依那普利对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响

目的探讨依那普利对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中细胞因子和肺纤维化的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量依那普利组、中剂量依那普利组、高剂量依那普利组和泼尼松对照组,每组10只。博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型。对各组大鼠进行肺泡炎、肺纤维化半定量评分,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素(IL)-1、IL-2、IL-4和IL-6含量,肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)含量,BALF和血清中间质金属蛋白酶(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的浓度,以及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)m-RNA的表达。结果依那普利剂量依赖性地降低博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的肺纤维化评分和肺泡炎评分(P<0.05);降低大鼠BALF中TGF-β1、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6的含量(P<0.05),并升高INF-γ含量(P<0.05);升高肺组织中SOD含量(P<0.05),并降低MDA和HYP含量(P<0.05);降低血清及BLAF中MMP-9、TMP-1的含量,降低MMP-9/TMP-1值(P<0.05);降低肺组织TNF-αm-RNA的表达(P<0.05)。结论依那普利可以有效抑制博来霉素诱导的大鼠肺纤维化。     

气管内注射博来霉素致小鼠肺纤维化造模方式改良

目的探讨手术显微镜下气管内注射博来霉素制作肺纤维化模型的效果。方法选择健康成年清洁级雌性8周龄C57BL/6小鼠30只,采用随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组15只。对照组小鼠在直视下行气管内注射博来霉素,观察组小鼠在手术显微镜下行气管内注射博来霉素造模,观察术后12 h内各组小鼠死亡情况及术后1周体质量变化;术后28 d每组随机选取8只小鼠,取小鼠肺组织制备石蜡切片并进行苏木精-伊红染色、Masson染色,评价各组小鼠肺泡炎及肺纤维化程度。结果术后12 h内观察组小鼠死亡率显著低于对照组(P<0.05)。术后1周内观察组小鼠体质量下降显著低于对照组(P<0.05)。观察组小鼠肺泡炎及肺纤维化评分均显著高于对照组(P<0.05)。结论手术显微镜下行气管内注射博来霉素制备肺纤维化模型对小鼠损伤小,造模效果好,是一种有效的肺纤维化模型制备手段。     

姜酮在博来霉素诱导小鼠肺纤维化中的保护作用及机制研究

目的 观察并探究姜酮(zingerone, ZO)在博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化中的疗效及潜在分子机制。方法 将40只雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为4组,依次为:对照组、模型组、低剂量ZO治疗组和高剂量ZO治疗组。给予小鼠单次气管内注射BLM (5mg/kg)建立肺纤维化模型。低剂量ZO治疗组和高剂量ZO治疗组小鼠给予不同浓度ZO灌胃处理。HE染色及Masson染色观察肺病理损伤及纤维化状况;试剂盒检测肺组织氧化应激水平;碱水裂解法检测肺组织羟脯氨酸的含量;Western blot法检测肺组织中collagen Ⅰ、α-SMA及NRF2的蛋白表达状况。结果 与对照组比较,模型组小鼠出现了明显的肺病理损伤及纤维化,同时氧化应激明显升高而NRF2蛋白表达明显降低;ZO预处理可明显减轻BLM所致的小鼠肺纤维化和氧化应激,同时上调NRF2蛋白表达。结论 姜酮具有减轻博来霉素小鼠肺纤维化的潜力,其机制与NRF2的激活有关。     

博来霉素致肺纤维化大鼠形态学变化的实验研究

目的　观察博来霉素 (Bleomycin ,BLM)致大鼠肺纤维化模型的形态学及胶原含量的变化 ,探讨其发生机制。方法　健康SD大鼠 ,BLM 5mg (kg·bw)复制大鼠肺纤维化模型 ,于 1、3、7、14、2 8d ,观察肺纤维化形成的病理变化和肺匀浆羟脯氨酸 (HYP)的含量变化。结果　光镜所见 :给予BLM后 1- 7d肺部病变以肺泡炎为主 ,14d以后则进入慢性纤维化阶段。电镜所见 :模型组 3- 7dⅠ型细胞受损 ;Ⅱ型细胞增生 ,其内板层小体明显增多 ,线粒体嵴消失甚至出现空泡样变 ;14 - 2 8dⅡ型细胞数目减少 ,纤维组织增生。模型组肺组织匀浆HYP含量于 7d开始明显增加 ,2 8d达高峰。结论　博来霉素诱发大鼠肺纤维化早期以肺泡炎为主 ,7d开始出现肺纤维化 ,2 8d肺纤维化为主要病变     

