卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞比例增高的可能机制

近期研究发现,人体内有一个具独特免疫调节功能的T细胞亚群———CD4 CD2 5 调节性T细胞,这群调节性细胞具有免疫无能和免疫抑制两大特性,即对高浓度的IL 2单独刺激或经TCR的刺激无应答,而活化的CD4 CD2 5 T细胞能抑制CD4 和CD8 T细胞的活化与增殖〔1,2〕。为阐明卵巢癌患者免疫受抑的可能机制,为卵巢癌免疫治疗提供一个有效的靶点,我们检测了卵巢癌患者体内CD4 CD2 5 T细胞及其比例变化,并观察卵巢癌细胞株(SKOV3 )培养上清液对这类细胞的影响,以探讨CD4 CD2 5 T细胞在卵巢癌免疫抑制中的作用。材料和方…     

山茱萸总甙对大鼠角膜移植排斥反应免疫抑制作用机制研究

目的：观察山茱萸总甙对大鼠角膜移植模型细胞免疫功能影响，并通过观察外周血淋巴细胞活化状态以期进一步阐明山茱萸总甙的免疫抑制机制。方法： 建立封闭群大鼠SD-Wistar组间同种异体穿透性角膜移植模型，观察脾淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应和单向混合淋巴细胞反应；采用双标法流式分析技术(PE标记CD4单抗及FITC标记的CD8、CD25单抗)，观察角膜移植术后不同时间外周血淋巴细胞表型变化，并计算CD4/CD8比值。 结果： ①山茱萸总甙可以明显抑制同种异体穿透性角膜移植大鼠T淋巴细胞的增殖反应和单向混合淋巴细胞反应。②外周血淋巴细胞表型改变主要结果如下：空白对照组大鼠外周血CD4、CD8的表达及CD4/CD8比值在术后各时点其差别无显著。但术后表达CD25的CD4阳性细胞明显升高。治疗组CD4/CD8比值则下降，术后表达CD25的CD4阳性细胞明显低于对照组。 结论： 抑制T淋巴细胞的增殖、混合淋巴细胞反应、T淋巴细胞活化表达CD分子，IL-2受体的表达，可能是山茱萸总甙抑制机体细胞免疫功能的主要机制之一。     

传染性非典型肺炎患者CD4阳性T细胞在发病早期显著下降

为了解传染性非典型肺炎患者早期的免疫状态 ,采用流式细胞仪以三色荧光标记的单克隆抗体 (CD4 FTTC/CD8 PE/CD3 PC5 )检测入院时 30例非典型肺炎或疑似患者的外周血T细胞亚群比例 ,并作绝对计数和计算CD4 +/CD8+比值。结果表明 ,11例非典型肺炎患者的CD3+、CD4 +T淋巴细胞比例、CD4 +/CD8+比值和CD3+、CD4 +和CD8+T淋巴细胞计数均明显低于 34例健康人 (P <0 0 0 1)。如CD4 +T细胞比例从健康人的 4 0 6 %降至 14 5 % ,细胞计数从健康人的 712 1/mm3 降至 15 1 1/mm3。患者CD8+T淋巴细胞比例也有一定程度的下降 (从健康人的 2 8 7%降至 2 2 6 % ,P <0 0 5 )。 19例疑似患者的上述大部分指标亦较健康人群有明显降低 (P <0 0 0 1)。非典型肺炎患者组与疑似患者组比较 ,前者CD3+T细胞和CD4 +T细胞比例进一步下降 (P <0 0 1) ,CD4 +/CD8+比例也倒置至 0 70。患者病程早期CD4 +T细胞比例下降可引起T细胞免疫功能低下 ,表明非典型肺炎和免疫功能失调有关。     

