骨肉瘤血清miR-337-3p、miR-484、miR-582表达及临床意义

目的 检测骨肉瘤血清miR-337-3p、miR-484、miR-582表达及其临床意义。方法 收集我院2016年1月至2022年1月期间收治的67例骨肉瘤患者的临床病历资料，另纳入同期60例健康志愿者作为对照组。采用DEGseq方法对血清样本进行全基因组miRNA分析，采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析血清和组织样本中miRNA水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA诊断骨肉瘤的效能。Logistic回归模型分析影响骨肉瘤新辅助化疗疗效的因素。Cox风险比例回归模型分析影响骨肉瘤预后的因素。结果 经全基因组miRNA分析，骨肉瘤患者血清中miR-337-3p、miR-484、miR-582、miR-1912、miR-4535的表达显著下调。qPCR检测结果显示，骨肉瘤血清miR-337-3p(0.519±0.249 vs. 1.015±0.420)、miR-484(0.669±0.254 vs. 1.029±0.515)、miR-582(0.516±0.258 vs. 0.996±0.381)均低于健康对照组(P<0.001),同时骨肉瘤组织中miR-337-3p、...     

血浆miR-92a与骨肉瘤预后相关性研究

背景与目的：骨肉瘤是儿童和年轻成人最常见的原发性恶性骨肿瘤,目前尚无高特异度、高灵敏度的预后预测指标。该研究旨在探讨血浆miR-92a表达水平与骨肉瘤临床病理及预后的关系。方法：收集30例健康体检者和45例骨肉瘤患者术前及术后血浆,通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测血浆miR-92a水平。以术前miR-92a≥5为界限,将骨肉瘤患者分为高表达组和低表达组。结果：骨肉瘤患者血浆miR-92a水平显著高于正常体检人群,患者术前miR-92a水平远高于术后。患者术前miR-92a表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小和组织学类型等无关,而与Enneking分期、肿瘤坏死率和肺转移相关。Kaplan-Meier分析高表达miR-92a的骨肉瘤预后差(P=0.035)。结论：骨肉瘤患者血浆miR-92a表达水平与生存率相关,可能是骨肉瘤一项有价值的预后指标。     

结直肠癌中医辨证分型与miR-29、miR-34a表达的相关性分析

目的:探究结直肠癌患者血清miR-29、miR-34a表达水平及其与中医辨证分型的相关性。方法:选取2014年06月至2015年06月本院收治的127例结直肠癌患者作为研究对象（结直肠癌组）,并根据中医辨证分型标准分为湿热内蕴型21例、气滞血瘀型40例、脾肾阳虚型29例、气血两虚型18例、肝肾阴虚型19例;另选取同期在本院体检的127例健康者作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测血清miR-29、miR-34a表达水平,并进行比较;采用Pearson法分析血清miR-29与miR-34a表达水平的相关性;采用Logistic回归模型分析影响结直肠癌患者不良预后发生的危险因素。结果:结直肠癌组患者血清miR-29、miR-34a表达水平均明显低于健康对照组（P＜0.05）。低分化、浸润程度T3-T4、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、淋巴结转移、远处转移患者血清miR-29、miR-34a表达水平明显低于高中分化、浸润程度T1-T2、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移、无远处转移患者（P＜0.05）。结直肠癌患者血清miR-29与miR-34a表达水平呈正相关（r=0.529,P=0.000）。低分化、浸润程度T3-T4、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、淋巴结转移、低miR-29水平、低miR-34a水平是影响结直肠癌患者不良预后发生的危险因素（P＜0.05）。脾肾阳虚型、气滞血瘀型、湿热内蕴型预后不良患者比例依次明显增加（P＜0.05）。肝肾阴虚型、气血两虚型、脾肾阳虚型、气滞血瘀型、湿热内蕴型结直肠癌患者血清miR-34a表达水平依次显著降低（P＜0.05）,miR-29表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:结直肠癌患者血清中miR-29、miR-34a低表达,与肿瘤分期升高、分化程度降低、浸润程度增加、淋巴结转移、远处转移、不良预后等密切相关,且miR-34a对结直肠癌不同中医辨证分型有一定的分型参考意义。     

miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨miR-19a和miR-19b在骨肉瘤组织及配对瘤旁组织中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：收集32对骨肉瘤和配对的瘤旁组织,运用实时荧光定量PCR（qPCR）检测骨肉瘤组织及其瘤旁组织中miR-19a和miR-19b的表达,分析其与骨肉瘤临床病理特征的相关性及其临床意义。结果：qPCR结果显示骨肉瘤组织中miR-19a和miR-19b的平均表达量较瘤旁组织中均明显上调（P均 < 0.05）。二者的表达水平呈正相关（r=0.685,P=0.000）。miR-19a和miR-19b的表达与骨肉瘤病理分级之间存在正相关（r=0.478,P=0.027）;miR-19a的表达与临床分期呈正相关（r=0.365,P=0.031）且与预后相关。Cox回归多因素分析发现miR-19a可作为骨肉瘤患者预后的影响因子（P=0.037）。结论：miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中表达上调,在骨肉瘤的发生发展中可能发挥重要的作用,其中miR-19a可能作为骨肉瘤独立的预后标志物。     

miR-27a,miR-138-5p对食管癌的早期诊断价值及与其病理分化程度的关系研究

目的 探讨微小RNA(miRNA)-27a、miR-138-5p与食管癌病理分化程度的关系，评价其在食管癌早期诊断中的意义。方法 选取73例食管癌患者作为研究组，另选59例健康体检者作为对照组，应用实时荧光定量PCR技术检测两组血清miR-27a、miR-138-5p表达水平，比较两组血清miR-27a、miR-138-5p表达水平，分析两者与食管癌临床特征的关系，建立受试者工作特征曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析miR-27a, miR-138-5p单独及联合检测对食管癌早期诊断价值。结果 研究组血清miR-27a表达水平高于对照组，miR-138-5p表达水平低于对照组(P<0.05);随着病理分化程度升高，血清miR-27a表达水平降低、miR-138-5p表达水平升高(P<0.05);淋巴结发生转移患者血清miR-27a水平高于未转移患者、miR-138-5p表达水平低于未转移患者(P<0.05);Ⅳ期患者miR-27a表达水平高于Ⅲ期和Ⅰ～Ⅱ期患者，miR-138-5p表达水平低于Ⅲ期和Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05);血清miR-27a, ...     

miR-95和miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及与顺铂耐药性的关系

目的 探究miR-95和miR-19b在骨肉瘤组织中的表达及与顺铂耐药性的关系。方法 选取骨肉瘤患者100例,收集患者临床资料。采用RT-PCR法检测组织miR-95和miR-19b表达水平,分析其与临床病理参数以及化疗耐药的关系。结果 miR-95和miR-19b表达与性别无关(P>0.05),与临床分期、肿瘤直径以及远处转移有关(P均<0.05),临床分期Ⅲ期、肿瘤直径≥5 cm、发生远处转移患者miR-95表达水平显著低于其他患者(P<0.05),miR-19b表达水平显著高于其他患者(P<0.05)。miR-95在耐药组的表达水平明显低于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-19b在耐药组的表达水平明显高于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-95和miR-19b评估骨肉瘤患者化疗耐药的预测AUC分别为0.707、0.692,联合检测AUC为0.808,高于单独检测的AUC值。结论 miR-95和miR-19b在骨肉瘤组织中的表达水平与临床病理参数以及化疗耐药有一定关系,为进一步研究骨肉瘤病情提供了一定的研究基础。     

miR-27a在三阴性乳腺癌中的表达及其对细胞耐药的影响

目的:探讨miR-27a在三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）中的表达及其对细胞耐药的影响。方法:首先通过QRT-PCR检测TNBC细胞株及非TNBC细胞株中miR-27a及P-gp的差异表达;上调TNBC细胞中的miR-27a的表达,通过CCK8检测细胞对化疗药物敏感性的变化。同时收集TNBC患者化疗前后血液标本,将其分为化疗敏感组和化疗耐药组,QRT-PCR检测患者血液标本中miR-27a及P-gp的表达,分析miR-27a与乳腺癌患者预后相关性。结果:miR-27a在TNBC细胞株中的表达明显低于非TNBC细胞株,上调TNBC细胞株中miR-27a的表达能够降低P-gp的表达,增加细胞对化疗药物的敏感性,此外TNBC组中miR-27a的表达与患者组织学分级、临床分期及淋巴结转移相关（P<0.05）;在非TNBC组中miR-27a的表达与患者临床病理特征无明显相关性（P均＞0.05）。结论:miR-27a参与调节TNBC细胞耐药,miR-27a可作为评估乳腺癌化疗敏感性及临床预后的潜在靶基因。     

