内毒素血症时肺动脉和胸主动脉内一氧化氮合酶表达的比较

目的 观察内毒素血症时肺动脉和胸主动脉中诱导型一氧化氮合(iNOS)基因和蛋白表达的时间依从性变化。方法 48只Wistar大鼠350－450g，雌雄兼备，随机均分成对照组（C组），3h组，8h组和48h组。对照组腹腔内注射2ml生理盐水，余各实验组腹腔内注射脂多糖（LPS）4mg/kg，溶于2ml生理盐水，分别在LPS腹腔内注射后3h,8h和48h颈椎脱臼法处死大鼠取肺动脉和胸主动脉，RT－PR和Western blot法测定各组肺动脉和胸主动脉中iNOS的mRNA和蛋白表达。结果 LPS注射后大鼠肺动脉中iNOS的mRNA和蛋白表达逐渐上升，8h达到高峰，48h恢复到LPS注射前水平；胸主动脉中iNOS的蛋白表达3h即达峰值，以后逐渐下降，48h恢复到LPS注射前水平。LPS注射后3h和8h大鼠iNOS的mRNA及蛋白表达水平肺动脉比胸主动脉高。结论 内毒素大鼠的肺动脉和胸主动脉中iNOS的mRNA和蛋白的表达呈现时间依从性变化，iNOS的mRNA和蛋白表达峰值胸主动脉早于肺动脉，肺动脉中iNOS的mRNA和蛋白表达程度高于胸主动脉。     

诱导性一氧化氮合酶抑制药对内毒素处理鼠主动脉和肺动脉的 …

目的：观察比较ｉＮＯＳ抑制药ＡＧ对鼠离体主动脉和肺动脉环力的影响。方法：测定血管对ＮＥ的量－效反应，在ＬＰＳ（３００ｎｇ／ｍｌ）中孵育４小时后。分为Ｌ－ＮＡＭＥ（３００μｍｏｌ／Ｌ）或ＡＧ（１００μｍｏｌ／Ｌ）孵育６０或２０分钟共８组。结果：ＬＰＳ孵育后动脉环对ＮＥ的反应明显降低，给予Ｌ－ＮＡＭＥ或ＡＧ后均升高以１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ ＮＥ作比较，Ｌ－ＮＡＭＥ组主动脉２０分种时反应性明显高于ＡＧ组。     

内毒素血症致肾衰大鼠中人参皂苷及L－硝基－精氨酸对一氧化氮合酶表达的影响

多脏器功能衰竭（MOF）的发病机制尚未完全明了，其中免疫复合物学说认为与内毒素（LPS）血症有关。一氧化氮合酶（NOS）和一氧化氮（NO）在内毒素休克所致急性肾衰（ARF）的发病机制中具有重要作用。中医学认为，休克系“阳气暴脱”，而人参有“回阳救逆”之功效，其有效成分主要是人参皂甙。本研究通过制作内毒素血症所致急性肾衰的大鼠模型，观察人参皂甙以及NOS抑制剂L-硝基-精氨酸（L-NNA）对肾组织中NOS表达的影响。     

葛根素对去卵巢大鼠股骨及主动脉一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的观察葛根素对去卵巢大鼠股骨及主动脉一氧化氮合酶（NOS）不同亚型表达的影响。方法3月龄雌性SD大鼠72只，随机分为6组：假手术组（SHAM）、去卵巢组（OVX）、17p雌二醇治疗组（ERT）、高剂量葛根素（PH）、中剂量葛根素（PM）和低剂量葛根素（PL）治疗组。去卵巢术后1w开始皮下注射给药，连续7w。硝酸还原酶法测定血清NO水平，免疫组化法分别观察股骨及主动脉内皮型NOS（eNOS）和诱导型NOS（iNOS）的表达。结果①与OVX组相比，PH、PM组大鼠血清NO水平显著提高（P〈0．01）；②在股骨及主动脉组织中，OVX组eNOS的表达明显减低（P〈0．01），各剂量葛根素组可不同程度地提高eNOS的表达（P〈0．01）；③iNOS的表达仅见于OVX大鼠股骨，其余各组大鼠股骨和各组大鼠主动脉均未见iNOS的明显表达。结论葛根素可以提高去势大鼠股骨及主动脉两组织中eNOS的表达，增加内源性NO的合成与释放，对防治绝经后妇女骨质疏松及动脉粥样硬化可能有益。     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后一氧化氮合酶表达的影响