颗粒蛋白前体与类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎（rheumatoidarthritis,RA）是一种病因不明的多系统性自身免疫性疾病,以关节滑膜炎、血管翳及对称性的关节病变为主要特征.RA的病理过程与多种免疫细胞、细胞因子及细胞信号通路异常相关.肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）是RA病程中最早产生、最重要的细胞因子之一,可与其他细胞因子共同促进炎症进程.近期研究获得重要发现,颗粒蛋白前体（progranulin,PGRN）可通过结合肿瘤坏死因子受体（tumor necrosis factor receptor,TNFR）结合并影响其信号转导,抑制TNF-α诱导的炎性反应,发挥抗类风湿关节炎的作用.因此,对PGRN的功能和相关细胞信号转导机制的研究将有助于人们对RA发病机制的认识,并为临床治疗提供新的思路.本文将从PGRN生物学效应、细胞信号转导机制与RA的联系做一综述.     

颗粒蛋白前体在皮肤鳞癌A431细胞中的表达及其作用研究

目的探讨颗粒蛋白前体(PGRN)在皮肤鳞癌A431细胞中的表达及其对生长转移的调控作用。方法构建PGRN干扰细胞株,通过增殖(CCK-8)实验和侵袭(Trans-well)实验分别研究PGRN在皮肤鳞癌A431细胞的增殖和侵袭中的作用,探讨PGRN在皮肤鳞癌生长及转移中的意义。结果成功构建了PGRN-sh RNA-A431细胞株,并通过CCK-8实验和Trans-well实验验证了干扰PGRN后对皮肤鳞癌A431细胞的生长及侵袭具有抑制作用。结论 PGRN在皮肤鳞癌A431细胞中表达,并与皮肤鳞癌的发生、发展密切相关。     

博来霉素致大鼠肺纤维化模型中赖氨酰氧化酶蛋白表达与活性的动态变化

[摘要] 目的 研究博来霉素（BLM）致大鼠肺纤维化模型中赖氨酰氧化酶（LOX）蛋白表达的变化，以及该变化与其活性的关系和对胶原沉积的影响。方法 将200～250 g雄性SD大鼠随机分组，通过气管注入BLM（5 mg/kg）建立肺纤维化模型，分别于第9、14、28、35 天处死动物取材。左肺切片作HE和MASSON染色，右肺匀浆用于检测羟脯氨酸（HYP）含量，LOX活性，Western Blot测定LOX的蛋白水平。结果 HE和MASSON染色结果显示，BLM处理后，大鼠肺组织发生炎症细胞浸润，成纤维细胞增生，胶原纤维增多； BLM处理后9 ～35 d，HYP含量与对照组比明显上调（P<0.01），并呈时间依赖性增加；LOX的46 kD、50 kD分子在第9、14 天表达显著增强，尤其是50 kD分子，在第14 天达到峰值，28 d后回落到基线水平；LOX活性的变化与50 kD分子相仿，第14 天达到对照组的4.7倍（P<0.01），28 d后回落到第9 天水平。结论 BLM通过增加LOX蛋白表达而上调其活性；并时间依赖性增加胶原蛋白沉积；两者趋势的一致，揭示LOX积极参与了BLM导致的大鼠肺纤维化。     

维生素D3对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的影响

目的 探讨维生素D3( VitD3)对博来霉素( BLM)诱发小鼠肺纤维化的保护作用及其机制.方法 96 只成年C57BL/6J雄性小鼠(8周,24～26 g)随机分为如下8组:生理盐水对照组(对照组),单纯维生素D3组(VitD3组),博来霉素组(BLM 1 d、7 d和21 d组),维生素D3+博来霉素组(VitD3+ BLM 1 d、7 d和21 d组). BLM组经气管单次给予BLM,剂量为3 mg/kg,VitD3+BLM组:在BLM(3 mg/kg)处理前 30 min 及处理后每 24 h 经腹腔给予一次 1, 25 (OH)2D3,剂量为1 μg/kg,对照组和VitD3组给予等量的生理盐水或1,25(OH)2D3,小鼠分别于BLM或生理盐水处理后1 d、7 d和21 d剖杀并取肺组织.用HE染色法检测肺病理改变,用免疫组化检测肺3-硝基酪氨酸水平,RT-PCR检测肺氧化及抗氧化酶 mRNA 水平.结果 HE 染色提示BLM处理引起肺组织破坏及间质纤维化,1,25(OH)2D3显著减轻BLM诱导的肺组织破坏及间质纤维化. RT-PCR提示BLM引起肺组织氧化酶基因表达上调( P＜0.05),抗氧化酶基因表达下调(P＜0.05). 1,25(OH)2D3处理显著抑制BLM引起的肺脏氧化酶基因表达上调及抗氧化酶基因下调(P＜0.05).免疫组化结果提示,1,25(OH)2D3明显减少BLM所致肺3-硝基酪氨酸残留.结论 维生素D3 可能通过抗肺氧化应激作用减轻BLM诱发的肺组织破坏及间质纤维化.     