肝细胞癌患者外周血中miR-30a、miR-106b的表达及其与预后的关系

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其与 预后的关系。方法:选取2015年6月-2017年2月本院收治的HCC患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。荧光定量PCR检测外周血中miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b水平与HCC临床病理的关系。分析HCC患者预后的影响因素以及血清miR-30a、miR-106b水平与HCC患者预后的相关性。结果:HCC患者血清miR-30a表达水平（1.03±0.02）低于正常人群（5.15±0.06）（P=0.00）;血清miR-106b表达水平（2.62±0.35）高于正常人群（1.15±0.06）（P=0.00）。miR-30a、miR-106b表达与患者肿瘤直径、组织分化类程度、肝内转移、淋巴结转移、甲胎蛋白（AFP）水平、门静脉癌栓、肿瘤数目及TNM分期有显著相关性(P＜0.05) 。miR-30a低表达组患者3年总生存率（39.8%）低于miR-30a高表达组（64.6%）（P=0.002）;miR-106b低表达组患者3年总生存率（75.8%）高于miR-106b高表达组（51.2%）（P=0.003）。二元Logistic回归分析提示,淋巴结转移、TNM分期、miR-106b及miR-30a水平是患者预后的重要影响因素。结论:miR-30a在HCC患者血清中低表达,miR-106b在HCC患者血清中高表达,与肿瘤的进展、预后不良有关。     

miR-34b和miR-320a的表达与前列腺癌组织临床病理特征及预后的相关性

目的 探讨前列腺癌组织中miR-34b、miR-320a的表达与其临床病理特征及预后的相关性.方法 选择前列腺癌患者80例,另选40例良性前列腺增生患者作为对照组.采用定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测两组患者组织中miR-34b、miR-320a的表达量,分析前列腺癌组织中miR-320a、miR-34b与各临床...     

结肠癌患者血清中miR-30a、miR-106b的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其在结肠癌进展及预测患者预后中的价值。方法:选取2012年06月至2013年02月本院收治的接受结肠癌手术治疗的患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。逆转录 PCR法检测外周血血清中 miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b表达与结肠癌临床病理及预后的关系。Spearman分析miR-30a、miR-106b表达的相关性。采用多因素logistic回归模型对结肠癌患者的预后影响因素进行分析,采用Kaplan-Meier生存分析miR-30a低表达组、miR-30a高表达组,miR-106b低表达组、miR-106b高表达组患者中位生存时间。结果:结肠癌患者血清miR-30a表达水平（1.03±0.02）低于正常人群（5.15±0.06）,差异具有统计学意义（t=16.38,P=0.01）;结肠癌患者血清miR-106b表达水平（2.62±0.35）高于正常人群（1.15±0.06）,差异具有统计学意义（t=10.17,P=0.03）。miR-30a、miR-106b表达与患者的组织分化类型、浆膜侵犯、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有显著相关性(P＜0.05)。多因素logistic回归模型对结肠癌患者预后影响因素进行分析,TNM分期（Ⅲ+Ⅳ）、miR-106b高表达及miR-30a低表达是结肠癌患者预后不良的危险因素。miR-30a低表达组患者总体生存时间（55.3±4.1）个月低于miR-30a高表达组（76.4±2.4）个月（P=0.000）;miR-106b低表达组患者的总体生存时间（75.1±7.3）个月高于miR-106b高表达组（51.8±3.1）个月（P=0.000）。结论:miR-30a在结肠癌患者血清中低表达,miR-106b在结肠癌患者血清中高表达,二者的表达与肿瘤的进展、预后不良有关。     

MicroRNA-34a调控KLF4转录因子

摘 要：［目的］ 研究microRNA-34a（miR-34a）与其靶基因KLF4转录因子在结直肠癌发生化疗耐药中的作用。［方法］ 利用miRDB和microRNA公共数据库筛选出miR-34a的直接作用靶点KLF4 3′-UTR区。运用real-time PCR方法检测人5-氟尿嘧啶（5-Fu）耐药和敏感的结直肠癌组织及癌旁组织中miR-34a与KLF4的表达水平;建立5-Fu抵抗性结直肠癌细胞系,运用real-time PCR方法检测耐药细胞中KLF4的表达;上调5-Fu耐药结直肠癌细胞中miR-34a的表达,明确在结直肠癌5-Fu耐药细胞系中miR-34a对KLF4的调控作用。［结果］ 在40例5-Fu耐药的结直肠癌组织中miR-34a呈低表达,KLF4呈高表达,且miR-34a在癌组织及癌旁组织中的表达与KLF4呈显著负相关（r=-0.678,P<0.001）;在5-Fu耐药结直肠癌细胞系HCT-8/5-Fu和SW-480/5-Fu中KLF4呈高表达,且上调耐药细胞中miR-34a可抑制耐药细胞中KLF4的表达。［结论］ KLF4转录因子在5-Fu化疗耐药的结直肠癌组织中呈低表达,并与miR-34a呈负相关,上调miR-34a的表达可直接抑制KLF4的表达,提示miR-34a负向调控KLF4具有逆转结直肠癌细胞化疗耐药的可能。     