近来研究表明 ,一氧化氮 (ｎｉｔｒｉｃｏｘ ｉｄｅ,ＮＯ)在有关中枢神经系统损伤中起重要作用。本实验通过对脊髓损伤过程的研究 ,探讨三七总皂甙是否影响ＮＯ而对脊髓起保护作用 ,为临床应用提供实验依据。材料与方法　健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠 6 5只 ,体重 2 30～ 2 5 0ｇ ,雌雄不限。随机分为空白组 (不给药 ,不造模 )、假手术组 (只咬除Ｔ13椎板 ,不造模 )、溶媒对照组和三七总皂甙 (ＰＮＳ)组 ,其中后 3组又各分为 2、6、12、2 4ｈ四个时相点组 ,共 13小组 ,每组 5只。试剂 :四唑氮蓝(ＮＢＴ ,上海东风产 ) ;ＮＡＤＰＨ (Ｓｉｇｍａ…     

异丙酚对高血压大鼠胸主动脉内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 评价异丙酚对高血压大鼠胸主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 SD大鼠,雌雄各半,体重240～ 280 g,采用皮下注射去氧皮质酮的方法制备高血压模型,采用随机数字表法,将64只造模成功的大鼠随机分为4组(n＝16):高血压组(H组)、小剂量异丙酚组(P1组)、中剂量异丙酚组(P2组)和大剂量异丙酚组(P3组).P1组、P2组和P3组分别静脉输注异丙酚20、30、40 mg·kg-1·h-13 h,H组给予等容量生理盐水.分别于给药前、给药1h、3h时记录平均动脉压(MAP).给药3h时处死大鼠,摘眼球法采集血样,硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(N0)浓度,取胸主动脉,采用RT-PCR和Western blot法测定eNOS mRNA、iNOS mRNA及其蛋白表达水平.结果 与H组比较,P1组、P2组和P3组给药3h时MAP降低,血清NO浓度升高,主动脉eNOS mRNA及其蛋白表达上调,主动脉iNOS mRNA及其蛋白表达下调,且呈剂量依赖性(P<0.05或0.01).结论 异丙酚降低高血压大鼠血压的机制与下调iNOS表达,上调血管内皮细胞eNOS表达,促进NO释放有关.     

辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠胸主动脉诱导型一氧化氮合酶及内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠胸主动脉诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及内皮型一氧化氮合酶( eNOS)表达的影响.方法 清洁级雌性Wistar大鼠80只,4月龄,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:正常对照组(Ⅰ组,n=8)、假手术组(Ⅱ组,n=8)、脓毒症组(Ⅲ组,n=32)和辛伐他汀预处理组(Ⅳ组,n=32).Ⅱ组打开腹腔找到盲肠后还纳腹腔,缝合腹壁切口.Ⅲ组和Ⅳ组采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型.Ⅳ组制备脓毒症模型前经胃管灌注辛伐他汀20 mg/kg,1次/d,连续2周,Ⅰ组～Ⅲ组给予等容量生理盐水.Ⅱ组于假手术后6h处死动物,Ⅲ组和Ⅳ组于盲肠结扎穿孔后3、6、24、48 h分别取8只动物,处死,取胸主动脉,采用Western blot法测定iNOS和eNOS表达水平.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组iNOS和eNOS表达差异无统计学意义(P＞0.05),Ⅲ组和Ⅳ组iNOS表达上调,eNOS表达下调(P＜0.05);与Ⅲ组比较,Ⅳ组iNOS表达下调,eNOS表达上调(P＜0.05).结论 辛伐他汀预处理可下调脓毒症大鼠血管内皮细胞iNOS表达和上调血管内皮细胞eNOS表达,对血管内皮细胞功能有保护作用.     

