越平台次数,HE染色观察海马CA1区椎体细胞的形态改变并对神经元数目进行定量分析。结果与VCI模型组大鼠相比,补肾健脾养血活血法可改善大鼠行为学变化,使其逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加（P〈0.05）。HE染色：模型组大鼠海马锥体细胞出现明显的病理变化,康欣胶囊及其简化方组大鼠海马椎体细胞的病理改变明显改善,且海马椎体细胞的数目明显多于模型组（P〈0.05）。结论补肾健脾养血活血立法的康欣胶囊能改善VCI大鼠的学习记忆能力,对缺血再灌注损伤有一定的保护作用.     

谷氨酸钠致使新生大鼠海马锥体细胞损伤的形态学研究

追踪观察谷氨酸钠（ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍｇｌｕｔａｍａｔｅ，ＭＳＧ）处理后的新生大鼠不同生长期海马锥体细胞的形态学变化。发现海马锥体细胞的损伤主要有急性期细胞肿胀和迟发性细胞固缩２种类型。急性期细胞损伤主要发生在１１日龄动物，细胞核急骤肿胀，细胞溃变死亡。以ＣＡ_１区最为明显，ＣＡ_４区除细胞肿胀外，尚伴有部分细胞固缩。齿状回细胞在此时期无明显变化。５２日龄组和１００日龄组动物主要表现为ＣＡ_２～ＣＡ_４区细胞核缩小，染色质聚集成块，胞浆浓缩深染，细胞固缩死亡。齿状回近门处内层细胞固缩，小颗粒细胞活性增加，数目明显增多。ＣＡ_１区较少发现细胞固缩现象，但背侧细胞减少明显。     

氨对体外培养胚胎大鼠大脑皮质神经元凋亡的影响

目的通过观察体外培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞在氨作用下的形态学、超微结构的变化,探讨氨与细胞凋亡及肝性脑病的关系.方法不同浓度的氨作用于体外培养的18d胎龄胚胎大鼠大脑皮质神经细胞24h后,采用光镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构;利用流式细胞仪进行凋亡细胞定量观察.结果对照组与实验组在光镜下形态不同,两组在透射电镜下可见到典型的"凋亡小体”,流式细胞仪定量显示出两组凋亡细胞数量具有显著性差异(P＜0.01),且不同浓度的氨引起的神经细胞凋亡数量也存在显著性差异(P＜0.01).结论氨可诱导体外培养神经细胞产生过量的细胞凋亡.     

老龄大鼠海马CA3区神经元锥体细胞超微结构变化

目的　观察老龄大鼠海马CA3区神经元锥体细胞的超微结构变化。方法　将Wistar大鼠分为老龄组和成年组 ,应用透射电镜观察海马CA3区锥体细胞超微结构。结果　老龄组CA3区锥体细胞出现核膜内陷、核仁体积减少 ,线粒体肿胀、变性等形态学改变。结论　大鼠在衰老过程中 ,海马CA3区锥体细胞超微结构出现退行性改变     

高压氧治疗对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马锥体细胞的影响

目的：研究高压氧治疗对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马锥体细胞的影响。方法：制作血管性痴呆大鼠模型,随机分成对照组、假手术组及治疗组,HBO治疗30天后,用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力。HE染色观察海马锥体细胞的变化。结果：治疗组大鼠空间记忆能力明显提高,海马锥体细胞数目比对照组明显增多。结论：高压氧对血管性痴呆大良有明显治疗作用。     

高温对小鼠睾丸生精细胞凋亡影响的实验研究

目的　研究高温对睾丸生精细胞凋亡的影响。方法　选用昆明系雄性小鼠 2 0只 ,随机分为高温组和对照组 ,采用核固红 -结晶紫染色法 ,观察睾丸生精细胞凋亡数目的变化。结果　高温组睾丸生精细胞凋亡的数目 (2 8.2± 3.0 3No ./10个曲细精管切面 )较对照组的凋亡细胞数目 (6 .38± 1.4 1No ./10个曲细精管切面 )明显增多 (P <0 .0 1)。结论　高温可触发生精细胞的细胞凋亡数目增加 ,造成生精能力丧失。     