miR-135a在调节小细胞肺癌多药耐药中的作用

目的:探讨miR-135a在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)多药耐药中的作用。方法:收集2008年1月至2013年12月本院肿瘤科及呼吸内科就诊的48例SCLC患者外周血液标本,将其分为化疗敏感组(28例)和耐药组(20例),采用QRT-PCR法检测患者血液标本、SCLC敏感细胞株H69及耐药细胞株H69AR中miR-135a的表达,分析其与临床预后的关系,并应用miR-135a模拟物和抑制剂分别上、下调细胞株中miR-135a的表达,采用CCK-8法检测细胞对各种化疗药物(ADM、DDP和VP-16)敏感性的影响。结果:与化疗敏感组相比,miR-135a在化疗耐药患者血液标本中的表达明显增高[(2.174±3.981)vs(-1.963±3.750),P<0.001];在临床患者血液标本中,miR-135a的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05),与疾病的分期、化疗敏感性及患者的生存时间相关(均P<0.01)。miR-135a在H69AR细胞中的表达明显高于H69细胞[(7.841±0.392)vs(1.047±0.081),P<0.01];通过miR-135a抑制剂下调H69AR中miR-135a的表达能够显著增加细胞对化疗药物的敏感性,H69AR细胞对DDP、ADM及VP-16的IC50值明显下降[(247.09±11.55)vs(76.64±10.00)、(150.83±8.03)vs(40.72±5.06)、(436.63±61.19)vs(163.35±20.00);H69细胞转染miR-135a mimics后对化疗药物DDP、ADM和VP-16的IC50值明显增加[(18.58±1.37)vs(159.27±3.29)、(24.37±2.63)vs(129.19±2.64),(48.55±2.59)vs(359.87±2.92)μg/ml,P<0.01]。结论:miR-135a参与调节SCLC的多药耐药,下调miR-135a基因的表达可能增加细胞对化疗药物的敏感性。     

miR-34a调控肺癌EGFR耐药细胞株中MET信号通路探讨

[目地]研究肺癌耐药细胞株HCC827/GR中MET信号通路的调控,明确肺癌获得性耐药的分子机制。[方法]使用HCC827细胞[epidermal growth factor receptor（EGFR）基因19外显子缺少的肺腺癌细胞株],在此细胞的基础上培养吉非替尼耐药细胞株。检测耐药细胞株中MET的表达,并使用RT-PCR的方法检测miR-34a的表达;使用TargetScan等生物信息学软件预测miR-34a的下游靶点,并在细胞内验证miR-34a是否可以调控MET的表达。[结果]与HCC827细胞相比,HCC827/GR细胞株对吉非替尼明显耐药。在耐药HCC827/GR细胞株中,miR-34a低表达,MET高表达,而在HCC827细胞株中,miR-34a高表达,MET低表达。Target Scan生物信息学软件提示,MET是miR-34a的下游靶点之一。将携带荧光报告基团和MET 3′UTR的载体与miR-34a共转染入细胞后荧光度下降。[结论]miR-34a可能通过调控靶基因MET而参与EGFR-TKI的获得性耐药。     

miR-449a对胰腺癌细胞放射敏感性影响

目的 研究miR-449a对胰腺癌SW1990细胞放射敏感性的影响方法 qRT-PCR检测放疗前后胰腺癌SW1990细胞系中miR-449a的表达变化,利用Lipofectamine 2000转染试剂盒将miR-449a mimics及miR-NC转染到SW1990细胞中,流式细胞术、克隆形成实验检测放射处理后细胞放射敏感性变化。使用TargetScan预测及双荧光素酶报告基因实验证明miR-449a与Cyclin D1的靶向作用,免疫组织化学法观察Cyclin D1在胰腺癌组织和胰腺癌旁5 cm的正常胰腺组织的分布,基因敲除Cyclin D1验证其对胰腺癌细胞放射敏感性的影响。结果 经放射处理后,miR-449a在胰腺癌细胞中的表达量明显降低;过表达miR-449a增加了放射后胰腺癌细胞的凋亡率,并使胰腺癌细胞克隆形成率也明显降低;TargetScan预测及双荧光素酶报告基因实验证实了Cyclin D1是miR-449a的靶标;Cyclin D1蛋白在胰腺癌患者组织中的阳性染色率(70%,35/50)明显高于正常胰腺组织(20%,2/10),Cyclin D1增加了胰腺癌细胞的放射敏感性。结论 miR-449a通过靶向干扰Cyclin D1的表达,促进胰腺癌细胞的放射敏感性。     