一氧化氮合酶在大鼠大肠癌细胞中的表达及意义

目的研究一氧化氮合酶(NOS)在大鼠大肠癌发生中的表达情况。方法应用免疫组化技术检测1，2二甲基肼(1，2-DMH)诱导的Wistat大鼠大肠癌模型中内皮型NOS(eNOS)，神经元型NOS(nNOS)和诱生型NOS(iNOS)在正常黏膜和大肠癌中的表达情况。结果eNOS和nNOS在正常黏膜中表达，在大肠癌中不表达；iNOS在正常黏膜中表达率很低(10%)，在大肠癌中高表达(87％)。结论在1，2-DMH诱导的大肠癌模型中，iNOS表达与大肠癌的发生关系密切。     

异丙酚对大鼠肺一氧化氮合酶活性的影响

目的 了解异丙酚对大鼠肺一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨异丙酚对肺血管、支气管扩张作用的机理。方法40只SD大鼠,随机分为异丙酚组(n=20)、对照组(n=20),分别腹腔注射等容积异丙酚(1ml·kg-1,即100mg·kg-1)和生理盐水(10ml·kg-1)。异丙酚组待鼠翻正反射消失后,经尾缘静脉泵以异丙酚10mg·kg-1·h-1,20min后处死,对照组鼠腹腔注射20min后处死。检测支气管肺泡灌洗液NO水平、肺组织匀浆中NOS酶活性、NO水平及内皮型NOS(eNOS)、神经型NOS(nNOS)在肺内的表达与分布(免疫组化法)。结果 异丙酚组支气管灌洗液和肺组织匀浆中NO水平均明显高于对照组(P<0.01),肺组织匀浆中NOS酶活性也明显大于对照组(P<0.01)。异丙酚组肺血管内皮细胞nNOS和eNOS、支气管粘膜上皮细胞nNOS染色表达强阳性。结论 异丙酚可以刺激肺中NOS活性,升高肺内内源性NO水平,在异丙酚的扩张肺血管、支气管中发挥一定的作用。     

大鼠睾丸内一氧化氮合酶的表达

目的 :阐明一氧化氮合酶 (NOS)在睾丸内的表达 ,探讨一氧化氮 (NO)在睾丸生殖功能中的作用。　方法 :取雄性SD大鼠睾丸于 4 %多聚甲醛中固定 ,常规石蜡切片。用免疫组化ABC法检测成年大鼠睾丸NOS的表达和定位。　结果 :内皮型NOS(eNOS)、神经型NOS(nNOS)、诱导型NOS(iNOS)在睾丸间质细胞内均有表达 ,精曲小管周围肌样细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞内仅为eNOS免疫反应阳性 ,而血管外膜纤维内仅有nNOS表达。免疫反应物质主要定位于细胞质 ,胞核为阴性。在生精细胞内 3种NOS免疫反应均为阴性。　结论 :3种NOS在睾丸内均有表达 ,不同的NOS分布部位有一定区别     

一氧化氮合酶在大鼠股骨闭合性骨折愈合中的表达及其意义

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)在大鼠骨折愈合过程中的表达及其意义。方法　Wistar大鼠 40只建立股骨闭合性骨折模型。骨折后第 3天、1、2、4周分别处死每组 10只大鼠 ,取骨痂和对侧正常骨组织 ,苏木素 伊红 (HE)染色和免疫组织化学链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶(SP)法观察骨折愈合及诱生性一氧化氮合酶 (iNOS)、内皮性一氧化氮合酶 (eNOS)和神经性一氧化氮合酶 (bNOS)在骨痂中的表达情况。结果　iNOS主要在成纤维细胞和成软骨细胞中表达 ;eNOS主要在增生血管内膜表达 ,bNOS没有表达。正常的股骨组织内没有NOS的表达。表达iN OS和eNOS的阳性细胞不同 ,并且不同时期其阳性细胞数也不同 ,iNOS在骨折后 1周最多 (P <0 .0 5 ) ,eNOS在骨折后 2周最多 (P <0 .0 1)。结论　iNOS和eNOS在骨折愈合中的表达具有时效性 ,它们在不同细胞内的表达提示一氧化氮可能对骨折愈合起一定的调节作用     