IL-27在博来霉素诱导肺纤维化模型中的保护作用

［摘要］目的　探讨IL-27在博来霉素诱导肺纤维化模型中的作用．方法　将80只C57BL/6小鼠随机分为正常组（A组）、BLM模型组（B组）、BLM＋IL-27组（C组）、BLM＋抗IL-27组（D组）,每组各20只．观察A、B组小鼠肺组织IL-27、IL-27R mRNA表达．各组分别于7 d、28 d各处死小鼠5只,获取肺组织,病理学方法观察各组小鼠肺组织肺泡炎症和肺纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量,观察各组小鼠生存情况．结果（1）IL-27、IL-27R mRNA在肺纤维化形成中明显升高（P＜0.05）;（2）病理结果提示:7 d D组肺泡炎和肺纤维化程度最重,C组最轻（P＜0.05）;28 d D组肺纤维化程度较B组加重, C组最轻（P＜0.05）;（3）羟脯氨酸含量变化:7 d,28 dD组肺组织羟脯氨酸含量最高,C组含量最少（P＜0.05）;（4）各组小鼠在28 d时A组无小鼠死亡,C组死亡率低于B组,D组死亡率高于B组（P＜0.05）．结论　IL-27抑制博来霉素诱导肺纤维化的形成,提高了小鼠的生存率．     

肺功能检查在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化中的实验研究

目的由于条件限制,在许多大鼠疾病模型中无法检测肺功能的变化情况,检测肺纤维化大鼠的肺功能对实验动物的肺功能应用具有重要意义。方法 12只健康SD大鼠,随机分成正常对照组和博来霉素组,气管注射博来霉素(5 mg/kg)复制大鼠肺纤维化模型。于第28日腹主动脉放血法处死,比较两组体质量及肺质量,计算肺系数,检测两组大鼠肺功能和肺组织中羟脯氨酸的含量。结果与正常对照组比较,博来霉素组大鼠肺系数明显升高,博来霉素组羟脯氨酸的含量明显升高,同时HE和MASSON病理染色提示大鼠肺纤维化模型复制成功。大鼠肺功能检查结果:用力肺活量(forced vital capacity, FVC)、50%肺活量的呼气流速(forced expiratory flow,FEF)、最大呼气流量(peak expiratory flow,PEF)均较正常对照组明显降低,且具有统计学意义,另外,博来霉素组FEV0.1/FVC较正常对照组升高。结论大鼠肺纤维化模型中肺功能检测技术基本成熟,可以进一步扩大样本量进行研究。     

颗粒蛋白前体在免疫和感染及炎症中的研究进展

颗粒蛋白前体(PGRN)是一个多功能生长因子,其对调节和维护机体正常组织的发展、增殖、再生及防御稳态发挥重要作用。PGRN与感染、免疫、炎症这三个紧密相关的病理生理过程密切相关。最近,PGRN对免疫信号转导通路,特别是肿瘤坏死因子受体的影响倍受瞩目。预期PGRN对临床上种类繁多的炎症性疾病具有巨大的治疗潜力。     

YKL-40在肺纤维化大鼠中的动态表达

目的　观察YKL-40在博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠肺组织中的表达。方法　以博菜霉素（7.5mg/kg体重）气管内注入复制大鼠肺纤维化模型。分别于第7天、14天、21天分批处死动物。通过HE染色、Masson染色判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;采用免疫组化、realtime RT-PCR及Western blot测定肺组织YKL-40表达情况。 结果 光镜下清晰可见博莱霉素组大鼠肺组织肺泡炎、肺纤维化程度增加,肺泡炎在第7天与对照相比差异极显著,第14天、21天肺泡炎症减轻,但仍与对照组间差异显著;纤维化程度在第14天即与对照组有显著性差异。与对照组相比,博莱霉素各组YKL-40上调表达有时间依赖性,且主要来源于平滑肌细胞、肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞及成纤维细胞。YKL-40转录水平在第7天即显著增加,蛋白水平在14 d显著高于对照组(p<0.05),21 d时与对照组相比差异极显著(p<0.01)。结论 YKL-40表达量与肺纤维化程度正相关,YKL-40可能参与肺纤维化过程。     

