壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的制备及其生物相容性实验研究

目的 了解制备的壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜的理化性能及其与MG63成骨样细胞的生物相容性,以初步探讨其作为引导骨再生屏障膜的可行性.方法 采用提纯的牛肌腱Ⅰ型胶原和壳聚糖,经冷冻干燥,使用热交联、化学交联技术制成壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜(实验组)和Ⅰ型胶原膜(对照组).采用氨基酸含量检测、差示量热扫描法分析牛肌腱Ⅰ型胶原性质和表征,红外光谱、扫描电镜分析2种膜的理化性能.将MG63成骨样细胞接种于2种膜上,MTS法检测细胞1d、3d、5d、7d的增殖情况.结果 牛肌腱Ⅰ型胶原的胶原3股螺旋结构保持较完整,其热变性温度为99.04℃,提热吸收峰为53.54℃,与标准品指标接近,其成分比例及性质表征符合Ⅰ型胶原特征.红外光谱结果表明实验组具备胶原和壳聚糖特征峰表现,并且2种材料之间形成大量氢键,分子间结合良好.扫描电镜显示实验组和对照组膜表面和横切面为多孔结构,实验组膜孔径较大,为10～ 100 μm.MG63成骨样细胞在2组膜上呈明显的增殖趋势,具有较好的细胞相容性.结论 制备的壳聚糖-Ⅰ型胶原复合膜具有优良的结构及生物学性能,可应用于下一步引导骨再生膜材料的研究.     

下颌骨缺损修复过程中Ⅰ型胶原基因表达的实验研究

目的：了解生物材料和TGF-β1复合生物材料植入骨缺损区后细胞外基质内胶原基因表达的特点及春在骨愈合中的意义。方法：采用Slot Blot杂交及苦味酸天狼星红－偏振光方法观察68只大鼠下 骨缺损区骨修复过程中Ⅰ型胶原mRNA表达及材料骨界面区Ⅰ型胶原蛋白的分布。结果Ⅰ型胶原的mRNA及其产物表达水平在三组之间有显著性差异。以TGF-β1组最高。结论：本研究表明外源性TGF-β1通过促进Ⅰ型胶原mRNA表达及其物的合成，加快骨缺损的愈合；Ⅰ型胶原mRNA可被认为是骨形成、骨改建的分子标记。     

成骨细胞与血管内皮细胞复合PDLLA的体外实验研究

目的：探讨兔成骨细胞与血管内皮细胞体外复合外消旋聚乳酸（PDLLA）的可能性,为血管化组织工程骨构建打下实验基础.方法：制备PDLLA浸提液培养血管内皮细胞,MTT法检测细胞活性.将制备好的PDLLA预湿、Ⅰ型胶原包埋;体外培养兔成骨细胞及血管内皮细胞后,与PDLLA复合10 d,扫描电子显微镜观察其在支架上的生长情况.结果：PDLLA浸提液对血管内皮细胞无毒性,成骨细胞与血管内皮细胞在支架上成片状分布,可见细胞外基质分泌.结论：两种细胞在经Ⅰ型胶原包埋的PDLLA上生长状态良好,可用于血管化组织工程骨的构建.     

人颊癌细胞在胶原凝胶中生长和浸润特性初步研究

目的 探讨胶原蛋白凝胶作为颊癌细胞在体外培养环境下生长和浸润模型的价值。方法 从鼠尾肌腱中提取出较纯的Ⅰ型胶原蛋白,制成胶原蛋白凝胶体,将建株人颊癌细胞置于其中培养生长,从形态学特征上初步探讨胶原蛋白凝胶模型的价值。结果 从鼠尾肌腱提取的Ⅰ型胶原蛋白,能形成胶原蛋白纤维束网状结构一胶原蛋白凝胶;其内生长的颊癌细胞所处的生长环境,类似于机体内的生长环境,颊癌细胞有很高的生长率。结论 鼠尾肌腱胶原蛋白凝胶,能制成理想的肿瘤细胞的生长及浸润模型;建株颊癌细胞能在立体胶原凝胶中生长,保持着细胞原有的形态特征及生物学特性。     