慢性再生障碍性贫血患者免疫功能改变及意义

目的　观察慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者红细胞和淋巴细胞免疫功能的改变 ,探讨红细胞和T淋巴细胞免疫功能之间及机体免疫功能和CAA发病之间的关系。方法　采用免疫酶标比色法、免疫比浊法、单克隆抗体免疫萤光法、流式细胞仪检测分析等 ,观察比较CAA患者和对照组的各项免疫指标。结果　与对照组相比较 ,CAA患者IgG、IgA、IgM、CD5 8、RBC C3bRR等显著降低 (P <0 .0 1) ,CD3、CD4、CD8、CD4 /CD8比值等明显异常。结论　CAA患者表现多种免疫功能改变 ;主要在骨髓内分化、增生的红细胞、B淋巴细胞的免疫功能明显低下 ,在骨髓外分化、增生的T淋巴细胞亚群的表达多异常升高。     

非小细胞肺癌患者高温射频治疗前、后免疫功能的变化

目的 研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者高温射频（RFA）治疗前、后机体免疫功能的变化。方法 CT引导下经皮肺穿刺可伸展锚状电极配合RF－2000射频治疗仪高温射频消融，治疗NSLC患者30例。采用流式细胞术及双抗体夹心法，检测治疗前、后外周血T细胞亚群（CD3^ 、CD4^ 、CD8^ )、NK细胞的百分率及sIL-2R含量的变化。采用LDH释放法检测NK细胞的杀伤活性。结果 治疗前NSCLC患者外周血中CD3^ 、CD4^ 细胞的百分率及CD4^ /CD8^ 细胞的比值降低，NK细胞的百分率和NK细胞杀伤活性亦降低，与对照组相比较差异显著（P＜0．01）。CD8^ 细胞的百分率及sIL-2R含量明显高于正常对照组（P＜0．01），提示患者处于免疫抑制状态。治疗后免疫抑制减轻，CD3^ 、CD4^ 、NK细胞的百分率及CD4^ /CD8^ 细胞的比值明显升高，NK细胞杀伤活性也升高，而CD8^ 细胞的百分率及sIL-2R的含量明显降低，治疗前、后相比较差别明显（P＜0．01）。结论 锚状电极高温射频消融具有免疫激活作用，可使机体的免疫功能得到一定程度的改善。     

胸腺肽α1围手术期应用对肝癌患者T细胞亚群的作用

目的:探讨胸腺肽α1围手术期应用对肝癌患者细胞亚群的影响。方法:选取45例可切除肝癌患者,按手术大小分为治疗组(23例)和对照组(22例),治疗组术后当天、第3、第5d皮下注射胸腺肽α14mg,观察两组术前、术后第1、4、7d外周血T淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、CD4 /CD8 分子的变化。结果:对照组术后CD3 、CD4 、CD4 /CD8 降低(CD4 、CD4 /CD8 术后1、4、7d与术前相比P<0.05),CD8 升高(术后1、4、7d与术前相比P<0.05),以第4d明显。治疗组CD3 、CD4 /CD8 术后第1、7d比较有统计学差异(P<0.05)。两组间比较,CD4 、CD4 /CD8 治疗组大于对照组(术后第1、4、7d均P<0.05),CD8 试验组小于对照组(术后第1、4、7d均P<0.05);CD3 试验组大于对照组(术后第4、7dP<0.05)。结论:手术对肝癌患者术后T淋巴细胞免疫功能抑制,胸腺肽对T淋巴细胞免疫功能有较好的保护作用。     