高温对原代培养神经上皮细胞影响的形态学观察

目的 观察高温处理后原代培养神经细胞的形态学变化。方法 应用细胞２、倒置相差显微镜和透射电镜方法。结果 高温可使神经细胞的凋亡数增多、存活数减少，神经网络稀疏，细胞内部结构出现凋亡特征。结论 高温可诱导原代神经细胞凋亡。     

Orexin-A对体外培养的大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:研究Orexin-A对体外培养的海马神经细胞凋亡的影响及其可能机制.方法:取体外培养的大鼠海马神经细胞分为7组,分别给予0,1.0,10.0,100.0 nmol/L及1.0、10.0、100.0 μmol/L的Orexin-A培养.另取大鼠海马神经细胞,预先加入Orexin-A受体(OX1R)阻断剂SB334867,然后同法分组及处理.观察海马神经细胞的形态学变化;采用Western Blot、逆转录PCR(RT-PGR)法检测OX1R蛋白和mRNA的表达;原位末端标记染色评价细胞凋亡率;Fura-2/AM荧光比值成像技术测定游离钙离子浓度[Ca2+]i.结果:随着Orexin-A浓度的增大,海马神经细胞凋亡增加(F=137.49,P＜0.01),同时呈剂量依赖性地触发[Ca2+]i的升高(F=961.44,P＜0.01),但是OX1R蛋白及mRNA的表达无明显变化.SB334867可以部分阻断这种现象.结论:大剂量Orexin-A对体外培养的海马神经细胞有促凋亡作用,其机制可能与增加了细胞内Ca2+浓度蓄积有关.     

大鼠海马锥体细胞甘氨酸受体的药理学特性

目的：探讨生后早期大鼠海马CA1区神经元上功能性甘氨酸受体的分布及其药理学特性。方法：选用出生 后11~13 d大鼠的海马脑片,采用膜片钳全细胞记录技术,观察外源性甘氨酸诱导的电流反应。结果：甘氨酸可诱导 出士的宁敏感的甘氨酸受体电流,其作用于甘氨酸受体的EC50为123.23 μmol/L,Hill系数为1.24;印防己毒素可部分阻 断该电流。结论：生后早期大鼠海马CA1区锥体神经元上存在着功能性士的宁敏感的甘氨酸受体,部分甘氨酸受体 的为αβ异聚体。     

沙土鼠脑缺血预处理与海马锥体细胞凋亡关系的实验研究

日益增多的证据表明细胞凋亡参与缺血性细胞损害。国外文献报道细胞凋亡是缺血引起迟发性神经元死亡 (Ｄｅ ｌａｙｅｄＮｅｕｒｏｎＤｅａｔｈ ,ＤＮＤ)的一种重要形式[1] ,另有文献报道 ,在致死性脑缺血前 1～ 7ｄ予以非致死性脑缺血 ,可明显减轻后一次脑缺血引起神经损害 ,称此现象为脑缺血耐受 (ｃｅｒｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉｃｔｏｌｅｒａｎｃｅ)或脑缺血预处理 (ｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉ ｔｉｏｎｉｎｇ,ＩＰＣ) [2 ] 。脑缺血耐受 ,是否通过抑制凋亡发生 ,尚未见报道。本实验通过原位末端标记法检测沙土鼠脑缺血预处理后海马锥体细胞的凋亡阳性细胞 ,探讨沙土鼠脑缺血预     

Effect of etomidate on voltage-dependent potassium currents in rat isolated hippocampal pyramidal neurons