中和白细胞介素 17 对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用

目的??初步探讨中和白细胞介素 17（IL-17）对博来霉素（BLM）诱导小鼠肺纤维化形成过程的 干预作用及其机制。方法??96 只小鼠随机分为 4 组,即抗体干预组、同型抗体对照组（IgG2A 组） 、博来霉素 组（BLM 组） 、正常对照组（NC 组） 。气管内注射 BLM 使小鼠急性肺损伤诱导肺纤维化形成, NC 组则给予 等量生理盐水。复制模型后第 4、9、14、19 和 22 天抗体干预组小鼠尾静脉注射 IL-17A 中和抗体, IgG2A 组 注射同型抗体 IgG2A; BLM 组和 NC 组则注射等量生理盐水。在培养的第 7、 14 和 28 天将 4 组小鼠分批处死, 取气管肺泡灌洗液（BALF）涂片进行细胞计数, ELISA 法检测 IL-1β、 IL-10、 IL-17A、 IFN-γ 含量的变化; 检测小鼠肺组织羟脯氨酸（HYP） 、丙二醛（MDA）及活性氧（ROS）等生化指标,并评价各组小鼠肺组织 的纤维化程度。结果??抗体干预组与 BLM 组比较,BALF 中细胞总数、淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞的 个数, IL-1β、IL-10、IFN-γ 的含量, 以及 HYP、MDA、ROS 的含量在各个时间点均降低（ P <0.05） ; 而 IgG2A 组上述指标在各个时间点与 BLM 组比较,差异无统计学意义（ P >0.05） 。结论??中和 IL-17A 对 BLM 所致的实验性小鼠肺纤维化模型具有一定的防治作用, 有利于延缓肺纤维化的进程。     

氟伐他汀对博来霉素A5致大鼠肺纤维化的治疗作用

目的观察氟伐他汀(fluvastatin)对博来霉素(bleomycinA5)所致的大鼠肺纤维化的治疗作用,为肺纤维化的治疗探索一种新的方法. 方法雄性SD大鼠30只,随机分为正常对照组(C组)、博来霉素组(B组)及根据给博来霉素后第1, 15日始每日按20 mg*kg-1及10 mg*kg-1给予氟伐他汀灌胃治疗分为4个治疗组(TH1, TL1, TH15及TL15组). 28 d后处死所有动物,提取肺组织,HE染色,显微镜下观察,Leica Q500MC图像分析系统测定肺泡间隔成纤维细胞数量、厚度及肺间质面积. Masson、苦味酸天狼猩红染色,观察基质胶原及Ⅰ, Ⅲ型胶原变化. 肺组织匀浆测定羟脯氨酸含量,并比较各组间变化. 结果① B组的肺泡间隔成纤维细胞数量、厚度、肺间质面积及肺组织羟脯氨酸含量均高于C组(P<0.01),各氟伐他汀治疗组的以上各观察指标均低于B组(P<0.01或P<0.05). ②肺泡间隔成纤维细胞数量、厚度、肺间质面积在TH1组低于TH15组(P<0.01),TL1组低于TL15组(P<0.01或P<0.05). ③ B组基质胶原及Ⅰ, Ⅲ型胶原分布较C组明显增多,各氟伐他汀治疗组均有不同程度的减少. 结论氟伐他汀对博来霉素所致的大鼠肺纤维化具有明显治疗作用,且早期治疗较晚期治疗效果更为明显.     

血管紧张素转化酶抑制剂对博来霉素诱导肺纤维化大鼠肺功能改变的影响

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）对博来霉素诱导肺纤维化大鼠肺功能改变的影响。方法在博来霉素诱导肺纤维化大鼠模型的基础上,采用卡托普利对肺纤维化大鼠进行干预。检测大鼠肺泡炎、肺纤维化半定量评分,支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-B1（TGF-B1）、干扰素1（INF-1）、白细胞介素（IL）-1、IL-2、IL-4、IL-5水平,肺组织匀浆中过氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及肺组织羟脯氨酸（HYP）水平,BALF和血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP-1）水平,并在显微镜下观察大鼠肺组织形态学改变。结果卡托普利可显著减轻博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的肺纤维化评分,升高BALF中TGF-p。水平,并降低INF-γ,IL-1、IL-2、IL4、IL-5水平;肺组织匀浆SOD水平升高,MDA及HYP水平降低;血清及BALF中MMP-9、TIMP-1均呈降低趋势,镜下观察肺纤维化明显减轻。结论卡托普利对博来霉素诱导肺纤维化大鼠的肺功能下降有明显的抑制作用。