恢复期SARS患者淋巴细胞亚群分布及其与T淋巴细胞Ag-NOR含量相关性的初步分析

目的　通过检测恢复期SARS患者外周血淋巴细胞亚群分布及其与T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag NOR)含量的相关性分析 ,探讨恢复期SARS患者的免疫状态及淋巴细胞亚群与活性状态改变的关系。方法　以流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞亚群 ,用KL型免疫图像分析系统检测外周血T淋巴细胞Ag NOR ,对两者进行相关分析。结果　恢复期患者T淋巴细胞总数及CD4 +亚群基本正常 ,而CD8+亚群偏高 ,CD4 +/CD8+降低 ,CD4 +/CD8+<1的比例占 37.4 % ,激活T细胞中以CD8+细胞为主。B细胞比例正常。NK细胞明显低于对照组。重症患者CD4 +、CD4 +/CD8+、CD1 9+CD5+降低及CD8+、CD3+HLA DR+升高。 50岁以上及使用大剂量激素患者CD3+HLA DR+升高。淋巴细胞Ag NOR的含量 (IS % )在正常范围 ,但患者IS值呈偏态分布 ,低于正常范围者占 4 4.99%。淋巴细胞Ag NOR的含量与CD3+、NK、CD3+HLA DR+、CD3+CD2 5+在统计学上具有相关性。结论　恢复期SARS患者免疫功能趋于恢复正常 ,但部分患者的淋巴细胞亚群数量及淋巴细胞活性仍未恢复正常 ,这些病人在临床症状得到改善之后 ,尚需一定时间的观察随访 ,以了解SARS病毒对人体免疫机能的长期影响。     

中晚期肺癌患者手术前后细胞免疫功能变化

目的：观察中、晚期肺癌患者手术前后细胞免疫功能的变化状况。方法：选肺癌组（A组）、肺良性病变组（B组）和正常对照组（C组）各20例；以间接免疫荧光法测定C组、A组及B组术前、A组及B组术后第10 d以及A组术后第17d的外周静脉血的T淋巴细胞亚群水平（CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/ CD+8比值）。结果：A组术前CD+3低于B组、CD+8高于C组和B组、CD+4/ CD+8比值低于C组和B组；A组术后第10、第17 d CD+3高于术前、CD+8明显低于术前；CD+4/ CD+8比值A组术后第17 d较术前增高。CD+4 A组比较C组、CD+8 A组术后第10 d比较术后第17 d、CD+4 A组术后第10、第17 d比较术前，均无明显差别。结论：中、晚期肺癌患者外科手术切除肿瘤后患者的免疫抑制有所解除，免疫功能得到改善。从免疫学观点看，中、晚期肺癌的手术治疗具有积极意义。     

小柴胡汤对免疫抑制小鼠淋巴细胞共刺激分子的免疫调节作用

目的探讨小柴胡汤对免疫抑制小鼠外周血淋巴细胞共刺激分子的调节作用。方法每日给予正常小鼠及肌肉注射环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠小柴胡汤25g/kg体重,连续10d。并设免疫抑制模型及正常对照小鼠。于实验第11天,收集所有小鼠血样,分离淋巴细胞,采用流式细胞术检测实验小鼠外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4、CD80和CD86的表达,并与对照组比较。结果与正常对照小鼠比较,免疫抑制小鼠淋巴细胞亚群发生明显变化、CD4/CD8比例明显倒置（P〈0.01）,淋巴细胞CD28、CTLA-4、CD80和CD86的表达明显降低（P〈0.01）。与正常对照小鼠相比较,给予小柴胡汤的正常小鼠的淋巴细胞亚群及淋巴细胞共刺激分子的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。与免疫抑制小鼠相比较,给予小柴胡汤的免疫抑制小鼠CD3＋细胞增加（P〈0.01）,CD3＋CD4＋细胞增加（P〈0.01）,CD3＋CD8＋细胞降低（P〈0.01）,CD4/CD8比例升高（P〈0.01）,CD28、CD86和CD80表达增加（P〈0.01）,而CTLA-4的表达无明显差异（P〉0.05）。结论小柴胡汤可能通过调节淋巴细胞表面协同刺激分子的表达进而调节免疫抑制小鼠的免疫功能。     