Background Previous studies demonstrated general anesthetics affect potassium ion channels, which may be one of the mechanisms of general anesthesia. Because the effect of etomidate on potassium channels in rat hippocampus which is involved in memory function has not been studied, we investigated the effects of etomidate on both delayed rectifier potassium current （IK（DR）） and transient outward potassium current （I_K（A）） in acutely dissociated rat hippocampal pyramidal neurons.Methods Single rat hippocampal pyramidal neurons from male Wistar rats of 7-10 days were acutely dissociated by enzymatic digestion and mechanical dispersion according to the methods of Kay and Wong with slight modification. Voltage-clamp recordings were performed in the whole-cell patch clamp configuration. Currents were recorded with a List EPC-10 amplifier and data were stored in a computer using Pulse 8.5. Student＇s paired two-tail t test was used for data analysis. Results At the concentration of 100 μmol/L, etomidate significantly inhibited IK（DR） by 49.2% at ＋40 mV when depolarized from -110 mV （P 〈0.01, n=8）, while did not affect IK（A） （/1=8, P 〉0.05）. The IC50value of etomidate for blocking IK（DR）was calculated as 5.4 μmol/L, with a Hill slope of 2.45. At the presence of 10 μmol/L etomidate, the V1/2 of activation curve was shifted from （17.3±1.5） mV to （10.7±9.9） mV （n=8, P 〈0.05）, the V1/2 of inactivation curve was shifted from （-18.3±2.2） mV to （-45.3±9.4） mV （n=8, P 〈0.05）. Etomidate 10 μmol/L shifted both the activation curve and inactivation curve of IK（DR））to negative potential, but mainly affected the inactivation kinetics.Conclusions Etomidate potently inhibited IK（DR） but not IK（A） in rat hippocampal pyramidal neurons. IK（DR） was inhibited by etomidate in a concentration-dependent manner, while IK（A） remained unaffected.     

细胞黏附对干扰素、5-氟尿嘧啶诱导细胞凋亡的影响

目的探讨细胞黏附作用对干扰素、5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导细胞凋亡的影响。方法采用HepG2、HEK293细胞株,常规96孔板培养细胞,分为空白不加药(A组)、多聚赖氨酸包被预处理+贴壁后加药(B组)、贴壁后加药(C组)、未贴壁就加药(D组)、未贴壁就加药和Fn抗体(E组)。选用干扰素、5-Fu分别作用各组细胞,MTT法测定各组增殖抑制率和DNA Fragmentation ELISA测定凋亡率,Western blot检测干扰素诱导各组PKR蛋白水平的表达。结果经多聚赖氨酸包被预处理后,细胞对药物的敏感性减弱,MTT法显示抑制率:干扰素作用G2细胞,B、C组抑制率分别为(27.24±31.77)%、(39.04±14.88)%(P<0.05);5-Fu作用G2细胞,B、C组抑制率分别为(30.61±11.26)%、(32.94±20.93)%(P<0.05);干扰素作用293细胞,B、C组抑制率分别为(32.02±23.48)%、(46.22±25.20)%(P<0.05);5-Fu作用293细胞,B、C组抑制率分别为(14.07±21.91)%、(31.61±31.49)%(P<0.05)。DNAFrag...     

温热与紫杉醇联合应用对体外培养人肺癌细胞A549的影响

目的：了解温热与紫杉醇联合对人肺癌Ａ５４９细胞的影响，为热疗与紫杉醇化疗的联合应用提供理论指导。方法：应用ＭＴＴ比色分析法测定温热、紫杉醇和二者联合应用对Ａ５４９细胞的细胞毒指数。结果：温热和紫杉醇对Ａ５４９细胞均有细胞毒作用，当温热达到４３°Ｃ以上二者联合应用的细胞毒作用更强，其热药时序对效果影响不大。结论：温热可以增强紫杉醇对Ａ５４９细胞的细胞毒作用。但由于存在阈温度效应，紫杉醇与热疗联合应用时应注意温度的控制     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的:研究异丙酚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响.方法:SD大鼠60只,体质量290～310 g,随机分为假手术组、异丙酚组和对照组,每组20只.用改良Longa法制成鼠脑缺血/再灌注模型(缺血2 h,再灌2 h),光镜下观察细胞形态学变化,TUNEL法观察细胞凋亡变化.结果:光镜检查异丙酚组细胞肿胀坏死明显减轻,凋亡细胞及坏死细胞明显减少.再灌2 h后对照组凋亡细胞比率、凋亡细胞阳性率、TUNEL阳性率均较假手术组高(P＜0.01),异丙酚组凋亡细胞阳性率、TUNEL阳性率较对照组减少(P＜0.05).结论:异丙酚能减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,具有抑制神经细胞凋亡坏死的作用.