珊瑚转化多孔羟基磷灰石复合rhBMP-2人工骨的动物实验研究

目的：寻找新的骨代用材料。方法：采用珊瑚转化多孔羟基磷石（ＣＨＡ）作为移植物支架,用Ｉ型胶原作为ｒｈＢＭＰ－２的缓释载体及赋形剂,将三者复合制成新型人工骨,进行了大鼠标准颅骨缺损骨移植实验。结果：ＣＨＡ／胶原具有良好的生物相容性和骨引导作用。ｒｈＢＭＰ－２／ＣＨＡ／胶原具有骨引导和骨诱导双重特性,其成骨效应明显优于单纯ＣＨＡ／胶原植入。结论：该复合人工骨有可能成为临床修复骨缺损的有效材料。     

骨基质蛋白在骨愈合中的作用

骨组织细胞外基质包含有胶原、非胶原蛋白多糖、细胞外间质糖蛋白矿化组织蛋白、生长因子等。胶原又分为纤维形成胶原和非纤维形成胶原两类。骨组织中最具有特征的胶原成份是胶原纤维,其为骨矿化提供支架。非胶原蛋白则被认为具有控制羟基磷灰石（ＨＡ）、钙盐晶体沉积的作用。本文将对细胞外基质各组份在骨组织愈合过程中作用机理的研究进展作一综述。     

兔骨髓基质干细胞自体嚼肌内移植异位成骨实验研究

目的：观察骨髓基质干细胞成骨向分化诱导后植入嚼肌内异位成骨的过程。方法：从兔髂骨分离骨髓基质干细胞,经体外诱导分化,与磷酸三钙／羟基磷灰石（tricalcium phosphate／hydroxyapatite,TCP／HA）支架复合,植入兔自体嚼肌内,形态学、免疫细胞化学、组织学观察其成骨特征。结果：体外培养的兔骨髓基质干细胞性状稳定,经矿化诱导培养的骨髓基质干细胞表现为成骨细胞分化,表达Ⅰ型胶原蛋白,与支架材料复合植入自体嚼肌内可见成熟骨组织形成。结论：利用骨髓基质干细胞为种子细胞植入嚼肌内开展功能性组织工程化颌骨移植方法可行。     

新型多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架体外细胞相容性的实验研究

目的　评价新型多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架材料的体外细胞相容性。方法　SD大鼠骨髓基质细胞 (BMSCs)经矿化诱导培养、扩增并检测证实其已具成骨细胞表型后,分别与多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架(实验组)、普通多孔羟基磷灰石陶瓷支架(对照组)体外复合培养。扫描电镜观察BMSCs在材料上的生长及生理功能表达情况;测定细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的含量;流式细胞仪检测细胞的凋亡及周期、倍体,比较细胞的粘附能力、增殖活力及成骨活性。结果　BMSCs经体外诱导形成钙结节,Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶免疫染色结果阳性。两组材料上皆有细胞附着生长,但实验组细胞的粘附能力、增殖活力及成骨活性均强于对照组。结论　SD大鼠BM- SCs与新型多孔纳米双相磷酸钙陶瓷支架材料有良好的细胞相容性。     

甘氨酸对新型胶原基人工骨材料细胞毒性影响的体外研究

目的 研究甘氨酸对新型胶原基人工骨材料的细胞毒性的影响.方法 提取兔骨髓基质细胞,传至第三代.在含或不含10g/L甘氨酸的培养液中与自行研发的胶原基人工骨材料共培养,定期计数存活细胞,另将胶原基人工骨材料经甘氨酸处理或直接与第三代兔骨髓基质细胞复合,用扫描电镜观察细胞黏附情况.结果 人工骨材料组加入甘氨酸后的细胞贴壁数明显高于无甘氨酸组.扫描电镜观察甘氨酸处理后的人工骨表面有细胞黏附,未处理组则无细胞黏附.结论 甘氨酸可有效降低新型胶原基人工骨材料的细胞毒性.     