SLE免疫调节功能紊乱的机理——T细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体的作用

系统性红斑狼疮(SLE)是非器官特异的自身免疫性疾病。近年来发现SLE的发病是由于患者免疫调节功能紊乱导致多种自身抗体形成和多器官损害。其中抗淋巴细胞抗体又与某类免疫调节细胞的缺失或异常有关,如CD4和CD8表型细胞的缺失或异常导致CD4~+/CD8~+细胞比例失调,HLA-DR~+CD4~+辅助/诱导T细胞选择性增加和CD4~+2H4~+和CD4~+4B4~+T细胞亚群的变化以及带CD8~+VV~+表型的反抑制T细胞(Tcs)增加导致免疫抑制功能减退,B细胞功能亢进,从而更促使自身抗体的产生;抗淋巴细胞抗体又与免疫系统的无能有关,如它能抑制T细胞的增殖和淋巴因子的诱导。因此,SLE免疫调节功能紊乱可能是由于T细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体所引起。     

射频热疗荷H22肝癌小鼠后脾淋巴细胞增殖及细胞毒性的动态变化

已有的少量研究表明,射频治疗原发性肝癌后患者外周血CD4^＋T淋巴细胞数目增加,CD8^＋T淋巴细胞数目减少,CD4^＋/CD8^＋比值升高.这些研究没有以手术组为对照,不能证明免疫变化为射频治疗所特有;同一表型T细胞可能具有不同功能,仅测定CD4^＋和CD8^＋T细胞表型,不能充分说明体内T细胞的功能状态,没有从淋巴细胞功能角度来动态研究射频治疗对机体细胞免疫功能的影响.淋巴细胞增殖及其细胞毒性检测是评价淋巴细胞功能的重要指标,本研究通过该两项指标的测定评价射频治疗荷H22肝癌小鼠后脾淋巴细胞免疫功能的动态变化,观察射频治疗对机体免疫功能的影响.     

猪CD4+CD25+treg细胞系的建立与功能分析

目的 分析猪淋巴细胞表型,分离猪CD4 CD25 T调节性T细胞系并鉴定其免疫生物学特性.方法用磁珠双阳性分选的方法从健康猪外周血及脾脏淋巴细胞中得到CD4 CD25 T细胞CD4 CD25-T细胞,监测其foxp3的表达,并对其进行体外长期培养、扩增,混合淋巴细胞培养实验分析其免疫抑制功能,流式细胞法分析其表型变化.结果猪CD4 CD25 T细胞与人类和啮齿类动物一样,是具有免疫抑制功能的调节性T细胞系.该T细胞系foxp3基因同样高表达,且能抑制同基因CD4 CD25-T细胞的活化,大剂量IL-2可以逆转其抑制功能,扩增培养的猪CD4 CD25 T细胞和诱导扩增的CD4 CD25-T细胞均具有免疫抑制功能.结论 猪CD4 CD25 T细胞为调节性T细胞,具有免疫抑制功能.     

CD4~+ TNFR2~+ 调节性T细胞在免疫相关疾病中作用机制的研究进展

调节性T细胞(Treg)是一种具有免疫抑制功能的效应性T淋巴细胞,在维持机体的免疫自稳中发挥重要作用。肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)主要表达于淋巴细胞并参与调节淋巴细胞的分化和存活。TNFR2可以稳定CD4~+CD25~+Treg的数量及其抑制功能。作为人和小鼠体内抑制功能最强的Treg,CD4和肿瘤坏死因子受体双阳性(CD4~+TNFR2~+)Treg参与多种疾病如肿瘤、移植排斥、结肠炎、关节炎、寄生虫感染等的免疫反应过程。CD4~+TNFR2~+Treg在各种免疫相关疾病中的作用及其机制已成为新的研究热点。     

