二甲基乙酰胺对人胚肺细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3表达的影响

目的探讨二甲基乙酰胺(DMAC)诱导人胚肺成纤维细胞(HELF凋亡)的可能机制。方法用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果DMAC处理HELF细胞24 h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系;DMAC诱导HELF细胞凋亡过程中伴随着Bcl-2蛋白表达下降、Caspase-3蛋白表达增加。结论 DMAC可诱导HELF细胞凋亡,其机制可能与Bcl-2蛋白表达下降从而激活Caspase-3的表达有关。     

内耳免疫反应中细胞凋亡及Caspase-3表达的研究

目的研究内耳免疫反应过程中是否存在细胞凋亡，以及细胞凋亡是否与Caspasr-3信号转导有关方法选用雌性白色豚鼠16只，随机分为实验组和对照组各8只，以钥孔虫戚血蓝蛋白(kryhole limpet hemoryanin．KLH)全身免疫后，实验组以相同抗原进行内耳免疫，对照组内耳注射等量的磷酸盐缓冲生理盐水(PRS)，在内耳免疫5tl后处死动物，取内耳免疫侧耳蜗做石蜡切片。通过TUNEL法检测内耳凋亡细胞，免疫组化检测内耳Caspase-3的表达结果实验组Corti器，血管纹、螺旋韧带和螺旋神经节存在TUNEL染色阳性细胞，而对照组仅在支持细胞、血管纹和螺旋神经节中发现极少数TUNEL染色阳性细胞免疫组化染色实验组Caspase-3表达阳性，而对照组表达阴性结论内耳免疫反应可以诱导细咆凋亡的发生；内耳免疫反应诱导细胞凋亡的发生中有Caspase-3的激活。     

阴道超声辐照对早孕胚胎绒毛细胞凋亡的影响

目的 探讨不同时间阴道超声辐照，对人早孕胚胎绒毛细胞凋亡的影响，以期为临床阴道超声辐照时限提供新的佐证。方法 选择拟行人工流产的60例健康早孕妇女，分为对照组（未照射）、辐照3、5、10min组。应用探头频率5．0-MHz的阴道超声，对孕囊进行不同时间持续辐照。辐照后24h行人工流产取绒毛。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位末端标记法（TUNEL）行细胞凋亡的组织学检测，免疫组织化学方法（S-P法）检测促／抑凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白在组织中的表达。结果 对照组早孕绒毛细胞有少量凋亡细胞存在，辐照组凋亡细胞数目增加；辐照3min组出现凋亡细胞数目增多，与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；随着照射时间延长凋亡细胞数目明显增加，辐照5min和辐照10min组与对照组及辐照3min组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。对照组早孕绒毛中促凋亡Bax蛋白少量分布于合体滋养细胞胞浆中，细胞滋养细胞及间质含量极少，辐照组细胞滋养细胞及合体滋养细胞Bax蛋白含量均增加，但辐照3min及辐照5rain组与对照组比较Bax蛋白表达，差异无统计学意义（P〉0．05），辐照10min组Bax蛋白表达明显增强，与其它3组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。抑制凋亡Bcl-2蛋白表达在各组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 阴道超声辐照后增加早孕绒毛细胞的凋亡，且随辐照时间的延长，绒毛细胞的凋亡指数逐渐升高，以辐照10min组的绒毛细胞凋亡指数最高。阴道超声辐照后早孕胚胎绒毛细胞滋养细胞及合体滋养细胞Bax蛋白表达增加，随着辐照时间的延长Bax蛋白表达逐渐增加；Bcl-2蛋白表达减弱，与阴道超声辐照时间长短无关。孕早期的阴道超声辐照3min内是安全的，辐照5min相对安全，阴道超声的直接辐照最好不要超过10min。     

马钱子碱中毒脑神经细胞Bcl-2和Caspase-3表达的研究

目的观察马钱子碱中毒后不同时间、不同剂量Bcl-2和Caspase-3表达的变化。方法选用20只Wistar大鼠为正常对照组,44只Wistar大鼠复制马钱子中毒模型,应用免疫组织化学和图像分析方法研究大鼠脑神经细胞马钱子中毒后Bcl-2与Caspase-3蛋白表达的变化规律。结果大鼠在马钱子中毒低、中剂量后的1~7 d不同时间段内,脑神经细胞Bcl-2与Caspase-3蛋白阳性表达细胞数均高于正常对照组,与相应的对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论Bcl-2与Caspase-3参与了马钱子中毒的病理生理过程。     

重度子痫前期胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及意义

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及其与重度子痫前期发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测20例正常晚期妊娠孕妇(对照组)、40例重度子痫前期患者(重度子痫前期组,其中早发型20例,晚发型20例)的胎盘组织进行Bcl-2和Caspase-3的定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析。结果:与对照组比较,重度子痫前期组Bcl-2的表达显著降低和Caspase-3的表达显著升高,且两者呈负相关(r=-0.334,P=0.009),早发型重度子痫前期与晚发型重度子痫前期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在胎盘组织中Bcl-2低表达和Caspase-3的高表达,可能与重度子痫前期的发生有关。     