胃癌患者血清中miR-106a的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌患者血清miR 106a表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用实时定量RT-PCR方法检测21例胃癌患者及10例健康人血清中miR-106a表达的水平。结果 实时定量RT-PCR方法能够检测到血清样本中微量miRNA的表达。21例胃癌患者miR-106a表达水平的中位数为0.34（0.17～0.69）,10例健康人为0.63（0.27～1.0）,两者差异有统计学意义（P=0.002）。在21例胃癌患者中,血清miR-106a表达水平与肿瘤分化程度有关,在低分化胃癌中的表达水平明显高于中分化胃癌（P=0.01）;血清miR-106a表达水平亦与血清CA724相关（P=0.03）,而与分期、性别、年龄无关（P＞0.05）。结论 采用实时定量RT PCR方法检测血清中miR-106a的表达敏感可靠。血清miR-106a作为新的生物学指标对于胃癌的诊断具有一定的价值。     

血清miR-146a、miR-638水平与非小细胞肺癌患者化疗耐药性的相关性

目的 探讨血清微小核糖核酸(miR)-146a、miR-638水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗耐药性的关系.方法 纳入化疗结束后产生耐药性的62例NSCLC患者作为耐药组,同期纳入接受化疗且化疗结束后未产生耐药性的62例NSCLC患者作为敏感组,全部患者均接受同步放化疗方案治疗,共治疗2个周期.回顾分析患者资料...     

miR-449a通过下调HDAC1表达抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移北大核心

目的:分析miR-449a对人非小细胞肺癌细胞株A549增殖、侵袭和迁移的影响。方法:通过Real-time PCR检测人肺成纤维细胞MRC-5、人非小细胞肺癌细胞株A549和HCC827中miR-449a和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)的表达水平。利用CCK-8法和Transwell法分析miR-449a对A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。使用生物信息软件分析miR-449a的靶向集合位点,并构建荧光素酶报告基因质粒,通过荧光素酶报告基因法分析miR-449a对HDAC1的靶向调控作用。通过Western blot分析miR-449a和HDAC1表达水平对A549细胞增殖及EMT相关分子表达水平的影响。建立裸鼠皮下瘤模型分析miR-449a和HDAC1对A549细胞体内增殖的影响。结果:miR-449a在MRC-5细胞中表达水平显著高于A549(P<0.0001)和HCC827(P<0.01);HDAC1在MRC-5细胞中表达水平显著低于A549(P<0.0001)和HCC827(P<0.01)。CCK-8法检测显示在A549细胞中转染miR-449a能够显著抑制其增殖。Transwell法检测显示在A549细胞中转染miR-449a能够显著抑制其侵袭和迁移(P<0.0001)。生物信息学预测显示miR-449a能够靶向结合HDAC1的3'-UTR;双荧光素酶报告基因分析显示,miR-449a能够靶向作用于HDAC1的3'-UTR抑制萤光素酶表达,Real-time PCR的结果表明过表达miR-449a能够显著抑制HDAC1的表达。在A549细胞中转染miR-449a或针对HDAC1小干扰RNA(siRNA)均能够下调HDAC1的表达,抑制细胞体内、外增殖;同时E-cadherin和ZO-1的表达水平下降,而N-cadherin、Fibronectin和Vimentin的表达水平增加。结论:miR-449a通过靶向抑制HDAC1的表达,抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。     

lncRNA-NEAT1靶向miR-34 a抑制肾癌细胞生长的实验研究

目的:探讨长链非编码RNA-NEAT1(lncRNA-NEAT1)通过与miR-34a相互作用影响肾癌细胞生长的机制.方法:检测60例肾癌患者癌组织、癌旁组织中miR-34a及NEAT1表达水平的差异.稳定培养A498细胞,转染si-NEAT1,并用脂质体法瞬时转染miR-34a inhibitor,敲低miR-34a...     

miR-196a 在肿瘤研究中的进展

最近研究表明,miR-196a在多种肿瘤的发生、发展中发挥类似癌基因的生物学功能,降低miR-196a的表达可抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移,促进肿瘤细胞凋亡,逆转肿瘤耐药。miR-196a有望成为肿瘤早期诊断、预后预测及逆转耐药的重要新靶标。本文结合国内外最新报道对miR-196a与肿瘤相关性研究进展作一综述。