脐带华氏胶来源间充质干细胞对CD4~+、CD8~+T淋巴细胞免疫抑制作用

已证实间充质干细胞(mesenchymal stromal cell, MSC)具有免疫调节作用,骨髓来源的MSC具有显著的免疫抑制效果,但骨髓的采集对供者而言是创伤性操作。脐带为产科废弃物,采集容易且对产妇、婴儿无任何损伤。为了探索脐带华氏胶来源MSC(Wharton's jelly-derived MSC, WJ-MSC)的免疫抑制作用,采用混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction, MLR)评估WJ-MSC对CD4~+、CD8~+T淋巴细胞的免疫抑制作用。研究证实在MLR中,异基因来源的反应性T淋巴细胞可以有效地被来自供者、受者或第三方的WJ-MSC抑制;在Transwell分离培养中,WJ-MSC的免疫抑制作用较直接接触培养弱;随着吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2, 3-dioxygenase, IDO)抑制剂1-甲基色氨酸(1-methyl-tryptophan, 1-MT)剂量的增加, WJ-MSC对CD4~+、CD8~+T淋巴细胞的抑制作用逐渐减弱;长期培养传代后的第10代WJ-MSC也有较好的免疫抑制作用。这说明WJ-MSC的免疫抑制作用不受MHC的限制,其免疫抑制作用主要是通过与T淋巴细胞直接接触表达,而IDO是WJ-MSC有效的可溶性免疫抑制因子。     

肿瘤患者胸/腹水和外周血中TCR Vβ亚家族表达及调节性T细胞亚群的研究

目的:探讨肿瘤患者胸/腹水中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)和外周血T细胞中T细胞受体(TCR)Vβ亚家族的表达变化情况、CD4/CD8细胞比例变化和Treg细胞的分布情况,分析肿瘤患者的免疫状态。方法:分离11例肿瘤患者胸/腹水和外周血以及4例健康人外周血的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD3、CD4、CD8、CD25、CD127的表达情况,统计分析T细胞中Vβ24个亚家族、Treg细胞的特点。结果:TCR Vβ亚家族的表达在肿瘤患者胸/腹水TIL中与血液淋巴细胞中存在着显著差异,其中肺癌患者(4/5)TIL中TCR Vβ8,结肠癌患者(3/4)TIL中TCR Vβ2等亚家族显著高表达;11例肿瘤患者胸/腹水样本中Treg的比例均比外周血高(P<0.05),其中5例肺癌患者胸腹水中CD8+T细胞比例降低。结论:肿瘤患者胸/腹水中的淋巴细胞TCR Vβ亚家族表达与外周血存在差异,表明肿瘤患者体内淋巴细胞发生了明显的优势取用和定向趋化。此外肿瘤微环境可能影响了TIL中CD4+细胞的分化导致胸腹水中Treg细胞的比例升高,同时伴随着CD8+T比例的下降,并可能因此影响到TIL中TCR Vβ亚家族的优势取用情况,且导致免疫耐受。     

慢性乙肝患者外周血淋巴细胞表面CD28的表达

HBV感染的慢性化与患者的免疫状态有关,为了解慢性乙肝患者免疫功能状态如何,我们对其外周血淋巴细胞亚型CD4、CD8、CD4和CD8细胞表面CD28的表达进行了测定。     

恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达

目的 :探讨SARS的免疫发病机理 ,研究恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达。方法 :流式细胞仪测定 15例恢复期SARS患者的T淋巴细胞及其亚群和凋亡相关基因蛋白———CD95、Bcl 2、DR5及人冠状病毒 2 2 9E受体—CD13表达 ;并以 10例高危、健康的医务人员为对照。结果 :恢复期SARS患者外周血T淋巴细胞亚群 (CD3、CD4、CD8)均恢复正常 ;CD4 DR5、CD13,CD8 DR5、CD13表达均阴性 ,与对照组无明显差异。但是 ,恢复期SARS患者CD4、CD8阳性细胞仍明显表达Fas和Bcl 2 ,其阳性细胞的百分数较对照组明显增多 (P <0 0 1)。结论 :Fas FasL途径导致T淋巴细胞凋亡可能是SARS患者的免疫发病机理之一 ,而恢复期Bcl 2表达增多对抑制T淋巴细胞的进一步凋亡、T淋巴细胞亚群恢复正常可能具有重要作用。SARS患者T淋巴细胞凋亡不通过Trail DR5 细胞凋亡途径。     