重组杀菌／通透性增加蛋白对内毒素休克中肝脏一氧化氮合酶的 …

目的：探讨重组杀菌／通透性增加蛋白（ｒＢＰＩ２１）对内毒素休克中肝组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的影响及其意义。方法 大鼠腹腔注射大肠杆菌内毒素（１５．０ｍｇ／ｋｇ）复制内毒素休克模型，动物随机分成正常对照组、内毒素休克组和ｒＢＰＩ２１治疗组。检测肝组织ＮＯＳ活性、三磷酸鸟苷环水解酶Ｉ（ＧＴＰ－ＣＨＩ）活性及生物喋呤含量，同时还观察肝脏微循环血流灌注量的改变。结果 内毒素攻击后肝组织诱生型ＮＯＳ（ｉＮ     

大鼠移植肝组织中一氧化氮合酶的表达及其抑制剂的作用

目的 观察大鼠移植肝组织中一氧化氮合酶(iNOS)的表达及iNOS抑制剂氨基胍和免疫抑制剂他克莫司(FK-506)对肝移植术后急性排斥反应的影响。方法 实验分为4组：同基因组(供、受者均为LEW大鼠)；急性排斥组(供者为BN大鼠，受者为LEW大鼠)；氨基胍组、FK506组在异基因大鼠肝移植后分别应用氨基胍和FK506。用免疫组织化学法检测各组移植肝组织中iNOS表达水平。结果 急性排斥组iNOS表达呈强阳性，与氨基胍组、FK506组、同基因组比较，差异显著。结论 在大鼠原位肝移植发生急性排斥反应时，iNOS增高程度与排斥反应的强度有明显关系。氨基胍和FK506可以抑制iNOS的表达，明显减轻移植肝组织的急性排斥反应。     

热休克蛋白70抑制大鼠颅脑损伤诱生型一氧化氮合酶mRNA的表达

目的 探讨热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）对大鼠感染性脑损伤（感脑）诱生型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的表达及一氧化氮（ＮＯ）合成的影响。方法 将大鼠７２只随机分为正常对照组、感染性脑损伤组和热休克处理组,每组又ｈ共３个时间点。采用百日咳菌液通过左颈内动脉注入制成大鼠感染性脑损伤模型,用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交技术检测各组各时间点的ＨＳＰ７０的表达,同时用原位杂交方法检测各组ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达及Ｇｒｉｅｓｓ法测定各组的ＮＯ含量的变化。结果 Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交分析结果表明,大鼠感脑各组及正常组有一定量的ＨＳＰ７０表达,而热休克处理组的ＨＳＰ７０的量明显高于感脑组（Ｐ〈０．０１）。原位杂交结果提示ｉＮＯＳ在感脑的大脑皮质神经细胞４、８、２４ｈ开始表达,可见明显的杂交信号,而休克处理组仅有少量的阳性颗粒。ＮＯ含量在感脑     

氯化镧对内毒素/脂多糖诱导巨噬细胞株一氧化氮合酶表达的抑制作用

目的了解氯化镧（LaCl3）对内毒素／脂多糖（LPS）刺激的巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响，并探讨其机制。方法将小鼠巨噬细胞株RAW264．7分为空白对照组、LaCl、组、LPS组和LaCl3＋LPS组。前3组细胞分别用常规培养液、含2．50μmol／L LaCl3的培养液、含1mg／L LPS的培养液培养24h，LaCl3＋LPS组用含2．5μmol／LLaCl，的培养液培养24h后，换为含1mg／L LPS的培养液培养24h。采用免疫细胞化学染色法检测iNOS在各组细胞中的表达强度；蛋白质印迹法检测iNOS的蛋白表达水平；反转录一PCR测定iNOS的mRNA表达水平；硝酸还原酶法测定各组细胞培养上清液中一氧化氮（NO）含量。结果免疫细胞化学染色结果显示，iNOS主要分布于各组细胞的胞质中，空白对照组和LaCl3组荧光强度极弱；LPS组荧光强度最强，阳性细胞百分率为44．4％，明显高于LaCl3＋LPS组（11．8％，P〈0．05）。LPS组iNOS蛋白及其mRNA表达量和细胞培养上清液中NO含量均高于其余各组（P〈0．05）。结论LaCl3可在mRNA水平和蛋白水平抑制LPS诱导的iNOS过度表达，减少NO生成，提示LaCl3能拮抗LPS诱导的iNOS过度活化。     