hBMP2修饰的β-TCP/胶原支架对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响

目的:构建含hBMP2(human bone morphogenetic proteins 2)质粒DNA的β-TCP/胶原(β-tricalcium phosphate/collagen)支架材料,并研究其对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响.方法:制备纳米级多孔β-TCP/胶原支架并负载含hBMP2目的DNA基因及对照质粒形成基因修饰的支架材料.建立MC3T3-E1细胞株与复合支架的体外培养体系.将其分为支架组hBMP2组(Z)对照质粒组(Z0),平皿hBMP2组(M)和对照质粒组(M0).复合培养后取样通过扫描电镜观察支架表面形态,成骨诱导1、3、7、14 d检测不同浓度BMP2支架组和非支架组细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性,并在成骨诱导的不同时间点采用实时荧光定量PCR的方法检测Runx2、OCN、ALP、OPN等成骨相关标志基因表达.检测结果进行统计学分析.结果:含hBMP2为目的基因的质粒DNA修饰纳米β-TCP/Ⅰ型胶原溶液复合材料表面呈多孔样结构;支架组和平皿组中加入hBMP2质粒DNA都能提高ALP的活性以及成骨相关标志基因的表达;支架组对MC3T3-E1细胞成骨促进能力优于平皿组.结论:负载hBMP2基因修饰的β-TC P/胶原支架材料具有良好的骨诱导性.     

柠檬精油对牙周致病菌抑制作用及其安全性初步研究

目的:探讨柠檬精油对牙周致病菌的体外抗菌活性及对细胞增殖的影响。方法:采用微量液体稀释法测定柠檬精油对Pg、Fn、Aa、Pi的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以较低浓度的MIC为标准稀释LEO作为实验组,采用MTT法测定柠檬精油对HUVECs的毒性作用,明确抑菌浓度下LEO的安全性。结果:柠檬精油对牙周主要致病菌均有抑菌作用,Pg、Fn、Aa、Pi的MIC分别是9.0 g/L、4.5 g/L、4.5 g/L、9.0 g/L,Aa、Fn的 MBC是9.0 g/L,Pg、Pi的MBC未测得。1/2MIC、1/20MIC浓度的LEO能够抑制人脐静脉内皮细胞的生长,而低于1/200MIC浓度的LEO则对人脐静脉内皮细胞的生长没有影响,其中1/200MIC浓度的LEO作用明显优于0.02%的CHX。结论:体外环境中,柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抗菌活性,低浓度应用对机体相对安全。     

Oral cancer: molecular technologies for risk assessment and diagnosis

Purpose: The effective biomarkers related to diagnosis, metastasis, drug resistance and irradiation sensitivity of oral cancers will help the pathologist and oncologist to determine the molecular taxonomy diagnosis and design the individualization treatment for the patients with oral cancers.     

Computer-assisted planning for maxillofacial prosthodontic rehabilitation

Computerized tomography (CT) planning and the use of CT derived surgical templates for implant placement have shown promise for restoring function within months after surgical reconstruction of acquired post-oncologic defects.     

Stimulated whole saliva components in children with Down syndrome

The authors report on the components of stimulated whole saliva from children with Down syndrome—including pH, flow rate, sialic acid and protein concentrations, and amylase and peroxidase activity. Saliva samples were collected from 35 children aged 6–10 years. Of the participants, 17 had Down syndrome and 18 did not. To stimulate saliva production, the children chewed a piece of parafilm for 10 minutes before the sample was collected. Soon after collecting the saliva sample, the authors measured pH using a portable pH-meter. Sialic acid levels were determined with a thiobarbituric acid assay. Protein content was determined with Folin's phenol reagent. Amylase was assayed and the authors measured the maltose produced by the breakdown of starch and peroxidase using ortho-dianisidine.
No statistically significant difference was observed in levels of sialic acid (free and total) between the two groups. Protein concentration was about 36% higher in the group with Down syndrome. However, the salivary flow rate, pH, and amylase and peroxidase activities were lower among the children with Down syndrome.     

Effect of Pingyangmycin on human venous malformation endothelial cells

Purpose: Venous malformations are common vascular anomalies with a propensity of the head and neck. Intralesional injection of Pingyangmycin (PYM, bleomycin A5 hydrochloride) is a widely used sclerotherapy method for the treatment of venous malformation.     