复发性流产患者子宫蜕膜细胞凋亡蛋白Fas、抑制凋亡蛋白Bcl-2表达的相关性研究

目的:探讨子宫蜕膜细胞凋亡蛋白Fas、抑制凋亡蛋白Bcl-2与复发性流产患者的相关性。方法:选择20例复发性流产患者作为研究组,以下称RAS组,同期正常计划外受孕者20例作为对照组。采用免疫组织化学方法测定各组子宫蜕膜细胞Fas、Bcl-2蛋白的表达。根据阳性表达率和表达强度进行量化评分,并进行相关性分析。结果:RAS组Fas的表达为(4.67±0.59)明显高于对照组(1.31±0.66)(P<0.001),而Bcl-2的表达为(1.76±0.51)明显低于对照组(4.89±0.41)(P<0.001),且两者的表达呈明显负相关(r=-0.61,P<0.05)。结论:①子宫蜕膜细胞Bcl-2低表达、Fas高表达与复发性流产患者的发生有关。②Fas与Bcl-2在子宫蜕膜细胞中的表达失衡可能是复发性流产患者发生的原因之一。     

马钱子碱中毒肾小管上皮细胞Bcl-2和Caspase-3表达的观察

以60只Wistar大鼠制作马钱子中毒模型,应用免疫组织化学方法研究大鼠肾小管上皮细胞中毒后Bcl-2与Caspase-3蛋白表达的变化规律.大鼠在中毒后肾小管上皮细胞Bcl-2与Caspase-3蛋白阳性表达数均高于正常对照组,Bcl-2与Caspase-3在1 d后出现表达,2～3 d达高峰,5 d和7 d两种蛋白表达逐渐下降.提示Bcl-2与Caspase-3参与了马钱子中毒的病理生理过程.     

急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的相关性

目的探讨急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的关系。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型。应用原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化法及Western-blotting蛋白印记技术分别检测Caspase-3及Caspase-10蛋白表达。结果①脑缺血大鼠海马CA1区3h出现凋亡阳性细胞,48 h达到高峰,72 h凋亡阳性细胞的数量开始下降。②脑缺血大鼠海马CA1区3 h可见Caspase-3及Caspase-10蛋白阳性细胞,48 h表达达高峰,72 h表达开始减少。③脑缺血大鼠海马CA1区Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的变化与细胞凋亡数呈正相关(r=0.976,P﹤0.01;r=0.986,P﹤0.01)。结论脑缺血大鼠海马CA1区存在细胞凋亡,且与Cas-pase-3及Caspase-10蛋白表达的变化一致,Caspase-3及Caspase-10蛋白可促进细胞凋亡发生。     

Bcl-2、Caspase-3与阿尔茨海默病关系的研究进展

随着社会人口老龄化的发展,近年来,阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的发病率逐年攀升,是继心脏病、肿瘤和中风之后影响老年人健康、导致死亡的第4位原因,但AD病因和发病机制尚未完全清楚,而且也无有效的治疗方法.AD脑内神经元的丢失机制与细胞凋亡密切相关,在凋亡发生机制中最关键的环节之一是Caspase-3和Bcl-2对细胞凋亡的调控.本文从Bcl-2、Caspase-3与阿尔茨海默病关系的研究进展进行综述.     

6价铬对人胚肺细胞P53和Bcl-2蛋白表达影响

6价铬[Cr（Ⅵ）]是我国一种常见的生产性毒物，广泛用于机械、化工、汽车、冶金、纺织等领域。流行病学调查发现，长期暴露于铬，特别是生产铬酸盐的工人肺癌高发。1990年国际癌症研究所（IARc）认定铬为人类致癌物。研究证明，六价铬化合物是最强有力的具基因毒性的铬化合物，对体外培养的细胞具有明显的毒性作用，但有关Cr（Ⅵ）对细胞内癌基因及抑癌基因表达产物的影响报道较少。为此，本实验采用免疫组织化学方法检测不同浓度重铬酸钾染毒对人胚肺细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响，为深入研究六价铬致癌的分子机制提供基础数据。     

二甲基甲酰胺致人肝细胞凋亡及其对Bcl-2及Bax和Caspase-3表达的影响

目的 初步探讨二甲基甲酰胺(DMF)对正常成人肝细胞的致凋亡作用和对Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法 以终浓度为0、50、100、150、200mmol/L的DMF作用于正常成人肝细胞12 h后,应用流式细胞术和western blotting法检测细胞凋亡率及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的变化.结果 与阴性对照组比较,各DMF剂量组凋亡率明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01).随着染毒剂量的增加,肝细胞凋亡率上升,呈现剂量-反应关系.且染毒后随着DMF剂量的增加,Bcl-2表达水平下降,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,Bax 表达水平无明显变化,Bcl-2/Bax比值随着DMF剂量增加而下降,200mmol/L剂量组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).在DMF150、200mmol/L剂量组可见到Caspase-3切割活化.结论 DMF可诱导肝细胞发生凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax比值表达下调、Caspase-3发生切割活化有关.     

Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应相关因素表达的影响

目的　探讨Bcl-2基因转染对心脏移植排斥反应中细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达的影响。方法　采用小鼠颈部心脏移植模型 ,随机分为 3组 :对照组 ,移植组 ,Bcl-2组。术后第 5d取移植心脏 ,用免疫组化方法观察细胞色素C、caspase-8和caspase -3表达情况。结果　移植组细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达均明显升高 (与对照组相比 ,P <0 0 1) ;与移植组相比 ,Bcl-2组细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达明显降低 (P <0 0 1)。结论　心脏移植排斥反应中移植心肌细胞色素C、caspase -8和caspase -3表达均明显上升 ,Bcl -2基因转染抗心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡作用可能与其下调细胞色素C、caspase -8和caspase -3的表达有关。     

COX-2抑制剂NS-398对肝癌HepG2细胞凋亡蛋白Bcl-2和Caspase 3表达的影响

目的探讨选择性环氧合酶2(COX-2)抑制在肝癌HepG2细胞凋亡中的作用。方法用选择性COX-2抑制剂NS-398处理HepG2细胞,流式细胞术测定细胞凋亡和半胱氨酸酶3(Caspase3)活性变化;Western blotting法检测不同浓度NS-398处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3表达变化。结果流式细胞术显示NS-398(0、100、200、300、400μmol/L)作用HepG2细胞24h后,对照组未见凋亡峰,各试验组(100、200、300、400μmol/L)出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(10.51±1.04)%、(27.79±2.40)%、(45.72±3.32)%、(60.22±2.03)%,呈明显剂量依赖性(P<0.01),不同浓度NS-398处理后Bcl-2表达下降,Caspase3表达增加,随着NS-398处理浓度的增加,表达活性Caspase3的细胞百分率分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.8)%、(63.40±0.69)%,呈明显剂量依赖性(P<0.01)。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过下调Bcl-2蛋白表达活化Caspase3,从而诱导肝癌细胞HepG2凋亡,COX-2抑制也许可作为新的肝癌的治疗方法。     

醋酸铅对人肾小管上皮细胞凋亡及Caspase-3的表达影响

目的探讨醋酸铅对人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡作用及Caspase-3活性的影响。方法醋酸铅(5、10、20μmol/L)染毒HK-26、12、24、48h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖。经铅(5、10、20μmol/L)染毒24h后细胞免疫化学法、RT-PCR和Western Blotting检测Caspase-3的转录与表达。结果与空白对照组相比,不同浓度的铅均不同程度的抑制了HK-2的增殖(P﹤0.01)。细胞免疫化学法、RT-PCR和Western Blotting结果显示醋酸铅组的Caspase-3转录与表达升高。结论醋酸铅可促进人肾小管上皮细胞的凋亡,Caspase-3参与了凋亡过程。     

Caspase-3及Survivin与心肌细胞凋亡的研究进展

Caspase-3是细胞凋亡的关键元件,Survivin具有抑制细胞凋亡的功能,而细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤发病机制中的重要环节。本研究对Caspase-3及Survivin与细胞凋亡进行综述,以期在分子水平控制细胞凋亡,达到保护心肌的目的。     

氢醌对人白血病细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响

目的 研究氢醌对白血病细胞株U937细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响。方法 用不同浓度的氢醌处理U937细胞24 h、48 h后,采用MTT法来检测细胞增殖抑制率;经瑞-吉染色后,观察细胞形态变化;采用流式细胞仪检测细胞凋亡;采用免疫印迹法检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达。结果 (1)U937细胞的增殖抑制率随氢醌作用时间及浓度的增加而增加,呈时间-剂量依赖性(P<0.05);(2)氢醌作用后,部分细胞体积增大,胞浆中有空泡,胞核发生畸形;(3)流式细胞术结果显示,细胞凋亡率随着氢醌作用时间及浓度的增加而增加,呈时间-剂量依赖性(P<0.05);(4)免疫印迹结果显示,与空白组相比较,染毒48h时,细胞Bax蛋白的表达量增加(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达量减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),染毒24 h时,细胞Caspase-3蛋白的表达量增加(P<0.05);与染毒24 h各组相比较,染毒48 h时细胞Caspase-3蛋白的表达量随时间延长呈增加趋势(P<0.05)。结论 氢醌可以诱导U937细胞凋亡,其机制可能与调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达有关。