高效抗逆转录病毒治疗对中国HIV/AIDS患者淋巴细胞活化及第二受体表达的影响

目的　了解高效抗逆转录病毒治疗后中国HIV/ AIDS患者淋巴细胞活化及CCR5、CXCR4表达的变化,探讨HIV感染者对于抗病毒治疗的免疫应答。方法　10例HIV /AIDS患者给予高效抗逆转录病毒治疗(HAART),用流式细胞仪检测治疗前和治疗第3、6 个月T淋巴细胞活化(HLA DR、CD38表达)及第二受体CCR5、CXCR4表达情况,比较HIV/ AIDS患者治疗前后淋巴细胞活化、第二受体表达的变化。结果　治疗前,10例HIV /AIDS患者CD4+、CD8+ T淋巴细胞活化水平均明显高于健康对照,CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达明显高于健康对照,CXCR4 的表达明显低于健康对照(P<0.05);HAART治疗后,患者淋巴细胞活化水平随治疗时间明显下降(P<0.05),CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达水平显著降低(P< 0. 01), CXCR4 的表达升高;治疗6 个月时, CD38 CD4、HLA DRCD38 CD4、CCR5 CD8、CXCR4 CD8表达水平恢复至健康人水平;HIV AIDS淋巴细胞活化水平及第二受体CCR5的表达降低与HAART治疗后CD4+T淋巴细胞数量的升高具有显著的相关性。结论HAART能够降低中国HIV /AIDS患者淋巴细胞活化水平,使第二受体表达水平趋于正常,促进免疫功能的恢复。     

急性脾破裂患者手术前后外周血淋巴细胞亚群的变化及临床意义

目的:观察急性脾破裂患者在脾切除后外周血淋巴细胞亚群水平的改变。探讨短期内脾切除术对机体免疫功能的影响。方法:利用流式细胞仪测定74例急性脾破裂患者在手术前后淋巴细胞亚群水平。结果:急性脾破裂患者手术后CD 3T淋巴细胞及CD 4T淋巴细胞较手术前升高(P<0.01);CD(16 56)细胞(即NK细胞)和CD 19B淋巴细胞较手术前降低(P<0.05);而CD 8T淋巴细胞及CD 4/CD 8较手术前无明显差异(P>0.05)。结论:脾切除术后,短期内患者的免疫功能有改变。     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群极化状态的研究

目的:分析强直性脊柱炎患者外周血中T细胞亚群的极化状态,进一步阐明强直性脊柱炎的免疫学发病机制.方法:运用流式细胞(FCM)技术,通过CD3/CD4或CD3/CD8设门,检测早、晚期AS患者和健康对照者外周血淋巴细胞的CD3 CD4 CD30 、CD3 CD4 CD30ˉ、CD3 CD8 CD30 、CD3 CD8 CD30ˉT细胞的百分率,分别表达Th1、Th2、Tc1、Tc2细胞,并进行比较分析.结果:在早期AS患者CD4 T细胞和CD4 T/CD8 T细胞的比值均明显低于健康对照组(P＜0.05),Th1细胞百分率及Th1/Th2比值明显降低(P＜0.05),CD8 T细胞的百分率明显高于健康对照组(P＜0.05),Tc2细胞明显升高(P＜0.05),且Tc1/Tc2比值明显降低(P＜0.05);在晚期AS患者Tc2细胞明显升高(P＜0.05),Tc1/Tc2比值明显降低(P＜0.05).结论:早期AS患者外周血CD4 T细胞、CD8 T细胞、CD4 T/CD8 T的变化与健康对照比较具有显著性意义,阐明了AS早期患者体内的免疫功能紊乱,呈现一种免疫功能低下的状态.重要的是Th1细胞、Th1/Th2、Tc1/Tc2的明显减少,提示在早期AS患者体内Th1/Th2、Tc1/Tc2的失调,且以Th2、Tc2占有优势,而晚期AS患者因Tc1/Tc2明显降低导致比例失衡,这些显示Th1/Th2、Tc1/Tc2的比例失衡可能是导致AS发病的重要因素,是AS发病机制之一.