牙髓再生的研究现状

目前,根管治疗术在临床上已得到了广泛的应用并成功的保存了患牙,但其仍有许多术后并发症。随着组织工程技术在口腔领域的应用,构建一种组织工程化牙髓进行牙髓-牙本质复合体的再生治疗成为可能。近年来国内外已有很多关于牙髓再生的研究,并且已经取得了一定成果。本文将对目前国内外牙髓再生的研究进展现状作一综述。     

Oropharyngeal dysphagia in amyotrophic lateral sclerosis alters quality of life

Dysphagia is one of the most important complications encountered in amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Our aim was to determine whether oropharyngeal dysphagia impacted the quality of life (QoL) of patients with ALS. Thirty consecutive patients were recruited (31–82 years, 18 men). Swallowing function was evaluated using a standardised videofluoroscopic barium swallow. All the patients completed a specific questionnaire on quality of life in dysphagia (SWAL‐QoL) immediately after the videofluoroscopy. The results of dysphagia outcome severity scale separated 14 patients with oropharyngeal dysphagia and 16 with normal swallowing function. There was no difference in the average age, weight and body mass index of the two groups (dysphagic patients: 68 ± 11 kg versus non‐dysphagic patients: 69 ± 14 kg). Most of the dysphagic patients had a bulbar affection based on their Norris scores which determine the importance of cranial nerves illness (20 ± 8), significantly lower than those of the non‐dysphagic patients (35 ± 5) (P < 0·0001). There was no difference in the neurological peripheral symptoms evaluated by Amyotrophic Lateral Sclerosis Functional Rating Scale scores (dysphagic patients: 26 ± 7 versus non‐dysphagic patients: 27 ± 8) (ns). The swallowing quality of life questionnaire revealed that the dysphagic patients had significant burden (P < 0·001). They were affected by the necessity to applied a food selection (P < 0·01), by the increase in eating duration (P < 0·05) and described a decrease in eating desire (P < 0·05). They complained of fear regarding the risk of dysphagia (P < 0·05). They also described difficulties with oral communication (P < 0·001). All of those complained about dysphagia which impacted directly mental health (P < 0·05) and social life (P < 0·05). In conclusion, oropharyngeal dysphagia is a common symptom accompanying ALS, which alters the patient's QoL, especially social health.     

拔牙位点保存用复合温敏凝胶的构建及体外表征

目的:制备多壁碳纳米管/羟基磷灰石/壳聚糖复合温敏凝胶,探讨其作为拔牙位点保存材料的理化性能。方法:采用原位沉积方法制备多壁碳纳米管/羟基磷灰石(MWNT/ HA简称HAC)复合无机材料,将其分散至壳聚糖温敏凝胶中,制备壳聚糖/多壁碳纳米管/羟基磷灰石(CS /MWNT/HA简称CS/HAC)复合温敏凝胶,以成胶时间、孔径、孔隙率、机械强度及降解性能为指标优化配方设计,并表征复合温敏凝胶的微观形貌及理化性能。结果:以10 g/L的HAC作为补强成分加入到壳聚糖溶液中,能够在不影响成胶并保证一定孔隙率(84%)的前提下,提高材料的机械性能(抗压强度0.441 MPa),所获复合温敏凝胶具有适宜的临床操作时间(12 min),并具有可控的降解速率。结论:负载HAC的复合温敏凝胶具有良好的成型性,并具有较好的机械性能,在拔牙位点保存领域具有良好的应用前景。     

替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节特征的锥形束CT研究

目的:采用锥形束CT(CBCT)研究替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节的影像学特征,探讨Ⅲ类功能状态下,颞下颌关节的生长、改建机制。方法:从就诊于昆明医科大学附属口腔医院正畸科的患者中选取符合纳入标准的替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者及骨性Ⅰ类错牙合患者各20名,使用NNT viewer 5.3图像处理软件进行三维重建及线距和角度的测量,并进行统计学分析。结果:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者组和替牙期骨性Ⅰ类错牙合患者组对比结果为:矢状面双侧关节前间隙偏小、双侧关节上间隙偏小、双侧关节结节斜度偏小;冠状面双侧关节内间隙偏小,双侧关节上间隙偏小,双侧关节外间隙偏小,右侧髁状突角度偏小;横截面右侧髁状突前后径偏小。结论:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节发育不充分,呈现髁状突,关节窝深度,关节结节斜度;冠状面关节内、外间隙均较小的特征。骨性Ⅲ类错牙合患者髁状突在关节窝中处于前置近关节窝顶位置。骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节影像学特征与其功能状态相适应。