川芎嗪对烧伤大鼠肠黏膜一氧化氮合酶表达的影响及意义

肠道不仅仅是营养物质消化吸收的器官，本身也是机体一道重要防御屏障。严重烧伤后，由于内脏组织的低灌注，肠黏膜缺血、缺氧等多种因素使肠黏膜的屏障功能受损，导致肠源性感染。一氧化氮（NO）作为体内重要的生理递质和细胞间、细胞内的化学信使，参与机体生理过程的调节和宿主防御，在炎症反应牛也发挥重要作用。一氧化氮合酶（NOS）作为N0合成的关键酶，直接调节NO的生成及其生物学效应。本研究旨在观察川芎嗪（TMP）对烧伤后肠黏膜细胞诱导性一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的影响及意义。     

抗氧化剂抑制内毒素性休克大鼠诱导型一氧化氮合酶基因表达

感染性休克时循环机能障碍的显著特点表现为进行性、顽固性低血压,伴对血管活性药物敏感性降低,以至组织器官灌注不足、重要器官机能代谢障碍,病死率仍高达30％～70％。休克时循环机能障碍所涉及的病理生理机制极其复杂,脂质过氧化物的堆积和NO的爆发生成是其中的关键病理因素之一。我们以往的研究中发现抗氧化剂能部分逆转内毒素休克大鼠的血管低反应性,为了进一步探讨其治疗学机制,本实验对抗氧化剂在内毒素性休克大鼠iNOS mRNA表达中的作用进行了观察。     

内毒素血症时大鼠脂多糖结合蛋白的变化及其意义

目的　探讨内毒素血症时大鼠肝组织中脂多糖结合蛋白mRNA的表达、血浆中脂多糖结合蛋白 (LBP)含量的变化及其意义。方法　经大鼠尾静脉注入内毒素 (5mg/kg)建立内毒素血症动物模型 ,检测不同时点模型鼠肝组织中LBPmRNA的表达 ,同时检测血浆中LBP、内毒素、TNF α及IL 6含量的变化 ,并与对照组相比较。另取肝组织在电镜下观察其病理学改变。结果　随着内毒素血症时间的延长 ,内毒素组大鼠肝组织LBPmRNA的表达明显增强 ,血浆中LBP、TNF α和IL 6含量也明显增加 ,与对照组比较差异有高度显著性 (P<0 .0 1)。电镜观察见肝细胞脂肪变 ,线粒体空化 ,枯否氏细胞数量增多、体积增大、吞噬功能增强。结论　内毒素血症时 ,大鼠肝组织中LBPmRNA表达明显增强 ,血浆中LBP含量也明显增加。由此提示 ,增高的LBP可能在脂多糖介导的枯否氏细胞激活及产生、释放各种炎性介质中可能起了重要作用。     

一氧化氮合酶在门静脉高压大鼠胰腺的分布

一氧化氮(ＮＯ)与消化道疾病的关系日益受到重视。我们采用依赖还原性辅酶Ⅱ硫辛酰胺脱氢酶(ＮＡＤＰＨｄｉａｐｈｏｒａｓｅ,ＮＡＤＰＨｄ)免疫组织化学方法和神经元性一氧化氮合酶(ＮＯＳ)免疫组织化学法对正常和门静脉高压大鼠胰腺组织ＮＯＳ的分布进行研究。一、材料和方法1.实验动物:同批ＳＤ大鼠,雌雄各半,体重200～270ｇ(由同济医科大学实验动物学部提供),分为3组,Ⅰ组为对照组(6只),Ⅱ组为肝硬化组(8只),Ⅲ组为肝前性门静脉高压组(8只)。肝硬化组皮下注射50%ＣＣｌ42ｍｌ/ｋｇ体重,3天1次,共计10周,经病理证实肝硬化形成。肝前性门…